Способ определения аминокислот, модифицированных высшими жирными кислотами

 

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в горнодобывающей, химической промышленности и других областях производства при определении ацилированных аминокислот методом тонкослойной хроматографии. Цель изобретения - повышение избирательности и точности определения ацилированных аминокислот во флотореагенте ААК. Пробу вещества наносят па пластину с силикагелем при соотношении вещества и сорбента 1:(1 00-1 50) . Хроматографическре разделение проводят последовательно сначала в смстеме гексан - диэтиловый эфир (1,5- ): 1, i затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон 1:1:(0,6-0,8). Обнаружение осуществляют в У -свете, 2 табл. S (Л

Hl)5 . 1 N 30/94

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСНОВ6У СВИДВТОЪСТВ3

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОИРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯм

1 1РИ ГКНТ СССР (21) 4687515/25 (22) 03.05.89 (46) 15.34.91. Бюл. N 14 (71) Ленинградский государственный университет и Производственное объЕдинение "Апатит" им. С.М.Кирова (72) И.Л,Куранова, Л.В.Балыкина, Н.Г.Ковалева, Н.В.Кельник, А.А.Петровский и В.Г.Голованов (53) 543.544 (088.8) (56) Патент ФРГ 1" 2004099, кл, G 01 N 31/02, 1987.

Кирхнер 10. Тонкослойная хроматография. М.: Мир, 1981, т,2, с.469.

Ахрем А.A. Кузнецова А.И, Тонкослойная хроматография, М,: Наука, 1964, с.30-41. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ, МОДИФИЦИРОВАННЫХ ВЫСШИМИ ЖИРНЫМИ

КИСЛОТАМИ

Изобретение относится к аналити-. ческой химии, а именно к определению ацилированных жирными кислотами аминокислот во флоторелгенте ААК, и может быть использовано в горнодобывающей промьппленности, химической промьпчленности и других областях производства при определении ацилированных аминокислот методом тонкослойной хроматографии.

Цель изобретения — повышение избирательности и точности определения ацилированных аминокислот во флотореагенте ААК...SU„, 42 Д, А1 (57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в горнодобывающей, химической промышленности и других областях производства при определении ацилированных аминокислот методом тонкослойной хроматографии, Цель изобретения — повышение избирательности и точности определения ацилированных аминокислот во флотореагенте ААК.

Пробу вещества наносят на пластину с силикагелем при соотношении вещества и сорбента 1 .(1 V0-150). Хроматографичеркре разделение проводят последовательно сначала в <: стеме гексан — диэтиловый эфир (1,5 — ").1, я затем в системе гексан — диэтиловнк эфир — ацетон 1:1:(0,6-0,8). Обнаружение осуществляют в УО> †све.

2 табл.

Способ осуществляется следующим образом..

Пробу вещества наносят на пластину с силикагелем при соотношении вещество:сорбиент 1:(100-150). Рядом с анализируемой пробой наносят в виде пятна стандарт — ацилированную жирными кислотами аминокислоту.

Хроматографическое разделение проводят последовательно сначала в системе гексан — диэтиловьп эфир при соотношении компонентов (1,5-2):1, а затем в системе гексан — диэтиловый эфир — ацетон при соотнощении компо1642373 нентов 1 з 1: ((2,6-0,8) . Обнаружение осуществляют в Уф-свете.

П р.и м е р 1. Навесху флотореагента (0,3020 r) взвешивают на аналитических весах. Смесь огранических компонентов, входящих в состав реагента ААК, выделяют экстракцией хлороформом из подкисленного водного раствора пробы реагента и далее анализируют методом препаративной тонкослойной хроматографии (ТСХ) на силикагепе.

Пробу вещества наносят на пластину с силикагелем ЛЛ при соотношении вещество:сорбент 1: t50. Рядом с анализируемой пробой наносят в виде пятна стандарт — ацилированную жирными кислотами аминокислоту.

Хроматографическое разделение 20 проводят последовательно сначала в системе гексан — диэтиловый эфир (1,5:1), а затем в системе гексан— диэтиловый эфир — ацетон (1:1:0,6).

Положение ацилированных аминокислот 25 на пластинке обнаруживают в Уф-свете, сравнивая с положением стандарта.

Силикагель с отмеченной полосы количественно снимают, ацилированные аминокислоты элюируют с сорбента

30 хлороформом со спиртом (1:1), растворитель удаляют, остаток сушат и взвешивают (0,0215 г). Содержание це левого продукта в пробе реагента 14%.

Пример 2, 0,4015 r реагента

AAK обрабатывают, как в примере 1.

Смесь органических компонентов, выделенных из pearåíòa, разделяют с помощью ТСХ на силикагеле ЛСЛ 4 при соотношении вещество:сорбит t .130 сначала в системе гексан — диэтиловый эфир (1,7 1), затем в системе гексан — диэтиловый эфир - ацетон (1:1:0,7). Выделяют 0,0558 г ацилированных аминокислот. Содержание 45 целевого продукта в пробе реагента

13,9%, Пример 3. 0,5010 г реагента

ААК обрабатывают, как в примере 1.

Смесь органических компонетов, выделенных из АКК, разделяют с помощью ТСХ на силикагеле JIJI >4 при соотношении вещество:србент 1:100 сначала в системе гексан — диэтиловый эфир (2:1)„ затем в системе гексан — диэтиловый эфир — ацетон (1: 1: 0,8) . Вьделяют О, 0706 г ацилированных аминокислот. Содержание целевого продукта в пробе реагента

14, 1%.

Ацилированная высшими жирными кислотами 6-аминогексановая кислота.

Найдено, %: С 72,44; Н 11,?4;

N 3,01.Вычислено ( аминогексановой кислоты), %: С 72,86, Н 11,46; 3,54.

ИК-спектр, см . 1470 (ср .,-CH>-);

1530 (ср.,NH,амидная полоса II); 1665 (с., СО, амидная полоса I) 1710 (с., СООН ; 2500-2700 (СООН); 2860-2940 (с.,СН, СК ); 3030 (=CH); 3455 (ср., Н)."

ПМР-спектр (200 МГц, 5% в СДС1 м.д. от ТМС): 0,89 (СН ); 1,30

Э (-(СН ) п-,м. ); 1, 62 (СН СН С(0)-,м. );

2,02 (=СН-СН вЂ,м.}; 2,18 (-СН СООН, тр.); 2,36 (-СН -C(0)NH òð.); 2,78 (=СН-СН -СН=,м); 3,28 (СО Н-СН вЂ,м.))

5,34 (-СН=СН-,м,).

R 0,58 (силикагель КСК, гексанэфир — ацетон 111:0,8).

R стандарта в тех же условиях

0,58, Точность и воспроизводимость предложенного хроматографического способа определения ацилированных жирнымя кислотами аминокислот проверены на стандартных смесях, для составления которых была специально синтезирована и очищена натриевая соль ацилированной жирными кислотами 6-аминогексановой кислоты. Результаты приведены в табл.1.

Результаты разделения с помощью

ТСХ при различных условиях хроматографирования приведены в табл.2.

Разработанный способ определения ацилированных жирными кислотами аминокислот во флотореагенте АКК отличается точностью, хорошей воспроизводимостью, простотой исполнения, Продолжительность анализа 3,5 - 4 ч.

Формула изобретения

Способ определения аминокислот, модифицированных высшими жирными кислотами, включающий нанесение пробы вещества на пластинку с сорбентом,,двукратное хроматографирование в различных системах с последующим обнаружением в УФ-свете, элюирование разделенных компонентов с сорбента, отличающийся тем, что, с целью повышения избирательности и точности определения ацилированных

1642373 6 аминокислот во флотореагенте ААК, в системе гексан — диэтиловый эфир разделение проводят на силикагеле ((1,5-2):1), а затем в системе гексан— при соотношении вещество:сорбент диэтиловый эфир — ацетон (1:1:(0 6

1г(100-150) последовательно сначала . 0 8)). 5

Таблица 1

Относительная

Содержание ацилированных аминокислот погрешность

Лхы.100 а

Задано, Х а

Найдено, Х х+ х1

44,1 +0,25

28,8 «+ 0,43

20,4 + 0,43

9,2 +0,50

43,5

28,4

21,6

9,4

0,6

1,5

2,0

5,3

Т а б л и ц а 2

Анализируемая проба

Условия хроматографического разделения

Прототип

Стандартная смесь

Разделение азотсодержащих компонентов не происходит

Разделение азотсодержащих компонентов не происходит

Система гексан:эфир (1,5! 1)

Вещество:сорбент

1: 100

Система гексан:эфир: ацетон (1: 1 г О, 6) Четкое разделение отсутствует, наблндается наложение полос отЧеткое разделение отсутствует дельных компонентов

Наблюдается частичное наложение полос

Наблюдается частичное наложение полос

Двукратное элюирование: а/гексан:эфир (2:1) б/гексаи:эфир:ацетон (131:О 6)

Вещество:сорбент 1:50 .Двукратиое . элюирование:

a/гексан:эфир (2:1) б/гексан:эфир: ацетон (1й1й0,6)

Вещество:сорбент 1:100

Четкое отделение ацилированных аминокислот от других компонентов

Четкое отделение ацилированных аминоксилот от других компонентов

Составитель В.Толстых

Редактор М.Циткина Техред М.Дидык

Корректор Н.Король

Заказ 1144 Тираж 399 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина, 101