Способ получения производных гризеоловой кислоты

 

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности способа получения производных гризеоловой кислоты формулы I: @ где R<SB POS="POST">1</SB>-группа: а)OR<SB POS="POST">2</SB>, б)NHR<SB POS="POST">3</SB>R<SB POS="POST">4</SB>, в)SH

R<SB POS="POST">2</SB>-C<SB POS="POST">1-4</SB>-алкил

R<SB POS="POST">3</SB>=H, C<SB POS="POST">1-4</SB>-алкил

R<SB POS="POST">4</SB>=C<SB POS="POST">1-4</SB>-алкил или фенил-C<SB POS="POST">1-4</SB>-алкил, которые как активные вещества могут быть использованы в медицине. Цель - создание новых активных и менее токсичных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединения ф-лы II с нуклеофильным реагентом ф-лы III: R<SB POS="POST">1</SB>-X, где X=NA или H, в среде растворителя при температуре от комнатной до температуры дефлегмации (лучше в присутствии кислотосвязывающего агента) с последующим гидролизом полученного продукта в присутствии основания при комнатной температуре в течение 1-5 ч в водной среде. Новые соединения обладают фосфодиэстеразным ингибирующим действием, способствуют восстановлению гибкости эритроцитов, пониженной в результате ацидолиза, и улучшают показатели вязкости крови, причем их токсичность меньше, чем у гризеоловой кислоты. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H naXaS ГУ

Гатгин

0—

Н0

1 О=C — С О) — С1 алкил

Π— С(0)-C, < алкил я

0H N

О=

О=С

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 3960265/23-04; 3808501/23-04 (22) 03.10.85 (23) 26.,10.84 (31) 58-202362 (32) 28.10.83 (33) ЗР (46) 30,10 90. Бюл, М 40 (71) Санкио Компани Лимитед (Jp) (72) Масакатсу Канеко, Мисако Кимура, Есинобу Мурофуси, Митсуо Ямазаки, Нобуеси Ивата и Фумио Накагава (JP) (53) 547,857.1.07 (088.8) (56) Вейганд Хильгетаг. Современные методы эксперимента в органической химии. М.: Химия, 1968, с, 365, 676 ° (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

ГРИЗЕОЛОВОИ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается гетероциклических соединений в частности спо..соба получения производных гризеоловой кислоты формулы I

„Л0„„1604158 А 3 (51)5 С 07 D 473/00, 473/30, 493/04//

//А 61 К 31/52 где К < — группа: а) ОК, б) щ р, в) $Н; К С1,,-алкил Rз Н, С(- . ал кил1 R+ = С, <-алкил или фенил-С„-алкил, которые, как активные вещества могут быть использованы в медицине.

Цель — создание новых активных и менее токсичных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединения ф-лы II с нуклеофильным реагентом ф-лы ХТХ: R<-Õ, где X = Na или Н, в среде растворителя при температуре от комнатной до температуры дефлегмации (лучше в присутствии кислотосвязывающего .агента)с последующим гидролизом полученного продукта в присутствии основания при комнатной температуре в течение 1-5 ч в водной среде, Новые соединения обладают фосфодиэстеразным ингибирующим действием, способствуют восстановлению гибкости эритроцитов, пониженной в результате ацидолиза, и улучшают показатели вязкости крови, причем их токсичность меньше, чем у гризеоловой кислоты. 2 табл.

1604158

Изобретение относится к способу получения производных гризеоловой . кислоты — новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — способ получения новых производных гризеоловой . кислоты, обладающих высокой фосфо1 дизстеразной ингибиторной активностью, относящихся к практически нетоксичным соединениям.

Пример 1, 6-Дезамино-6-метоксигризеоловая кислота (соединение

1)..

408 мг диметил О, О -диацетил6-хлор-6-дезаминогризеолата суспендируют в 16 мл безводного метанола и смесь охлаждают до температуры (-20) — (-10) С. Затем добавляют

1 н. метанольный раствор метилата натрия и смесь перемешивают при поддержании температуры ниже О С в течение 2-2,5 ч. Растворитель отгоняют и добавляют 4 мл воды, Смесь xieремешивают в течение 3 ч при комнатной температуре, а затем его рН доводят до 2 с помощью 3 н, соляной кислоты. Выпавшие в осадок кристаллы собирают фильтрованием, получают

151 мг (79,77) целевого соединения, Спектр ультрафиолетовorо поглощения (вода), h», (E): 246 (12600).

Спектр ЯМР {гексадейтерированный диметилсульфоксид), с, млн.дол.:

4,53 (1Н, синглет); 4,63 (IН, дублет, J = 6,0 Гц); 5,13 (IН, дублет, = 3,0 Гц); 6,03 (!Н, дублет, дублетов, J = 3,0 и 6,0 Гц); 6,60 (IН, синглет); 8,61 (IH, синглет);

8,63 (IH, синглет).

Пример 2. 6-Дезамино-6-меркаптогризеоловая кислота (соединение 2).

-7!

l 0 г 0, О -диацетил-6-хлор-6дезаминогризеоловой кислоты растворяют в 30 мл диметилформамида. Воздух в реакционной емкости вытесняют азотом, а затем к раствору добавляют

1,5 r гидросульфата натрия, Смесь пе" ремешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь при потоке азотного газа подкисляют концентрированной соляной кислотой, растворитель отгоняют. К остатку добавляют

20 мл 1 н. водного раствора гидроокиси натрия и смесь оставляют стоять в течение ночи при комнатной темпера5

l0 l5

50 !

5 туре. Величину рН раствора затем доводят до 2 с помощью концентрированной соляной кислоты и затем смесь очищают с помощью хроматографии в обратной фазе с использованием предварительно наполненной колонки R

{Иерк), получают 0,44 r целевого соединения.

Спектр ультрафиолетового поглощеда) > hмакс > нм (Я): 32! (20300) .

Спектр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид), 8, млн.дол.:

4,51 (IH, синглет); 4,58 (IH, дублет

J = 6,0 Гц)» 5,14 (IН, дублет J

= 3,0 Гц, 5,8! (!Н, дублет дублетов, J = 3,0 и 6,0 Гц); 6,51 (IН, синглет); 8,30 (IН, синглет); 8,50 (IН, синглет).

Пример 3. N -Метилгризеоловая кислота (соединение 3) °

7>

2,5 г О, О -диацетил-.б-хлор-6дезаминогризеоловой кислоты растворяют в 20 мл метанола. К полученному раствору добавляют 4 мл 40% вес/объем метанольного раствора метиламина и смесь перемешивают в течение 5 ч при комнатной температуре. Растворитель . отгоняют и к остатку добавляют 20 мл н, водного раствора гидроокиси натрия. Смесь. оставляют стоять в течение ночи при комнатной температуре.

Величину рН смеси доводят до 2 с помощью концентрированной соляной кислоты и затем смесь оставляют стоять

B течение ночи в холодном месте Выпавшие в осадок кристаллы собирают с помощью фильтрования, получают

l,4S r целевого соединения, Спектр ультрафиолетового поглощеда) макс нм (9 (17200). !

Спектр ЯИР (гексадейтерированный,циметилсульфоксид), У, млн.дол..

4,52 {IH, синглет); 4,60 (IH, дублет,,Х = 6,0 Гц); 9,!О (IН, дублет, У == 3,0 ); 6,09 (1Н, дублет дублетов, .Х = 3,0 и 6,0 Гц)1 6,53 (IÍ, синглет);

8,31 (IН. синглет); 8,35 (IH, синглет). . Процедуры, описанные в примере 3, повторяют за исключением того, что метиламин заменяют другим амином и. получают соединения примеров 4-S.

Пример 4. N,N -Диметилгризе6 6 оловая кислота (соединение 4).

Выход 65,77, 5

55

5 l6

Спектр ультрафиолетового поглоще(вода) м кс, нм (®) (19800).

Спектр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид),3, млн,дол.:

4,52 (1Н, синглет); 4,58 (1Н, дублет), J = 6,0 Гц); 5,11 (1Н, дублет, J = (1H, дублет рублетов,Л 3,0 и 6,0 Гц); 6,58 (1Н, синг лет); 8, 30 (1Н, синглет); 8, 38 (1Н, синглет) .

С

Пример 5. N -Бензилгризеоловая кислота (соединение 5).

Спектр ультрафиолетового поглощения (50X объем/объем водного метанола), A ц„„ нм (E): 267 (22000), Спектр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид),S млн.дол.:

4,53 (lH, синглет); 4,61 (1Н, дублет, J = 6,0 Гц) 5,10 (1Н, дублет, J =

= 3,0 Гц); 6,07 (1Н, дублет дублетов, J = 3,0 и 6,0 Гц), 6 54 (1Н, синглет)

8,30 (1Н, синглет); 8,40 (1Н, синглет) .

Получение исходных продуктов.

Дибензгидрил гризеолат.

10 г гризеоловой кислоты суспендируют в смеси 400 мл ацетона и .

50 мл воды. К полученной смеси добавляют раствор 15,4 r дифенилдиазометана и 100 мл ацетона и смесь перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре, продукт реакции добавляют по каплям к 2 л гексана.

Полученное порошкообразное вещество собирают путем фильтрации, промывают 500 мл гексана и сушат при 55ь

65 С в течение 10 ч при давлении

1-2 мм Hg (100-250 Па). Получают

17,95 г (выход 95,6X) целевого соединения в виде белого порошка, Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол),%„,„,, нм (Я): 258 (11200), Спектр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид),о, млн, дол..

4,68 (1Н, дублет,,У = 6,0 Гц); 4,93 (1H, синглет); 5,27 (1H, дублет, J = 3,0 Гц); 6,35 (1Н, дублет дублетов, J= 3,0 и 6,0 Гц); 6,58 (1Н, сииглет); 8,18 (1H, синглет); 8,37 (1Н, синглет)

Диметил гризеолат. а) ° Использование диазометана.

700 мг гризеоловой кислоты растворяют в 100 мл охлажденного льдом диметилформамида. К полученному раствору затем добавляют при перемешива04158 6 нии раствор 1 0-1 2 ммоль диазомета- на в 1 мл диэтилового эфира до тех пор, пока смесь не приобретает желтоватый цвет.

Смесь оставляют реагировать в течение 10 мин, По завершении реакции к продукту реакции добавляют уксусную кислоту до тех пор, пока продукт реакции не потеряет свою окраску. Затем смесь упаривают досуха при пончженном давлении. Высушенный продукт растворяют в метаноле и полученный раствор фильтруют, Фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении.

Высушенный продукт перекристаллизовывают из воды, получают 540 мг целевого соединения, Ь) С помощью смешанных ангидридов кислоты 1,14 r гризеоловой киспоты суспендируют в 20 мл метанола ° При охлаждении льдом к раствору добавляют 1,39 мл бензоилхлорида и раствор, оставляют стоять при комнатной темпе-.. ратуре в течение 16 ч, Затем растворитель упаривают при пониженном давлении и полученный остаток обрабатывают диэтиловым эфиром, получают белое твердое вещество, которое собирают фильтрацией и растворяют в небольшом количестве воды, рН этой смеси доводят до 7, Полученную в результате смесь оставляют в холодильнике на всю ночь. Выпавшие в осадок кристаллы собирают фильтрацией, при этом получают 1,08 r желаемого соединения.

Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол),, нм (Я): 258 (15600).

Спектр ЯК. (гексадейтерированный диметилсульфоксид),3,млн,дол.:

5,60 (lH, дублет, J = 6,0 Гц); 4,66 (1Н, синглет); 5,12 (lH, дублет, J =

3,0 Гц); 6,06 (1Н, дублет дублетов, J =. 3,0 и 6,0 Гц); 6,53 (1Н, синглет); 8,33 (1Н, синглет); 8,37 (1Н, синглет).

6 6 z 7

Дибензгидрил N, N, 0, О -тетра-. бензоилгризеолат, 17,8 r дибензгидрилгризеолата растворяют в безводном пиридине. K этому раствору при охлаждении льдом добавляют 18,5 мл бензил хлорида и смесь оставляют стоять при комнатной температуре в течение 16 ч с предохранением ее от влаги. Затем продукт реакции охлаждают льдом и добавляют 10 мл воды. Смесь перемешивают при комнатной температуре в те 1604158 чение I ч. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток растворяют в смеси 100 мл этилацетата в 50 мл воды и затем этилацетат5 ный слой отделяют. Этот слой промывают разбавленной соляной кислотой, водой, водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раство( ром хлористого натрия в указанной последовательности. Органический растворитель отделяют и сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель отгоняют при пониженном давлении до получения бледно-желтоватого остатка. Этот остаток растворяют в небольшом количестве метиленхлорида, к которому затем добавляют этанол. Растворитель медленно отгоняют при пониженном давлении с помощью аспиратора до получения желтоватого порошкообразного вещества, Это вещество собирают с помощью фильтрации, промывают этанолом и затем сушат, получают 9,1 г целевого соединения в ви- 25 де желтоватого порошка, выход 92,57., Пробу для анализа получают путем лиофилизации бензолом продукта, очищенного хроматографией на силикагельной колонке, элюированной IOX-ным 30 объем/объем раствором ацетона в бензоле. . Спектр ультрафиолетового поглощения (метанол), „;,„„, нм (с,): 273 (22000). 35

Спектр SIMP (гексадейтерирован

4 ный диметилсульфоксид), 1, млн.дол,.

5 63 (1Н; дублет, J = 3 3 Гц) 6 04 (,IН, дублет, J - 6,6 Гц); 6,13 ()H, синглет); 6,63 (1Н, дублет дублетов, J = 3,0 и 6,0 Гц); 8,63 (1Н, синглет)

8,89 (1H, синглет).

Используя предыдущую методику, получают следующие соединения, Диметил О, О -диацетилгризеола

Спектр ультрафиолетового поглос ): 257 щения (метанол), ф „с,„., нм (с ). (17100).

Спектр Я11Р (гексадеитерированный диметилсульфоксид),3, млн,дол.:

5,17 (IН, дублет, .1 = 3,0 Гц); 5,66 (1H, дублет, J = 6,0 Гц);5,73 (IH, синглет); 6,31 (IH дублет дублетов, J = 3,0 и 6,0 Гц); 6,89 (IН, синглет); 8,23 (IН, синглет); 8,36,(1Н, синглет), Динатрий Н, О, О -трибензоилгризеолат, 6 6, 2

7, 26,2 r дибензгибрил N N у О, 0 -трибензоилгризеолата растворяют в 52 мл анизола ° Затем добавляют

52 мл трифторуксусной кислоты при охлаждении льдом и смесь перемешива. ют при комнатной температуре в течение 4 ч, Растворитель отгоняют при пониженном давлении и остаток растворяют в ацетоне. Толуол добавляют к ацетоновому раствору и отгоняют, этот процесс повторяют 3 раза. Остаток растворяют в 150 мл ацетона и . раствор медленно выливают при перемешивании в 2,5 л гексана. Полученный осадок собирают фильтрацией, промывают гексаном и сушат, получают

17 r белого порошка, который раство, ряют в смеси 350 мл этйлацетата и

60 мл воды, обрабатывают активированным углем, 8 эквивалентов бикарбоната натрия, растворенных в 90 мл воды добавляют при перемешивании к этому раствору и смесь перемешивают в течение 2 ч, Полученное твердое вещество собирают фильтрацией, получают

17,7 r целевого вещества в неочищенном виде. его затем перекристаллизовывают из смеси воды и ацетона в соотношении I:8 по объему с использованием активированного угля, получают 15,7 г целевого соединения.

Спектр ульрафиолетового поглощения (метанол), ф „ц,, нм (E): 228 (39800); 277 (24900).

Спектр ЯйР (гексадейтерированный диметилсульфоксид),8, млн.дол.. 5,25 (1Н, дублет> J = 3,0 Гц); 5.74 (IН, широкий дублет, J = 6,0 Гц)1 6,47 (1Н, синглет); 6,48 (1Н, дублет дублетов, J = 3,0 и 6,0 Гц); 6,98 (1Н, синглет); 8,85 (2Н, синглет).

2 7»

О, О -Диацетил-б-хлор-б-дезаминогризеоловая кислота, 1,8 мл этилацетата, 1,0 мл хлорокиси фосфора и 5,4 мл N N-диэтиланилина добавляют к 18 г дибензгид-: 1 -7 I рил О, О -диацетил-б-дезамино-6оксигризеолата и смесь кипятят с обратным холодильником в течение

20 мин при нагревании. Затем растворитель отгоняют и к остатку добавляют этилацетат и воду. Этилацетатный слой отделяют и экстрагируют два раза,, каждый раэ 20Х вес/объем водным раствором бикарбоната натрия.

Величину рН водного слоя доводят до 2 ., и полученный осадок собирают фильтрованием, получают 6,9 r целе8 10

О/5 в конце испытания (т,е. из 5 крыс в каждой подопытной группе ни одна не умерла).

При дозе 100 мг/кг смертность, вызванная гризеоловой кислотой, была

3/5 и 0/5 в первые два дня и 3/5 после 3 дней. Показатели смертности для двух соединений по изобретению при дозе 100 мг/кг были О/5 к концу испытания, при дозе 200 мг/кг — О/5, т.е. смертность отсутствовала.

Эти результаты дают основание предположить, .что соединения по изобретению в сравнении с гризеоловой кислотой являются практически нетоксичными.

Фосфодиэстеразная (РДЕ) ингибиторная активность.

Испытания осуществляли при использовании метода Пичарда. В качестве источника сАМР РДЕ использовали неочищенный энзиматический раствор, Взятый из мозгB Kpblc °

В качестве субстрата использовали меченый 6 сАМР . Его применяли в

И

0,2 M буферном растворе трис-соляной кислоты (рН 8,0) в количестве, достаточном для получения конечной концентрации 0,14 мкМ. "Трис" представляет собой трис-(оксиметил)аминометан. Раствор субстрата смешивали с соответствующим количеством испытываемого соединения, растворенного в 25 мкл диметилсульфоксида, с 20 мкл . раствора змеиного яда и 40 мкл неочищенного раствора энзима. Добавляли достаточное количество трис-солянокислотного буфера для достижения общего объема 100 мкл. Смеси давали о возможность реагировать при 30 С в течение 20 мин, В конце данного периода времени реакционную смесь обрабатывали смолой Амберлит (торговая марка) IR P-58 и определяли уровень остаточной радиоактивности аденозина в продукте. Эксперимент осуществляли при ряде уровней концентрации каждого активного соединения и по этим данным вычисляли величины 50%ного ингибирования (I gp ) .

Эксперимент повторяли за исключением того, что вместо сАМР в качестве субстрата,применяли циклический гуанозин-монофосфат (сСМР). Также вычисляли величину I 0 против сСМР РДЕЮ

160415 вого соединения (выход 63%). Хлористый натрий добавляют до насыщения к фильтрату, который затем экстрагируют дважды этилацетатом, получая дополнительно 2,4 r целевого соедине5 ния, Спектр улътрафиолетового поглощения (50% объем/объем водного метанола), 1,ц „, нм (Я): 246,5 (7400)>

262 {8700).

Спетр ЯМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид), E млн.дол.:

5,23 (1Н, дублет, J = 3,0 Гц)1 5,68 (1Н, синглет); 5,72 (.1Н, дублет, J = 6,0 Гц); 6,17 (3H, дублет дублетов, Л 3,0 и 6,0 Гц); 6,01,,(1Н, синглет); 8,91,(2Н, синглет).

Проведены испытания соединений по изобретению на биологическую ак- 20 тинность, Соединения по изобретению обладают различными видами ценной фармакологической активности. Так, они обнаруживают заметную способность ин- 25 гибировать активность РДЕ как с АМР

РДЕ, так и с СМР (циклический гуанозин монофосфат) РДЕ, способность ускорять или промотировать регенерацию или восстановление мозговой функции после повреждений головного мозга, вызванных аноксией (кислородным голоданием), улучшают сахарный метаболизм и фосфатный метаболизм высокой энергии в головном мозге крыс с церебральной ишемией, восста- ° навливают гибкость эритроцитов, котоу рая была снижена в результате ацидоsa, увеличивают мозговой приток крови у кроликов, ускоряют восстановление функции головного мозга у крыс с церебральной ишемией, а в сочета-нии с противораковыми агентами или инсулином усиливают свои эффекты.

Различные виды активности соединений по изобретению.

Токсичность.

Испытаниям подвергали гризеоловую кислоту и соединения 1 и 2.В качестве подопытных животных использовали крыс штамма Фишер. Крыс делили на группы по пять крыс..для каждого опы-. та.

Испытываемые соединения назначали в виде единичных суточных доз

500 мг/кг или 100 мг/кг на протяже55 нии четырех дней испытания.

При дозе 50 мг/кг все испытываемые соединения показали смертность

04158 12

Таблица1 ° 5

Фосфодиэкстера зная ингибиторная активность

Соеди- R нение

Тцо cCNP (мкмоль) РДЕ сАМР РДЕ

ОСН 10

SH 19

NHCH g 2,0

И(СНз) 2 31

NHCH C

4,9

9,1

14

39

9,7 ровали пентобарбиталом и одновременно

20 вводили орально испытываемое соедиТеофиллин

Гризеоловая кис360,0 196,0

0,16

0,63 лата

30

11 16

Ф„

Результаты показаны в табл.1, в -"ф которой величины I о даны в микромолях

Известными соединениями, использу". емыми для сравнения, являются теофиллин, который ингибирует как сАМР РДЕ, так с сСМР РДЕ и применяется для данной цели как терапевтическое средство, и гризеоловая кислота. Наименее эффективное из испытанных соединений имеет величину 1 о, которая примерно, на порядок кратности ниже, чем соответствующая величина для теофиллина, в то время как наиболее эффективное из соединений, которые были испытаны, имеет величину I >0 примерно на 3-4 порядка кратности ниже, это указывает на то, что показатели активности соединений по изобретению в качестве ингибиторов РДЕ достаточно высокие.

Эти соединения несколько уступают по фосфодиэстеразной ингибиторной активности гризеоловой кислоте, однако относятся к практически нетоксичным соединениям.

Действие на восстановление гибкости эритроцитов, пониженной в результате ацидоза.

В данном эксперименте применяли зрелых самцов крыс в виде групп по пять крыс в каждой. Испытываемое соединение суспендировали в водном растворе карбоксиметилцеллюлозы и вводили орально, Через два часа после введения крыс анестезировали пентобарбиталом и из сердца брали пробу крови 5 мл, величину рН ее доводили до 5,1 и пробе давали возможность отстояться. Определяли текучесть эритроцитов. Контрольных животных обраба.тывали таким же образом за исключением того, что раствор карбоксиметилцеллюлозы не содержал активного соединения.

Результаты показывают, что соединения по изобретению увеличивают проток церебральной крови. Это увеличение длится долго, Вводимое соединение не оказывает воздействия на кровяное давление в отличие от известных препаратов.

Улучшение вязкости крови.

Подопытными животными были самцы крыс Mishear. Их объединяли в группы по пять крыс в каждой. Крыс анестезикение в дозе, указанной в табл.2, в виде суспензии в карбоксиметилцеллюлозе. Быстро производили надрез на шее и из яремной вены собирали пробу крови 0,5 мл. Вязкость данной пробы определяли с помощью ротационного вискозиметра. Через 30 мин после орального введения общую сонную артерию перевязывали билатерально. Через один час после этого (т.е, через

90 мин после орального введения), из яремной вены отбирали еще одну пробу крови 0,5 мл и ее вязкость определяли таким же образом.

Вычисляли показатели вязкости крови каждого подопытного животного и ее стандартные отклонения для каждой из четырех скоростей или степени сдвига (37,5; 75; 150 и 375 с ) ротационного вискозиметра. Значения для кажкаждой группы перед перевязкой и после перевязки (т.е. изменение на протяжении периода 60 мин) анализировали по методу статистического т-испытания.

Результаты приведены в табл.2.

Для каждой скорости сдвига, когда не отмечалось значительного повышения кровяного давления (Р (0,05) между значениями перед перевязкой и после перевязки, печатается единственный знак плюс (+) . Так, если не было значительной разницы в вязкости между показателями до перевязки и после перевязки при любой из четырех скоростей:сдвига, результаты будут

++++, Параллельно с этими экспериментами осуществляли идентичный экспери13

4i58 !

4 отличающийся соединение формулы

160 тем, что, мент эа исключением того, что подопытным животным вводили раствор одной карбоксиметилцеллюлозы без активного соединения. Результаты данной подопытной группы показали значительное увеЛичение вязкости крови при каждой из четырех скоростей сдвига.

Как видно из табл,2, значительное улучшение (т.е. стабилизация) вязкости крови достигается при дозах не менее 50 мг/кг.

ЦО

RgQGC

Таблица2

QRg

Доза, мг/кг

l l I

Соединение

10 30 50 100

2 R =SH Не ис- ++ +++ Не испы5 пыты- тывавалось лось

R — Х () Таким образом, соединения, полученные согласно предлагаемому спосо— бу, обладают высокой фосфодиэстеразной ингибиторной активностью, при этом они практически нетоксичны. формула изобретения

Способ получения производных гризеоловой кислоты формулы

В i

N +N

L л у Я

В60

БООИ

Н ЛООС

GH, "де и R5 и Rj имеют указанные значения, 50 при комнатной температуре в течение

5 ч в водной среде

Волкова

Составитель В.

Рецактор А. Лежнина Техред N.дндык

Корректор Л. Бескид

Заказ 3395 Тираж 326 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðîä, ул. Гагарина, 101

/ где Б « - группа формулы — 0R, "Р

Где К я (С «С 4) алкил

Rg "(C«С4)-алкил или водород,.

R4-(С «-С4)-алкил или фенил-(С

С«) -алкил, 15

) где 2 — галоген

К вЂ” СО алкил (С«-C«,);

R — водород, подвергают взаимодействыо с нукле-.. офильным реагентом где R имеет указанные значения

25 Х вЂ . традиционный остаток, подходящий реагенту, такой, как натрий или водород, в растворителе при температуре от комнатной до температуры дефлегмации

30 предпочтительно в присутствии кислотосвязывающего агента с последующим основным гидролизом полученного соединения формулы !