Способ диагностики лекарственной аллергии

 

Способ относится к медицине, предназначен для применения в клинической практике для диагностики лекарственной непереносимости. Целью изобретения является повышение точности диагностики лекарственной непереносимости. Для этого лимфоциты крови инкубируют с аллергеном, а в качестве контроля используют обзидановый тест, учет реакции ведут по содержанию гликогена в пробе. В случае, если содержание гликогена равно или меньше по сравнению с обзидановым тестом, диагностируют лекарственную аллергию. Точность способа составляет 92%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ .РеспУБлик (я)з G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2 (21) 4387285/30-14 (22) 02.03.88 (46) 23.10.90. Бюл, N 39 (71) Карагандинский государственный медицинский институт и 1-й Ленинградский медицинский институт им, акад. И.П.Павлова (72) А.К.Бадина (53) 615.375 (088.8) (56) Фрадкин B.À. Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови. — М„1975. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ АЛЛЕРГИИ

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано в клинике внутренних болезней для диагностики лекарственной непереносимости.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим об-. разом, Кровь из вены берут натощак, используя .в качестве консерванта полиглюкин и гепарин (из расчета 3 мл полиглюкина и 3 капли гепарина на 20 мл крови). Лейковзвесь получают седиментацией крови в течение 1,5 ч при 37 С.

Лейковзвесь разливают в центрифужные пробирки по 1 мл и в каждую порознь добавляют лекарства в соответствующих разведениях, Для пенициллина, стрептомицина, эритромицина, ампициллина используют дозу 5 тыс.ед., левомицетина 0.5 мг, тетроолеана 0,01 мг, анальгина, сульфосалицилового натрия, витаминов В, Вв и С 0,1 мл

1,-ного раствора, новокаина и димедрола

„„Я „„1601584 А1 (57) Способ относится к медицине, п редназначен для применения в клинической практике для диагностики лекарственной непереносимости. Целью изобретения является повышение точности диагностики лекарственной непереносимости. Для этого лимфоциты крови инкубируют с аллергеном, а в качестве контроля используют обзидановый тест, учет реакции ведут по содержанию гликогена в пробе; В случае, если содержание гликогена равно или меньше по сравнению с обзидановым тестом, диагностируют лекарственную аллергию, Точность способа составляет 927ь.

0,1 мл 0,1;(-ного раствора, йода 0,1 мл

0,25ь-ного раствора. В одну из пробирок добавляют 0,1 мл обзидана. Инкубируют в течение 20 мин и затем центрифугируют при

1,2 об./мин в течение 10 мин. Готовят мазки и окрашивают по Шабадашу для выявления гликогена: мазки фиксируют в течение 10 мин в спирте — формалине в соотношении 10;1 и промывают водой. Выдерживают мазки в течение 20 мин в 0,8 -ном растворе периодата калия или натрия в темноте, промывают и просушивают. Просушенные мазки окрашивают раствором Шиффа в течение 1 ч в темноте и промывают проточной водой в течение 20 мин. Мазки окрашивают 0,1;ь-ным раствором метиленовой зелени B течение 10 мин и промывают водой.

В 100 лимфоцитах определяют содержание гликогена и при содержании гликогена в лекарственной пробе, равном или меньшем по сравнению с обзидановым тестом, диагностируют лекарственную непереносимость.

1601584

20 дом вариационной статистики доказано статистически достоверное различие между средними показателями динамики гликоге25

30 на в контрольной и опытных группах: Т=6,6;

P<0,001.

При суммировании полученных результатов в 37 наблюдениях выявлена диагностическая точность метода 92% (опыт и контроль).

Формула изобретения

Способ диагностики лекарственной аллергии путем цитохимического исследования лейкоцитов после инкубации в присутствии аллергена крови, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно проводят инкубацию лимфоцитов в присутствии 0,1 ного раствора обэидана в объеме 0,1 мл на

1 мл лейковэвеси с последующим определением содержания гликогена в лимфоцитах и при содержании гликогена в пробе с аллергеном, равном или меньшем по сравнению с пробой с обзиданом, диагностируют лекарственную аллергию.

После 10-минутного центрифугирования при 3 тыс. об./мин из осадка готовили мазки, которые окрашивали по Шабадашу для выявления гликогена.

Содержание гликогена определяли в

200 окрашенных лимфоцитах. Вычисляли средний цитохимический коэффициент, B контрольной пробе он равен 0,40, а под возСоставитель П.Бонарцев

Редактор О,Юрковецкая Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор Э,Лончакова

Заказ 3269 Тираж 509 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r Ужгород, ул.Гагарина, 101

Пример. Больная М.,23 года. Диагноз: полиаллергия, бытовая, пылевая, пыльцевая, пищевая и медикаментозная аллергия.

Отек Квинке и крапивница на пенициллин.

Анамнестически .выявлена крапивница на . пенициллин в возрасте 1 мес и отек Квинке в течение последних лет при контакте с пе нициллином. Пищевая аллергия на рыбу, цитрусовые яйца. Кожными пробами под: тверждена аллергия к домашней пыли, зла ковым, овсянке, тополю, березе /4+/.

У больной производили забор крови и определяли концентрацию гликогена под воздействием лекарств и обзидана следую: щим образом.

В химическую пробирку наливали 1 мл . полиглюкина и добавляли 500 — 800 ЕД (1—

: 2 капли) жидкого гепарина, перемешивали.

Эту смесь можно приготовить накануне ис:: следования и хранить в холодильнике.

Кровь из вены обследуемой взяли утром натощак в ту же пробирку в количестве 5—

6 мл, перемешивали осторожным покачиванием и оставляли в термостате при 37 С для спонтанного осаждения эритроцитов. В ремя зависит от скорости осаждения и не превышает 1,5 ч. Кровь разделилась на два слоя: верхний, мутный желтого цвета — лейковэвесь и нижний — эритроциты. Верхний слой отобрали пипеткой в отдельную пробирку, перемешали.

В две пробирки налили по 1 мл лейковзвеси — опыт и контроль. В контрольную пробирку внесли 0,1 мл 0,1%-ного раствора обэидана, в опытную — 0,1 мл раствора пенициллина, содержащего 5 тыс,ед, Пробирки поставили в термостат при 36 С на 10 мин. действием пенициллина — 0,18. Таким образом, по меньшему содержанию в опытной пробе по сравнению с контрольной диагностируют непереносимость к пенициллину.

Критерием истины при установлении непереносимости лекарств в исследованиях избран анамнез. В случаях с доказанной хорошей переносимостью лекарств (контрольная группа) из 23 наблюдений обнаружена 1 ложноположительная проба, т.е. диагностическая точность соответствовала

96%. Средний прирост гликогена под воздействием обзидана s этой группе был равен 44,2М,4 В опытной группе больных с доказанной непереносимостью. лекарств наблюдались 2 ложноотрицательных результата из общего числа обследованных больных в количестве 14, диагностическая точность 86 . Средняя убыль гликогена под воздействием обэидана в этой группе обследованных составляла 35,5+11 . Мето