Производные кумарина, обладающие антиаллергической активностью

 

СО103 СОВЕТСКИХ

ВЮЛК

РЕСПУБЛИН

0y - 011

А1 (51)5 С 07 0 311 l2 А 61 К 31/35

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АЬТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ9У при;14-Н,.-OCH>1 К - ССН-.СН- .

1 .I

Изобретение относится к новым хи:мическим веществаи - проиэводныи кумарина, обладающим:1 антиаллергичес-.

«ой активностью, что позволяет.пред..-.пололщть их использование в медицине.

Цель изобретения - обнаружение.-. . антиаллергической активности в ряду." производных кумарина .

П р н и е р I. Карбоксииетиленамнд кумарин 3-карбоновой кислоты

:(соединение Ii).

- Смесь:2,10 г хлорайгидрида куиа рнн-3-карбоновой кислоты, 0,75 г

:.аминоуксусной кислоты, 50 ил толуола и .5-10 капель пиридина нагревают при

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (46) 23.08.91. Бюл. и 31;/ (21) 4288068/04 ,(22) 21.07.87 (71) Пятигорский Фармацевтический йнститут

:(72) Э.Т.Оганесян, .И.С.Гущин, .:А.В.Симонян, А.С:.СврвФ и А.Н.llanos ,(53) .547.814.03 (088.8) .j(56) .Машковский М.Д. Лекарственные .средства. М.:, Медицина, 1985, ч.1., : с,319,564,571. (54) пРоизВоДные кУИАРинА,ОВлАЦМЩие

АНТИАЛЛЕРГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЫО ,(57) Изобретение касается гетероцик".

:лических соединений, в частности, щ1оиэводных кумарина общей формулы .

-Сф;(0)NH К Д-,С(О)-О-С С-СН«СН-СН

;: Согде при 14-Н; Rt- -CH

«,.вСН - CH a N - Сн е илн

СООС Н Й(С К ) -CH СН, обладаю-щих антиаллергической активностью,. .что мокет-бить использовано в меди- . " цине. Цель - создание веществ с ак-, тивностью, не характерной для данно»,".-, .. го класса. Синтез целевых соединений . ведут реакцией хлорангидрида куиа- .рин- или 8-метоксикуиарин-3-карбо - . новой кислоты с аминоуксусной кисло.той или 4-аминопиридином, или ди° зтилаииноэтнловим эфирои 4-аминобенвойной кислоты и присутствии пириди-.. на в среде толуоля при 50-60 С в те- .. чение I ч. Выход,Х: т.пл.,4С.1 брут. то-Фориуля: я) 72; 197; С«нцоэМ; б) Bl; 292; С, Н 0gN, в) 75; 238-: Е 240; СдН<<0+N ; г) 70; 255;

С 4Н A6N . Новые соединения превыша вт антияллергическув активность кро-:, молината натрия.в 1,5 2 раза при токсичности LDgy (иг/кг)- ta) 1960, б) 840, в) 1530 ° г) 1510. 4 табл..

1aal в9ь

2; . фф слабом кипении 1 ч. После охлалдения, ©Ъ до комнатной температуры отделяют Ьф осадок, промывают небольшим количест Easel вом этанола, затем,водой. Выход : арф

1 78 r (72%) ° Кристаллизувт из водного.диметилформаиидв (ЛИФА). Т.пл. I97 C,.

Найдено,Z: С 58,30; Н 3,64; М 5,67$

С, Н,О 11.. аваЬ

Вычислено,%: C 58,26; Н 3,70; .0 5,51.

Данные УФ-спектров: Л 204, 308 ии.

3 1466217

П р и и е р,2. 4-Пиридиламид ку=. K . марин-3-карбоновой кислоты (соедине,т ние 2á)

Смесь 2.10 г хлорапгидрида кума5 рин-3-карбоновой кислоты, 0,94 г

4-аминопиридина, 50 tù толуола и 510 капель,пиридина нагревают в тече"

0 ние 1, ч при 50-60ОС. После охлаждеУ ния отделяют осадок, промывают не- 10 большим количеством зтанола, затем водой. Выход 2,15 г (81X). Кристаллизуит из водного ДМФА, т.пл.292 С„

Кайдено,Х: С 67,80;, Н 3,68, Ы 10,65. ° 15

С,„. 11„, 0,11,, Вичислено1Хе С 67р671 H 3976;

Н 10,53. л

Данные УФ"спектров: А иана 204, 302 нм.. 20 Пример 3, 4- (2-(Дизтиламино) этоксикарбонил)феииламид кумарин-3карбоновой кислоты (соединение 1н).

Смесь 2,10 г хлорангидрида кума-,. рин-3-карбоновой кислоты, 2,36 г р диэтиламиноэтиловаго эфира 4-аминок бензойной кислоты, 50 мл толуола и

5-10 капель пиридина нагревают при

50-60 С в течение 1 ч. После охлаждеи ния осадок отделяют, промывают неболь-З1 с шим количествам этанола,, затем водой. к

Выход 3,06 r {15X) . Кристаллизуют иэ водного ДМФА, т.пл.238-240- С.

Найдено,X: С 67„81 „ H 4,19;

К 6,75, сРЗ HC405Ny

Вмиислено,Х: С 67,65; Н 4,08;

И 6„86. н

Данные УФ-спектров, "),„д 203, 224, 302 пм .. 4О

П р и и B р 4, 4- (., -- (Диэтиламиио) этокснкарбонил фениламид 8-метоксц сумарин-3-карбоиовой кислоты (соединение lг).

Смесь 2,40 г хлорангидрида 8-метоксик марии-3=-карбоново6 кислоты„ .2э36 г диэтнламвиоэтилового эфира

4-аминобенэоййой кислоты, 50 мл . толуола и 5-10 капель пиридина нагрева-, ют нрч 50-бО С в течение 1 ч. После охлаждения отделяют осадок, промы" ваит небольшим количеством этанола.

Затем водой. Выход 3,07 г (7OX). ристжтизуит из водного 1Я<Щ, .пл. 255 С.

Н и cg ч

6,22.

С„11, О,нп.

Вычислено,Х: С 65,75; Н 5,93;

6,39.

Данные УФ-спектров: 3„, 206, 261, 30 им, / исследования антияллергического ействия соединений lа-г проводят на адели реакции пассивной кожной ана-. " илаксии (РПКА).

Сыворотку, содержащую специфичесие гомоцитотропные антитела, полуаит на третьей неделе после сенсиби-изации мьппей линии СВА овальбумиом {0,5 мкг) с гидроокисью алиминия (2,5 мг/мышь) . Полученную мыши— уи сыворотку в разведении 1:30 после определения титра гомоцито" ропных антител в РПКА) вводят внутикокно в шесть выстри:кенных участов каки спины белых беспородных рыс (240-260 r) в.количестве

0 мкл. Через 48 ч крысам внутривено вводят разрешающую дозу овальбуина (1 мг/к г ) в 1 мл О, 5Х-ного ратвора синьки Зваиса. Спустя 30 мин рыс под эфирным наркозом декапитиуит, коку выворачивают, прокрашенные участки вырезают и экстрагируют красу формамидом при 37 С в течение сут. Количество красителя в экставазате определяют спектрофотометически при 600 нм по калибровочому графику.

Вещества la-г вводят внутрибришинно в виде суспензий, приготовленных c добавлением одной капли твина-80,, в дозе 50 мг/кг за 1,5 ч до разрешающей дозы овальбумина.

В качестве объекта сравнения иск .полвзуйт. антиаллергический препарат ..кромолинат,натрия (интал) .- аналог . по действии, обладающий антнанафилак тическим действием . Кромолинат. нагрия вводят в дозе 50 мг/кг за 1,5 ч

О до введения.антигена. Контрольным крысам внутрибрюшинио вводят физиоло,гический раствор с таким же количе- ством твийа-80. Процент ингибирования PHKA вычисляют по формуле синька в участках коки крыс,получавших

100 х исследуемые соединения/синька в участках ко и KGRTpoJ25BBx крыс, мкг

Производные кумарина формулы 3

С-NH R

5 . )4662!7 6

Результаты опытов. статистически внутрибрнипиино ввод вво ят по 1 мл суспенобразованы и приведены в табл.). эии исследуемых веществ, приготов- . ленных с добавлением 1 капли тви-.

Влияние соединений lа-r на гетерона-80 и дозе 50 мг/кг. логичную пассивную кожную анафилак.-, В качестве объекта сравнения иссию у морских свинок, опосредованную пользуит кромолинат натрия, который

Ig G-антитейами кролика. вво ят в такой же дозе и тем же

Сыворотку, содержащую специфичес- вводят в так и . д и тем. Контрольным крысам внутрикие IgG-. антитела, получают через 7- путем. Контро

10 бришиино вводят физиологический ра10 дней после 4-кратной сенсибили- 4 1 ство с добавлением такого же коли.эации кролика смесью, состоящей иэ. с р д

l0 мг овальбумина, растворенного в . чества твнна ° чества твина-80.

0 5 мл физиологического раствора .- . ))P ц р

П оцент ингибирования кожной ре—

> и 0,5 мл полного адъюванта Фрейда, акции, вызван ой д иной вве ением экзогеиного гистамина или вещества 48/80, вводимой внутримышечно 1 раз в,не- )5 ного гист ми вычиспяют по указанной формуле. Рез льтаты опытов статистически обраПолученную сыворотку кролика в, . зультаты опыт ве ены в табл.3 и 4, разведении l: !6 вводят внутрикожно в ботаны и приведень

Определение острой токсичности шесть выстриженных участков кожи спины морских свинок — r в (270-300 ) 20 и расчеты )Д осуществляют по метод Ке бе)и. Wåëûì мьппам массой !8количестве 50 мкл..Через 3 ч морским ду еР еЖ.

20 r внутрибрюшинно вводят 0,5 г свинкам внутривенно вводят 1 мл

0,5Х-ного раствора синьки Эванса, со - суспензии исследуемых веществ, приготовленных с добавлением небольшого держащнй 5 мг овальбумина. Спустя фира 25 xoaHueclaa rsHHa 80. На ду

30 мин животных под наркозом эфира в опыте берут 6 мьпчей. Получают следекапитируит, кожу выворачивают, дующие значения LQ gq (мг/кг): Ia прокращенные участки вырезают и

1960;, I б 840; I в 11530; г

1 1 530; 1 15!О краску экстрагируют формамидом при

Результаты показывают, что соеди37 С в течении 4 сут. Количество -

30 нения Ja-r обладают выраженным янтикрасителя в экстравазате определяют аллергическим действием, превышаюспектрофотометрически при 600 нм. щим активность антиаллергического

Соединения ta-r кромолинат нат. препарата — кромолината натрия s рия вводят аналогично, Контрольным Р Р, 1,5-2 раза. В отличие от последнего животным внутрибрищинно вводят физио- °

П о ент ингибиро- 35 вещества Ia-г инги нруют р кцию логический раствор. Процент инги иро- 35 пассивной кожной анафилаксии, опо вания РПКА у морских свинок вычис средованную как IgE-антителамн (у ляют по указанной формуле. Результакрис) так и IgG-антителами (у морсты опытов статистически обработаны ких свинок), снижают кожные реакции, ; и приведены в .табл.2.

Влияние соединений )я-r на прояв- 40 вызываемые .введением гистамина и ления местной реакции, вызванной либератора гнстамина — вещества. внутрикожным введением гистамина"или 48/80. либератора гнстамина — вещества . Соединения )а-r могут найти приме48/80 некие. в медицине в качестве антиала

В шесть выстриженных участков . 45 лергических препаратов ° кожи спины беспородных релых крыс (230-250. г) вводят по 30 мкл физио- . Ф о р и у л а и з о б р е т е н и я

i логического раствора, содержащего

1,2 мкг гистамина или 0,3 мкг вещества 48/80. Cpasy после этого внутри- ву. венно вводят 1 мп 0,5Х-ного раствора синьки эванса. через 5 мин у декалнтированимх под эфирным наркозои .. О крыс интенсивность местной сосудис- О той реакцИи оценивают по количест- ..

I . ву красителя в экстраааэете, опреде- - .. " „ 1, „ ппа., где ляемому по описанной методике.. ап 1,9 u ao пнутрппопап п wnex-. . К Н и р -Са у-группа; р,- Н ций гистамииа или вещества 48/80. !

1466217 Ц О "2Щ- ®Р512 rpynna) обладающие антиаллергической активностью.

H Rg- 4 )-СООС1Н М(С)Н)1 -rpyntta или R - -OCH> и Ry..

/ 1

Таблица!

Влияние исследуемых веществ на проявление

PIlKA у крыс, опосредованной ТВЕ-антителами

» »

Х ингиби- Достоверрования . . вость

РПКА

Количество синьки в экстраваза те, икг

Группа Вводимое ве- .Число щеетво крыс

8 7) 9440) 26

8 5,5410,47

30,2

1 0,001

4,9640 38

4) 76 0,51

3)33+0)60

3,11<0 56

4

37) 6 с 0,001

40,0 с 0,001

58, l (О) 001

60,9 сО 001

Т а б л и ц а 2

Влияние соединений Ia-г на проявления

РПКА у морских свинок, опосредованной

Zg0-антителами сло Количество Х ингибиот-. синьки в рования.зкстравазате, PlIKA икг

Группа Вводимое ве

mectao

Достовер-. ность

14)5<0)52

3,4

30,6

38,!

54,7

52,4

8 а

8

4

Контроль ()физиологический раствор)

Кромолинат натрия

1а

Is

1в

l. Контроль (физиологи» ческий.раст sop)

2 Кромолин натрия

la

Хб

ls

l4,0 0,45

lO 06+0)61

8,9810,36

6)57+0)58

6,90М),39 с0,5 с0,001 с0,001 с 0,001 с0,001

Группа . Вводимое вещество

1466217

Таблица 3

Влияние соединений la-г на интенсивность

I местной сосудистой реакции,вызванной внутрикожным введением гистамина

Число Количество крыс синьки в экстравазате, мкг

Х ингиби рования

Достоверность

6 4,67<0,24

4,32 0,49

4,0510,62

1 ° 6540,42

7,5

13,2

64,7

6

)0,5

l-0,5 с. 0,001

4

6 l q99<0 55 57,4

6 1,60 0,51 65,7 0,001 0,001

Т а б л и ц а 4

Влияние соединений !а-г на интенсивность местной реакции, вызванной внутрикожным введением вещества 48/80.

Достоверность

Число крыс

Х ингибирования

Групп

Количество синьки в экс равяэате, 6 11,!2Й),30

6

6

5,4

21,6

43,9

52,5

57,7 с0,5 0,01

LO,00! с0,001 0,00!

4

Составитель И.Дьяченко

Редактор М.Самерхянова Техред M.Яндык . Корректор М.йароши

Заказ 3442 Тираж 236 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета .ло нэобретеииям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

- Проиэводственно издательский комбинат "Патент", г.ужгород,.ул. Гагарина,!О1

Контроль (физиологический раствор)

Кромолинат натрия ! а

Контроль (физиологический раствор)

Кромолииат натрия

Ха ! б

is г

fO 5240 44.

8,72!0,55

6,24М,7!

5,.28-0, 63

4 ° 70 О,34