Способ получения вещества, восстанавливающего репродуктивную функцию из семенников половозрелого скота

 

Изобретение относится к химикофармацевтической промышленности. Цель изобретения - повышение специфической активности целевого продукта. Измельченные семенники крупного рогатого скота обрабатывают уксусной кислотой, осаждают ацетоном. Растворяют осадок в воде с последующими фильтрацией и высушиванием целевого продукта. Обрабатывают сырье уксусной кислоты при рН 3,5 - 4,0 с добавлением 0,5 г/л хлористого цинка. Сохранение специфического начала целевого продукта обеспечивает использование при обработке сырья температуры 10 - 15°С. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к получению препаратов из органов животных. Цель изобретения - повышение специфической активности целевого продукта. Изобретение осуществляется следующим образом. Измельченные семенники крупного рогатого скота обрабатывают уксусной кислотой, осаждают ацетоном, растворяют осадок в воде с последующими фильтрацией и высушиванием целевого продукта, обрабатывают сырье уксусной кислотой при рН 3,5-4,0, в течение 12-24 при температуре 10-15^оС с добавлением 0,5 г/л хлористого цинка, осаждение ацетоном производят тремя объемами при температуре от -5 до -10^оС, а к измельченным семенникам добавляют жмых семенников после отделения вещества, обладающего гиалуронидазной активностью, или смесь семенников и жмыха. Семенники и жмых семенников берут в соотношении 1:(5-10). Существенность отличия предложенных признаков усматривается в том, что из семенников крупного рогатого скота или жмыха этих семенников выделяют вещество, отличное от известных веществ, полученных ранее из семенников крупного рогатого скота. П р и м е р 1. Берут 2,0 кг замороженных семенников половозрелых быков, измельчают на волчке и добавляют 10,0 кг жмыха семенников, перемешивают. Сырье помещают в реактор с охлаждением и мешалкой и заливают 5-10 ч. раствора уксусной кислоты по рН 3,5. Туда же добавляют 0,5 г на 1 л хлористого цинка (табл.1) и включают мешалку. Обработку проводят при температуре 15^оС в течение 24 ч при постоянном перемешивании. После обработки сырья жидкую фракцию отделяют центрифугированием, охлаждают до температуры -5^оС, добавляют ацетон в соотношении ацетон - супернатант 3: 1 (табл.2). Формирование осадка 20 ч. Осадок высушивают, измельчают. Полученный порошок в количестве 236 г растворяют в дистиллированной воде при температуре 18^оС из расчета 70 г на 1 л воды. Водную экстракцию проводят 2 ч при непрерывном перемешивании. Балластные белки удаляют фильтрованием. В фильтрате устанавливают рН 4,5, стерильно фильтруют через пластины EKS, разливают во флаконы, лиофилизируют, получают в каждом флаконе по 12 мг лиофилизированного порошка. Выход активного вещества составляет 36 г из 1 кг сырья. П р и м е р 2. Берут 10 кг жмыха семенников крупного рогатого скота после выделения лидазы, помещают в реактор и заливают 5 ч. раствора уксусной кислоты до рН 4,0. Добавляют хлористый цинк из расчета 0,5 г на 1 л содержимого и включают мешалку. Обработку проводят при температуре 15^оС в течение 12 ч при постоянном перемешивании. После обработки сырья жидкую фракцию отделяют центрифугированием, охлаждают до температуры -10^оС и добавляют 3 объема ацетона. Формирование осадка 20 ч. Полученный осадок высушивают, измельчают и в количестве 180 г растворяют в дистиллированной воде при температуре 18^оС из расчета 75 г на 1 л воды. Водную экстракцию проводят 1 ч при непрерывном перемешивании. Балластные белки удаляют фильтрованием. В фильтре устанавливают рН 4,5, стерильно фильтруют через пластины EKS, разливают во флаконы, лиофилизируют и получают в каждом флаконе по 12 мл лиофилизированного порошка. Выход активного вещества составляет 24 г из 1 кг сырья. Биологическую активность вещества, выделенного из семенников, изучали в экспериментальной модели, предложенной Б.А.Федоровым (Федоров Б.А. Состояние семенников крыс при острой лучевой болезни. Канд. диссертация ЦНИРРИ МЗ СССР, Л., 1962). П р и м е р 3. Берут 1 кг замороженных семенников половозрелого скота, измельчают и добавляют 5 кг жмыха семенников, после выделения лидазы перемешивают и заливают раствором уксусной кислоты до рН 3,8 с добавлением 0,5 г/л хлористого цинка, температуру устанавливают 10^оС, включают мешалку и обрабатывают сырье в течение 18 ч при постоянном перемешивании. После экстракции жидкую фракцию отделяют центрифугированием, охлаждают ее до температуры -8^оС, добавляют три объема ацетона и формируют осадок в течение 20 ч. Полученный осадок сушат и измельчают. Получают порошок в количестве 118 г, растворяют в дистиллированной воде (70 г на 1 л) и проводят водную экстракцию в течение 1 ч при непрерывном перемешивании. Балластные белки отделяют фильтрованием. При рН 4,5 в фильтрате фильтруют через пластины EKS, разливают во флаконы, лиофилизируют и получают в каждом флаконе по 12 мг лиофилизированного порошка. Выход активного вещества составляет 36 г на 1 кг сырья. П р и м е р 4. Берут 4 кг замороженных семенников половозрелого скота, измельчают, добавляют 20 кг жмыха семенников, перемешивают и экстрагируют раствором уксусной кислоты при рН 3,6 с добавлением 0,5 г/л хлористого цинка при температуре 12^оС. Экстракцию проводят 20 ч при постоянном перемешивании. После экстракции жидкую фракцию отделяют центрифугированием, охлаждают до температуры -7^оС, добавляют 3 объема ацетона и формируют осадок в течение 20 ч. Полученный осадок в количестве 416 г растворяют в дистиллированной воде из расчета 75 г/л, проводят водную экстракцию в течение 1 ч при постоянном перемешивании. Балластные белки удаляют фильтрованием, после чего стерильно фильтруют, разливают во флаконы, лиофилизируют и получают в каждом флаконе по 12 мг лиофилизированного порошка. Выход активного вещества составляет 24 г на 1 кг сырья. Из приведенных данных видно, что при концентрации ZnСl₂ 0,5 г/л происходит более полное выделение из семенников конечного продукта и лучшее осаждение его ацетоном.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ВОССТАНАВЛИВАЮЩЕГО РЕПРОДУКТИВНУЮ ФУНКЦИЮ ИЗ СЕМЕННИКОВ ПОЛОВОЗРЕЛОГО СКОТА, включающий обработку сырья уксусной кислотой, центрифугирование, осаждение ацетоном, растворение осадка в воде с последующими фильтрацией и высушиванием целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения специфической активности целевого продукта, используют жмых семенников после отделения вещества, обладающего гиалуронидазной активностью, или смесь семенников и жмыха, обрабатывают уксусной кислотой при pH 3,5 - 4,0 в течение 12 - 24 ч при температуре 10 - 15^oС с добавлением 0,5 г/л хлористого цинка, а целевой продукт получают осаждением тремя объемами ацетона при температуре от -5 до -10^oС.

РИСУНКИ

Рисунок 1

PC4A - Регистрация договора об уступке патента Российской Федерации на изобретение

Номер и год публикации бюллетеня: 27-1999

(73) Патентообладатель:ООО "Клиника Института биорегуляции и геронтологии"

Договор № 8617 зарегистрирован 28.04.1999

Извещение опубликовано: 27.09.1999