Натриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4- дигидропиридин-4-карбоксамидо)этансульфокислоты, обладающая антиагрегационной активностью
Изобретение касается замещенных гетероциклических веществ, в частности натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1 ,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты, обладающей антиагрегационной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных и малотоксичных веществ указанного класса. Синтез соединения ведут из пентафторфенилового эфира 2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидроизоникотиновой кислоты и таурина в присутствии триэтиламина в среде диметилформамида при 20°С с последукж ей обработкой раствором NaOH. Выход 85%, т.пл. 189°С (с разл,), брутто-ф-ла Ci6H23N2NaOa. Исследования соединения показывают, что в концентрации 500 мкмоль/л оно ингибирует первичную обратимую агрегацию тромбоцитов более чем на 50%. При этом действующие концентрации соединения в 30 раз меньше по сравнению с таурином. Острая токсичность ЛДзо 1500 мг/кг. 1 табл. (Л С
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
3 3
Н (21) 4307643/04 (22) 16.09,87 (46) 23.10.91. Бюл. hh 39 (71) Институт органического синтеза
АН ЛатвССР и Институт кардиологии Министерства здравоохранения РСФСР (72) Я.Я.Пойканс, Э.А.Бисениекс, В.С.Гуревич, И.А,Михайлова, Г.Д.Тирзит, Я.P.Óëäðèкис и Г.Я.Дубур (53) 547,822.1.07 (088,8) (56) Авторское свидетельство СССР
М 1206275, кл. С 07 D 211/90, А 61 К31/44,1986. (54) НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-(2,6-ДИМЕТИЛ3,5-ДИ ЭТО КСИ KAP БО Н ИЛ-1,4-ДИ ГИДРОПИ РИДИН-4-КАР БОКСАМ ИДО)ЭТАНСУЛЬФОКИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩАЯ АНТИАГРЕГАЦИОННОЙ АКТИВНОСТЬЮ (57) Изобретение касается замещенных гетероциклических веществ, в частности натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэИзобретение относится к новому химическому соединению, а именно к натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты формулы (NH- CH,CH,SO, п
С Н500С С 00 С И обладающей антиагрегационной активностью в отношении тромбоцитов человека.
„, SU „„1685934 А1 (51)5 С 07 D 211/90, А 61 К 31/44 такс и кар бо нил-1,4-ди гидро и и риди н-4- ка рбоксамидо) этансульфокислоты, обладающей антиагрегационной активностью, что может быть использовано в медицине, Цель — создание новых активных и малотоксичных веществ указанного класса.
Синтез соединения ведут из пентафторфенилового эфира 2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-ди гидроизоникотиновой кислоты и таурина в присутствии три-. этиламина в среде диметилформамида при 20 С с последующей обработкой раствором NaOH. Выход 85, т.пл, 189 С (с разл.), брутто-ф-ла С16Н зй2йаОв. Исследования соединения показывают, что в концентрации 500 мкмоль/л оно ингибирует первичную обратимую агрегацию тромбоцитов более чем на 50;(,. При этом действующие концентрации соединения в
30 раз меньше по сравнению с таурином.
Острая токсичность ЛДБо = 1500 мг/кг.
1 табл, Целью изобретения является поиск в ряду замещенных 1,4-дигидропиридинов соединений, обладающих антиагрегационной активностью и низкой токсичностью.
Пример 1. 2-(2,6-Диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо} этансульфокислота.
К раствору 9,2 г (0,020 моль) пентафтор. фенилового эфира 2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидроизоникотиновой кислоты в 60 мл ДМФА добавляют 6,3 мл (0,045 моль) триэтиламина и 3,1 г (0,025 моль) таурина. Суспензию перемешивают при комнатной температуре 48 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат упаривают
1685934 в вакууме. Остаток растворяют в 100 мл хлороформа и обрабатывают 70 мл 37-ного раствора карбоната натрия (Иа2СОз). Водный слой отделяют, промывают 50 мл хлороформа и разбавляют 400 мл дистиллированной воды. Водный раствор подкисляют 5%-ной соляной кислотой (HC!) до рН 1, выпавшее масло дважды зкстрагируют 100 мл хлороформа, хлороформный слой отделяютт и промывают 50 мл дистиллированной воды. Хлороформный раствор упаривают в вакууме и остаток кристаллизуют из смеси уксусной кислоты и воды. После высушиванил в вакууме над гидроокисью натрия (Na O H) получают светло-желтый мелкокристаллический продукт, В ыход 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты 5,5 г (68 " ), т,пл. > 150 С(разл,), Найдено, %: С 47,, 3; Н 6,3; N 7,2.
C16H24! !2О8S.
Вычислено, : С 47,5; Н 6,0; N 6,9.
ПМР-спектр (ДМСО-d8I, д, 1,18 (6Н, т„
l = 7,0 Гц, СНз-3,", ñëîæíoýôèðíûõ заместителей); 2,18 (6Н, с., 2,6/СНз); 2,42 (2Н, искаж.т. частично перекрывающийся с сигналом ДМСО, I = 6,8 Гц, — СН2ЯО2): 3,21 (2Н, искаж. кв., частично перекрывающийся с сигналом !20, i = 6„8 Гц, - NCH2 -); 4,05 (4Н, кв„ i = 7,0 Гц, СН2-3,5-сложноэфирных заместителей); 4,29 (1H, с., 4-н); 7,28 (1Н, т „! = 5,8 Гц, — CONH-); 8,72 (1Н, с„
1-NH); 11,25-12,13 (м,д., 1H, шир. полоса,—
ЯОзН), Пример 2. Натриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо)этансульфокислоты, К раствору 4,0 г (0,010 моль) 2-(2,6-диметил-3,5-диэто кси ка рб он ил-1,4-ди гидро и иридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты в 30 мл этанола при перемешивании добавляют 1н. раствор йаОН до рН 7. Реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси этанола и хлороформа (1:3), Выход натриевой соли 2-(2,6-диметил3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-ка рбоксамидо) этансульфокислоты
3,6 г (85 ), т.пл. 189 С (разл.).
Найдено, ; С 44,3; Н 5,2; N 6,3, C18H2aN2NaO8S
Вычислено, : C45 1; Н 54; N 6 6.
ПМР-спектр (ДМСО-d8), д; 1,20 (6Н, т„ ! = 7,0 Гц, СНз — 3,5-сложноэфирных заместителей); 2,19 (6Н, с,, 2,6-СНз); 2,46 (2Н, искаж. т., частично перекрывающийся с сигналом DMCO, I == 6,8 Гц, -СН2502); 3,16
55 (2Н, искаж,кв., частично перекрывающийся ссигналом H20, =6,8 ГЦ, NCH2-);4,04(4Н, кв., I -7,0 Гц, СН2-3,5-сложноэфирных заместителей); 4,29 (1Н, с., 4-н); 7,28 (1Н., т„
I = 5,5 Гц, — CONH-); 8,22 (м.д,, 1Н, с„1-NH).
Пример 3. Исследование действия натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты на агрегацию тром1 оцитов человека и на активность Са2+ и Mg + АТФазы проведено в сравнении с природным метаболитом-таурином (2-аминоэтансульфокислота) и ближайшим структурным аналогом —. ди натриевой солью
2-(2, 6-ди метил-3,5-ди это кси ка рбо н ил-1,4дигидропиридин-4-карбоксамидо) глутаровой кислоты (соединение !!), В опытах используют кровь здоровых доноров в возрасте 25-40 лет, не получавших фармакологических препаратов, Кровь смешивают с 1/10 объема 3,8%-ного раствора цитрата натрия и центрифугируют 10 мин при 140 g Xmin для получения обогащенной тромбоцитами плазмы, Последнюю центрифугируют при 1100 g/min в течение 15 мин, получая обедненную тробмоцитами плазму. Все операции проводят в силиконированной посуде. Количество тромбоцитов подсчитывают в. фазово-контрастном микроскопе. Агрега- цию изучают нефелометрическим методом, используя агрегометр ФРМ-1 с термостатированной кюветой и магнитной мешалкой.
Контролем служит обедненная тромбоцитами плазма, Объем исследовавшейся плазмы
1,3 мл, Индукцию агрегации производят введением в плазму 50 — 150 мкл раствора
АДФ в концентрации 2,0-3,5 мкмоль/л.
Изменение светопропускания плазмы под действием индуктора в отсутствии исследовавших соединений принимают за
100%.
Активность Са Mg АТФазы тромбоцитов определяют по приросту неорганического фосфора, отщепившегося от АТФ в оптимальных условиях. Инкубационная среда определенная Са Mg АТФазной акти вн ости содержит, ммол ь/л, АТФ 2,5;
MgCl2 5,0; уабаин 0,15; ЗГИ ".,"„;:рис-! ICI
23,0, рН 7,5, Инкубацию проводят 20 мин при 37 С, Соединение (!) в концентрации
500 мкмоль/л существенно тормозит способность тромГ, итов к формированию агрегатов, приче;. действие соединения (I) в основном затрагивает фазу первичной обратимой агрегации, которая ингибируется более чем на 50 (таблица). Следствием этого является замедление в 1,5 раза реакции высвобождения, В присутствии соеди1685934
Н обладающая антиагрегационной активностью.
Составитель Н.Банникова
Техред M.Мор гентал Корректор О.Кравцова
Редактор И.Дербак
Заказ 3573 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 нения (I) по данным микроскопического исследования уменьшается количество тромбоцитов в агрегатах. Об этом же свидетельствует снижение осцилляций на . кривых агрегации. При использовании по- 5 роговых концентраций АДФ соединение(!) вызывает снижение максимальной агрегации на 52, ..Действующие концентрации соединения (!) в 30 раз ниже по сравнению с таурином. 10
Соединение (I) обладает так же, как и таурин активиоующим эффектом в соотношении Са Mg АТФазы. Это свидетельствует о сходстве молекулярного механизма действия этих веществ на активацию тром- 15 боцитов. Стимуляция Са Мд АТФазы тромбоцитов соединением (!) до 70 от ба. зальной активности имеет место при его концентрации на порядок ниже концентрации таурина. 20
Соединение (!) не влияет на свертываемость крови при травмах, что свидетельствует об отсутствии действия на вторичную фазу агрегации.
Соединение (!) является малотоксич- 25 ным, ЛД о при внутрибрюшинном введении мышам составляет 1500 мг/кг.
Динатриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-. карбоксамидо) глутаровой кислоты (соеди- 30 нение II) практически не влияет на агрегацию и Са Mg АТФазную активность тромбоцитов в концентрации 0,5-2 ммоль/л.
Таким образом, особенностью антиагрегационного эффекта соединения (!) является его селективное действие на фазу первичной обратимой агрегации тромбацитов в отличие от известных соединений с антиагрегантными свойствами (ацетилсалициловая кислота, антагонисты кальция), снижающих в основном скорость вторичной необратимой фазы агрегации. Это указывает на перспективность использования сое- . динения (!) в практической медицине для профилактики заболеваний и синдромов, сопровождающихся гиперреактивностью тромфоцитов, Отсутствие влияния на вторичную фазу агрегации позволит избежать ряд осложнений, возникающих при использовании других антиагрегантов, например геморрагии, при применении ацетилсалициловой кислоты.
Формула изобретения
Натриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты формулы
cnNH- сц„сц„цо, „
С Н 00С C00(. 1j.,
