Способ получения производных гризеоловой кислоты

 

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности способа получения производных гризеоловой кислоты общей формулы I, где R - бензоил, незамешенный или замешенный в п-положении галоидом, метилом, метоксиили нитрогруппой; RQ- бензгидрид, обладающих биологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных и менее токсичных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией соединения формулы 11, где RU бензгидрил, с ацилирующим агентом ,где X - галоид , R/ - см.выше, в присутствии агента , связываюшего кислоту, такого как пиридин, предпочтительно при комнатной температуре. Новые соединения обладают способностью ингибировать активность фосфодиэстеразы циклического аденозин-монофосфата (Igo 158- 177 мкмоль) и циклического гуанозинмонофосфата (IgQ 153-177 мкмоль) против соответственно 360 и 196 мкмоль для теофиллина. (Л

ii|1 сОюз советсних

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1 тФ

Ж1г г г

N 1Ф

1.1 =(гг г (0)ОР2 (-(o)oR (»)

0Н (,(C )0R (1)

o /cQ)QR>

B-, I табл.

ГссудАРстВеннцй кОмитет по изоБРетениям и ОщРытиям пРи гккт сссР (21) 3808501/23-04 (22),26. 10. 84 (31) 58-202362 (32) 28.10.83 (33) ;?Р (46) 15.10.90. Бюл. 11г 38 (71) Санкио Компани Лимитед (JP) (72) Масакатсу Канеко, Мисако Кимура, Есинобу Мурофуси, Митсуо Ямазаки, Нобуеси Ивата и Фумио Накагава (JP) (53) 547.857.1.07(088.8) (56) Вейганд-Хильгетаг. Современные методы эксперимента в органической химии. М.: Химия, 1964, с.432. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

ГРИЗЕОЛОВОИ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности способа получения производных гризеоловой кислоты обшей формулы I, где Rg— бензоил, неэамешенный или замешенный

Изобретение относится к способу получения производных гриэеоловой кислоты — новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — способ получения новых производных гриэеоловой кислоты, обладаюпгих пизкой токсичностью и более высокой способностью ингибировать активность фосФо-, „.SU 1600632 A 3 (Я)5 С 07 Н 19/16, С 07 D 493/04, 405/06 (С 07 D 493/04, 473:00, 307: 7?) в и-положении галоидом, метилом, метокси- или нитрогруппой; R<- бензгидрид, обладающих биологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных и менее токсичных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией соединения формулы II, где Р.q — бензгидрид, с ацилируюшим агентом R -Х,где Х вЂ” галоид, Р г — см.выше, в присутствии агента, связываюшего кислоту, такого как пиридин, предпочтительно при комнатной температуре. Новые соединения обладают способностью ингибировать активность фосфодиэстеразы циклического аденоэин-монофосфата (Тбб 158177 мкмоль) и циклического гуанозин=монофосфата (Еб11 153-)77 мкмоль) протчв соответственно 360 и 196 мкмоль для теофпллина.

1 диэестеразы (PDE) циклического аденоэин-монофосфата (сАМР).

Пример 1. Дибензгидрип б б (N, N, О,О -тетрабензоилгриэеолат.

17,8 г дибензгидрид гризеолата растворяют в безводном пиримидине ° К этому раствору при охлаждении льдом добавляют 18,5 мл бензоил хлорида. смесь оставляют стоять при комнатной температуре в течение 16 ч с пре1600632

4 дохранением ее от влаги. Продукт реащии затем охлаждают льдом и добавляют 10 мл воды. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение

1 ч. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток растворяют смеси 100 мл этилацетата и 50 мл

Цоды, органический слой отделяют, промывают разбавленной соляной кислотой, водой, водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным водным раствором хлористого натрия. Органический раствор отделяют, сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, бледно-желтый остаток растворяют в небольшом количестве хлористого метилена, к которому затем добавляют этанол. Растворитель отгоняют при пониженном давлении медленно с использованием аспиратора,, в остатке — желтоватое порошкообразное вещество, Вещество отфильтровывают, промывают этанолом, сушат. По- 25 лучают 9,1 r целевого продукта в виде желтоватого порошка (выход 92,5 ) .

Пробу для анализа сушат модификацией у бензолом после очистки хроматографией на колонке с силикагелем, для элюирования используют 10 -ный раствор ацетона в бензоле (па объему).

Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол), 9 щакс, нм (8): 273

1,22000) . Спектр HYP (гексадейтерированный диметилсульфоксид), 8, млн. дол.: 5 63 (IН, дублет, .1 = 3 3 Гц)9

6.04 (IН, дублет, 3 = б,б Гц), 6,13 (1H, синглет),6,63 (I Н, дублет дублетов, J = 3,0 и 6,6 I ц),„8,63 (IН, 40 сингле г), 8, 89 (I Н, синглет);

Соединения по примерам 2-5 получают аналогично примеру 1, причем выбирается . соответствующий хлорангидрид кислоты или ангидрид кислоты вместо хлористого бензила, Н р и м е р 2. Дибензгидрил

1 7(N,.N, 0,0 -тетра-и- толуолгризеолат.

Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол), g ркс, нм (Г): 247 (49700), 275 плечо (32900). Спектр

ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфаксид) Я млн о дол е ° 5 у б 3 (1 Н дублет, J = 3,0 Гц), 6,00 (IH, дублет, .1 = 6,0 Гц), 6,13 (IН, синглет), 6,62 (I El, дублет, дублетов, 1 = 3,0 и 6,0 Гц), 8,63 (IН, синглет), 8,88 (IH синглет).

Пример 3. Дибензгидрип N, -- I

N, 0, О -тетра-и-хлор 6ензоилгри з еолат. дик, нм (g): 248(56400), 275 плечо (31700). Спектр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид)

g,.ìëH.дол.: 5.,70 (I Н, дублет, J =

3,0 Гц), 6,00 (IН, дублет, J =

= 6,0 Гц), 6,11 (IН, синглет), 6,62 (IН, дублет дублетов, J = 3,0 и

6,0 Гп) ; 7,05 (1Н, синглет), 8,68 (IН, синглет); 8,89 (IН,синглет). б

Пример 4, Дибензгидрил N

N,0, 07.-тетра-п-нитробеноилгризео6 лат 4

Спектр ультрафиолетового поглошения (метанол), Я макс, нм (F): 261 (57400) . Спектр ЯИР (гексадейтерированный диметилсульфоксид), о, млн. дол.: 578 (I Н, дублет, 1 = 30 Гц);

6,07 (IН, дублет, 3 = 6,0 Гц), 6 16 (IН, синглет), 6,62 (IН, дублет дублетов, J = 3 0 и 6,0 Гц), 8 75 (IН, синглет), 8,97 (I Н, синглет), Пример 5. Дибензгидрид

N N, О 00-тетра-и-анизоилгризеолат.

Спектр ультрафиолетового паглошения (метанол), 3 макс, нм (с):

264 (53100), 273 (52400), 275 плечо (35000). Спектр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид), млн.дол.. 5,64 (IН, дублет, — 3,0 Гц), 5,98 (IН, дублет, 6,0 Гц), 6,11 (IH, синглет), 6,62 (IН, широкий мультиплет); 8,65 (IH, синглет), 8,85 (IН, синглет), Проведены биологические испытания соединений, полученных в условиях предлагаемого способа.

Токсичность, .

Подопытными животными были самцы крыс штамма Фишер. Крыс распределяли по группам по пять крыс для каждого опыта. Введенное в дозе 200 мг/кг исйытуемое соединение (дибензгидрил

N6,N 0,0 -тетрабензоилгризеолат) не проявляло никаких признаков токсичности.

Гризеоловая кислота, введенная в дозе 100 мг/кг, в первые два дня была

О/5, после 3 дней -3/5.

Таким образом, соединения по изобретению менее токсичны, чем гризеоло" вая кислота и могут быть отнесены к . категории малотоксичных.

В) — N — Â1

N в,оос

R200(- O R в где R < — бензоил незамещенный или

30 замещенный в и-положении галоидом, метилом, метоксиили нитрогруппой, Р < — бензгидрил, отличающийся тем, что соединение формулы

N q) N

8200

"200С О

5 )б00б

Соединения по изобретению испытывались на фосфодиэстеразную (PDE) ингибиторную активность.

Испытание осуществлялось при ис5 пользовании в основном методе Ричард.

В качестве соединения сравнения ис" пользован аналог по действию - теофиллин. В качестве источника сАМР РДЕ использовался неочищенный энзиматиче- 10 ский раствор, взятый из мозга крыс.

В качестве субстрата использовался меченый 6) сАМР, он применялся в

0,2 М буферном растворе Трис-соляной кислоты (рН 8,0) в количестве, доста- 15 точном для получения конечной концентрации 0,14 мкМ. Трис представляет собой трис-(оксиметил)аминометан.

Раствор субстрата смешивался с соответствующим количеством испытуемого 20 соединения, растворенного в 2-5 мкл диметилсульфоксида, и с 20 мкл раст-вора змеиного яда и 40 мкл неочищенного раствора энэима. Добавлялось достаточное количество Трис-соляно|кислотного буфера дня достижения общего объема 100 мкл. Смеси давали возможность реагировать при 30 С в

0 течение 20 мин. В конце данного периода времени реакционная смесь обрабатывалась смолой Амберлит (торговая марка) IRÐ-58, и определялся уровень остаточной радиоактивности аденозина в продукте. Эксперимент осуществлялся при ряде уровней концентрации каждого активного соединенения, по этим данным вычислялись . величины 507 ингибирования (I gp) .

Эксперимент повторялся за исключением того, что вместе сАМР в каче- 4О стве субстрата применялся циклический гуанозин-монофосфат .(сСМР) . Также вычислялась величина Igp против

cGMP PDE °

Результаты показаны в таблице °

32

Из таблицы видно, что соединение по изобретению более эффективно чем теофиллин ингибируют CAMP PDE u

cGMP PDE.

Проведенные испытания показали, что соединения, полученные в условиях предлагаемого способа, малотоксичны .и обладают более высокой фосфодиэстеразной ингибиторной активностью чем аналог по действию - теофиллин.

Формула изобретения

Способ получения производных гризеоловой кислоты формулы

I5p s сАМР P DE

Соединениее

cGYP PDE пример а

50 к,— х

2

4

Тео4жллин

)77

)69

158

153

360,0

177

169

158

153

196,0 ( где R о - бензгидрил, подвергают взаимодействию с ацилирующим агентом где Х вЂ” галоид, R1 имеют указанные зчачения в присутствии агента, связывающего кис55 лоту, такого как пиридин, предпочтительноо при комнатной температуре.