Способ получения аналога соматостатина


C07K1/04 - Пептиды (пептиды в пищевых составах A23, например получение белковых композиций для пищевых составов A23J, препараты для медицинских целей A61K; пептиды, содержащие бета-лактамовые кольца, C07D; циклические дипептиды, не содержащие в молекуле любого другого пептидного звена, кроме образующего их кольцо, например пиперазин-2,5-дионы, C07D; алкалоиды спорыньи циклического пептидного типа C07D519/02; высокомолекулярные соединения, содержащие статистически распределенные аминокислотные единицы в молекулах, т.е. при получении предусматривается не специфическая, а случайная последовательность аминокислотных единиц, гомополиамиды и блоксополиамиды, полученные из аминокислот, C08G 69/00; высокомолекулярные продукты, полученные из протеинов, C08H 1/00; получение

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕД МСТВО СССР (ГОС АТЕНТ СССР)

О ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ е (я)5 С 07 К 1/04, А 61 К 37/02

4ЙИЛ

: Ы. Р4а0ИЫ (54

М (57 из по ти

Су

С.-Сн(сн,н

QN-cH сн Я-Д, сн;о к ж т з

I (21) 4356419/04 (22) 16.08.88 (31) 3153/87 (32) 17.08.87 (33) СН (46 30,01.93.Бюл.¹ 4 (71 Сандос АГ(СН) (72 Моника Мерглер (ДЕ) и Вальтер Прикосо ч (AT) (56 Патент США ¹ 4395403, кл.424-177, оп бл. 1983.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНАЛОГА СООСТАТИ НА

Использование: в медицине. Сущность бретения: усовершенствованный способ учения аналсга соматостатина — гептапепа формулы Н-0-Phe-Cys-Phe-0-Trp-Lys Thr-ЙН СН(СН2ОН)ОН(СНз)ОН. Реагент 1: онцевой цист ин, связанный с полимерИзобретение относится к усовершенваннному способу получения аналога соостатина — гептапептиду формулы I

Ф" I=ON

D-Рье-сцз-РЪе-ц-тгр-цз -Ть -С е-НН-сн

I сн;он орый может найти применение в медине.

Известен способ получения соединения утем фрагментной конденсации в раствоНедостатком известного способа являя сложность процесса, необходимость деления промежуточных продуктов на дой стадии и невозможно=ть его автомаации.

Цель изобретения — упрощение процесполучения соединения I.,. Ж„„1792418 АЗ ной матрицей ИН2СНСН(СНз)ОС -1 РЬ® ОН О где (Р/ — аминометилированный полистирол. Условия реакции: твердофазный синтез ступенчатым наращиванием цепи, начиная с реагента 1 в присутствии конденсирующего агента, с получением защищенного пептидииполимера формулы

Fmoc-0-Phe-Cys(B u ) P he-О-Тгр-1.ys(Boc)Thr-Cys(Bu )-X, где Fmoc-флуоренилоксикарбонил; Вос-трет-бутилоксикарбонил, Ви -трет-бутил; X-КНСНСН(СНз)ОСНРЬ9, СН20 который деблокируют окисляющим агентом и трифторуксусной кислотой в среде органического растворителя. Процесс упрощается за счет исключения стадий выделения и очистки промежуточных продуктов, а также простой процедуры выделения целевого продукта. (a(6 = - 42 (С 0,5; 95 $ АсОН).

Поставленная цель достигается описываемым способом, который заключается в том, что синтез соединения 1 осуществляют твердофазным методом путем ступенчатого наращивания пептидной цег.и, начиная с Сконцевого цистеина, связанного с полимерной матрицей формулы где Р— аминометилированный полистирол, с использованием соответствующих Мфлуоренилоксикарбониламинокислот в присутствии конденсирующего агента с последующей обработкой полученного защищенного пептидилполимера формулы:

Fmoc-0-Phe-Cys(B u )-Phe-0-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys(B u ) X (1 I I), 1792418

20

40

55 где Fmoc — флуоренилоксикарбонил, Вострет.-бутилоксикарбонил, В u -трет,-бутил, ХX- -NH-СН-СН(СН, -О сн,-о--сн+Qv, деблокирующими агентами, окисляющим агентом и трифторуксусной кислотой в среде органического растворителя, Стадия 1, Получение треонинол-ацеталь и-формилфеноксиуксусной кислоты (I la).

К 105 r (1 моль) L-треонинола в 200 мл метанола в атмосфере азота прикапывают при 0 С 200 мл метилового эфира трифторуксусной кислоты в 250 мл метанола, Реакционную смесь перемешивают 1,5 ч при

10 С и упаривают при 40 С, Полученный белый кристаллический остаток растворяют в 200 мл этилацетата при 70 С и переосаждают добавлением 100 мл гексана. Осадок отфильтровывают при 0 С, промывают гексаном и сушат при комнатной температуре, 50,3 г (0,25 моля) полученного продукта растворяют в атмосфере азота в 1250 мл тетрагйдрофурана и к полученному раствору прикапывают последовательно 75 мл триметилхлорсйлана и 70 мл триэтиламина в

250 мл тетрагидрофурана. Через 4 ч отфильтровывают образовавшийся осадок, фильтрат упаривают при 40 С, остаток растворяют в 1500, мл метиленхлорида, Полученный раствор порциями смешивают с

90,4 г и-формил-феноксиуксусной кислоты, а затем добавляют 9 мл триметилсилилового эфира трифторметансульфокислоты. Реакционную смесь перемешивают 24 ч, образовавшийся осадок отфильтровывают, тщательно промывают метиленхлоридом, фильтрат упаривают при 40 С, остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюента этилацетата, Чистоту полученного соединения lla определяют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления.

Стадия 2. Получение соединения И, 17,2 г Аминометилированного полистирола (0,7 вес.%, 11, что соответствует

0,50 ммоль/г) суспендируют в 80 мл смеси метиленхлорида с диметилформамидом (4:1). К полученной суспензии последовательно добавляют 4,17 r Ila, 1,6 г оксибензотриазола и 4 г дициклогексилкарбодиимида, перемешивают 2 ч при комнатной температуре, смолу отфильтровывают, промывают и суспендируют в 100 мл смеси тетрагидрофурана с метанолом (3;1). Полученную суспензию порциями смешивают с 10,4 r боргидрата натрия, перемешивают 6 ч при комнатной температуре, отфильтровывают и промывают, Стадия 3, Получение гептапептида 1.

Полученную на стадии 2 смолу сус пендируют в смеси метиленхлорида с диметилформамидом и добавляют последовательно

5,57 г N-флуоренилоксикарбонил, $-трет.бутил-L-цистеина, 1,74 г оксибензотриазола и 3,6 г дициклогексилкарбодиимида. После отщепления флуоренилоксикарбонильной защитной группы обработкой смолы пиперидином (2х20 мин), затем последовательно присоединяют с помощью дициклогексилкарбодиимида с добавкой оксибензотриазола N-флуоренилоксикарбонил-L-треонин, N-флуоренилоксикарбонил, N -бензилоксикарбонил- -лизин, N-флуоренилоксикарбонил-D-триптофан, N-флуоренилоксикарбонил- -фенилаланин, N-флуоренилоксикарбонил, S-трет,-бутил-L-цистеин, и К-флуоренилоксикарбонил-0-фенилаланин, В итоге получают пептидил-полимер формулы III, Полученный пептидилполимер суспендируют в 100 мл смеси трифторэтанола с метиленхлоридом (1:1) и смешивают с 50 мл трибутилфосфина. Суспензию перемешивают 70 часов при комнатной температуре, смолу отфильтровывают и смешивают со

100 мл смеси тетрагидрофурана и 1 М раствора ацетата аммония (1:1), К полученной смеси добавляют 1,1 мл 30%-ной перекиси водорода и перемешивают 24 ч при комнатной температуре, Затем смолу промывают и смешивают со смеськ 20 мл трифторуксусной кислоты, 80 мл метиленхлорида, 10 мл воды и 2 мл тиоанизола и перемешивают 2 ч. Затем смолу отфильтровывают, промывают трифторуксусной кислотой и метиленхлоридом, к фильтрату добавляют 200 мл диэтилового эфира, выпавший осадок отфильтровывают, растворяют в водном буфере, Полученный раствор обессоливают обработкой Дуолитом и подвергают лиофильной сушке.

В итоге получают 2,1 г (70%) соединенияя 1; (a$ = -42 (С О,б; 95% AcOH).

Как видно из приведенного примера, предлагаемый способ получения гептапептида I позволяет существенно упростить процесс получения целевого продукта за счет исключения стадий выделения и очистки промежуточных соединений и за счет простой процедуры выделения конечного продукта путем фильтрования и обессоливания. Кроме того. предлагаемый способ может быть автоматизирован при проведении процесса на пептидном синтезаторе.

Формула изобретения

Способ получения аналога соматостатина формулы

1792418

Fmoc-0-Phe-Cys(B u )-Phe-D-TrpLys(Boc)-Thr-Cys(B и )-Х, где Fmoc"- флуоренилоксикарбонил;

Вос — трет.-бутилоксикарбонил;

В u — трет.-бутил; х- -нн-ш-сн«н -о

I сн,-о — сн-О-®, Составитель М. Меркулова

Техред М.Моргентал Корректор 3. Салко

Тирам Подписное осударственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-ÇS, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

Н-о-Р«е-.CyS-Phe-О Тгр -LyS—

r сН(СН i-OH

-Tht-Cys-NH CH

1 сн -он путем наращивания пептидной цепи с ис- 5 пользованием N-защищенных аминокислот, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, синтез ведут путем стуПенчатого наращивания пептидной цепи, начиная с С-концевого цистеина, свя- 10 зайного с полимерной матрицей формулы

М н сн ъ лр где Р— аминометилированный полистирол, 15 с ирпользованием соответствующих N-флуор нилоксикарбониламинокислот в присутствии конденсирующего агента с последующей обработкой полученного защищенного пептидилполимера формулы послеДовательно деблокирующими агентами, окисляющим агентом и трифторуксусной кислотой в среде органического растворителя.

Способ получения аналога соматостатина Способ получения аналога соматостатина Способ получения аналога соматостатина 

 

Похожие патенты:

Изобретение относится к твердофазному синтезу биополимеров на нежестких полимерных носителях и мож-ёт найти применение в химических, биологических, медицинских исследованиях, а также в про: мышлением производстве биологически ,ак-

Изобретение относится к твердофазному синтезу биополимеров на.нежестких полимерных носителях и позволяет повысить точность управления процессом синтеза, повысить производительность и экономичность работы синтезатора

Изобретение относится к медицине и ветеринарии

Изобретение относится к биохимии, конкретно к конъюгату аденилил(21-51)аденилил (21-51) аденозина с бычьим сывороточным альбумином

Изобретение относится к медицине, в Частности к хирургии и интенсивной терапии

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в качестве лекарственного препарата для лечения поражений , вызываемых вирусом герпеса простого

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для лечения бронхиальной астмы

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии Цель уменьшение клинических проявлений заболеваний за счет коррекции метаболизма соединительной ткани
Наверх