Способ идентификации микробов

Авторы патента:

G01N33/552 - стеклом или диоксидом кремния

ОПИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

l4496l

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое GT авт, сзидетельства ¹â€”

Кл. 301г, 14

Заявлено 15Х(11 1959 (№ 636694/31) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 31 V.1967. Бюллетень № 12

Дата опубликования описания 4Л III.1967

МПК А 61k

УДК 615.45: 576.8,093.1 (088.8) йомитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

Автор изобретения

А. К. Адамов

Заявитель

С11ОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРОБОВ

Адсорбционные связи антигенов и антител с различными обьсктами используются в микробиологии с различной степенью эффективности для идентификации микробов.

Предлагаемый способ идентификации микробов обеспечивает значительное упрощение и ускорение исследований. Отличительной особенностью em является использование при идентификации микробов путем агглютинации на стекле иммунных сывороток, адсорбированных на ализариновой суспензии. Иммунные сыворотки должны быть консервированы борной кислотой.

Для осуществления способа вначале приготовляют «лизариновую суспензию, к которой затем добавляют диагностическую агглютинирующую сыворотку, консервированную борной кислотой. Ализариновые частицы суспензии адсорбируют агглютинины видовой монорецепторной сыворотки (титр не ниже

1: 800). Полученный препарат сохраняют и используют для реакции агплютинации микробов на стекле.

Для приготовления ализариновой суспензии в фарфоровую ступку помещают 1,0 порошка кристаллического ализарина и 3 час растирают его пестиком с 2 вЂ” 3 л бидистиллированной воды (рН=7,0 вЂ” 7,2). Через 3 час полученную суспензию разводят 18 лгл бидистиллированной воды. При этом образуется равномерная однородная суспензия, которую дважды центрифугируют с декатпрованием надссадочной жидкости н суспендированием получаемых осадков в оидистпллированной воде (20 лг.г первый раз и 90 лг г второй). Полученную суспензию переносят в колбочку с фарфоровыми бусами и встряхивают в течение 15 лгин.

Крупные частицы удаляют центрифугиро10 ванием, а надосадочную жидкость фильтруют под небольшим вакуумом через мембранные фильтры с диаметром пор 3 вЂ” 5 лгк, получая в фильтрате преимущественно (свыше 90%) частицгп величиной 1,0 вЂ” 1,6 лгк. Получение

1> устойчивой суспензии с такой величиной частиц требует высококачественных реактивов и определенного навыка работы с суспензиями.

Для адсорбции агглютининов на частицы

20 ализариновой суспензии к 10 лг г последней добавляют 2 лгл диагностической видовой монорецепторной агглютинирующей сыворотки с титром не ниже 1: 800, разведенной 1:5 или 1: 10 физиологическим раствором, содер25 жащим 1% борной кислоты. Смесь, периодически перемешивая, выдерживают 2 час при

37 С, затем помещают на 18 час в холодильник (температура +4 вЂ” 8 ), перемешивают и центрифугируют до полного просветления

30 жидкости. Надосадочную жидкость удаляют

144961

Предмет изобретения

Редактор Т. II. Караиова Техред T. П. Курилко Корректоры; М. П. Ромашова и T. д. Чуиаева

Заказ 2381 6 Тираж 535 Подписное

ЦНИИПИ Комитета пс делам изоорстений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2 декантацией, а к осадку добавляют 10 л л физиологического раствора, содержащего

0,5в/в борной кислоты.

Препарат, консервированный 0,5в в борной кислоты, в запаянных ампулах при температуре +8 вЂ” 12 сохраняет иммунологическую активность и специфичность около 12 месяцев.

Для осуществления реакции агломерации на тщательно обезжиренное предметное стекло наносят каплю препарата и к ней добавляют две капли исследуемой микробной взвеси. Капли перемешивают платиновой петлей и распределяют по предметному стеклу в виде квадрата 20Х20 мм. Контролем служит 15 капля препарата, смешанная с двумя каплями гетерологичных микробов, капля препарата, смешанная с двумя каплями физиологического раствора, и капля адсорбированного на ализариновой суспензии нормального кро- 20 личьего глобулина (приготовляется аналогично описываемому препарату), смешанная с двумя каплями исследуемой микробной взвеси. При легком покачивании предметного стекла через 5 вЂ” 10 иия (в зависимости от концентрации гомолог1ичных микробов в исследуемой взвеси) происходит скучивание частиц ализарина в крупные агломераты с частичным или полным просветлением жидкости, тогда как контрольные капли остаются гомогенными.

Способ идентификации микробов при помощи агглютинации на стекло, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения исследования, применяют иммунные сыворотки, консервированные борной кислотой, адсорбированные на ализариновой суспензии.

Похожие патенты:

Матрица иммуносорбента // 2140084

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике инфекционных заболеваний

Способ диагностики пищевой аллергии // 2140085

Изобретение относится к медицине, а именно, аллергологии и может быть использовано для выявления пищевой аллергии у взрослых и детей

Способ морфологической оценки гибели клеток при апоптозе // 2157999

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной гематологии, токсикологии, и касается способов морфологической оценки гибели клеток при апоптозе

Способ выявления цитокинов // 2180120

Изобретение относится к медицине, а именно к выявлению экспрессии цитокинов в клетках

Способ получения иммуносорбента // 2253871

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению иммуносорбентов

Способы избирательной количественной оценки агрегатов а-бета // 2642314

Изобретение относится к биохимии. Описан способ количественной оценки и характеризации агрегатов А-бета, включающий следующие стадии, на которых: а) осуществляют иммобилизацию захватывающих молекул на субстрате, б) наносят предназначенный для тестирования образец и внутренний стандарт на субстрат, в) добавляют меченые с целью детекции зонды, которые метят агрегаты А-бета посредством специфического связывания с ними, и г) определяют количество и размер маркированных агрегатов А-бета с пространственным разрешением в каждом случае по сравнению с соответствующим фоном, при этом стадию б) можно осуществлять до осуществления стадии в). Также представлен набор для осуществления описанного способа, содержащий стандарт и один или несколько из следующих компонентов: стеклянный субстрат с нанесенным покрытием из гидрофобной субстанции; захватывающую молекулу; зонд; субстрат с захватывающей молекулой; растворы; и буфер. Также представлен способ определения эффективности действующих веществ и/или терапий, предназначенных для лечения болезни Альцгеймера, отличающийся тем, что а) осуществляют иммобилизацию захватывающих молекул на субстрате, б) наносят предназначенный для тестирования образец и внутренний стандарт на субстрат, в) добавляют меченые с целью детекции зонды, которые метят агрегаты А-бета посредством специфического связывания с ними, и г) определяют количество и размер маркированных агрегатов А-бета с пространственным разрешением в каждом случае по сравнению с соответствующим фоном, при этом стадию б) можно осуществлять до осуществления стадии в), д) сравнивают результаты, полученные на образцах, которые представляют собой образцы биологической жидкости организма, взятые до или в различные моменты времени после введения действующих веществ и/или применения терапии, с результатами, полученными для контроля, который не обрабатывали действующим веществом и/или не подвергали терапии, и на основе полученных результатов отбирают действующие вещества и/или терапии, после применения которых наблюдалось снижение количества агрегатов А-бета. Изобретение расширяет арсенал средств, предназначенный для определения эффективности лечения болезни Альцгеймера. 3 н. и 40 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 пр.