Терапевтическое средство против желудочно-кишечного заболевания
Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины и касается терапевтического или профилактического средства, стимулирующего миграцию клеток ткани слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, содержащего пептид с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемую соль. Кроме того, пептид с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемую соль и пептид с аминокислотной последовательностью Phe-Gly-Leu-Met-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль вводят в комбинации. Заявленные средства используются в способе лечения патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта. Группа изобретений обеспечивает синергетическое воздействие при использовании в комбинации и может существенно индуцировать заживление ран в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта. 6 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 табл.
Область техники
Настоящее изобретение относится к терапевтическому средству или профилактическому средству против желудочно-кишечного заболевания, содержащему пептид, который имеет аминокислотную последовательность, представленную Ser-Ser-Ser-Arg, или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента. Настоящее изобретение также относится к терапевтическому средству или профилактическому средству против желудочно-кишечного заболевания, содержащему
(а) пептид, имеющий аминокислотную последовательность Ser-Ser-Ser-Arg, или его фармацевтически приемлемую соль; и
(b) пептид, имеющий аминокислотную последовательность Phe-Gly-Leu-Met-NH2, или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активных ингредиентов.
Уровень техники
Желудочно-кишечный тракт - это орган переваривания пищи и поглощения питательных веществ, и жизненно важные питательные вещества поглощаются через слизистые ткани кишечного тракта. Однако, когда желудочно-кишечная слизистая ткань подвержена атрофии из-за патологического или хирургического воздействия или язвы в мембранной ткани, наблюдается дисфункция желудочно-кишечного тракта, причем иногда может аномально увеличиться проницаемость слизистой оболочки кишечника. Кроме того, известно, что слизистая желудочно-кишечная ткань подвержена атрофии также при интенсивном облучении, хирургических операциях на кишечнике, при действии лекарств или стимуляции, ухудшающих пролиферацию клеток. Таким образом, при некоторых воздействиях на желудочно-кишечный тракт или при его атрофии происходят серьезные желудочно-кишечные нарушения, и поэтому необходимо быстрое восстановление желудочно-кишечного тракта и желудочно-кишечных функций.
С другой стороны, пептид, имеющий аминокислотную последовательность Ser-Ser-Ser-Arg (впоследствии называемую "SSSR") - это часть пептида инсулиноподобного фактора роста I, и пептид, имеющий аминокислотную последовательность Phe-Gly-Leu-Met-NH2 (впоследствии называемую "FGLM-NH2") - это тетрапептид на С-терминальном конце вещества Р. В фармацевтике известно применение комбинации SSSR и FGLM-NH2 в качестве терапевтического средства при лечении нарушений роговицы в офтальмологии и в качестве терапевтического средства для лечения кожных ран в дерматологии (JP-A-2003-231695).
Однако для желудочно-кишечных заболеваний не проводили исследования, какого рода фармакологический эффект проявляется при введении SSSR или FGLM-NH2 по отдельности или при совместном введении SSSR и FGLM-NH2.
Сущность изобретения
Решаемая проблема
Очень интересным предметом исследования является поиск нового медикамента, который может быть полезен в качестве терапевтического средства и профилактического средства при желудочно-кишечных заболеваниях, таких как атрофия слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, дисфункция желудочно-кишечного тракта или при его повреждениях.
Способы решения проблемы
В настоящем изобретении с помощью фармакологического теста, использующего клетки слизистой ткани кишечника, было показано, что SSSR стимулирует миграцию клеток ткани слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и поэтому оказывает прекрасный терапевтический эффект на желудочно-кишечные заболевания, например, восстановлением желудочно-кишечного тракта после повреждения. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что, используя комбинацию SSSR и FGLM-NH2, даже если концентрация SSSR низкая, эти медикаменты оказывают синергетическое воздействие и существенно стимулируют миграцию клеток слизистой ткани кишечника.
Настоящее изобретение направлено на терапевтическое средство или профилактическое средство для желудочно-кишечных заболеваний, содержащее SSSR или их фармацевтически приемлемые соли и FGLM-NH2 или их фармацевтически приемлемые соли в качестве активных ингредиентов, и, кроме того, направлено на терапевтическое средство или профилактическое средство против желудочно-кишечных заболеваний, содержащее (а) пептид, имеющий аминокислотную последовательность Ser-Ser-Ser-Arg, или его фармацевтически приемлемую соль и (b) пептид, имеющий аминокислотную последовательность Phe-Gly-Leu-Met-NH2, или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активных ингредиентов.
В настоящем изобретении примеры фармацевтически приемлемых солей включают гидрохлориды, сульфаты, фосфаты, лактаты, ацетаты, трифторацетаты, формиты, малеаты, фумараты, оксалаты, метансульфонаты и р-толуенсульфонаты. Более предпочтительными являются ацетаты и трифторацетаты для SSSR и гидрохлориды и трифторацетаты для FGLM-NH2.
В настоящем изобретении примеры органов желудочно-кишечного тракта включают такие органы, как пищевод, желудок, двенадцатиперстная кишка, тонкий кишечник и толстый кишечник, а примеры желудочно-кишечных заболеваний включают различные заболевания, такие как язвенные или воспалительные желудочно-кишечные заболевания, вызванные аномальной проницаемостью слизистой оболочки, приобретенные нарушениями пищеварения и всасывания, вызванные повреждением желудочно-кишечного тракта при резекции желудка и кишечника, облучении или действии лекарственного препарата и врожденном нарушении пищеварения и всасывания. В данной заявке язвенная желудочно-кишечная болезнь включает не только пептическую язву, но также эрозию и острое повреждение слизистой, такое как острая язва.
Далее терапевтическое средство или профилактическое средство против желудочно-кишечных заболеваний по настоящему изобретению, по-видимому, может быть также эффективным для лечения или профилактики патологии слизистой оболочки или демпинг-синдрома, возникшего в результате воспалительных заболеваний, таких как энтериты, болезнь Крона или язвенные колиты, и, более того, становится возможным стимулировать восстановление после хирургических вмешательств или улучшить функционирование желудочно-кишечного тракта.
Терапевтическое средство или профилактическое средство против желудочно-кишечных заболеваний по настоящему изобретению может вводиться орально или парентерально. Примеры форм дозировки включают таблетку, капсулу, гранулу, порошок и инъекцию, и такой фармацевтический препарат может быть создан с помощью обычных техник.
Например, может быть приготовлен оральный препарат, такой как таблетка, капсула, гранула или порошок с использованием наполнителя, такого как лактоза, маннитол, крахмал, кристаллическая целлюлоза, легкая безводная кремниевая кислота, карбонат кальция или вторичный кислый фосфат кальция, смазывающее средство, такое как стеариновая кислота, стеарат магния или тальк; связывающее средство, такое как крахмал, гидроксипропил целлюлоза, гидроксипропилметил целлюлоза или поливинилпирролидон; дизинтегрант, такой как карбоксиметил целлюлоза, низкозамещенная гидроксипропил целлюлоза или цитрат кальция; покровное вещество, такое как гидроксипропилметил целлюлоза, макрогол или силиконовая смола; стабилизатор, такой как этил парагидроксибензоат или бензиловый спирт; корригирующее вещество, такое как подсластитель, подкислитель или ароматизатор; или тому подобные средства в соответствии с необходимостью.
Кроме того, препарат для парентерального введения путем инъекции может быть приготовлен с помощью средства, регулирующего тоничность, такого как хлорид натрия или концентрированного глицерина; буферного средства, такого как фосфат натрия или ацетат натрия; суфрактанта, такого как полиоксиэтилен сорбитан моноолеат, полиоксил 40 стеарат или полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло; стабилизатора, такого как цитрат натрия или этилендиаминтетрауксусный натрий; консерванта, такого как хлорид бензалкония или парабен; или подобного средства при необходимости.
Дозировка терапевтического средства или профилактического средства против желудочно-кишечных заболеваний по настоящему изобретению может быть соответствующим образом выбрана в соответствии с симптомами, возрастом, формой введения и тому подобное. Например, в случае оральных препаратов, когда SSSR или его фармацевтически приемлемую соль используют как единственное средство, SSSR или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить целиком однократно или частями в дозах от 0,01 до 5000 мг, предпочтительно от 0,01 до 1000 мг в день. Кроме того, когда SSSR или его фармацевтически приемлемую соль и FGLM-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль используют в комбинации, SSSR или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить однократно или частями в дозах от 0,0001 до 500 мг, предпочтительно от 0,001 до 100 мг в день, и FGLM-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить однократно или частями в дозах от 0,001 до 5000 мг, предпочтительно от 0,01 до 1000 мг в день.
Благоприятные эффекты изобретения
На основе результатов фармакологического тестирования было подтверждено, что соль SSSR оказывает стимулирующий эффект на миграцию клеток слизистой ткани желудочно-кишечного тракта. Таким образом, можно ожидать, что SSSR или его фармацевтически приемлемая соль действуют как терапевтическое средство или профилактическое средство против различных желудочно-кишечных заболеваний, таких как язвенные или воспалительные желудочно-кишечные заболевания, желудочно-кишечное заболевание, вызванное аномальной проницаемостью слизистой оболочки, приобретенными нарушениями пищеварения и всасывания, вызванными повреждениями желудочно-кишечного тракта в результате резекции желудочно-кишечного тракта, облучения или действия лекарственного препарата и врожденного нарушения пищеварения и всасывания.
Кроме того, когда соль SSSR и соль FGLM-NH2 используют в комбинации, эти медикаменты оказывают синергетическое воздействие в результате, даже в том случае, если SSSR используют в низкой концентрации, при которой он сам по себе не может индуцировать миграцию клеток слизистой ткани желудочно-кишечного тракта, эти медикаменты при совместном действии могут вызвать заметную миграцию клеток слизистой ткани желудочно-кишечного тракта. Соответственно комбинированное использование SSSR или его фармацевтически приемлемой соли и FGLM-NH2 или его фармацевтически приемлемой соли применимо для лечения или профилактики желудочно-кишечного заболевания.
Способ реализации изобретения
В настоящей заявке описаны результаты фармакологических тестов и примеры препаратов, однако эти примеры нужны для лучшего понимания настоящего изобретения и не ограничивают рамки настоящего изобретения.
1. Фармакологический тест (Влияние на миграцию клеток слизистой ткани желудочно-кишечного тракта)
Влияние на миграцию клеток исследовали следующим способом, используя клетки Сасо-2, которые являются клеточной линией рака толстой кишки человека.
(Экспериментальный метод)
Клетки Сасо-2 засевали в плашку с 24 ячейками, покрытыми коллагеном типа IV, в концентрации 1×105 клеток на ячейку и культивировали до слияния в среде DMEM, содержащей 10% FBS. С помощью бритвенного лезвия формировали вырез в клеточном слое, и с помощью ватного тампона была образована бесклеточная область. После промывания средой DМЕМ, содержащей 1% FBS, клетки культивировали в течение 18 часов в той же среде, содержащей каждое тестируемое соединение при 37°С и 5% СO2. Влияние на миграцию клеток Сасо-2 исследовали путем регистрации изображений перед добавлением тестируемого соединения и через 18 часов после добавления тестируемого соединения и сравнения площадей, занятых клетками, в фиксированной области через 18 часов после добавления тестируемых соединений. Кроме того, в качестве контроля использовали клетки Сасо-2, культивированные таким же образом в среде, не содержащей тестируемых соединений.
(Результаты)
В таблице 1 показаны результаты, полученные в случае, когда использовали единственное средство SSSR, а в таблице 2 - в случае, когда SSSR и FGLM-NH2 использовали в комбинации. В этих таблицах миграция клеток Сасо-2 выражена в виде среднего и стандартной ошибки, вычисленных по результатам, полученным на 8 образцах для каждого тестируемого соединения, принимая миграцию контрольных клеток в качестве стандарта (100%). При этом символ «∗∗» означает статистическую достоверность отличия от контроля при значении Р меньше <0,001.
| Таблица 1 | |
| Тестируемое соединение (концентрация) | Миграция клеток Сасо-2 (%) |
| Контроль | 100,0±3,8 |
| SSSR (30 мкМ) | 125,0±2,0∗∗ |
| Таблица 2 | |
| Тестируемое соединение (концентрация) | Миграция клеток Сасо-2 (%) |
| Контроль | 100,0±3,8 |
| SSSR (10 нМ) | 109,7±5,1 |
| FGLM-NH2 (20 мкМ) | 105,9±3,9 |
| SSSR (10 нМ)+FGLM-NH2 (20 мкМ) | 130,6±0,6∗∗ |
(Обсуждение)
Из таблицы 1 следует, что SSSR трифторацетат в концентрации 30 мкМ индуцирует миграцию клеток Сасо-2.
Кроме того, из таблицы 2 следует, что применение единственного средства SSSR трифторацетата в концентрации 10 нМ или единственного средства FGLM-NH2 трифторацетат в концентрации 20 мкМ не индуцирует миграцию клеток Сасо-2, однако при совместном действии 10 нМ SSSR трифторацетата и 20 мкМ FGLM-NH2 трифторацетата наблюдается значительный эффект, индуцирующий миграцию клеток Сасо-2.
2. Примеры препаратов
Ниже будут показаны общие примеры препаратов терапевтического средства или профилактического средства против желудочно-кишечного заболевания по настоящему изобретению.
1) Таблетка
Состав 1 (на 1000 мг)
| SSSR трифторацетат | 100 мг |
| Лактоза | 700 мг |
| Кукурузный крахмал | 100 мг |
| Кальций-карбоксиметил целлюлоза | 50 мг |
| Гидроксипропил целлюлоза | 43 мг |
| Стеарат магния | 7 мг |
Таблетка с указанным выше составом покрыта покровным веществом (например, таким как гидроксипропилметил целлюлоза, макрогол, силиконовая смола или гипромеллоз фталат), в результате чего получают желаемую таблетку, покрытую оболочкой. Кроме того, можно получить желаемую таблетку, изменяя количества добавляемых средств.
Состав 2 (на 1000 мг)
| SSSR трифторацетат | 1 мг |
| FGLM-NH2 трифторацетат | 200 мг |
| Лактоза | 600 мг |
| Кукурузный крахмал | 100 мг |
| Кальций-карбоксиметил целлюлоза | 50 мг |
| Гидроксипропил целлюлоза | 43 мг |
| Стеарат магния | 6 мг |
Таблетка с указанным выше составом покрыта покровным веществом (например, таким как гидроксипропилметил целлюлоза, макрогол, силиконовая смола или гипромеллоз фталат), в результате чего получают желаемую таблетку, покрытую оболочкой. Кроме того, можно получить желаемую таблетку, изменяя количества добавляемых средств.
Состав 3 (на 1000 mg)
| SSSR ацетат | 0,1 мг |
| FGLM-NH2 гидрохлорид | 10 мг |
| Лактоза | 650,9 мг |
| Кукурузный крахмал | 200 мг |
| Кальций-карбоксиметил целлюлоза | 80 мг |
| Гидроксипропил целлюлоза | 50 мг |
| Стеарат магния | 9 мг |
Таблетка с указанным выше составом покрыта покровным веществом (например, таким как гидроксипропилметил целлюлоза, макрогол, силиконовая смола или гипромеллоз фталат), в результате чего получают желаемую таблетку, покрытую оболочкой. Кроме того, можно получить желаемую таблетку, изменяя количества добавляемых средств.
2) Капсула
Состав 1 (на 150 мг)
| SSSR трифторацетат | 100 мг |
| Лактоза | 50 мг |
Изменяя соответствующим образом соотношение медикамента и лактозы и заполняя наружную оболочку медикаментом и лактозой, можно получить желаемую капсулу. В качестве исходного материала наружной оболочки использовали желатин, гидроксипропилметил целлюлозу или тому подобное.
Состав 2 (на 150 мг)
| SSSR трифторацетат | 0,1 мг |
| FGLM-NH2 трифторацетат | 10 мг |
| Лактоза | 139,9 мг |
Изменяя соответствующим образом соотношение медикамента и лактозы и заполняя наружную оболочку медикаментом и лактозой, можно получить желаемую капсулу. В качестве исходного материала наружной оболочки использовали желатин, гидроксипропилметил целлюлозу или тому подобное.
Состав 3 (на 150 мг)
| SSSR ацетат | 0,05 мг |
| FGLM-NH2 гидрохлорид | 10 мг |
| Лактоза | 139,95 мг |
Изменяя соответствующим образом соотношение медикамента и лактозы и заполняя наружную оболочку медикаментом и лактозой, можно получить желаемук капсулу. В качестве исходного материала наружной оболочки использовали желатин, гидроксипропилметил целлюлозу или тому подобное.
Промышленная применимость
Настоящее изобретение предлагает терапевтическое средство или профилактическое средство против желудочно-кишечного заболевания, такого как язвенное или воспалительное желудочно-кишечное заболевание, желудочно-кишечное заболевание, вызванное аномальной проницаемостью слизистой оболочки и приобретенными нарушениями пищеварения и всасывания, вызванными резекцией желудка и кишечника, облучением или лекарственным препаратом или врожденным нарушением пищеварения и всасывания.
1. Терапевтическое средство или профилактическое средство, стимулирующее миграцию клеток ткани слизистой желудочно-кишечного тракта, содержащее пептид с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.
2. Терапевтическое средство или профилактическое средство, стимулирующее миграцию клеток ткани слизистой желудочно-кишечного тракта, содержащее в качестве активных ингредиентов комбинацию следующих компонентов (а) и (b):
(a) пептид с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемую соль; и
(b) пептид с аминокислотной последовательностью Phe-Gly-Leu-Met-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль.
3. Терапевтическое средство или профилактическое средство, стимулирующее миграцию клеток ткани слизистой желудочно-кишечного тракта, по п. 1 или 2, где терапевтическое или профилактическое средство пригодно для лечения патологии слизистой желудочно-кишечного тракта, которая является аномальной проницаемостью слизистой оболочки или вызвана желудочно-кишечным заболеванием, таким как язвенное или воспалительное желудочно-кишечное заболевание, или повреждением желудочно-кишечного тракта вследствие резекции желудка и кишечника, облучения или действия лекарственного препарата или врожденного нарушения пищеварения и всасывания.
4. Терапевтическое средство или профилактическое средство, стимулирующее миграцию клеток ткани слизистой желудочно-кишечного тракта, по п. 1 или 2, где его дозированная форма представляет собой препарат для приема перорально.
5. Способ лечения или профилактики патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества пептида с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемой соли.
6. Способ лечения или профилактики патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту комбинации терапевтически эффективных количеств следующих компонентов:
(a) пептида с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемой соли; и
(b) пептида с аминокислотной последовательностью Phe-Gly-Leu-Met-NH2 или его фармацевтически приемлемой соли.
7. Способ лечения или профилактики патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта по п. 5 или 6, где патологией слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта является аномальная проницаемость слизистой оболочки или она вызвана язвенным или воспалительным желудочно-кишечным заболеванием или повреждением желудочно-кишечного тракта в результате резекции желудка и кишечника, облучения или действия лекарственного препарата или врожденного нарушения пищеварения или всасывания.
8. Способ лечения или профилактики патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта по п. 5 или 6, где введение осуществляется путем приема перорально.
9. Применение пептида, имеющего аминокислотную последовательность Ser-Ser-Ser-Arg, или его фармацевтически приемлемой соли для лечения или профилактики патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.
10. Применение по п. 9, где патологией слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта является аномальная проницаемость слизистой оболочки или она вызвана язвенным или воспалительным желудочно-кишечным заболеванием или повреждением желудочно-кишечного тракта в результате резекции желудка и кишечника, облучения или действия лекарственного препарата или врожденного нарушения пищеварения или всасывания.
11. Применение по п. 9 для производства терапевтического средства или профилактического средства, применяемого перорально.
12. Комбинация следующих компонентов (а) и (b) для лечения или профилактики патологии слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта
(а) пептида с аминокислотной последовательностью Ser-Ser-Ser-Arg или его фармацевтически приемлемой соли; и
(b) пептида с аминокислотной последовательностью Phe-Gly-Leu-Met-NH2 или его фармацевтически приемлемой соли.
13. Комбинация пептидов или их солей по п. 12, где патологией слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта является аномальная проницаемость слизистой оболочки или она вызвана язвенным или воспалительным желудочно-кишечным заболеванием или повреждением желудочно-кишечного тракта в результате резекции желудка и кишечника, облучения или действия лекарственного препарата или врожденного нарушения пищеварения или всасывания.
14. Комбинация пептидов или их солей по п. 12 для производства терапевтического средства или профилактического средства, применяемого перорально.
