Способ выявления клеточного состава сосудистого сплетения головного мозга

 

Изобретение относится к медицине , а именно к гистологии, и может быть использовано с диагностической целью при изучении прижизненного состояния полиморфных органов. Цель изобретения - более полное выявление клеточных элементов сплетений. Готовят пленочный препарат сосудистого сплетения головного мозга мыши. Затем на сплетение на 2 мин пипеткой наносят раствор Рингера температурой 37°С и рН 7,0. Окрашивают сосудистые сплетения в течение 15-25 мин путем аппликации на сосудистое сплетение 0,012-0,25%-ного раствора януса зеленого в растворе Рингера с рН 7,0 и температурой . Затем краситель отсасывают пипеткой. Вновь заливают раствор Рингера при рН 7,0 и 37°С на 2 мин. Далее инкубируют сосудистое сплетение головного мозга в.0,045- 0,05%-ном растворе сульфита натрия в течение 40-45 мин. Для получения постоянного пленочного препарата отсекают структуры, соединяющие сосудистое сплетение с организмом, и монтируют на покровном стекле с последующим высушиванием в вакууме при 140-180 мм рт.ст. в течение 40-45;мин, Препарат заключают в среды. В препарате окрашиваются помимо нейроцитов глиальные макрофаги, миоциты, перициты , эндотелиоциты, эпендимоглиоциты. с сл 00 01 со о

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

Я0» 1288536

А1 (58 4 С 01 N 1 8

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ВНВЯНЦТЫА 1 % Ют

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3627897/28-14 (22) 22.07.83 (46) 07,02.87. Бюл. Р 5 (71) Астраханский государственный мадицинский институт им.А.В.Луначарского (72) P.À.Çóìåðîâ и Л.Г.Сентюрова (53) 616 †.88.8(088.8) (56) Самойлов М.О. О взаимосвязи витальных красителей с живыми и переживающими нейронами коры головного мозга млекопитающих. ДАН СССР, 1973, 209, 6, 1435.

Лилли P. Патогистологическая техника и практическая гистохимия °

И,: Мир, 1969, с. 572. (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ КЛЕТОЧНОГО

СОСТАВА СОСУДИСТОГО СПЛЕТЕНИЯ ГОЛОВНОГО M03I A (57) Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии, и может быть использовано с диагностической целью при изучении прижизненного состояния полиморфных органов. Цель изобретения — более полное выявление клеточных элементов сплетений. Готовят пленочный препарат сосудистого сплетения головного мозга мьппи. Затем на сплетение на 2 мин пипеткой наносят раствор Рингера температурой 37 С и рН 7,0, Окрашивают сосудистые сплетения в течение 15-25 мин путем аппликации на сосудистое сплетение

0,012-0,25Х-ного раствора януса зеленого в растворе Рингера с рН 7,0 и температурой 37 С. Затем краситель отсасывают пипеткой. Вновь заливают раствор Рингера при рН 7,0 и 37 С на

2 мин. Далее инкубируют сосудистое сплетение головного мозга в 0,0450,05Х-ном растворе сульфита натрия в течение 40-45 мин. Для получения постоянного пленочного препарата отсекают структуры, соединяющие сосудистое сплетение с организмом, и монтируют на покровном стекле с последующим высушиванием в вакууме при

140-180 мм рт.ст. в течение 40-45,мин, Препарат заключают в среды. В препарате окрашиваются помимо нейроцитов глиальные макрофаги, миоциты, перициты, эндотелиоциты, эпендимоглиоциты.

Формула из обре те ния

Способ выявления клеточного,состава сосудистого сплетения головного мозга путем обработки пленочного препарата сосудистого сплетения красителем с последующим заключением в среды и дифференцировкой клеточного состава под микроскопом, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью более полного выявления клеточных элементов сплетения, окраску проводят в течение 15-25 мин, при этом в качестве красителя используют

0,012-0,015Х-ный раствор януса зеленого, далее после окраски препарат дополнительно обрабатывают 0,045О, 05Х-ным р а с тв ор ом сульфи та натрия в течение 40-45 мин, а перед заключением препарат высушивают при давлении 140-180 мм рт.ст.

Составитель Л. Соловьев

Техред Л, Олейник Корректор С. Черни

Редактор А. Шишкина

Заказ 7798/39 Тираж 799 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие., r. Ужгород, ул. Проектная, 4

1 12885

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии, и может быть использовано, в частности, с диагностической целью при изучении прижизненного состояния полиморфных ор-. ганов.

Цель изобретения — более полное выявление клеточных элементов сплетений путем сочетанного-действия красителя янус зеленого и дополнительно-10 го фактора — сульфита натрия, что обеспечивает выявление в сосудистом сплетении эпендимоглиоцитов, эндотелиоцитов, перицитов, миоцитов, глиальных макрофагов и нейтроцитов.

Способ осуществляют следующим образом.

После окраски при концентрации красителя янус .зеленого 0,012-0,015Х в течение 15-25 мин пленочный пре- 20 парат сосудистого сплетения обрабатывают в 0,045-0,05Х-ном растворе сульфита натрия 40-45 4ин. Перед заключением в среды и дифференцировкой клеточного состава под микроско- 25 пом препарат высушивают при давлении

140-180 мм рт.ст. в течение 40-45 мин, Пример. Вначале приготавливают пленочный препарат сосудистого сплетения головного мозга. Для это-,30 го у наркотизированной мыши под бинокулярным стереоскопическим микроскопом вскрывают черепную коробку и рессекают мозжечок, открывают 4-й желудочек, раздвигают полушария большого мозга и вскрывают третий и боковые желудочки. Затем мягкой кисточкой, смоченной в растворе Рингера, расправляют сосудистое сплетение. Далее на сплетение на 2 мин 40 пипеткой наносят раствор Рингера температурой 37 С и рН 7,0. После этого производят окраску сосудистый сплетений в течение 15 мин путем аппликации на сосудистое сплетение 0,012ного раствора януса зеленого в растворе Рингера рН 7,0 и температурой

37 С. Затем краситель отсасывают пи36 2 петкой, и вновь наливают раствор

Рингера при рН /,О и температуре 37 С на 2 мин. Следующий этап заключается в инкубации сосудистого сплетения головного мозга в 0,045Х-ном растворе сульфита натрия в течение 80 мин, Для получения постоянного пленочного препарата отсекают структуры, соединяющие сосудистое сплетение с организмом, и монтируют на покровном стекле с последующим высушиванием под вакуумом (140 мм рт.ст.) в течение 40 мин. Далее препарат заключают.

Таким образом, при осуществлении подготовки сосудистых сплетений головного мозга для гистологического исследования путем прижизненного окрашивания удается повысить чувствительность реакции клеточных элементов за счет окрашивания помимо нейроцитов глиальных макрофагов, миоцитов, перицитов, эндотелиоцитов, эпендимоглиоцитов, т.е. добиться более полного выявления клеточных элементов сплетений.