Способ очистки 4ъ-эпидоксорубицина

 

Изобретение касается производных гликозидов, в частности г -эпидоксорубицина, используемого в медицине и биохимии. Процесс ведут из сырого 4 -эпидоксорубицина, 0,3%-ный водный раствор которого обрабатывают муравьинокислым натрием до рН 4,8 и адсорбируют на колонке 400 мл со смолой Амберлит УКС-724, затем промывают водой и злюируют смесью CHjOH-HjO-HCl

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

yg 4 С 07 Н 15/24

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3674607/23-04 (22) 16. 12.83 (31) 24939 А/82 (32) 23.12.82 (33) IT (46) 23.11.88. Бюл. У 43 (71) Фармиталия Карло Эрба С.п.А. (IT) (72) Эрнесто Оппичи, Карло Варесио и Онорино Джиакома Роза (IT) (53) 547.855.07 (088.8) (56) Carter S.Ê. J.Nat1 Cancer. Inst

55, 1265-1274, 1975 ° (54) СПОСОБ ОЧИСТКИ 4 -ЭПИДОКСОРУ-

БИЦИНА (57) Изобретение касается производных гликозидов, в частности 4 -эпидоксорубицина, используемого в медицине и биохимии. Процесс ведут из сырого

4 -эпидоксорубицина, 0,37.-ный вод„„SU „„1440350 А 3 ный раствор которого обрабатывают муравьинокислым натрием до рН 4,8 и адсорбируют на колонке 400 мл со смолой Амберлит УКС-724, затем промывают водой и элюируют смесью СН ОН-Н О-НС1 (39, 11 об.Ж) при объемном соотношении

99:5:0,015 с доведением рН у выделенного элюта (с HCOONa) до 4,8. Реадсорбцию ведут на колонке 250 мл со смолой карбоксиметилцеллюлозы, промывают смесью С НЕОН-Н О""НС1 (объемное соотношение 90:10:0,05) с последующим концентрированием элюата в вакууме и осаждением целевого продукта с помощью ацетона. Получают продукт с выходом до 55,3Х, содержанием примесей ЗХ и титром 91,2Х, что свидетельствует о высокой чистоте целевого 4 -эпидоксорубицина.

Получают 6,9 r 4 -эпидоксорубицина с титром 91,2Х и содержанием примесей З . Выход составляет 55 3Х. t440350

Формула изобретения

Составитель И,Федосеева

Техред М.Дидык Корректор Э,Лончакова .

В.

Редактор C.Ïàòðóøåâà

Заказ 6092/58 Тираж 348

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4

Изобретение относится к способу очистки антрациклиновых гликозидов ! а именно 4 -эпидоксорубицина, селективной адсорбцией на смолах.

Цель изобретения — улучшение способа очистки, которое дает возможность получить чистый целевой продукт.

Пример. Очистка 4 -эпидоксоI рубицина.

15,0 r сырого 4 -эпидоксорубицина, имеющего титр 75,9Х и 15Х примесей, растворяют в 4000 мл воды.

Раствор, рй которого доводят до 5

4,8 с помощью добавления формиата натрия, адсорбируют на 400 мЛ смолы лмберлит IPC 724 в колонке диаметром

2,5 см, при скорости потока 1600 мл/ч.

Колонку промывают 800 мл воды и 20 затем элюируют смесью метанола 95, воды 5 и концентрированной соляной кислоты 0,015, d< =1 20. Отбирают

4000 мл средней фракции элюата с .

4 -эпидоксорубицином, содержащего еше 25

10Х примесей, а также1500 мл конечной фракции элюата с превалйрующим содержанием примесей.

Среднюю фракцию элюата койцентРи руют до 1500 мл, доводят до рН 4,8 30 добавлением формиата натрия и адсорбируют на 250 мл смолы Карбоксиметилцеллюлоза (К) Wathman в колонке диаметром 2,5 см, при скорости потока

500 мл/ч.

„После завершения адсорбции продукт промывают смесью этанола 99,3, воды

О, 7 и концентрированной соляной кислоты 0,015 и затем элюируют смесью этанола 90, воды 10 и концентрирован-40 ной соляной кислоты 0 05 отбирая

3200 мл средней фракции элюата.

Элюат концентрируют в вакууме до

60 мл и затем продукт осаждают добав" лением 300 мл ацетона. 45

В хроматографическом способе очистки применяются адсорбирующие смолы полимерного и ионнообменного типа или карбоксиметил целлюлозного типа: точный выбор, подходящая последовательность в использовании различных типов смол в соответствии с очищаемым сырьевым продуктом, слегка кислые условия в течении адсорбции позволяют получить высокую степень чистоты целевого продукта, устраняет использование хлорированных органических растворителей и дает высокие выходы продукта во время очистки.

Способ очистки 4 -эпидоксорубицина, отличающийся тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, О,ЗХ-ный водный pacf твор сырого 4 -эпидоксорубицина доводят с помощью муравьинокислого натрия до рН 4,8 и адсорбируют на колонке 400 мл со смолой Амберлит IRC 724, затем промывают водой и элюируют смесью метанол-вода-хлористоводородная кислота 39,11 oá.X при соотношеннии 95:5:0,015 об/об, собранный элюат доводят до рН 4,8 добавлением муравьинокислого натрия, реадсорбируют на колонке 250 мл со смолой карбоксиметилцеллюлозы (К), промывают смесью этанол-вода-хлористоводородная кислота при соотношении 99, 3: О, 7: 0,015 об//o6, с последующим элюированием смесью зтанол-вода-хлористоводородная кислота при соотношении 90:10:0,05 об/об, концентрирование элюата в вакууме и осаждают целевой 4 -эпидоксорубицнн.