Способ дифференциации бактерий

Авторы патента:

C12Q1/04 - установление присутствия и(или) вида микроорганизма; использование селективных сред для испытания антибиотиков или бактерицидов; составы, содержащие химический индикатор для этих целей

C12N1/20 - бактерии; питательные среды для них

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ БАКТЕРИЙ , включающий воздействие видоспецифическими фагами и витальную окраску тетразоловым красителем, отличающийся тем, что, с цепью ускорения способа, витальную окраску проводят до воздействия фагами, затем окрашенную пробу облучают светом с длиной волны 7004-10 им, регистрнруют нарастание флуоресценции в спектральном диапазоне 738-745.нм, далее воздействуют специфическими фагами, повторно облучают, светом и регистрируют фпуоресценхщю, дифференциацию бактерий проводят по реакции тушения флуоресценции до и после воздействия фагами.

ÄÄSUÄÄ 1182076

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

NUI

РЕСГ1УБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ;:

К АВТОРСКОМУ СВИД.:ТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЯ (21) 3724411/28-13 (22) 10.04.84 (46) 30.09.85. Бюл. У 36 (72) В.К.Яковлев,и Л.С.Наумов (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биологического приборостроения (53) 576.8.093. 1(088.8) (56) Г ольдфарб Д.М. Бактериофагия, М.: Медгиз, 1961, с. 220-256.

Инструкция Минздрава СССР

В 836.70, 837-70, 16.02.70. (54)(57) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ БАКТЕРИЙ, включающий воздействие видоспе(м)4 С 12 N 1/20, С 12 Q 1/04 о цифнческими фагами и витальную окраску тетразоловым красителем, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью ускорения способа, витальную окраску проводят до воздействия фагами, затем окрашенную пробу облучают светом с длиной волны 700+10 нм, регистрируют нарастание флуоресценции в спектральном диапазоне 738-745.нм, далее воздействуют специфическими фагами, повторно облучают. светом и регистрируют флуоресценцию, дифференциацию бактерий проводят по реакции тушения флуоресценции . до и после воздействия фагами.

82076 Составитель А.Маныкин

Редактор Н.Швыдкая Техред Ж.Кастелевич Корректор В.Гирняк

Заказ 6069/26 Тираж 524 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений:и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

1 11

Изобретение относится к микробиологии, в частности к определению видовой принадлежности бактериальных клеток.

Целью изобретения является ускорение способа.

Пример. Иссследуемую пробу жидкости (суспензия специфических фагов) и 0,1Х-ный раствор тетразолового витального, красителя (например, НТХ-нитротетразолий хлористый), изготовленного на фосфатном буфере

Зеренсена с рН 8,2 прогревают 1 мин на водяной бане при 40 вЂ” 41 С. Добавляют в пробу тетразоловый краситель в соотношении 1:4 вЂ” 1:5 по объему (краситель/проба), облучают пробу светом с длиной волны 700+10 нм и регистрируют, например, с помощью обычного спектрофлуориметра, на одной из длин волн в спектральном диапазоне 738-745 нм нарастание флуоресI ценции от витально,:окрашиваемых микроорганизмов пробы. Затем вносят в пробу суспензию специфических фагов объемом 0,4-0,5 мп с исходной концентрацией порядка 10 частиц/мл и продолжают указанным способом облу10 чать пробу и регистрировать флуоресценцию.Если сразу после введения специфических фагов наступает резкое тушение @луоресценции и падение сигнала при ее регистрации, которое продолжается от 30-50 с до 2-4 мин, то делают вывод о присутствии в lIpo бе живых микроорганизмов искомого вида, по отношению к которому быпи использованы специфические фаги.