Способ очистки сырого доксорубицина

 

Изобретение касается антрациклиновых гликозидов, в частности очистки доксорубицина, используемого в медицине. Цель - повышение степени очистки целевого продукта. Очистку 0,25%-ного водного раствора сьфого доксорубицина с рН 3,7-4,5 (буфер формиата натрия), ведут адсорбцией на колонке со смолой S-112 Kastell iR с элюированием смесью воды с метанолом (35:15 об/об), концентрированием и осаждением целевого продукта добавлением смеси этанола с ацетоном

СОЮЗ. СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 С 07 Н 15 24

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ilATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4028832/23-04 (62} 3674607/23-04 (22) 20.01.87 (23) 16.12.83 (31) 24939 A/82 (32) 23 ° 1 2 ° 82 (33) IT (46) 30. 03.89. Бюл. Р 12 (71) Фармцталия Карло Эрба С,п.А. (ЕТ) (72) Эрнесто Оипичи, Карло Варесио и Онорио Джиакома Роза (1Т} (53) 547,945.1.07(088.8) (56) Патент Франции 11 2381060, ки. С 07 Н 15/24, 1978.

Патент Франции Р 2442242, кл. С 07 И 15/24, 1979, (54) СПОСОБ ОЧИСТКИ СЫРОГО ДОКСОРУБИЦИИА (57) Изобретение касается антрациклиновых гликозидов, в частности очистки доксорубицина, используемого в медицине. 1!ель — повышение степени

Изобретение относится к способу очистки антрациклиноновых гликозидов, а именно доксорубицина селективной адсорбцией на смолах.

Цель изобретения — разработка технологичного способа очистки сырого доксорубицина, позволяющего выделять целевой продукт лучшего качества, с максимальным содержанием примесей до 2/.

Пример 2. Очистка доксорубицина. 70 г доксорубицина растворяют в 28 л волы. рН раствора доводят до

3,7 — 4,5 с помощью добавления буфер„Я0„„1470197 А 3 очистки целевого продукта. Очистку

0,257-ного водного раствора сырого доксорубицина с рН 3,7-4,5 (буфер формиата натрия), ведут адсорбцией иа колонке со смолой S- 112 Kastell (к ) с элюированием смесью воды с метанолом (35:15 об/об), концентрированием и осаждением целевого-продукта добавлением смеси этанола с ацетоном (1:45 об/об). Далее целевой продукт расплавляют в воде с добавлением формиата натрия до рН = 4 и адсорбируют

0,337.-ный водный раствор на колонке с карбоксиметилцеллюлозной смолой, промывают водой и элюируют продукт подкисленной до рН = 2,5 водой. После Я концентрирования раствора в вакууме осаждают целевой продукт добавлением . смеси изопропанола с ацетоном ,(1:3 об/об). Эти условия обеспечивают получение целевого продукта с титром

98,57 и содержанием примесей до 1,5Х.

2 ного раствора и раствор адсорбируют на 2 л смолы S 1 12 Kastell, (R), которая находится в колонке диаметром

6 см. Продукт элюируют смесью 35 л воды и 15 л метанола.

Элюат (40 л) концентрируют в вакууме до 0.,5 л и продукт кристаллизуют добавлением смеси 1 л этанола и 4,5 л ацетона при перемешивании в течение

3 ч при 5 С. Продукт фильтруют, промывают 0,01 л ацетона и сушат под вакуумом при 40 С в течение 5 ч. Получают 56,0 r моноочищенного доксорубицина.

Составитель И. Федосеева

Техред М.Морг ентал Корректор Л. Пилипенко

Редактор О. Спесивых

Заказ 1369/59 Тираж 339 Подписное

ВЯИИПИ Государстввнного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035 ° Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент"„ г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 з 147019

80,0 г моноочищенного доксорубицина, полученного по указанному способу, растворяют в 24 .л воды и рН раствора доводят до 4,0 с помощью добавления буферного раствора. Раствор адсорбируют на колонке диаметром

12 см, содержащей 1,6 смолы карбоксиметилцеллюлоза Mathman. Еолоночный злюент удаляют. После промывания 10

3,2 л воды продукт злюируют 55 л воды, рН которой доводят до 2,5 добав:лением соляной кислоты.

46 л элюата отбирают и концентрируют под вакуумом до 0,6 л и про. дукт кристаллизуют с помощью осторожного добавления смеси иэопропанолацетон 1:3. Продукт отфильтровывают, промывают 1 л ацетона и сушат при

40 С в течение 4 ч. Получают 65 г доксорубицина с титром 98,5Х и содержанием примесей 1,5 .

Таким образом, способ по данному изобретению позволяет получить высо- 25 кую степень чистоты целевого продукта с высоким выходом.

7 4

Формула изобретения.

Способ очистки сырого доксорубицина, полученного путем ферментации или синтеза, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, 0,25 -ный водный раствор сырого доксорубицина после доведения рН до

3,7-4,5 добавлением формиата натрия подвергают адсорбции на колонке

2 л со смолой $-112 Kastell (К 1, затем элюируют смесью вода-метанол (35:15 об/об), концентрируют и осаждают целевой продукт добавлением смеси этанол-ацетон (1:4,5 o6/об), растворяют целевой продукт в воде с добавлением формиата натрия до рН

4 и повторно адсорбируют 0,33%"ный водный раствор на колонке 1,6 л с карбоксиметилцеллюлозной смолой, промывают водой и элюируют целевой продукт водой, подкисленной до рН

2,5, раствор концентрируют в вакууме и осаждают целевой продукт с титром

98,5% добавлением смеси изопропанолацетон (1: 3 об/об).