Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона

 

Использование: ветеринария, в частности способы определения активности гормонов , стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения; активность фолликулостимулирующего гормона определяют по его воздействию на биологические объекты. В качестве биологического объекта используют ооциты животных . Оценку биологической активности гормона осуществляют по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 А 61 К 37/38

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

ВЫd93HM

1ИЙЧИЯМ

ОТЕКА

С) (Ю (! () (21) 4913460/15 (22) 20,02.91 (46) 07.01.93. Бюл. ¹ 1 (71) Белорусский научно-исследовательский институт животноводства (72) Ю.Д.Романов, Л.В.Трощенкова и А,И.(анджа (73) Белорусский научно-исследовательский институт животноводства (56) Кабак Я.M. Практикум по эндокринологии, M.: Изд-во Московского университета, 1968, с. 150 — 155.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных.

Цель изобретения — упрощение способа определения активности фолликулостимулирующего гормона.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве биологического объекта используют культивируемые ооциты животных, а оценку биологической активности гормонов проводят по продолжительности времени и интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.

Пример, На мясокомбинате от только что убитых коров берут яичники в стадии фолликулярного роста. B стерильных условиях в лаборатории извлекают ооциты, размещают их в чашки Петри с питательной средой TC-199 с 20 % фетальной сыворотки примерно по 30 штук в каждую, Формируют

„„SU „„1787034 АЗ (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ФОЛЛИКУЛОСТИМУЛИРУЮЩЕГО

ГОРМОНА (57) Использование: ветеринария, в частности способы определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения; активность фолликулостимулирующего гормона определяют по его воздействию на биологические объекты. В качестве биологического объекта используют ооциты животных. Оценку биологической активности гормона осуществляют по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.

1 табл. пять групп. В одну чашку Петри гормональные препараты не добавляют. Эта группа ооцитов является контролем. Во вторую чашку Петри к стандартной питательной среде, нанесенной на дно в количестве 2-3 мл, добавляют 10 и кг/мл стандартного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), заведомо известной активности, э в три следующие чашки Петри с таким же количеством питательной среды вносят 5, 10 и

15,и кг/мл проверяемого гормонального препарата. Все чашки Петри помещают в одинаковые условия в эксикатор с максимальной влажностью при 5-процентном содержании углекислого газа, Эти условия позволяют поддерживать в эксикаторе рН равную 7,3 — 7,5. Культивирование ооцитов осуществляют в течение 30 ч в термостате с постоянной температурой 38,5 С. Затем с помощью цитогенетического анализа определяют стадии созревания ооцитов с подсчетом процента ооцитов на стадии

1787034

Формула изоб ретения

On еделено ооцитов на стадии

Доза ФСГ,,и кг/мл

Всего ооцитов в группе, штук

Добавка к и итател ьной среде мето азы tl егене ации штук /. штук

Пе вая се ия опытов

Контроль

Стандартный ФСГ

П раве ряемый ФСГ

16,1

75,0

24

29

17

22

5

56,7

75,9

80,0

13,3

Вто ая се ия опытов

16,6

Контроль

Стандартный ФСГ

Проверяемый ФСГ

34

76,4

5,8

33

5

12

17

36,3

56,7

76,6

3,3

Составитель М.Дошкина

Техред М,Моргентал Корректор Л.Ливринц

Редактор С.Кулакова

Заказ 261 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул,Гагарина, 101 метофазы П, При 70 — 80/ фактического наличия их в группе, дальнейшее культивирование прекращают. Ооциты могут быть оплодотворены семенем быка-производителя, Использование активного ФСГ обеспечивает созревание ооцитов самок крупного рогатого скота уже через 25 — 26 ч.

Результаты 30-часового культивирования ооцитов приведены в таблице, Как видно из данных таблицы, в первой серии опытов доза 10,и кг/мл испытываемого ФСГ была эквивалентна такой же дозе стандартного ФСГ, а во второй серии опытов — проверяемый гормональный препарат был не менее активен. Лишь доза 15,икг/мл соответствовала эквивалентному количеству в 10,и кг/мл стандартного ФСГ.

Таким образом, использование предложенного способа определения активности фолликулостимулирующего гормона позволяет в течение 25 — 30 ч с минимальными затратами труда и средств определить фактическую активность испытываемого гормонального препарата, При этом не нарушается биотехнологический процесс воспроизводства сельскохозяйственных

5 животных. Отпадает необходимость в выращивании инфантильных крыс или мышей, их инъецировании, взятия влагалищных мазковб забоя с последующей препаровкой и взвешивания их полового аппарата, 10

Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона, включаю15 щий оценку его физико-биологического . воздействия на биологические объекты, о тл и ч а ю щи и с я тем, что, с цельюупрощения способа, в качестве биологического обьекта используют ооциты животных, а оценку

20 биологической активности гормона по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде,