Способ определения чувствительности к антибактериальным препаратам у больных туберкулезом легких

 

Изобретение о носится к медицине , точнее к биохимическойодиагностике . Цель изобретения - более ранняя диагностика непереносимости препаратов. Для этого тонкие мазки крови высушивают на воздухе, фиксируют в 60%-ном ацетоне с добавлением л рйлона Б (рН рабочего раствора 5,2-5,4) 30 с. Мазок полоскают в дистиллированной воде и высушивают. Инкубируют препарат 1 ч в стандартной среде в термостате при 37 С.Прополаскивают дистиллированной водой, высушивают, окрашивают метиловым зеленым и смотрят под микроскопом с масляной иммерсией. Инкубационная среда: 60 мл фосфатного буфера (рН 7,2-7,4)+16 мг трилона Б + 16 иг паранитротетразоля фиолетового + с/- глицерофосфата 630 мг. Продукт реакции of- глицерофосфатдегидрогеназы (о - ГФДГ) определяют в виде четко очерченных синих гранул. В мазке проводят подсчет общего числа гранул в 50 лимфоцитах. Активность фермента вьфажают средним числом гранул в одном лимфоците. При снижении активности фермента на одну и более гра- . нул продукта реакции судят о непереносимости лекарственных препаратов. о S (Л со 05 ю 4 СП

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (д1) 4 A 61 Б 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3971640/28-14 (22) 29..10.85 (46) 30, 12.87. Бюл. N 48 (71) Саратовский государственный медицинский институт (72) З.Л.Шульгина, P.Ï.Íàðöèññîâ и Е.А.Киршак (53) 616.015 (088.8) (56) Рабухин А. Химиотерапия больных туберкулезом. N.: Медицина, 1970, с. 224-225. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К AHTHEAKTEPHAJfbHblM ПРЕПАРАТАМ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ (57) Изобретение оТносится к медицине, точнее к биохимической,диаг.ностике. Цель изобретения — более ранняя диагностика непереносимости препаратов. Для этого тонкие мазки крови высушивают на воздухе, фиксируют в 607. — ном ацетоне с добавлением

",рилона Б (рН рабочего раствора

ÄÄSUÄÄ 1362450 А1

5,2-5,4) 30 с. Мазок полоскают в дистиллированной воде и высушивают.

Инкубируют препарат 1 ч в стандартной среде в термостате при 37 С.Прополаскивают дистиллированной водой, высушивают, окрашивают метиловым зеленым и смотрят под микроскопом с масляной иммерсией. Инкубационная среда: 60 мл фосфатного буфера (рН 7,2-7,4)+16 мг трилона Б + 16 мг паранитротетразоля фиолетового + Ыглицерофосфата 630 мг ° Продукт реакции Ы- глицерофосфатдегидрогеназы (с(- ГФДГ) определяют в виде четко очерченных синих гранул. В мазке проводят подсчет общего числа гранул в

50 лимфоцитах. Активность фермента выражают средним числом гранул в одном лимфоците. При снижении активности фермента на одну и более гра" нул продукта реакции судят о непереносимости лекарственных препаратов.

13624

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимической диагностике.

Цель изобретения — более ранняя

5 диагностика непереносимости препаратов.

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят тонкие мазки крови из 10 пальца. Высушивают их на воздухе и ,фиксируют в 607. -ном ацетоне с добавлением трилона Б (рН рабочего раствора 5,2-5,4) в течение 30 с. Мазок прополаскивают в дистиллирован- 15 ной воде и высушивают на воздухе.

Инкубируют препарат в течение часа в стандартной среде в термостате при

37 С. Прополаскивают дистиллировано

1 ной водой, высушивают, окрашивают ме- 0 тиловым зеленым и смотрят под микроскопом с маслянай иммерсией.

Инкубационная среда: готовят фосфатный буфер (рН 7,2-7,4), на 60 мл фосфатного буфера добавляют 16 мг трилона Б + 16 мг паранитро-тетразоля фиолетового + 0 — глицерофосфата

630 мг. Продукт реакции Ы- глицерофосфатдегидрогеназы (Ы- ГФДГ) определяется в виде четко очерченных си- З0 них гранул. В мазке проводят подсчет общего числа гранул в 50 лнмфоцитах.

Активность фермента выражают средним числом гранул в одном лимфоците, При снижении активности фермента на одну и более гранул продукта реакции прогнозируют переносимость лекарственных препаратов.

В процессе антибактериальной терапии у больных туберкулезом наблю- 40 дается улучшение самочувствия, уменьшение и полное исчезновение симптомов интоксикации, чему соответствует повышение активности Ы- ГФДГ до нормы и выше. Снижение активности фер.мента лимфоцитов на фоне антибактериальной терапии не может быть связано уже со специфическим воспалением и зависит от влияния на энергетический обмен клеток самих лекарст- 80 венных. препаратов.

Пример 1. Больной, 59 лет, в течение 15 дней получает комбинированную терапию по поводу туберкулемы верхней доли правого легкого в фазе распада БК + . Активность с ГФДà — 13,0. Через 15 дней отмечено снижение активности фермента до 12,0.

Признаки клинической непереносимости

2 препаратов отсутствовали. При последующем исследовании отмечено дальнейшее снижение активности .! М -ГФДГ до

6,92. В это же время больной предъявлял жалобы на слабость, тошноту, отсутствие аппетита. Продолжение антибактериальной терапии привело к снижению активности фермента до 2,8.

Наросли клинические симптомы непереносимости лекарств(рвота после приема препаратов, боли в животе), что потребовало отмены всех антибактериальных препаратов.

Пример 2. Больной, 52 лет, по поводу инфильтративного туберкулеза верхней доли правого легкого в фазе распада БК +, получал антибактериальную терапию в течение 15 дней.

Активность 3- ГФДà — 10,02. На-30-й день лечения активность фермента снизилась до 8, 1, еще через 15-дней— до 7,42. В это же время у больного появились боли в суставах, эозинофилия — 7X. Данные изменения потребовали коррекции лечения, после чего

1 последовало постепенное повышение активности фермента до 23,9 (на

135-й день лечения). При последую- . щем исследовании отмечено вновь снижение активности Ы- ГФДГ до 9,4, .а затем до 2,2. В это же время появилась эозинофилия — 6X лейкоцитоз— ,0 19/л, АЛТ возросла до 1,26 мкм.

Больной предъявлял жалобы на слабость, плохое настроение, бессонницу, боль в правом подреберье. Антибактериальные препараты были отменены.

Пример 3. Бальной, 70 лет, в течение 15 дней получал антибактериальные препараты по поводу фиброзно-кавернозного туберкулеза правого легкого БК +, активность о - ГФДГ12,6. Через 15 дней отмечено снижение активности до 2,8. В это же время на туловище и лице появились папулезные высыпания, кожный зуд. Отмена стрептомицина, назначение десенсибилиэирующих средств привели к . повышению активности фермента до

10,4 и угасанию клинических симптомов непереносимости лекарственных препаратов.

Пример 4. Больная, 36 лет.

Диагноз: Фиброзно- кавернозный туберкулез правого легкого в фазе инфильтрации и обсеменения БК +, туберкулез гортани. Показатели активности

Ц вЂ” ГФДГ до лечения и на 15 день

Составитель Н.Гуляева

Техред М.Дидык Корректор M,ØàðîøH

Редактор Л.Повхан

Заказ 6331/3

Тираж 595 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 136 лечения соответственно — 8,6 и 10,6.

На 30-й день терапии активность фермента составила 9,9 гранул продукта реакции, самочувствие больной было удовлетворительным, переносимость препаратов хорошая. Активность фермента при последующем исследовании составила 11,3. Клинических симптомов непереносимости лекарственных препаратов не появилось.

Способ диагностики непереносимости лекарственных препаратов применен при лечении 99 больных (83 мужчин и

16 женщин в возрасте от 18 до 70 лет) с впервые выявленным активным туберкулезом легких. Активность -ГФДГ изучалась в процессе лечения с интервалом в 15 дней.

У 67 человек (687) в процессе . антибактериальной терапии отмечены побочные реакции в виде сыпи, головной боли, головокружения, тошноты и рвоты, слабости, боли в суставах и мышцах. У 21 больного побочные реакции сопровождались эозинофилией (31 ), у 10-лейкоцитозом (157) у 5повышением трансаминаз (87). У всех больных отмечалось снижение активности Ы-глицерофосфатдегидрогеназы лимфоцитов периферической крови по сравнению с предыдущим анализом на одну и более гранул формазана. СниI .жение активности фермента на 15-30 .-„ дней предшествовало клиническим про:явлениям непереносимости антибактериальных препаратов.

Из приведенных примеров конкретного применения и анализа результатов, полученных на группе больных сле1 дует, что предлагаемый способ обеспечивает более раннюю диагностику

4 лекарственной непереносимости, позволяет прогнозировать непереносимость лекарственных препаратов и, следова5 тельно, делает вполне разрешимой задачу избежать тяжелые и затяжные побочные реакции путем своевременной коррекции терапии.

10 По точности предлагаемый способ значительно превосходит известный способ лейкергии. Преимуществом предлагаемого способа, помимо доступнос- ти, надежности, является возможность

15 оценки состояния организма до появления клинических признаков непереносимости антибактериальных препаратов и, следовательно, ее предупреждение.

Простота данного способа позволяет

20 применять его во всех учреждениях здравоохранения,.имеющих биохимические лаборатории.

Формула изобретения

Способ определения чувствительности к антибактериальным препаратам у больных туберкулезом легких путем исследования лейкоцитов периферичес30 кой крови, отличающийся тем, что, с целью более раннего определения непереносимости препарата, исследуют лимфоциты, в которых цитохимически определяют активность

35 обработки пробы п-нитротетразолем фиолетовым и подсчета гранул образовавшегося формазана и при увеличении среднего количества грйнул в расчете

40 на лимфоцит по сравнению с нормой на

1 и более диагностируют непереносимость.