Способ получения аминокислотного препарата для парентерального питания

 

Использование: изобретение относится к медицине и касается получения аминокислотного препарата для парентерального питания . Целью изобретения является повышение концентрации аминокислот. Сущность изобретения заключается в кислотном гидролизе эритромассы при соотношении субстрат-кислота 1 : 1,2-1,5 и концентрации кислоты в гидролизной смеси 1,4-2,0 н, обработке гидролизата активиро - ванным углем в количестве 60-70 г на 1 л, очистке на анионите и катибните, коррекции аминокислотного состава путем добавления к продукту 1-триптофана и 1-изолейцина, добавления сорбита термической обработке и стерилизующей фильтрации. Положительный эффект заключается в повышении в препарате концентрации аминокислот без нарушения его стабильности при хранении. 2 табл.

„„5U„„1780754 А1

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s А 61 К 37/18, 37/04

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) с+y. j

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ повышение концентрации эмийокислот.

Сущность изобретения заключается в кислотном гидролизе эритромэссы при соотношении субстрат-кислота 1: 1,2-1,5 и концентрации кислоты в гидролизной смеси

1,4 — 2,0 н, обработке гидролизата активированным: углем в кол ичкестттцве 60-70 г на 1 л, очистке на анионите и катйбнйте, коррекцити аминокислотного состава путем добавления к продукту 1-триптофана и — изолейцина, добавления сорбита термической обработке и стерилизуЮщей фильтрации. Положительный эффект заключается в повышении в препарате концентраций аминокислот без нарушения его стабильйости при хранении, 2 табл. (21) 4878424/14 (22) 29.10.90 (46) 15.12,92. Бюл. № 46 (71) Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (72) Л.А.Седова, Н.А,Горская, З.С,Тхоржевская и Н.П.Сивакова (56) Хим. фарм, журнал, 1980, ¹ 44, стр. 63-67, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНОГО ПИТАНИЯ (57) Использование: изобретение относится к медицине и касается получения аминокислотного препарата для парентерального пйтания. Целью изобретения является

Изобретение относится к медицине и ции кислоты в гидролизной смеси 1,4 — 2,0 н; касается получения аминокислотного npe- перед Очисткой на анионите и катионите парата для парентерального питания. -,проводят обработку гидролизата активироИзвестен способ получения аминокис- ванным углем в количестве 60-90 г на 1 л лотного препарата для парентерального пй- гидролизата, а перед термической обработтания путем кислотного гидролйза . кой к целевому продукту добавляют Д вЂ” сорэритромассы с последующей очисткой гид- бит в количестве 50 г/л. ролизата на анионите и катионите, коррек- Пример 1. К смеси 10,4 л дистиллиции аминокислотного состава путем рованной воды и 6,0 л концентрированной (Л добавления к целевому продукту L-трипто-. соляной кислоты прибавляют 13,67 л зрит- фи фана и L-изолейцина, термической обра-, ромассы (соотношение субстрат — кислота— сотки истерилиэующей фильтрации11). 1/1,20; концентрация кислоты е гидролиэ- )и

Однакоизвестныйспособнепозволяет ной смеси — 2,0 н). Гидролиз проводят в еЪ получить аминокислотный препэратс высо- .реакторе при 130 С в течение 6,5 ч при кой концентрацией аминокислот и стабиль- постоянном перемешивании. После гидроный в процессе хранения. лиза смесь охлаждают-и пропускают через

Целью изобретения является повыше- фильтр с 2,7 кг активированного угля {90r ние концентрации аминокислот. угля/1 л гидролизата).

Предложениеотличаетсятем,что гидро- Дополнительную очистку обесцвеченлиз эритромассы ведут при соотношении ного кислого гидролизата от ионов хлора и субстрат-кислота 1/1,2-1/1,5 и концентра- аммиака проводят путем последовательно1780754

3 4 го пропускания раствора через анионит и Объем полученного раствора 1,43 л, В катионит. Для этого в колонку; заполненную полученный очищенный раствор добавляют

0,5 кг анионита ЭДЭ вЂ” 10П, подают 1,4 л кис- 0,86 г 1;триптофана, 3,17 г 1;изолейцина и лого обесцвеченного гидролизата. Скорость 71,5 r Д-сорбита. потока через анионит 60-80 мл/мин. Пер- 5 Препарат стерилизуют путем термичевые порции фильтрата отбрасывают. При ской обработки в атмосфере азота и последусодержании азота в вытекающей из колонки ющего фильтрования через стерилизующие жидкости, равном 3,0-5,0 г/л (рефракцйя пластины с размером пор 0,22 мкм.

1,3380-1,3390), подают-раствор"на катионит Пример 3. К смеси 13,0 л дистиллиКРС-20ll, При рефракции вытекающей из 10 рованной воды и 4;5 л концентрированной колонки с катионитом жидкости равной соляной киСлоты прибавляют 12,5 л эритро1,3380-1,3390, фильтрат начинают собирать массы (соотношение субстрат-кислота— в приемник, Азотистые продукты элюируют 1/1,4; концентрация кислоты в гидролизной дистиллированной водой. Конец процесса: смеси — 15 н). Гидролиз проводят в реакторе манного обмена устанавливают по показа- 15 йри 130О С в течение 6,5 ч при,постоянном

" тел ю - рефракции в ггриемнике (1,3465- перемешивайии. После гидролиза смесь ох-

1,3470), что соответствует содержанию . лаждают и пропускают через фильтр с 2,1 кг общего азота 11,0-12,0 г/л.:, .-,: ... активированного угля (70г угля/1 л гидролиОбъем получейного раствора 0;84 л . В эата)., йолученный очищенный раствор добавляют 20 Дойолйительную очистку обесцвечен,0,50 r Е;трйптофана, 1,86 r L-иэолейцина-и, ного кислого гидролизата от ионов хлора и

42 г Д-сорбйта..: :-,:-,. - - -:...- ... :,;., : аммиака проводят путем последовательноПрепарат стерилизуют"гфтемтермиче - го пропускания раствора через анионит и ской:обработки в атмосфере азота и после- --- катионйт. Для этогб в колонку, заполненную дующего фильтрирования - через 25 0,5 кг анионита ЭДЭ вЂ” 10П, подают 1,76 л стерилизующие пластины с размером пор -. кислого обесцвеченного гидролизата. Ско. 022 мкм.,:::. :,,:: - .:;,;,--:., =:::.,- . рость йотока через анионит 60-80 мл/мин.

Пример 2. К смеси 11,6.л дистилли- . Первые порции фильтрата отбрасывают. . рованной воды и 5.4 л концентрированной При содержании азота в вытекающей из косоляной кислоты прибавляют13,0л эритро- 30 лонкижидкости,равном3,0;5,0г/л(рефрак- массы (соотношение субстрат-кислота — ция 1,3380-1,3390), подают раствор на

1/1-31; концентрация кислоты и гидролиз- .. катионит КРС-20П, При рефракции вытеканой смеси — 1,8 н). Гидролиз проводят в ющей из колонки с катионитом жидкости, реакторе при 130 С в течение 6,5 ч при равной 1,3380-1.3390, фильтрат начийают постоянном перемешивании. После гидро- 35 собирать в приемник. Азотистые продукты лиза смесь охлаждают и пропускают через- элюируют дистиллированной водой; Конец фильтр с 2,4 кг актйвированного угля (80 r процесса ионного обмена устанавливают угля/1л гидролизата).::-:,.:.-:::: . показателю рефракции в приемнике

Дойолнительную очистку обесцвечен- . (1,3465-1,3470),чтосоответствуетсодержаного-кислого гидролизата от ионов хлора и 40 нию общего азота 11,0-12,0 г/л, аммиака проводят путем последовательно- . Объем полученного раствора 1,44 л. В, ro пропускания раствора через.анионит и полученный очищенный раствор добавляют катионит.,:;..: .",, 0,86 г L-òðééòîôàíà, 3,2 г L изолейцина и

Для этого в колонку, заполненную 0,5 кг 72 г Д-сорбита, анионита ЭДЭ-10ll. подают 1,9 л кислого 45 Препарат стерилизуют путем термичеобесцвеченного гидролизата. Скорость по- ской обработки в атмосфере азота и последутока через айионит 60-80 мл/мий. Первые ющего фильтрования:через стерилизующие порции фильтрата отбрасывают. При содер-" пластины с размером пор 0,22 мкм. жании азота в вытекающей из колонки жидкости, равном 3,0-5,0 г/л (рефракция 50 Пример 4. К смеси 13,8л дистилли1,3380-1,3390), подают раствор нат катио- рованной воды и 4,2 л концентрированной нйт КРС-20П. При рефракции вытекающей соляной кислоты прибавляют12,0л эритроиз колонки с катионитом жидкости, равной массы (соотношение субстрат-кислота— . 1,3380-1,3390, фильтрат начинают собирать 1/1,5; концентрация кислоты в гидролизной в приемник. Азотистые продукты элюируют 55 смеси — 1,4.н). Гидролиз проводят в реактодистиллированной водой. Конец процесса ре при 130 С в течение 6,5 ч при постоянионного обмена устанавливают rio показа- ном перемешивании. После гидролиза телю рефракции в приемнике (1,3465-. смесь охлаждают и пропускают через

1,3470), что соответствует содержанию фильтр с 1,8 кг активированного угля (60 r общего азота 11,0-12,0 гlл.. угля/1 л гидролизата).

1780754

Дополнительную очистку обесцвечен- та в растворе. Увеличение же доли субстра. ного кислого гидролиза от ионов хлора и та в гидролизной смеси до соотношения аммиака проводят путем последовательно- 1/1,1 приводит к снижению концентрации го пропускания раствора через анионит и аминногоазота,т. е. куменьшению глубины катионит, Для этого в колонку, заполненную 5 расщепления белка до 62 %, что свидетель0,5 кг анионита ЭДЭ-10П, подают 1,65 л ствует о снижении качества препарата за кислого обесцвеченного гидролизата. Ско- счет присутствия в растворе значительного рость потока через анионит 60-80 мл/мин. количества пептидов;

Первые порции фильтрата отбрасывают. " С другой стороны, уменьшение количеПри содержании азота в вытекающей из ко- 10 ства используемого для очистки препарата ланки жидкости, равном 3,0-5,0 г/л (ре- активированного угля не позволяет достигфракция 1,3380-1,3390), подают раствор на нуть необходимой степени очистки раствокатионит KPC-20П, При рефракции вытека- ра от побочных продуктов гидролиза, о чем ющей из колонки с катионйтом жидкостй, свидетельствует повышение цветности расравной 1,3380-1,3390, фильтрат начинают 15 твора-до 0,30ед. экст. Что касается огранисобирать в приемник, Азотистые продукты чения верхнего предела концентрации элюируют дистиллированной водой. Конец . кислоты в гидролизной смеси, то любая конпроцесса ионного обменаустанавливаютпо ., центрация выше 2,0 н приводит к желаемопрказателю рефракции в приемнике му результату{глубина расщепления более (1,3465-1,3470), что соответствует содержа- 20 75 % и общий азот — не менее 11,0 г/л). Тем

we общего азота 11,0-12,0 г/л. не мейее ограничение "верхнего предела

Объем полученного раствора 0,96 л. В этого показателя необходимо, так как срок полученный очищенный раствор добавляют . эксплуатации реакторов для гидролиза за0,58 г L — триптофана, 2,11 г L — изолейцина и вйсит от концентрации кислоты, что диктует

48 r Д-сорбита. . :,- . 25 выбор минимально возможной концентраПрепарат стерилизуют путем термиче-" ции кислоты для гидролиза. ской обработки в атмосфере азота и после- Препарат, полученный по предложендующего фильтрования через ному способу, стабилен при хранении в тестерилизующие пластины с размером llop чение 2 лет, что достигается введением в

022 мкм. 30 технологический процесс, по сравнению с

Результаты сравнительного аналйза со- известным методом, операции обработки става препаратов, полученных с примене- раствора актйвированным углем и введенинием предложенного способа и известного - ем в состав препарата Д вЂ” сорбита, обладаюприведены в табл. 1, щего солюбилизирующйми свойствами.

Из табл. 1 видно, что предложенный ме- 35 Помимо этих свойств Д-сорбит является тод позволяет повысить концентрацйю об- энергетическим компонентом, что повышащего азота и суммарное содержание етпитательнуюценностьилечебнуюэффекаминокислот в препарате по сравнению.с тивность препарата при парентеральном известным методом (11,0 и 7,8 г/л; 40,5 и питании.

68,7 г/л соответственно). При этом повыше- 40 . Кроме достижения поставлен йой цели —, ние концентрации аминокислот не ухудша- .повышения концентрации аминокислот в"

- ет других показателей качества препарата, - - препарате, предложенный способ имеет

Показатели, характеризующие степень чис- технологические преимущества перед изветоты (цветность, глубина расщепления, Go- — cTHblM, что выражается в сокращении норм держание аммиака) и сбалансированность 45 . расхода времени на проведение технологипоаминокислотномуиминеральномусоста-: ческого процесса(51 и 35 ч соответственно ву {содержание триптофана, изолейцина," для приготовления 100 л препарата). Это натрий-, калий-, и хлорид-ионов), практи-, достигается тем, что исключается вспомогачески не изменяются. . : .. тельная операцйя регенерации йонообменСледует отметить, что такой результат 50 ных смол соляной кислотой, а также . возможей только при использовании пара- операция фильтрации кислого гйдролизата. метров технологического процесса в ука- . Таким образом, предложенный способ занных в предложении грачицах значений позволяет получить препарат с более высо(табл. 2), Например, снижение концентра- кой концентрацией аминокислот без наруции кислоты при гидролизе ниже 1,4 н, из- 55 шения его стабильности при хранении и с менение соотношения субстрат-кислота с использованием более упрощенного техно1/1,5 на 1/1,6 или увеличение на стадии логического метода. очистки количества активированного угля Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я до 100 г/л не позволяет достичь основной Способ получения аминокислотного цели — повысить концентрацию общего азо- препарата для парентерального питания пу 1780754 тем кислотного гидролиза эритромассы с последующей очисткой гидролизата последовательно на анионите и катионите, кор-. рекции аминокислотйого состава путем добавления к продукту L-триптофана и (=

: изолейцина, термической обработки и стерилизующей фильтрации, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью пьвышения концентрацйи аминокислот, гидролиз ведут при соотношении субстрат . кислота — 1: 1,2-1,5 и концентрации кислоты в гидролизной смеси

1,4 — 2,0 н, а перед очисткой на анионите и катионите проводят обработку гидролизата

5 активированным углем в количестве 60-90 г на 1 л гидролиэата и перед термической обработкой к целевому продукту добавляют

Д-сорбит в количестве 50 г/л.

Та.бл и ца1

ХарактериСтйка аминокислотных препаратов, полученных по известному и предложенно-. му способу

Аминокислотный и епа ат йол ченный поспособ

Показатель

П е ложенный

Известный

7,8

40,5

11,5

68,7

Таблвпа 2 ..

Влияние твхноиогических параметров (соотношения субстрат/кислота, концентрации кислоты, количества активированного угля) на показатели качвотна аминокислотного препарата

Покаяателм качества препарата

Параметры технйвгйческего пропвсоа

Соотношение субстрат/кислбта при концентрации квслоты I 4-2 0 в

Количество акт»вировввного угля

Концентрация кислоты при соотно внии с бстрат/ки лота I 2- 5.

I/I,2-I/I,5 I/I,6

I 4-2,0

2 I

IO0

l,з

Обший азот, г/л. и инвЮ азот, .и к обшеиу азоту

Цветность, ед.акст.

Стабильнооть в процессе хранения

П,5

П,5

7,0

78 .

П, 5

7,5 .76

П,5

I2у0

7,8. 78

0,80

0,05

О,OI атабилвн в течение

2к лет лен; выпадает осадок через

2-3 недели х енвя

Общий азот, г/л

Сумма аминокислот, г/л

Аминный азот, к общему азоту. рН

Аммиак, ммоль / л

Цветность, ед.экст.

" Натрий;ион, мэка/л

Калий-ион, мэкв/л

Хлорид-ион, мэкв/л. Триптофан, г/л

Изолейцин, г/л

- со бит, г/л

78,3

6,9

2,8

0,04

32,1

10,0

33,6.

0,7 2,0 нет

78,3 .

6,3

3,9

0,05

43,8

4,6

41,5

0,Т

2,0

50,0