Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных

 

ИЗОБРЕТЕНИЕ КАСАЕТСЯ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ, В ЧАСТНОСТИ СПОСОБОВ ПОЛУЧЕНИЯ 5-(4-ГИДРОКСИ-3,5-ДИ-ТРЕТ-БУТИЛФЕНИЛ)-МЕТИЛЕНТИАЗОЛИДИНОНА-4 ИЛИ ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ ФОРМУЛЫ CH=C[C(CH<SB POS="POST">3</SB>)<SB POS="POST">3</SB>-C(OH)=C[C(CH<SB POS="POST">3</SB>)<SB POS="POST">3</SB>]-CH=C-CH=C-C(O)-NR-CH<SB POS="POST">2</SB>-S, где R-H, или C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, обладающих противовоспалительными и противоартритными свойствами, что может быть использовано в медицине. Цель - создание веществ с активностью, не характерной для данного класса. Синтез ведут реакцией 3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензальдегида с роданином при кипячении в среде ледяной уксусной кислоты в присутствии ацетата щелочного металла. Образующееся соединение восстанавливают триалкилоловогидридом в присутствии азобисизобутиронитрила при кипячении в среде инертного органического растворителя или водородом над палладиевым катализатором под давлением при 50-120°С. Целевой продукт выделяют непосредственно при R-H или его обрабатывают гидридом натрия и соединением формулы: R<SB POS="POST">1</SB>-J, где R<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, при кипячении в среде инертного органического растворителя с выделением целевого продукта, где R-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил. Новые соединения ингибируют IN VITRO 5-липогеназу и фосфолипазу A<SB POS="POST">2</SB>, а также в дозе 30-50 мг/кг они ингибируют каррагининовый отек на 12-67%, вызванную антигеном гранулему на 5-67%, вызванный коллагеном артрит на 50-100%. Кроме того, эти соединения предотвращают вызываемое ишемией повреждение клеток, в частности повреждение нейрональных клеток в результате удара. 5 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕО-(ИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (5 l ) 4 С 07 D 277 34//А 61 К 31/425

Л,,f. ОИНДЯ, .:„;ЧЕСК0

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

3 i =-г;Д

К ПАТЕНТУ

Изобретение относится к способу получения новых химических соединений

5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет.бутилфенил)— метилентиаэолидинона-4 или его производных, которые обладают противовоспалительными и противоартритными

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4027906/23-04 (22) 08.08.86 (31) 764160; 869488 (32) 09.08 ° 85; 02.06.86 (33) US (46) 15.10.89. Бюл . Р 38 (71) Эли Лилли энд Компани (US) (72) Джилл Энн Панетта (US) (53) 547.789 ° 3,07(088.8) (56) Н.-J. Teuber et al. Synthese von

3,5-Di-tert-butyltyrosin und 3,5-Ditert-butyl-4-hydroxyphenylglycin. Siebigs Ann. Chem. М 5, 1978, s. 757-770, J. Isonueta et al. Synthesis and

Anti-inflammatory Activity of 2,6-Ditert butylphenols with à hetегоcyclic

Group at the 4-Position. Chem. Pharm.

Bull, v. 32, М 1, 1984, р ° 152-165. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 5-(4-ГИДРОКСИ-3,5-ДИ-ТРЕТ-БУТИЛФЕНИЛ)-Г1ЕТИЛЕНТИАЗОЛИДИНОНА-4 ИЛИ ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ

157) Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности способов получения 5-(4-гидрокси-3,5-дитрет-бутилфенил)-метилентиаэолидинона-4 или его производных формулы

СН-С (С (СН 1) -С (ОН) -С (С (СН,), -Ch-С-СН- -С(0)-NR-СН -S, где R — Н, или

С -С -алкил, обладающих противовоспалительными и противоартритными свойствами, что может быть использовано в медицине. Цель — создание веществ с активностью, не характерной для данного класса. Синтез ведут реакцией

3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензальдегида с роданином при кипячении в среде ледяной уксусной кислоты в присутствии ацетата щелочного металла.

Образующееся соединение восстанавливают триалкилоловогидридом в присутствии азобисизобутиронитрила при кипячении в среде инертного органического растворителя или водородом над палладиевым катализатором под давлением при 50-120 С. Целевой продукт выделяют непосредственно при R — Н

Ф или его обрабатывают гидридом натрия и соединением формудь! R, — J, где R,— (/)

С,-С -алкил, при кипячении в среде инертного органического растворителя с выделением целевого продукта, где R—

С,-С -алкил. Новые соединения ингибируют in vitro 5-липогеназу и фосфолиВи 0 пазу А, а также в дозе 30-50 мг/кг они ингибируют каррагининовый отек на ©

12-67Х, вызванную антигеном гранулему на 5-67Х, вызванный коллагеном артрит Ж на 50-100Х, Кроме того, эти соединения O предотвращают вызываемое ишемией повреждение клеток, в частности повреж- Я дение нейрональных клеток в результате удара. 5 табл. свойствами и могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — получение новых 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет.бутилфенил)-метилентиазолидинонов, облада15160! ющих новыми фармакологическими свойствами в этом ряду соединений.

Пример 1. Получение 5-(3,5-ди-трет.бутил-ч-гидроксифенил)метилен-2-тиоксо-4-тиазолидинон (соединение IIa).

В атмосфере азота в 2500 мл ледяной уксусной кислоты нагревают до кипения 117,2 г 3,5-ди-трет.-бутил-4гидроксибензальдегида, 66,6 г роданина и 143,5 r плавленного ацетата натрия. После нагревания в течение 23 ч реакционную смесь охлаждают и переносят в смесь 1 л этанола и 1 л ледяной 15 воды и перемешивают. Добавляют 500 мл воды после перемешивания в течение

30 мин и образовавшийся осадок отделяют фильтрованием. Твердое вещество взвешивают в 500 мл этилацетата и фильтруют. Полученныи осадок растворяют в 3 л этанола, кипятят и добавляют воду до помутнения раствора примерно 450 мл . После охлаждения смеси до комнатной температуры фильтрованием получают 99,6 r целевого продукта, т.пл. около 260 С.

Вычислено, : С 61,86; Н 6,63;

N 4,01.

С < Н ИО Б2.

Найдено, %: С 62,13; Н 6,55;

N 4,15.

Пример ы 2-3. 5-(3 5-ди-трет. бутил-4-гидроксифенил)-метилен-4-тиазолидинон (соединение IIb) и 5-(3,5бис 1,1 — диметилэтил)-5-(3,5-ди †тр. бутил-4-гидроксифенил)метил-4-тиазолидинон (соединение IIc).

Раствор 69,9 г 5-(3,5-ди-трет.бутил-4-гидроксифенил)метилен-2-тиоксо4-тиазолидинона в 4 л этанола гидри- 40 руют под давлением 500 psi (35 атм) в течение суток при 100 С в присутствии 200 г 5 палладия на угле. Реакционную смесь отфильтровывают и испаряют досуха, Порциями продукт раст- 4> воряют в 1 объеме горячего этилацетата, разбавляют 2 объемами гексана, фильтруют и загружают в хроматографическую колонку, заполненную силикагелем. Вымыванием раствором 35 -ного зтилацетата в гексане получают различные фракции, которые объединяют в соответствии с чистотой каждого соединения, В общей сложности хроматографированием получено 4,6 r соединения. 5

IIb. Фракции с преобладающим содержанием соединения ТТЬ кристаллизуют из смеси этилацетата с гексаном с по2

4 лучением в общей сложности 13,79 г соединения IIb ° Ïîâòîðíîé хроматографией фракций, содержащих загрязненное соединение IIc, на окиси кремния с применением для вымывания 25%-ного этилацетата в гексане получают в общей сложности 9,82 г соединения IIc.

2. 5-(3,5-ди-трет.бутил)--4-гидроксифенил метилен-4-тиазолидинон, т.пл.

209-213 С.

Вычислено, %: С 67,67; Н 7,89;

N 4,38.

Я" 1Б 2

Найдено, %: С 67,44; Н 8,11;

Б 4,65.

3. 5-(3,5-бис(1,1 — диметилэтил)-4гидроксифенил метил)-4-тиаэолидинон, т.пл. 149-152 С.

Вычислено, Я: С 67,251 Н 8,47;

N 4,36.

С (В Н27БО1

Найдено, .: С 67 43; Н 8 44;

N 4,21, Пример 4. 5-(3,5-ди-трет.бутил-4-гидроксифенил)метилен-3-метил2-тиоксо-4-тиазолидинон.

Заглавное соединение получено с выходом 76% по методике примера 1 на основе 3,5-ди-трет.бутил-4-гидроксибензальдегида и метилродамина, т.пл.

260 С.

Вычислено, : С 62,77; Н 6,93;

N 3,85; S 17,64.

С <> H > NO S .

Найдено, Ж: С 62,54; Н 7,05;

N 3 бб S 17 82.

П р и и е р 5. 5-(3,5-ди-трет.бутнл-4-гидроксифенил)метилен-3-метил-4тиазолидинон.

Заглавное соединение получено.с выходом 71% кипячением 1 ч 10,31 r тиона примера 4 с 38,15 мл три-н,-бутилоловогидрида и 1,16 г азобисизобутиронитрила (А1!БН) в 142 мл толуола. Продукт выделяют добавлением воды к охлажденной реакционной смеси, разделением слоев, промыванием органического слоя 1 н. соляной кислотой и насыщенным раствором хлористого натрия, высушиванием над сульфатом магния, концентрированием в вакууме и очисткой остатка хроматографированием на силикагеле с использованием гексана в эт .t, цетате с градиентом 10-50X ° Очищенный продукт имеет т.пл. 142-144 С.

Вьг-.ислено, : С 68,43; Н 8,13;

4, 20.

С И !О S . биторами фосфолипазы Az. Более того, соединения проявили активность п ч1чо в различных системах испытания> предназначенных для выявления противовоспалительных и противоаритмических средств. Такое фармакодинамическое действие показано в следующих системах испытания.

Опыты с каррагинином. Соединения испытаны на противовоспалительную активность. В этом испытании воспаление вызывали инъекцией каррагинина в задние лапки крыс. Перед инъекцией вводили испытуемые соединения для опр:.деления процента ингнбирования по сравнению с контрольными зверька u: °

Полученные результаты приведены r табл. 1.

Т аблица I

Соединени по примеРую

Дозировка, мг/кг

Ингибирование, Х

67

46 !

1516012

Найдено, 7.: С 68,68; Н 8,00;

N 3,97.

Пример 6. 5-(3,5-ди-трет.бутил-4-гидроксифенил) метипен-3-этил4-тиаэолидинон.

К раствору 9,58 г 5-(3,5-ди-трет ° бутил-4-гидроксифенил)метипен-4-тиазолидинона в 150 мл тетрагидрофурана добавляют 1,2 г 60Х-нои дисперсии гидрида натрия в минеральном масле °

После прекращения выделения газа прибавляют 2,4 мл йодистого этила и реакционную смесь перемешивают 2 дня в атмосфере аргона. Смесь кипятят 6 ч, охлаждают, разбавляют диэтиловым эфиром и водой и добавлением I н. соляной кислоты устанавливают рН 3. Слои разделяют, органический слой промывают насыщенным раствором бикарбоната „2-0 натрия и затем насыщенным раствором хлористого натрия. Концентрированием высушенного органического раствора и хроматографированием полученного остатка на силикагеле с испольэовани- 25 ем 10-ЗОХ-ного градиента этилацетата в гексане получают 3,65 r целевого заглавного продукта, т.пл. 169-172,5 С. (ЗО

Вычислено, Х: С 69,12; Н 8,.41

N 4,03. С Н ИО Б.

Найдено, Х: С 69,39; Н 8,52;

N 4,30.

Пример ы 7-8. По методике примера 6, используя соответствующие йодистые алкилы, получают следующие соединения.

7. 5-(3,5-ди-трет,бутил-4-гидроксифенил)метилен-З-пропил-4-тиаэолидинон, выход 60Е, т.пл. 145-146,5 С. о 40

Вычислено, 7.: С 69,76; Н 8,64;

N 3,87.

С,,Н„Ю S.

Найдено, Х: С 70,5; Н 8,76;

N 4,0!.

8. 5-(3,5-ди-трет.бутил-4-гидрок= сифенил)метилен-3-бутил-4-тиазолидинон, выход 607., т.пл. 168,5-169,5 C.

Вычислено, Е: С 70,36; H 8,85;

N 3,73.

С Н )ИО Я .

Найдено, Х: С 70,60; Н 8,811

N 3,97.

Изучение фармакологической активности получаемых по предлагаемому способу соединений. Соединения формулы ингибируют in vitro 5-липогенаэу.

Кроме того, соединения являются ингиперорально с помощью желудочного зонда, пропускаемого через нос.

Индуцируемая антигеном гранулемоподобное воспаление на морских свинках.

Морские свинки обоих полов линии на Harttey весом 250-300 г делали чувствительными к овальбумину инъекцией каждому животному единичной дозы мкг овальбумина в смеси с 50 мг гидроокиси алюминия. Этих животных использовали на 21-26 день для инъекции в подушечки лапок овальбумина, ковалентно связанного с агарозой, Гранулемоподобное воспаление вызывали инъекцией 0,1 мл Аффигеля

Овальбумина (Лаборатории Вio-Rad, Ричмонд, шт. Калифорния) в подушечки лапок чувствительных морских свинок.

Через 3 дня после инъекции измеряли объем инъекцированных и неинъекцированных подушечек лапок. Объем лапок (подушечек лапок) измеряли путем вытеснения воды использованием датчика давления Statham à и цифрового вольтметра. Разница в объемах лапок между инъекцированными и неинъекцированными лапками показывает степень воспаления.

Гистологическое исследование воспален1516012 ных лапок показало инфильтрацию нейтрофилов между первым и третьим днем и макрофагов к третьему дню. К ll дню наблюдали очаговое обширное гранупемоподобное воспаление. Заметный инфильтрат воспалительных клеток, в основном состоящий иэ макрофагов при меньшем числе многоядерньж гигантских клеток, эозинофилов, клеток плазмы и лимфоцитов, окружали сферы Аффигеля

Овальбимина.

Группам по пять морских свинок, получивших инъекцию Аффигеля Овальбуми15 на в подушечку лапки эа три дня до этого, дали испытуемое соединение, клинические противоревматические лекарства, такие как: пенициламин или плацебо, которые 8 дней подмешивали в рацион или вводили перрорально че20 рез нос с помощью желудочного зонда в течение 4 дней. Замеряли объемы лапок и разницу в объемах иньекцированных и неинъекцированных лапок с разницей на 3-й день и день начала лечения с помощью лекарства. Процент ингибирования гранулемоподобного воспаления подсчитывали по следующему ypa"" нен

30 раз.oC. -!;

7. ингибирования = (1 в †----- †---)х раз.об ° -3 х 100, где раз.об.-3 — разница в объемах лапок между инъекцированными и неинъек- 35 цированными лапками на 3-й день, раз. об.-ll — разница в объемах инъекцированных и неинъекцированных лапок на

11-й день. Результаты проведенных испытаний суммированы в табл. 2. 40

Опыты с вызываемым коллагеном артоитом.

Из бычьего суставного хряща выде- 45 ляли коллаген типа II. Коллаген растворяли в уксусной кислоте и хранили при -20 С. Коллаген типа II раэбавляо ли до концентрации 2 мг/мл и тщательно эмульгировали в равном по объему неполным вспомогательным веществом

Freund а (НФВР>). Эмульсию, содержащую примерно 0,5 мг коллагена, вводили в виде инъекций группам по 6 инбредных крыс линии Lewis (поставщики Charles

Rwir, мужские особи по 170-200 г) в . различные места спины. Инъекцию вводипи в день 0 внутрикожно. Три раза в неделю в ходе испытания замеряли и фиксировали объемы задних лапок для выявления воспалительной реакции.

Начиная с 1-го дня испытуемая группа зверьков получала соединения в виде суспенэий в карбоксиметилцеллюлозе (носитель) перорально через желудочный зонд 5 дней в неделю (понедельник-пятница). KQHTpoJIbHhle зверьки получали носитель без испытуемого со-единения, В конце испытания (день 28 или 30) у зверьков с помощью сердечной пункции отбирали кровь, в которой использованием методики с пассивным склеиванием красных кровяных телец, выявляли уровень антител к коллагену анти-типа II в сыворотке, используя для этого обработанные глутаровым альдегидом красные кровяные тельца овцы, к которым коллаген типа

II сопряжен. Клеточный сигнал или сверхчувствительный отложенного типа отзыв на коллаген типа II измеряли с помощью радиометрического ушного показателя. В некоторых случаях рентгенограммами задних лапок 2 или 3 зверьков из каждой группы определяли костное повреждение, вызванное иммунизацией коолагеном типа II и действием лекарства. Инъекции НФВВ беэ коллагена II испольэовали на некоторых крысах в качестве отрицательного контроля, такие крысы в ходе испытания получали только карбметоксицеллюлозу (8o1 ситель).

Результаты испытания соединений формулы I в системе с вызываемом коллагеном артритом суммированы в табл.3, 7. ингибирования подсчитывали по следующей формуле:

Vt- Чч

7 ингибирования = (1- — — — --)х100

V — Ч с ч

1 где V — объем задней лапки животного, получавшего соединения (испытуемая группа); Ч вЂ” объем задней лапки животного, не получавшего соединения . (только носитель-карбметоксицеллюлозу, контрольная группа); Ч вЂ” объем задней лапки животного, получавшего носитель (карбметоксицеллюлозу) и

НФВВ без коллагена II (группа отриL;a÷ельного контроля).

Противовоспалительная активность в опытах с вызываемой антигеном гранулемой приведены в табл. 2.

1516012

10 бей крыс линии Lewis-Wistar (200210 r) единственной пересевной инъекции в правую заднюю лапку 0,1 мл 0,57ной суснензии убитых нагревом лиофилизованных ИусоЬас ег1ипйцЬегсц1онез (Ca1biochem-,Per rigen — С) в минеральном масле. Одну группу из 10 крыс (ТБ-контроль|) подвергали только такой обработке. Другую группу иэ 5 крыс вообще не подвергали обработке (нормальный контроль). Каждое испытуемое соединение суспендировали в карбоксиметилцеллюлозе (17) и его вводили перорально крысам (группы из 5 крыс) ежедневными дозами по 50 мг/кг, начиная с первого дня и по 28-ой день после инъекции вспомогательного нещестна (29 доэ). Измеряли объем лапок использованием датчика давления Statham а и цифрового вольтметра с помощью вытеснения ртути. Объемы как инъекцированных, так и неинъекцированных задних лапок измеряли в день 16, !8, 21, 23, 25, 28 и 30. На 30-й день снимали рентгенограмму после умерщвления животных. Измерения объема инъекцированных лапок, проводимые с !6-ro дня и по 30-ый„ откладынали с помощью компьютера для ТВ-контроля, нормального контроля и для зверьков, принимавших лекарство, и площади под кривыми (ТБконтроль минус нормальный контроль) и (зверьки, принимавшие лекарства, минус нормальный контроль) измеряли.

35 Полученные результаты суммированы в

-.абл ° 4.

Таблица 2

0,17. в рационе

25 мг/кг п.о.

50 мг/кг п.о °

100 мг/кг п.о.

0,l7 в рационе

0,17. в рационе

50 мг/кг п.о.

64

23

61

67

2

Азатиоприн

D-пенициламин!

00 мг/кг п,о. 60

200 мг/кг п.о. 73

Ацетаминофен

Дексаметаэон

100 мг/кг п.о. 69

3 мг/кг п.о. 62

1 мг/кг п.о, 70

l Ингибирование, 7

50!

53

100

79

Таблица 4 крыс °

Соединения испытаны на способность 4р изменять распухание задней лапки и костное повреждение, происходящих в результате вызванных вспомогательным веществом отеках у крыс. С целью количественной оценки ингибирования 45 опухания задней лапки в результате вызв нного вспомогательным веществом артрита сделано определение двух фаз воспаления: (1) первичной и вторичной и инъекцированной задней лапке и 50

I (2) вторичной и неинъекцированной задней лапке, которая начинает развиваться спустя примерно 11 дней после индуцирования воспаления в инъекиированной лапке. Уменьшение последнего типа воспаления является свидетельством иммуноподавляющей активности.

Вызванный вспомогательным веществом артрит индуцировали у мужских осоСоединение примера, K

10

57

40

Испытуемое Доза, путь нве- Ингибиросоед. дения ванне, 7

Ингибиронание вызванного коллагеном артрита приведено в табл. 3

Т а б л и ц а 3

Соединение, Доза, мг/кг примера, М

Испытание на развитие вызванного вспомогательным веществом артрита у

Доза мг/кг ИнгибироФ р.о.х29 вание, 7.

7. ингибирования является разницей площадей под кривыми (ППК) средних объемов неинъекциронанных лапок отложенных для дня 16, 18, 21, 23, 25, 28 и 30 согласно следующей формуле:

1516012

ППК нормального контроля

ППК для получивших лекарство животных н 100

X ингибирования

ППК норм.контроППК ТБ-контроля ля

Было также показано, что соединения формулы I предотвращали вызываемое ишемией повреждение клеток, в g частности повреждение нейрональйых клеток в результате удара, как показано следующей системой испытания °

Моделирование удара у крыс.

Удар у крыс вызывали эакупоривани" 5 ем четырех артерий, по которым в мозг подается кровь согласно следующей методике. Мужские особи крыс линии Wistar анестезировали с помощью метофана и помещали в стеротоксичный инстру- 20 мент. На спинной поверхности шеи делали продольный разрез, Шейные мускулы отводили, осуществляя доступ к спинной поверхности позвоночника. Две позвоночные артерии обнажали в месте их 25 прохождения через первый шейный позвонок. Обе артерии, наглухо закупоривали применением электроприжигания.

После коагуляции позвоночных артерий крысу вынимали из стереотоксиного ин- 3О струмента и хирургическую рану зашивали. Затем на брюшной поверхности шеи делали два продольных разреза. Обнажали две обычные сонные артерии и с них удаляли окружающие нервы и соединительные ткани. На каждую сонную артерию накладывали атроматический зажим, изготовленный в основном из силиконовой трубочки, таким образом, чтобы не повредить и не закупорить соил суд. Затем хирургические раны закрывали. Атроматический .зажим устроен так, что может сжиматься с закупоркой сонной артерии, если потянуть небольшую нить из силастика, которая выходила иэ раны. Кровообращение в мозг через сонные артерии могло быть восстановлено при снятии напряжения на пить иэ силастика. После проведения хирургических операций ждали 24 ч, по-. ка крысы не очнутся.

В день испытания соединения суспендировали в 2Х-ной аравийской кос меди и вводили перорально в разное время перед индуцированнем удара.

Удары (церебральная ишемия) вызывали

55 сжатием вокруг сонных артерий зажимов на 30 мин, В ходе этого времени крысы, у которых удар был успешно вы зван, теряли рефлекс выпрямления и становились нечувствительными к сти1 муляторам. Спустя 30 мин ишемии нагрузку на зажимы снимали с восстановлением потока крови к мозгу. Крысам снова дали соединения на утро после удара ° На 3 день после удара зверь" кам дали повышенную дозу барбитуратаанестетика и их мозг обливали i.n si.tu 10X-ным нейтральным буферным формалином. После промывания формалином в количестве, достаточном для фиксации мозга, мозг удаляли и хранили в

10Х.-ном формалине до момента приготовления гистологических срезов, 1

Одной из областей мозга, наиболее чувствительноЙ к повреждению вызываемого ишемией как у крыс, так и у человека, является СА пирамидальный клеточный слой в гиппокампе. У животных, которые оставались нечувствительными в течение 30 мин ишемии, СА пирамидальный клеточный слой полностью разрушен. Этот слой исследовали под микроскопом в гистологических срезах, приготовленных из гиппокампа. Повреждение:мозга градуировали согласно следующей шкале: 0 — никакого повреждения, полностью нетронутый клеточный слой; 1 — небольшое повреждение, треть СА1 слоя уничтожена; 2 — умеренные повреждения, уничтожено две трети СА слоя; 3 — тяжелые повреждения, полное разрушение САу слоя.

С целью получения тонной картины повреждения исследованы повреждения в 10-12 срезах из каждого мозга. Средний показатель повреждения подсчитывали для каждой испытанной группы, Показатели для зверьков, получавших соединения, сравнивали статистически с показателями для контрольных групп, получавших только носитель (2X аравийская камедь), которое было использовано для суспендирования соединенш . Уровень значимости определяли использованием "t-критерия" Стьюдента.

Полученные результаты суммированы в табл. 5.

1516012

Таблица 5

Доза« Крыса, !! Показатель повреждения""

Обработка (носи2,5+0,2

1,2 0,2"

50 (носи2,3 0,8

200 (носи10

2,520,2

0,0710,007" "

500 (носи2,8 0,2

0,0««

500 (носи2,4 0,4

0,7+0,3 «

50 (носи1,540,5

0,3+0,3

150

"мг/кг, дают перорально в 2Х. аравийской камеди; среднее значение + стандартная ошибка;

«"+у трех крыс не обнаружено повреждений, одна. крыса умерла и была оживлена; р (0,02

+р 0,02; ++ Р < 0,00!.

Таким образом, приведенные испытания показывают, что соединения формулы ? являются противовоспалительными и противоартритными средствами.

Ниже следующие примеры получения составов могут использовать в качестве активного компонента любое из соединений формулы I.

Пример 9. Таблетки получают с использованием нижеприведенных ком5-(3,5-ди-трет;бутил-4-гидроксифенил)метилен-2-тиазолидинон

Крахмал

Микрокристаллическая целлюлоза

Стеарат магния

164

164

22 понентов

Кол-во, мг/таблетку

5-(3,5-дитрет.бутил-4гидроксифенил) метилен-4-тиазолидинон

М лкокристаллическая цел250

400 люлоза

Пенистая окись кремния 10

Стеариновая кислота 5

Компоненты смешивают и прессуют с образованием таблеток, каждая весом

665 мг.

Пример 10. Капсулы, каждая иэ которых содержит 150 мг медикамента, получают следующим образом, мг:

О сн- ) - сн,),с

НО

Контроль тель)

Пример 2

Контроль т"ель)

Пример 2

Контроль тель)

Пример 2

Контроль тель)

Пример 2

Контроль тель)

Пример 6

Контроль тель)

Пример 6

Всего: 500

Активный компонент, целлюлозу, крахмал и стеарат магния смешивают, просеивают через сито на 45 меш. (стандарт США) и полученной смесью заполняют твердые желатиновые капсулы в количестве 500 мг.

Формула изобретения

Способ получения 5-(4-гидрокси-3,550 ди-трет-бутилфенил) - метилентиазолидинона-4 или его производных общеи формулы I

1516012

16

<СН, С О н

СН

Составитель 3. Латыпова

Техред А.Кравчук Корректор М. Васильева

Редактор А. Долинич

Заказ 6299/59 Тираж,352 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðoä, ул. Гагарина, 101 где К вЂ” водород или С<-С -алкил, отличающийся тем, что.

Э,S-da-трет-бутил-4-гидроксибенэальдегид подвергают взаимодействию с роданнном при кипячении в среде ледяной

5 уксуеной кислоты в присутствии ацетата щелочного металла, образующееся соединение формулы ?I подвергают восстановлению триалкилоловогидридом в присутствии аэооисизобутиронитрила при кипячении в среде

I инертного органического растворителя или водородом над палладиевым катализатором под давлением при 50-120 С и вьщеляют целевой продукт соедйнения

I, где R — водород, или его подвергают взаимодействию с гидридом натрия и соединением общей формулы

R - J, где R — С -С<-алкип, ! при кипячении в среде инертного органического растворителя с вьщелением целевого продукта соединения I где R — - С,-Сд-алкил, Приоритет по признак ам.

09.08.85 при R — водород;

02.06.86 при R — С „-С4-алкил.

Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных 

 

Похожие патенты:

Изобретение относится к органической химии, к новым производным 3-алкоксикарбонил-5-замещенный бензилидентиазолидин-2,4-диона, обладающим противомикробной активностью

Изобретение относится к органической химии, а именно к усовершенствованному способу получения 3-алкоксикарбонил-5-R2-илидентиазолидин-2, 4-дионов, и может найти применение в медицинской промышленности, а также при разработке новых способов получения соединений этого ряда

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению 2-селено-5-арилиден гиазо- ЛИДИН-4-ОНОВ формулы I R -

Изобретение относится к ревматологии и терапии

Изобретение относится к ревматологии

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лечения острого ревматоидного артрита

Способ получения 5-(4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилфенил)- метилентиазолидинона-4 или его производных

Наверх