Способ получения иммуносорбента

 

I6 9507

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 19.Ч1.1964 (№ 906736/23-4) Кл. 12о, 6 с присоединением заявки №

Приоритет

Государственный комитет по делам изобретений и открытий СССР

МПК С 08Ь

>ДК 661.728.8(088.8) Опубликовано 17.III.1965. Бюллетень № 7

Дата опубликования описания 14.IV.1965

Авторы изобретения

М. В. Далин и Т. С. Котова

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТА

Подписна» группа № 50

Известен способ получения иммуносорбента, заключающийся во взаимодействии целлюлозы с бензиловым эфиром и-нитробензилхлоридом. Г1олученный эфир целлюлозы восстанавливают, диазотируют и сочетают с антигеном.

С целью упрощения процесса предложен способ получения иммуносороента, заключающийся в том, что в качестве исходного продукта используют аминированный эфир целлюлозы.

Пример. 2 г порошка целлюлозы, состоящего из частичек малых размеров, или же водную суспензию эквивалентного количества этого порошка обрабатывают в течение 10 мин при 20 С 12 мл водного раствора, содержащего 2 г сернокислого эфира 4 р-оксиэтилсульфонил-2-аминоанизола и 1,2 г бикарбоната натрия. Затем порошок отфуговывают, запаривают 10 — 15 мин при 100 С, отмывают горячей водой, высушивают и определяют сухой вес. Полученную ампHîöåëëþëîçó вновь переосаждают в растворе Швейцера и хранят в виде отмытой суспензии в дистиллированной воде. Определяют сухой вес суспензии.

Суспензию целлюлозы с определенным сухим весом выливают в стакан на ледяной бане и добавляют равный объем ледяной воды и двойной объем 100/О-ного раствора соляной кислоты. После доведения температуры смеси до 2 С в стакан приливают по каплям из микробюретки 1н. раствор NaNO2 до появления стойкой реакции на иодкрахмальной бумаге

5 после 10 мин перемешивания с момента добавления последней капли. Смесь перемешивают еще 60 мин при 2 С, а затем отмывают на рефрижераторной центрифуге два раза ледяной водой, подкисленной до рН 4,0, затем

10 два раза охлажденным раствором 5 /р-ной мочевины и в конце два раза охлажденным боратным буфером с рН 8,6. Оценку реакции диазотирования проводят капельным методом на стекле по интенсивности окрашивания

15 р-нафтолом и ацетил-Аш-кислотой.

Диазоцеллюлозу, отмытую от надосадочной жидкости из суспензпи, заливают 20 мл

2,5%-ного раствора сывороточного альбумина человека и перемешивают на магнитной ме2о шалке при температуре 0 — 2 С в течение 1—

2 час до тех пор, пока реакция с Р-нафтолом

:ли ацетил-Аш-кислотой не станет или слабо положительной, или отрицательной. После этого перемешивание прекращают и смесь

25 оставляют на сутки в холодильнике при 4 С.

По истечении указанного срока при помощи центрпфугирования удаляют надосадочную жидкость, а осадок иммуносорбента промывают боратным буфером с рН 8,6, затем раствоЗо ром насыщенного р-нафтола, 10/р-ным раство169507

Предмет изобретения

Составитель Л. М. Иоффе

Редактор Л. К. Ушакова Техред Л. К. Ткаченко

Корректор О. Б. Тюрина

Заказ 708/13 Тираж 675 Формат бум. 60)(90 / Объем 0,1 изд. л. Цена 5 коп.

ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр, Сапунова, 2.

3 ром NaC1 с рН 7,0 (один раз), три раза

1е/р-ным раствором NaC1 с рН 3,2, один-два раза 1). В полученном сорбенте определяют сухой вес и используют его для реакции с концентрацией 10 мг сорбента в 1 мл суспензии.

Способ получения иммуносорбента сочетанием диазотированного эфира целлюлозы с

5 антигеном, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, в качестве исходного продукта используют аминированный эфир целлюлозы.