Способ получения пролинсодержащего эфира 4- фенилбутилфосфоновой кислоты

 

союз советсних социАлистичесних

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТ У

-(zz) О В, 0

"1 р О-CH-С-Х вЂ” +1.00Й

I 3 оя4® Н (Ц

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР

1 (21) 4028770/04 (22) 05.01.87 (31) 816476 (32) 06.01.86 (33) Us (46) 30.01.92. Бюл. М 4 (71) E.P.Сквибб энд Санз, Инк (US) (72) Дональд Стивен Караневски (Us) (53) 547. 26 1 18. 241, 07 (088. 8) (56) Патент США N 4444765, кл. 424-200, 1984.

Патент.CllIA У 4452791, кл. 424-200, 1984.

Патент США И 4452790, кл. 424-200, 1984. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОЛИНСОДЕРЖАЩЕГО ЭФИРА 4-ФЕНИЛБУТИЛФОСФОНОВОЙ

КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается фосфорорганических веществ, в частности полуИзобретение относится к химии фосфорорганических соединений с С-P связью, а именно к способу получения нового пролинсодержащего эфира 4-фенилбутилфосфоновой кислоты формулы (i) 2

0 (CH2)4 .3

24

СВВП-(СН2)4-Р-О- СН-С-И СООН1

Он (5) 0 0-), который обладает ангистензивной ак„,Я0„„1709912 (S1)5 С 07 F 9/38, 9/40, 9/572, А 61 К 31/675

2 чения пролинсодержащего эфира 4-фенилбутилфосфоновой кислоты, обладающего ангистензивной активностью, конвертирующей заторможенную активность энзима, что может быть использовано в медицине. Цель — создание нового более активного вещества указанного класса. Синтез ведут реакцией 4-фенилбутилфосфонистой кислоты с бензиловым эфиром Н-замещенного пролина в присутствии дицикло ексилкарбодиимида и N,N-диметиламинопиридина с последующим окислением полученного эфира периодатом натрия и гидрогенолизом образующегося фосфоната водородом в присутствии катализатора РЙ/С. В этом случае активность полученного вещества по отношению к ангиотензинтрансформирующему ферменту выше известных аналогов. 4 табл.

I / тивностью, конвертируюцей заторможенную активность энзима, и может быть использовано в качестве антигипертензивного средства в медицине.

Известны пролинсодержащие фосфиновые кислоты или их эфиры, или соли, которые обладают антигипертензивной активностью. Наиболее близкими к описываемому соединению по структуре и назначению являются пролинсодержащие эфиры фосфоновых кислот общей формулы

17()9912

4 (сн2)4 ынс(0)осн с н

НО-СН

С ОСН2СбН5 в

20 водородом в присутствии катализаторапалладия на угле.

Часть молекулы пролина в продуктах (I) no способу согласно данному изоб- „ ретению имеет L-конфигурацию. В описанном выше процессе в качестве исходных продуктов могут использоваться рацематы, энантиомеры или диастереомеры. Полученные диастереомерные продукты могут быть разделены методами хроматографии или фракционной кристаллизацией. Асимметрический центр в боковой цепи соединений формулы Т имеет (S). — êîíôèãóðàöèe.

Целевые продукты формулы I могут быть превращены в соответствующие двойные соли путем обработки дикислот солеобразующими реагентами. Соедине.где К„и R< - незамещенный или замещенный алкил, R> и R< - водород или катион металла, которые обладают высокой антигипертензивной активностbe.

Целью изобретения является получение нового пролинсодержащего эфира

4-фенилбутилфосфоновой кислоты формулы (I), который обладает более высокой антигипертензивной активностью, чем известные структурные аналоги.

Поставленная цель достигается опи сываемым способом получения соединения формулы (Т), который заключается в том, что 4-фенилбутилфосфонистую кислоту формулы

О

Il

CgHq(CH )q-Р-Он

/ подвер гают в за имодей ствию с бен зило-. вым эфиром N-замещенного пролина формулы

О !!

С Н-(СН) -Р-OCH !

0Н в. присутствии дициклогексилкарбодиимида и N,N-диметиламинопиридина, образующийся пролинсодержащий эфир

4-фенилбутилфосфонистой кислоты ðмулы О

c,н;(сн,),-Р-осн-с

И

-(сн,),мнс(о)-осн,с,н, — С-М С-ССН,Е,Ц, окисляют периодатом натрия с последующим гидрогенолизом образующегося фосфоната формулы ния ряда двойных сопей включают фармацевтически приемлемые соли, такие, как соли натрия, калия, лития и кальция. Дикислотный продукт может быть обработан гидроксидом лития, гидроксидом натрия, гидроксидом калия или гидроксидом кальция с образованием требуемого продукта - двойной соли.

Конечные продукты формулы (II), включая их фармацевтически приемлемые соли, могут использоваться в качестве антигипертензивных агентов. Действие энзима на ангиотензиноген псев1 доглобулин в плазме крови продуцирует ангиотензин Io Ангиотензин I превращается под действием ангиотензивного энзима (АСЕ) в ангиотензин ТТ. Последний является активным веществом

1709912

6 попыша ощим кровяно.. давление, и может быть применен в качестве факторного агента при некоторых Формах гипертонии к различным млекопитающимся, например к людям. Конечные продукты формулы (II) включаются в последовательность ангиотензиноген — (ре,нин) — ангиотензин Š— ангиотензин II путем ингибирования ангиотензивного превращающего энзима и восстановления или .элиминирования образования ангиотензина II который, 9sляется веществом, повышающим кровяное давление, Таким образом, применение композиций, содержащих один или комбинацию из конечных продуктов формулы (II) облегчает ангиотензивно зависимую форму гипертойии для некоторых типов млекопитающими;ч. (на-." 20 пример, людей), Установлено, в частности, что:про" дукт формулы (Е) применим в качестве орального антигипертензивного агента, Высок уровень применимости при ораль- 2 ном использовании на тестовых животных.

Таким образом, одна или две - четыре принимаемые ежедневно орально дозы, рассчитанные на основании при- 30 мерного соотношения 0,5 - !О .мг сое.-. динения Формулы Е на килограмм веса в день, предназначена для восстановления кровяного давления.

Соединение формулы (I) можно также З5 комбинировать с диуретином при лечении гипертонии. Комбинированные продукты, содержащие соединение формулы

Е и диуретин, при необходимости могут быть рекомендованы млекопитающим в 40 значительном количестве, которое сос-. тавляет общую дневную порцию примерно 30 - 600.мг, преимущественно 30330 мг соединения формулы I и примерно 15 - 300 мг, преимущественно 15 - 45

200 мг, диуретина. Примером диуретина, предлагаемого для использования в комбинации с соединением (I), является тиазидный диуретик, например хлортиазид, гидрохлортиазид, флуметиазид, гидрофлуметиазид, бензофлуметиазид,метилхлортиазид,трихлорметиазид, политиазид или бензтиазид, а также этакриновая кислота, тикринафен, хлорталидон, фуросемид, мусолимин, биметанид, триамтерен, амидорид или спиронолектон, или соли этих соединеСоединение формулы I может быть использовано для восстановления кровяного давления в композициях, таких, как таблетки, капсулы или эликсиры, для орального приема или как стерильные растворы и суспензии .для парентерального введения. Примерно

10 †.500 мг соединения формулы I соединяется с физиологически приемлемым носителем, наполнителем, инертным наполнителем, связывающим веществом., консервирующими средствами, стабилизатором, отдушкой и т.д. в единую дозировочную форму, как это принято в фармацевтической практике. Количество активного вещества в этих композициях или препаратах является таким же, как и приемлемая дозировка в пределах, указанных выше.

Следующие примеры иллюстрируют изобретение.

Пример 1. (S)-1-(6-.амино-2— ((гид рокси/4-Фенилбут ил/фосфонил -окси) -1-оксогексил/-T.-пролин.

А). (4-Фенилбутил) фосфонистая кислота

К суспензии гидрата гипофосфита натрия (60 г, 0,566 ммоль) в абсолютном этаноле (600 мл) добавляют концентрированную серную кислоту (15 мл)

4-Фенил-1-бутен (25,0 г, 0,189 ммоль) и 2,2 -азобисизобутиронитрил (3,0 r) °

Полученную смесь кипятят в течение

6 ч, добавляют вторую порцию 2,2

-азобисизобутиронитрила (2,0 r) и дополнительно кипятят 16 ч. Охлажденную смесь фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток суспендируют в воде (200 мл), подщелачивают до щелочной реакции 503-ным раствором гидроксида натрия и промывают двумя порциями диэтилового эфира (200 мл).

Водную фазу подкисляют концентрированной серной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Экстракт с этилацетатом промывают насыщенным хлоридом натрия, сушат над безводным суль- фатом натрия. и упаривают, получая

34,5 г сырой (4-фенилбутил)фосфонис" той кислоты. Эту сырую кислоту (34,5 г) переносят в этиловый .эфир (200 мл) и обрабатывают раствором адамантанамина (26,3 г, 0,174 ммоль) в этиловом эфире (200 мл). Белый осадок отделяют, промывают этиловым эфиром и сушат в вакууме, получая

54,2 г соли (4-фенилбутил) фосфонис1 709912 той кислоты и l-адамантанамина в виде белого твердого вещества; т.пл.

192-200 С. Соль 1-адамантанамина

0 (10,5 г) переносят в смесь этилацетата и 1 н. соляной кислоты (150 мл каждого компонента). Этилацетатную

Фазу промывают 1 н, соляной кислотой и насыщенным хлоридом натрия, сушат над безводным хлористым натрием и упаривают, получая 5,75 r чистой (4-Фетилбутил) фосфонистой кислоты в виде бесцветного вязкого масла.

TCX (силикагель, изопропанол:концентрированный аммиак;вода 7:2: I):, R

= 0,67. Выход 963.

Б). Соль 1"адамантанамина и фенилметилового эфира 1-(S)-6- I (/Фенил. метокси/карбонил) амино) "2- j (гидрокси/

4 фенилбутил/фосфонил окси) 1-оксо 20 ге ксил -L-пролина.

Раствор (4-фенилбутил) фосфонистой кислоты (,0,67 г, 3,38 ммоль) и Фенилметилового эфира 1-(S)-6-(((/Фенилметокси/карбонил1амино -2-гидрокси-1"оксогексил) -L-пролина (1,0 г, 2,14 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (8,0 мл) .обрабатывают дициклогексилкарбодиимидом (0,67 г, 3,25 ммоль) и диметиламинопиридином (0,1 г) и ЗО перемешивают при комнатной температу-. ре под аргоном. Спустя 2 ч смесь фильтруют, разбавляют этилацетатом и промывают последовательно 54-ным бисульфитом калия, насыщенным -бикарбонатом натрия, насыщенным хлоридом натрия, сушат над безводным сульфатом. натрия и упаривают.

Остаток Фильтруют через слой силикагеля (Sili CAR СС7, 10 г), элюи- 0 руя смесью ацетон 1гексан (1:1) . Фрак" ции,;соде ржащие продукт, объединяют и упаривают, получая 1,42 г фенилметилового эфира 1- ((S)-6-tI. /Фенил° метокси/карбонил амино -Z f/4-фенил- 45 бутилфосфонил/окси) -1-оксогексил) "

-L-пролина в виде бесцветного масла.

ТСХ (силикагель,. ацетон:гексан, 1:1). к1 - 018.

Описанный выше фенилметиловый эфир g0 (1,42 г) переносят в диоксан (10 мл), обрабатывают раствором периодата нат рия (0 5 r, 2,34 ммоль) в воде (6 мл) перемешивают при комнатной температуре 16 ч. Оранжевую смесь переносят в смесь этилацетата - 1ь-ного раст вора бисульфита калия. Органическую

Фазу промывают водой, разбавленным

1 бисульфитом натрия и насыщенным хлоридом натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Сырой продукт переносят в небольшое количество этилацетата (около 5 мл), разбавляют этиловым эфиром (около 20 мл) и обрабатывают раствором 1-адамануанамина (0,34 г, 2,25 ммоль) в этиловом эфире (4 мл). Белый осадок отделяют, промывают этиловым эфиром и сушат в вакууме, получая 1,5 r соли 1-адамантанамина и фенилметилового эфира 1- ${S) -6- (/фенилметокси/карбонил)амино1-2-It гидрокси/4-фенилбутил1фосфонил)оксида-1-оксогексил ;

-L-пролина в виде белого твердого вещества, т.пл. 129-140 С. TCX (силикагель, уксусная кислота:метанол:

:хлористый метилен 1:1:20), Rg

= 0,24 (свободная кислота). Выход 863

В). (S)-1- 6-Амино-2-((гидрокси/4-фен илбутил/-Фосфонилокси) 1-оксоге ксил -L-пролин.

Соль 1 "адамантанамина из части (Б) (0,8 г, 0,98 ммоль) переносят в смесь этилацетата и 1 н. соляной кислоты (20 мл каждого компонента). Эти.пацетатный слой промывают 1 н. Соляной кислотой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток переносят в метанол (8,0 мл), обрабатывают катализатором - 10ь-ным палладием на угле - (0,1 r) и перемешивают в атмосфере водорода (из баллона) в течение 1,5 ч. Смесь фильтруют через цеолит и упаривают досуха.

Осадок переносят в воду и Фильтруют через поликарбонатный фильтр для удаления следов дициклогексилмочевины.

Упаривание элюентов дает 0,41 r (S)-1-(6-амино-2-((гидрокси/4-фенилбутил/фосфонилокси)-1-оксо-гексил(-L-пролина в виде белого твердого вещества, т.пл. 160-175 С после растирания в ацетонитриле. Вещество кристаллизуют из смеси вода-ацетонитрил, т,пл. 187-192 С (равложение), C Lj

-46,7 С (с = 5„05, метанол). ТС1 (силика гель, изопропанол: аммиа К: вода

7:2."1), R.j 0,24. Выход 953.

Вычислено,3: С 55,67, Н 7,65

И618 Р684. с Hз и обРО 7Н о

Найдено Ф С 55 67 H 7 76 и 6,28; Р 6,55, 1709912 10

В экспериментах in vitro u in vivo зопрессорной реакции ангиотензина I изучена ингибирующая активность ан- выражалось в процентом отношении оггиотензин-трансформируюшего Фермента ветной реакции к ангиотензину Iq посоединений (см. табл. 1 и 2): лученному перед введением испытуемого

Соединения были подвергнуты испы- соединения, и измерялось с регулярнытанию in vitro на ингибиторную ак- ми интервалами в течение трехчасово" тивность ангиотензин-трансформирую- . го периода после введения испытуемого щего фермента (АСЕ), определена .кон- соединения. Максимальное ингибирован центрация соединения, необходимая для 10 ние в процентном содержании, йаблюдаеингибирования АСЕ, полученного из. мое в течение указанного периода о р кроличьего -легкого при 504 (I ),, представлено в табл. 3 и 4 в виде

АСЕ-активность определяли как. сто.-.. чисел от 0 до 1004. Усреднение выполпень получения гиппуровой кислоты .,: няли по результатам, полученным по из синтетического соединения гиппу-.- 15 каждому соединению,. по крайней мере

t рил-гистидил-лейцин. К реакционным, для четырех крыс. Для соединений, иссмесям фермента добавляли серийные.:: пытываемых с несколькими дозами нар разведения раствора, содержацего-;:, блюдалось повышение уровней ингибиАСЕ-ингибитор. I a -величины определя-; . рования с повышением:.количества вволи графически из графиков зависимос-.-:>p димого соединения. ти ферментной активности от концен-:: - указпансные данные подтверждают р трации ингибитора АСЕ. что -испытуемые соединения формул (I)

Результаты испытаний: и (II),;имеющие перечисленные пара-! метры для R, Rg, К и К, являются

Соединение Igc по своей природе активными ингибиторами ан гиотензин-трансформирующего . Ферме та, соединения, в которых R<

30139 640 (CHg) ЫН э ЯВЛЯЮТСЯ аКТИВНЫМИ 3п

16 . 3p vitro как после внутривенного, так и

29651 106 после перорального введения. Однако соединения, в которых R<. ЯвляетсЯ

29898

: алкилом или фенилэтилом, являются ли190 б

017 14 о неактивными in vitro . либо имеют р значительно более низкий уровень ак"

106

29687

Соединения, где R является амино30329 бутилом, а- R -фенилбутилом, т.е.

29865 3

6 Sg 29852 и его двулитиевая соль

jp SQ 29644, являются наиболее активныСоединения подвергали испытанию ми после перорального введения в соотin vivo на крысах с нормальным кровя" ветствующих дозах.

HblM давлением. Ангиотензин I> вводи- На основании указанных данных можмый внутривенно, повышает кровяное но заключить, что БО 29852 и его соли давление вследствие превращения его 45 обладают более высокой ингибирующей в ангиотензин II посредством ангио- активностью по отношению к ангиотен-. тензин-трансформирующего фермента (АСЕ) И б

)., нги ирование АСЕ выражается зин-трансформирующему ферменту по сравнению с другими типами этих соеослабленйем вазопрессорного ответа динений, где Rg является аминобутилом. ангиотензина I после введения соеди+ Ф о р м у л а и

50 орму аизорет енИ..Я,, нения. Способ получения пролинсодержащего б табл. 3 и 4 представлены реэуль эфира й-фенилбутилаосфоновой кислоты: таты, полученные после внутривенно- Формулы го и перорального введения испытуемых соединений. Дозы выбирали так, чтобы Л получить эквимолярные количества ис55 Г ТЗ /ач пытуемых соединений для устранения 24 разности, обусловленной разностью

t молекулярных масс. Ингибирование ваОН!

1709912

15 окисляют периодатом натрия с последующим гидрогенолизом.,образующегося фосфоната формулы

-C-ОСН С Н н (ц) 0 R20

В Г 0 СН С Я СООЯ

II I I

OR (S) " (L) Номер SQ

4 5

274 96

-(СН ) (сн2) О

- (сн,)д .()

-(сн,), -O

-(сн,) -O

-(сн ) G

Ь1

СН (СН2)з СНЗ

-СН СН (СН у)

-(сн,g O — (СНг)+-()(Н

-(СН )+ -NH

Ь1

29907

Ь1

Ь1

30140

Li

30139

29644

Ь1 ьi

29852

NH2 (сн,), !

-СН вЂ” C-N СООН

II (8) Î " (L) заключающийся в том, что 4-фенилбутилфосфонистую кислоту формулы

О

1 с н;(сн )„-Р-ос.

Н подвергают взаимодействию с бензиловым20 эфиром N-замещенного пролина формулы (СН,);ННС(0)0СН,С,Н, HO-СН (С вЂ” N в присутствии дициклогексилкарбодиимида и N,N-диметиламинопиридина, образующийся пролинсодержащи(1 эфир 4-фенилбутилфосфонистой кислоты формулы

0 (СH1)4NНС(0) ОСН С Н

С,Н;(С )„-Р-OCH(„)/ ) С

Н 0 -HO (е) - 0 (СН1)4МНС(0) ОСН С Н

С Н;(СН,) -Р-ОСН(), 1

С-0(H,C,H, О HO (Ь) водородом в присутствии катализатора— палладия на угле.!

t 709912

О В,О

) Г

R,-P-О-СН-С-Х СООВ

ОВ4 (8) (1.) абли ца 2

R(Номер Я

R R5 (29651

Li

29866 — (Сн )+ -Ино

-(сн ) NH

Li

29898

Н (СН2)Ф ЫНя

30178

29652

Ь1

СН3

29687

-(СН ) -- ннс

-(сн ) -инг — (СН )(! -Инг — (СН 2)4 -) (Н

Li

29899

Н

30329

29865

Li

Таблица 3

Максимум ингибироаания в процентах при внутривенном введении

0,015 мкМ/кг 0,05 мкМ/г.

Соединение 0,15 мкМ/кг 0,5 мкМ/кг j1,5 мкМ/кг

16,0

24,0

27496

8,0

15,0

29907

30140

10,1

10,6

ke испытывалось приведены ниже

Данные

40,8

41,2

66,4

73,4

87,3

88,3

39,8

82,2

83,7

81,0

80,9

15,3

32,3

71,3

70,7

70,0

41,3

83,7

89,6

73,1

56,1

58,1

15 мкИ/кг

19,1

23,8

84,1

61,9

90,6

50 мкМ/кг

5 мкМ/кг

П р и м е и а н и е, .Соединение SQ 30140 не испытывали in vivo, так как его активность in vitro были слишком низкой. Эти величины для соединения 29907 рассматривались; как не имеки)1ие активности в пределах эксперимента, 30139

29644

29852

2965!, 29866

29898

30178

29652

29687

29899

30329

Соединение

30139

30,7 °

38,5

41,0

17,6

46,6

56,7

34,9

16,1

34,4 (СН )

-(сн,) Q

-(сн,), -Q

-(сн,) Q

- (СН2)5- -СН 9

-(сн ) -сн9 — (СН )5--СН9 (СН2)+ СН9 (СН2)7 СНУ

1 109912

1 оединение 0,5 мкМ/кг 1,5 мкМ/кг

5 мкМ/кг 15 мкМ/кг

14,0

Не испытывалось

Не испытывалось

74,0

20,9

46,6

91,0

89,9:

97,1

69,0

Не испытывалось

64,5

66,7

65,0

50,3

32,2

41,0

85,5

72,4

66,5

82,7

82,1

19,7 !

7,9

90,3

57,2

82,6

16,8

93,6

51,1

П р и м е ч а н и е..1. Соединения Sg 29907 и 30139 не испытывались при пероральном введении, так как при парентеральном введении они показали низкий уровень активности.

2. Соединение Sg 29651 не испытывалось при пероральном введении, но ожидается, что уровень его активности будет соответствовать уровню активности

29652.

Составитель Л. Карунина

Техред М, Дидык

Корректор И.Муска

Редактор А.Маковская

Заказ 440 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.ужгород, ул. Гагарина,101

27496

29907

30139

29644

29852

29651

29866

29898

30178

29652

29687

29899

30329

29865

»блица

Максимум ингибирования в процентах при пероральном введении