Способ микробиологического окисления стероидных соединений

 

Класс 301т 2гв № 135427! 1

1 (СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Подписная группа Л5 189

Заявитель

Иностранное предприятие Хиноин Дьодьсерэс Ведьесети

Термекек Дьара Рт. (Венгрия) Действитель! ые изобретатели иностранцы

Дьордь Викс и Кароли Альбрехг

СПОСОБ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ОКИСЛЕНИЯ

СТЕРОИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Заявлено 5 февраля 1960 г. за № 653233/3! н Ьогиитст по аслаки изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Опубликовано в «Бк:ллстсис изобретений» № 2 за 1961

Известные методы микробиологического окисления стероидов используют окисление в ферментаторах.

Предлагаемый способ микробиологического окисления стероидных соединений заключается в том, что через неподвижну!о массу мицелия которая имеет форму бус, пропускают культуральную жидкость. содержащую кислород воздуха и окисляемое стероидное соединение. Особенность способа состоит в использовании циркуляции культуральной жидкости через слой неподвижной массы мицелия, причем периодически часть питательной среды отвозится, и из нее выделяются продукты реакции. Взамен отобра:-ной част; питательной среды в цнркулируюLUHH раствор добавляют свежую питате. нчую среду.

Способ осуществляется в хроматографической колонне. в средней части которой имеется неподвижный слой бусовидных культур микроорганизмов, отделенный от текущей жидкости фильтру!ошей поверхность!о.

Насыщаемая кислородом питательная среда с добавлением стероидов циркулирует через слой неподвижного мицелия микроорганизмов, Бусовидные культуры адсорбируют большие количества стероидов, в связи с чем замена непрерывно отходящей из системы жидкости, содержащеч окисленные стероиды, может быть осуществлена и путем применения питательной среды, лишенной стероидов. Отделенную культуральнуK) жид№ 135427

Предмет изобретения

Способ микробиологического окисления стероидных соединений мицелийобразующими микроорганизмами, отличающийся тем, что через неподвижную массу мицелия, которому придана форма бус, пропускают насыщенную воздухом питатсльную среду, содержащую окисляемое стероидное соединение, а целевые продукты выделяют из отводимого раствора известными способами.

Редактор В. В. Бердюгина Техред А. Л Камышникова

Корректор Цвернна

Формат бум, 70; 108 /„.

Тираж 450

ЦБТИ при Комитете по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, М. Черкасский пер., д. 2/6

Объем 0,17 уса. и. л.

Цена 3 коп.

Подп. к .печ. 20.IV-61 r

Зак. 4061

Типография ЦБТИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР, Москва, Петровка, 14. кость заменяют или чистой водой, или физиологическим раствором, или питательной средой с добавлением дополнительных количеств стероида.

Л р и м е р 1. Для приготовления мицелия смесь из 5 л 2%-ного раствора глюкозы и 2%-ного водного раствора от замочки кукурузы и питательной среды с содержанием 0,1% хлористого натрия, стерилизованную при рН4,5 и 121, инокулируют 1,6. 10 спор Rhisopus nigricaus. В ферментатор пропускают в течение двух дней воздух при 28 при перемешивании. При этом наблюдается бусовидное развитие грибковой культуры, 400 мл которой переносят в хроматографическую колонну. К циркулирующей жидкости добавляют 160 мг прогестерона и 4 мл ацетона. После начала аэрации (5 л/мин) при скорости циркуляции 75 мл/мин через 6, 8, 10, 12, 14 часов отбирают по 250 мл фильтрованной жидкости, причем это количество замещают свежей питательной средой. Через 16 часов из объединенных экстрактов питательной жидкости и оставшегося в колонке мицелия выделяют 158 мг стероидов: 115,0 мг 11а-оксипрогестерона и 43 мг прогестерона, причем в реакцию вступает 72% исходного количества прогестерона, Пример 2. Условия ферментации и обработки такие же, как в примере 1, но при отборе проб через 6, 8,10, 12, 14 часов отбиравшаяся питательная среда заменяется дистиллированной водой. Аэрация—

3 л/мин, скорость циркуляции жидкости — 240 мл/мин. Выделяют

162,0 мг стероидов: 148,0 мг 11 а-оксипрогестерона, и 14,0 мг прогестерона. В реакцию вступа ет 90% от исходного количества прогестерона.

Пример 3. Условия ферментации и обработки такие же, как в примере 1, но при отборе проб используемая для пополнения питательная среда содержит 40 мг прогестерона. Общее количество стероида, пропускаемого через колонну, — 280 мг. Аэрация — 3 лlмин, скорость циркуляции — 250 мл/мин, Выделяют 244,4 11а-оксипрогестерона, в реакцию вступает 80% исходного количества прогестерона.

Пример 4. 5 л питательной среды, описанной в примере 1, инокулируют в стеклянном ферментаторе 6Х 104 спор Cunninghomella

b lakesleeana, культуру подвергают аэрации в течение двух дней при 28.

400 мл бусовидной культуры подвергают хроматографированию с добавкой 100 мл соединения Рейхштейна. ьlерез 4, 8, 12, 16 и 20 часов отбирают по 200 мл жидкости и заменяют их 200 мл свежеферментной жидкости. Отобранные пробы экстрагируют. Путем хроматографии на бумаге в них обнаруживают гидрокортизон, образующийся с хорошим выходом наряду с картизоном и более полярными продуктами, чем гидрокортизон.

Способ микробиологического окисления стероидных соединений Способ микробиологического окисления стероидных соединений 

 

Наверх