Способ подготовки тканей полукружных каналов вестибулярного аппарата для изучения в сканирующем электронном микроскопе

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к области медицины , в частности гистологии, а более конкретно - к функциональной морфологии вестибулярного аппарата. Цель изобретения - сохранение активности полукружных каналов при подготовке их для исследования в сканирующем электронном микроскопе. Указанная цель достигается тем, что наркотизированное животное перед декапитацией в течение 40-45 мин транскардиально перфузируют вначале физиологическим раствором с добавлением гепарина, а затем 1,5%-ным раствором глютарзльдегида с добавлением 5% сахарозы на фосфатном буфере (0,1 моль/л, рН 7,4) и извлекают структуру внутреннего уха лишь после постфиксации и обезвоживания пирамид височных костей. Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4640188/14 (22) 12.12.88 (46) 30.09.91. Бюл. М 36 (71) Институт физиологии йм. А.А.Богомольца (72) В.Ф.Шумилина (53) 615.475 (088.8) (56) Винников Я.А. и др. Исследование отолитовой мембраны утрикулюса морской свинки.вЂ” Эволюц. биохимии и физиологии, 1981, М 5, с. 474 вЂ” 481, (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ТКАНЕЙ ПОЛУКРУЖНЫХ КАНАЛОВ ВЕСТИБУЛЯРНОГО

АППАРАТАДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ В СКАНИРУЮЩЕМ ЭЛЕКТРОННОМ МИКРОСКОПЕ (57) Изобретение относится к области медицины, в частности гистологии, а более конкИзобретение относится к области медицины, а именно к функциональной морфологии вестибулярного аппарата.

Цель изобретения вЂ” сохранение целост ности структур полукружных каналов при подготовке их для исследования в сканирующем электронном микроскопе.

Способ реализуется следующим образом.

Наркотиэированное животное перед декапитацией транскардиально перфузируют вначале физиологическим раствором при

36 вЂ” 37 С, а затем холодным (4 С) 1,5% глютаральдегидом на фосфатном буфере с добавлением 5% сахароэы. Время перфузии

40 вЂ” 45 мин. После декапитации выделяют пирамиды височных костей, проводят постфиксацию в 1% растворе четырехокиси осмия и дегидратацию в спиртах еосходя Ы 1681250 А1 ретно вЂ” к функциональной морфологии вестибулярного аппарата. Цель изобретения сохранение активности полукружных каналов при подготовке их для исследования в сканирующем электронном микроскопе.

Укаэанная цель достигается тем, что наркотизироеанное животное перед декапитацией в течение 40 вЂ” 45 мин транскардиально перфуэируют вначале физиологическим раствором с добавлением гепарина, а затем

1,5 -ным раствором глютаральдегида с добавлением 5% сахарозы на фосфатном буфере (0,1 моль/л, рН 7,4) и извлекают структуру внутреннего уха лишь после по стфиксации и обезвоживания пирамид височных костей, щей концентрации и лишь после обезвоживания извлекают полукружные каналы иэ полости вестибулярного лабиринта. Сушат, напыляют золотом и изучают в сканирующем электронном микроскопе.

Пример. Морскую свинку массой

320 г под нембуталовым наркозом из расчета 40 мг/кг транскардиально перфуэируют вначале физиологическим раствором с добавлением гепарина 25000 ед./л е объеме

300 мл при 37 С, а затем 1,5% глютаральдегидом на фосфатном буфере рН 7,4 с добавлением 5% сахарозы (4 С), Время перфуэии

45 мин. После декапитации выделяют пирамиды височных костей, перфорируют преддверие и круглое окно, постфиксируют в 1% растворе осмиевой кислоты на фосфатном буфере вЂ” 1 ч, обезвожиеают в спиртах восходящей концентрации от 30 вЂ” 100 . После

1681250

Формула изобретения

Составитель А. Древаль

Редактор Т. Пилипенко Техред М.Моргентал Корректор Н. Король

Заказ 3310 Тираж 385 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 дегидротации извлекают полукружные каналы иэ вестибулярного лабиринта, монтируют на предметном столике, сушат в камере при критической точке в C0z, напыляют золотом и изучают в сканирующем 5 электронном микроскопе.

Предлагаемый способ приготовления препаратов оказывается продуктивным не только при анализе тонких структур полукружных каналов, но и позволяет изучить 10 особенности рельефа тела утрикулюса, области перехода его в полукружные каналы, исследовать рельеф и распределение отоконий на утрикулярных и саккулярных мембранах, позволяет получить нативную 15 структуру базилярной мембраны и волокнистых клеток слухового анализатора вЂ” улитки, выявить стереологические особенности слуховых косточек вЂ” стремячка и др.

Способ подготовки тканей полукружных каналов вестибулярного аппарата для изучения в сканирующем электронном микроскопе, включающий извлечение исследуемого материала, фиксацию, постфиксацию, обезвоживание, сушку и напыление препаратов, отличающийся тем, что. с целью сохранения активности исследуемого материала, производят предварительно перед декапитацией фиксацию всех тканей животного, в том числе структур внутреннего уха, путем транскардиальной перфузии гепариниэированным физиологическим раствором, а затем глютаральдегидом и извлекают структуры внутреннего уха лишь после постфиксацйи и обезвоживания пирамид височных костей.

Изобретение относится к области медицины , в частности к хирургии

Способ разделения сахаров сыворотки крови // 1681248

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии, и касается способа хроматографического разделения Сахаров сыворотки крови

Способ исследования защитного барьера слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки // 1681247

Изобретение относится к области медицины , в частности к гастроэнтерологии

Способ определения овуляции // 1681246

Изобретение относится к области медицины и касается способов определения овуляции

Способ определения локального гемостаза у больного с гастродуоденальным кровотечением // 1681245

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии и гастроэнтерологии

Способ определения криза отторжения аллогенного сердца при трансплантации // 1681185

Изобретение относится к трансплантологии и может быть использовано для выявления кризиса отторжения аллогенного сердца

Способ дифференциальной диагностики вульгарной пузырчатки и пемфигоида // 1681183

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии

Способ определения белка в биологической жидкости // 1681182

Изобретение относится к области медицины , а именно к методам лабораторного исследования

Способ дифференциальной диагностики сепсиса и гнойно- резорбтивной лихорадки // 1681181

Изобретение относится к области медицины , а именно к хирургии

Способ определения протиукачивающей активности лекарственных веществ // 1679379

Изобретение относится к экспериментальной медицине и найдет применение в качестве скринингового метода для выявления лекарственных веществ с противоукачивающим действием

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750