Способ получения композиции инсулина для орального введения

 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения композиций для лечения диабета. Цель - повышение биодоступности инсулина. В способе получают частицы из твердого эмульгатора и поверхностно-активного вещества диаметром от 1 мкм до 0,5 мм, связывают их с инсулином, покрывают частицы липидным слоем толщиной 0,05-1 мкм, затем кишечнорастворимым слоем, возможно нанесение водорастворимого слоя. 36 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

1 (21) 43565?8 / 14 (22) 20.09.88 (86) PCT / US 87/00485 (12.03.87) (46) 07.05.93. Бюл. %17 (31) 842625 (32) 21,03,86 (33) US (71) Юрейшм Лабораториз, Инк. (US) (72) Янг В.Чо (US) (56) DE,OS3421468, кл. А61 К9/10, 1985. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИ ЦИИ, ИНСУЛИНА ДЛЯ ОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ

Изобретение относится к способам получения композиции для перорального введения белковых материалов в биологически активной форме, а именно к композициям для лечения диабета путем перорального введения инсулина, Настоящее изобретение касается способа получения композиции из частиц, состоящих по существу из твердых эмульгаторов и поверхностно-активных веществ, при этом инсулин связывается с поверхностью частиц при помощи связующего вещества, Затем на частицы и белковое вещество наносят липидное покрытие. Частицы могут иметь средний диаметр приблизительно от 1 мкм до 1/2 мм, однако предпочтительно, чтобы частицы имели средний диаметр, приблизительно, от 1 до

100 мкм, Липидное покрытие предпочтительно наносят на частицы и белковое вещество с толщиной, приблизительно, от 0,05 до

1,0 мкм. Липидный слой может быть покрыт энтеросолюбильной оболочкой, В другом варианте осуществления настоящего изобретения белковое вещество связано с липопротеиновыми частицами.

„„ 4 „„1814559 А3 (ю1)5 А 61 К 37/26, В 01 J 13/02 (57) Изобретение отн6сится к медицине, а именно к способам получения композиций для лечения диабета. Цель — повышение биодоступности инсулина. В способе получают частицы из твердого эмульгатора и пове рхностно-активного вещества диаметром от 1 мкм до 0,5 мм, связывают их с инсулином, покрывают частицы липидным слоем толщиной 0,05 — 1 мкм, затем кишечнорастворимым слоем, возможно нанесение водорастворимого слоя, 36 табл.

Частицы могут иметь средний диаметр от 1 мкм до 1/2 мм, однако предпочтительно, что- ) бы частицы имели средний диаметр от 1 до

100 мкм. Частицы затем покрывают водорастворимым веществом и полученный продукт покрывают липидным слоем. Липидный слОЙ предпочтительно имеет толщину приблизительно от 0,1 до 0,3 мкм, Полученный продукт может быть помещен в гель-капсулу и затем покрыт энтеросолюбильной оболочкой до толщины приблизительно — от 0,1 до 0,3 мкм. С©

В другом варианте осуществления настоящего изобретения белковое вещество покрывают гранулами. Гранулы образуют покрытием бикарбоната натрия и, если желательно, небольшого количества крахмала, частицами лимонной кислоты (предпочтительно, размером 100 — 150 r). Состав, включающий белковое вещество, затем покрывают гранулой. Полученный продукт покрывают энтеросолюбильной оболочкой.

Полученные гранулы имеют размер менее 2 мм. Физиологически размер гранул менее 2 мм может способствовать быстрому прохождению лекарства в двенадцатиперстную

1814559

10 ставляют собой

25

55 кишку. Благодаря инкапсулированию гранул в небольшие твердые гель-капсулы в противоположность большим гк ель-капсулам также повышается кишечная абсорбция. Использование бикарбоната натрия и лимонной кислоты или при получении гранул, или при применении с составом в виде порошка промотирует быстрый разрыв и открывание капсул или гранул и таким образом высвобождает белковый материал в двенадцатиперстную кишку. Конечно, и другие соединения могут быть использованы для промотирования этого эффекта. например лимоннокислый натрий и другие бикарбонаты, такие как бикарбонат калия, Энтеросолюбильное покрытие обеспечивает прохождение композиции в кишечный тракт без разрушения в желудке. В кишечном тракте покрытие растворяется.

Липидное покрытие обеспечивает прохождение композиции в лимфатическую систему пользователя, Для этой цели липидное покрытие создает для композиции сродство с виллами.(концевыми отверстиями лимфатической системы в кишечной мембране).

Если фармацевтическое вещество связано с липопротеиновыми частицами, то эти частицы повышают абсорбцию фармацевтического вещества в тканях. Липопротеин легко проникает через клеточную мембрану и таким образом обеспечивает создание носителя для продвижения вещества в ткань пользователя, Предпочтительные компоненты для получения композиции приведены ниже.

Липидные материалы покрытия, Липидные материалы покрытия, пригодные в настоящем изобретении, включают те хикломикронподобные материалы, которые притягиваются к виллам тонкой кишки. Такие материалы включают (однако не ограничиваются) сложные полиэтиленгликолиевые эфиры жирных кислот, глицерофосфатиды, фосфатидилфосфаты, лецитин яичного желтка, олеиновую кислоту, стеариновую кислоту, пальмитат, холестерин, моно- и ди- и триглицериды, сложный холестериновый эфир, лицитин яичного желтка, содержащий от 5 до 20 фосфатидной кислоты, линолевую кислоту, линоленовую кислоту, лауриновую кислоту, фосфатидилфосфат, глицерин, соевое масло, сезаиовое масло и трометан. Эти липидные материалы покрытия после нанесения на поверхность фармацевтического вещества не только герметизируют фармацевтическое вещество, но также увеличивают

"сродство" и "абсорбцию" частиц такого фармацевтического вещества к виллам, т.е, к концевым отверстиям лимфатических сосудов у кишечных мембран, так, что вещество абсорбирует в лимфатическую систему, Липидная композиция покрытия, функционирующаяя удовл етво ритель но, и редставляет собой следующее: от 80 до 90 липида в форме моно-, ди- и триглицеридов, от 6 до 9 фосфолипидов, 2 сложного холестеринового эфира и 1 свободного холестерина, а также менее 1 свободных жирных кислот (NEFA), Также можно добавлять около 2 низкомолекулярной протеин/аминокислоты, Сложные холестериновые эфиры пред30 в виде сложного эфира холестеринлинолевой кислоты;

20 в виде сложного эфира холестеринолеиновой кислоты;

22 в виде сложного эфира холестериннальмитиновой кислоты, Энтеросолюбильные материалы покрытия.

Энтеросолюбильные материалы покрытия, пригодные в настоящем изобретении, включают те материалы покрытия, которые устройчивы к разрушению в желудке, но которые разлагаются в окружающей среде кишечного тракта с экспонированием покрытого вещества. Такие энтеросолюбильные материалы покрытия включают(однако не ограничиваются) следующие компоненты, взятые либо в отдельности, либо в комбинации: гидроксипропилметилцеллюлозафталат, полиэтиленгликоль-6000 и шеллак, и они могут растворяться в таких растворителях, как дихлорметан, этанол и вода, целлюлозафталат или поливинилацетатфталат, Предпочтительный энтеросолюбильный материал покрытия для нанесения на инсулин содержзит 4,5 мас.ч. гидроксиметилцеллюлозы к 0,5 мас.ч, шеллака, к 0,5 мас.ч. полиэтиленгликоля-6000. Этот материал растворяют в 47,3 мас.ч. дихлорметана и 37,8 мас.ч. этанола. Энтеросолюбильную оболочку затем растворяют водой до оптимальной концентрации и наносят на композицию настоящего изобретения.

Липопротеиновые материалы.

Липопротеиновые материалы, пригодны в настоящем изобретении, содержат те липиды и протеины, которые могут соединяться с образованием липопротеинов малой плотности. Предпочтительно, липопротеины с малой плотностью имитируют показатели липопротеинов малой плотности у человека.

Липидный компонент включает (однако не ограничивается) холестерин, олеиновую кислоту, стеариновую кислоту, лаурилсульфат натрия, лецитины, лаупилсульфат на1814559 тия.

55 трия с лецитинами, фосфатиды, пальмитиновую кислоту и фосфатидфосфатхолин, Белковый компонент включает (однако не ограничивается) любую из аминокислот или низкомолекулярный белок. Наиболее предпочтительные аминокислоты включают аргинин, лизин, гистидин и аспарагиновую кислоту и наиболее предпочтительные протеины включают альбумин и глобулин.

Предпочтительно липиды соединить с низкомолекулярным белком или аминокислотой при соотношении от 1:1 до 3 1 на молекулярной основе. В предпочтительном варианте липиды и белки обьединяют при соотношении I:1.

Липидная композиция, содержащая

46 сложного холестеринового эфира, 14 свободного холестерина, 14;(> жира, 25 фосфолипидов и около 1 МЕГА(свободных жирных кислот), функционирует удовлетворительно, когда объединена с 20-25Я, по массе аминокислот.

Водорастворимые материалы покрыВодорастворимые материалы покрытия, пригодные в настоящем изобретении, включают те соединения, которые обеспечивают создание, гидрофильного покрытия, включающие, но не ограничивающиеся гидроксипропилметилцелл юлозафталатом, полиэтилен гликолем-6000, гидроксипропилметилцеллюлозой, гидрокСипропилцеллюлозой, кристаллической целлюлозой и шеллаком, растворенным в дихлорметане, зтаноле и воде, целлюлозойфталатом и поливинилацетатфталатом. Если белковые материалы связаны с липопротеинами и покрыты водорастворимой оболочкой, они предпочтительно покрываются слоем толщиной приблизительно от

005до0,5мкм.

Связующие материалы.

Связующие материалы, пригодные в настоящем изобретении, это те соединения, котоыре связывают пептид с липидом или липопротеином. Эти материалы включают (однако не ограничены) микрокристаллическую целлюлозу, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, метилгидроксипропилцеллюлоза-желатин, повидон и группы сложного полиэтиленгликолевого эфира жирной кислоты.

Липолитические ферменты.

Липолитические ферменты, пригодные в настоящем изобретении, представляют собой те ферменты, которые промотируют абсорбцию липидов в виллы. Эти ферменты включают липазу, включая панкреатическую липазу, амилазу, протеазу и соли желчных кислот. Кишечная абсорбция жирных кислот и липидов повышается и промотиру5

50 ется панкреатической липазой в присутствии соли желчной кислоты. Следовательно, когда белковое вещество покрыто липопротеином, панкреатическая липаза в присутствии соли желчной кислоты будет повышать абсорбцию белкового вещества. При желании липолитические ферменты могут быть объединены с композицией настоящего изобретения или введены в отдельной таблетке или капсуле. Смесь липолитических ферментов, которая функционирует удовлетворительно, когда фармацевтическим веществом является инсулин, включает панкреатическую липазу, амилазу, протеазу и соли желчных кислот.

На пол н ител ь.

Если белковое вещество связано с.липопротеином, может быть использован наполнитель. Наполнитель может или не может быть использован в качестве физического связующего вещества. Наполнитель может включать (однако не ограничивается) аравийскую камедь, кристаллическую целлюлозу, гидроксипропилцеллюлозу и гидроксип роп ил метил целл юлозу.

Поверхностно-активные вещества, Поверхностно-активные вещества, пригодные в настоящем изобретении, включают те соединения, которые промотируют более лучшую абсорбцию и виллы, и эти вещества включают (однако не ограничиваются) катионогенные, аниогенные и неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как лаурилсульфат натрия, стеариламин, сложные полиглицериновые эфиры жирных кислот, полиэтиленалкиловые эфиры, полиоксиэтиленалкилфениловые эфиры, моноглицериды жирных кислот, сложные сорбитан-жирнокислотные эфиры, полиоксиэтиленовые жирнокислотные амины и сложные полиэтиленгликолевые жирнокислотные эфиры.

Э мул ьгаторы.

Эмульгаторы, пригодные в настоящем изобретении, включают те соединения, которые создают эмульсию М vivo, и включают (однако не ограничиваются) вещества и комбинации веществ, такие как холестерин, стеариновая кислота, стеарат натрия, пальмитиновая кислота,пальмитатнатрия,олеиноваякислота, глицерилмоностеарат олеата натрия, полиэтилен-50-стеарат,полиокси-40-стеарат, полисорбат 20, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 80, пропиленгликоль-диацетат и пропиленгликоль-моностеарат. Эмульгатор может также включать те химические вещества и компоненты, которые делают его подобным

"липопротеину с малой плотностью", обнаружиЬаемому в плазме человека, такие как аргинин-HCI, аравийская камедь, холестерин, 1814559 сложный холестериновый эфир, фосфолипиды и жирные кислоты, Стабилизаторы и ферментные ингибиторы.

Стабилизаторы и ферментные ингибиторы, пригодные в настоящем изобретении, представляют собой те соединения, которые способны инактивировать или ингибировать воздействие разрушения млекопитающих ферментов, таких как пептидазы, протеазы, фосфорилазы, глутатион-инсулин-трансгидрогеназа, а также инсулин разрушающий фермент, т,е. инсулиназа. Стабилизирующие соединения включают (однако не ограничиваются) стеариламин, стеариловый спирт, лимонную кислоту, молочную кислоту, триэтиламин-НС!-пирофосфат, триэтаноламин, овомуксид, тетраацетат этилендиамина, йодоацетамид, фенилгидразин, гидроксидамин и 8-гидрохинолин, Противомикробные средства.

Противомикробные средства, пригодные в настоящем изобретении, представляют собой те соединения, которые способны препятствовать микробному загрязнению и разрушению фармацевтического соединения и связанным с ним присадкам и связующим покрытиям, При выборе противомикробного средства микробная активность средства должна быть сравнена с его совместимостью с другими компонентами фармацевтической композиции, а также с его токсичностью в отношении организма, подлежащего лечению таким средством. Противомикробные соединения, в основном отвечающие этим требованиям, включают (однако не ограничиваются) метилпарабен, этилпарабен, пропил парабен, бутилпарабен, фенол, дегидроацетовую кислоту, фенилэтиловый спирт, бензоат натрия, сорбиновую кислоту, тимол, тимерозал, дегидроацетат натрия, бензоловый спирт, крезол„ р-хлоро-m-крезол, хлорбутанол, фенилртуть, ацетат, фенилртуть борат, фенилртуть нитрат и бензидалконий хлорид.

Устройство для получения композиции содержит сосуд, имеющий камеру. На дне камеры расположены перфорированный вращающийся диск, средства для создания воздушного потока и вибратор, Над дном камеры расположены сопла, Для получения композиции частицы помещают на дне камер и вибрируют вибратором. Средства создания воздушного потока заставляют частицы суспендироваться внутри камеры.

Фармацевтическое вещество распыляют через сопла так, что данное вещество связывается с частицами. После того как фармацевтическое вещество связалось с частицами„последние покрывают липидным слоем, распыленным через сопла. После нанесения липидного слоя можно наносить энтеросолюбильное покрытие.

На фиг.1 изображена в разрезе струйная мельница; на фиг,2 — то же, поперечный разрез; на фиг.3 — схематический вид в разрезе Splr-А-Flow; на фиг.4 — хроматограмма композиции примера 1; на фиг.5- микрофотография композиции примера 1; на фиг,6

10 — микрофотография композиции примера 1; на фиг.7 — сравнение уровней венозного сывороточного сахара двух свиней, одна из которых получила композицию примера 1, а другая — Актрапид. Уровень венозного сывороточного сахара свиньи, получившей композицию примера 1, обозначен о, а уровень венозного сывороточного сахара свиньи, получившей Актрапид, обозначен х. Ось х выражена в минутах и ось у выражена в

20 миллимолях сывороточной глюкозы; на фиг.8 — сравнение инсулина Tong-Shin, перорального инсулина примера 1 и инсулина

Novo согласно испытания 1-1; на фиг.9— сравнение перорального инсулина примера ние перорального инсулина примера 1 и перорального инсулина примера 2 согласно испытания 2 — В; на фиг.11- сравнение перорального имнсулина примера 1 и перорального инсулина примера 2 согласно испытания 2 — В; на фиг.12 — влияние примера 6 на уровни кровяной глюкозы; на фиг,13 — сравнение инъекцируемого инсулина s сопоставлении с примером 6; íà фиг.14 — сравнение инъекцируемого инсулина в сопоставлении с примером 6; на фиг.15— сравнение инъекцируемого инсулина в сопоставлении с примером 6; на фиг.16 — влияние примера 6 на уровни кровяной глюкозы; на фиг.17 — влияние примера 6 на

40 уровни кровяной глюкозы; на фиг.18 — влияние примера 6 на уровни кровяной глюкозы; на фиг.19 — сравнение инъекцируемого ин45 сулина с примером 6; на фиг.20- сравнение инъекцируемого инсулина в противопоставлении примеру 6; на фиг.21 — сравнение инъекцируемого инсулина в сопоставлении с примером 6; на фиг.22- сравнение перорального инсулина примера 7 с регулярно инъекцируемым инсулином; на фиг,23 поперечный разрез гранулятора CF; на фиг.

24 — схематическая иллюстрация инсулиновой гранулы для перорального введения при50 мера 12; на фиг.25 — уровни содержания инсулина в крови собак, получивших инсулиновый состав примера 12; на фиг.26 — влияние гранул инсулина для перорального введения по примеру 12 на уровни сахара. содержащегося в крови собак; на фиг,27—

25 1 и регулярно инъекцируемого инсулина согласно испытания 1-Е; на фиг.10 — сравне1814559

10 влияние перорального инсулина примера

12 на уровни глюкозы в плазме собак: на фиг,28 — влияние перорального инсулина примера 11 в сопоставлении с пероральным инсулином примера 13 на сахар в крови; на фиг.29 — влияние формулы перорального инсулина примера 13 на сахар в крови.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами, Пример 1. В настоящем примере композицию, предназначенную для перорального введения инсулина, получают в соответствии с настоящим изобретением.

Частицы, имеющие средний диаметр приблизительно 50 мкм, получают из смеси холестерина, лаурилсульфата натрия и метила и пропилпарабенов (рН 6) в качестве противомикробных консервантов. Частицы получают с использованием струйной мельницы, поставляемой Фреунд Интэрнзйшнл Лимитед, Токио, Япония, Фиг,1 и 2 схематически иллюстрируют струйную мельницу 10, Частицы для получения подают во входную камеру 11 вибрационным питателем, Частицы во входной камере переносятся в камеру измельчения

12 воздушным потоком через воздушное сопло 13. Воздушный противоток подается че. рез воздушное сопла 14 противоположно потоку воздуха, несущему частицы в суспензии. Воздушные потоки указаны стрелками.

Онй приводят к действию размола частиц в пределах кольцевой камеры размола 12.

Воздушный поток через сопла управляется с тем, чтобы отрегулиовать действие размола в пределах камеры. Частицы размалываются до желаемого размера диаметра и затем подаются в канал 15 для выпуска воздуха в центре камеры размола. Сепаратор

16 направляет размолотые частицы так, чтобы они располагались в коллекторной колбе

17 в то время, когда воздух выходит через отверстие трубки 18 для выпуска воздуха, Кристаллический однокомпонентный свиной инсулин (получен из Novo, Bagarvaerd, Дания) затем связывают с частицами, используя раствор, содержащий 8 мас, гидроксипропилцеллюлозы и 0,005 М лаурилсульфата натрия, 0,005 М триэтиламин-HCl и 0,005 М лимонной кислоты. Частицы с инсулином, связанным с их поверхностями, затем покрывают раствором, содержащим 6 мас. моностеарата полиэтиленгликоля (EMANON-3199, получен из КАО, Токио, Япония), с образованием липидного слоя, приблизительно, толщиной

0,1 мкм. Затем получают раствор для энтеросолюбильного покрытия путем растворения

4,5 мас. гидроксиметилцеллюлозафталата (НРС-55), 0,5 мас, шеллака (Шин-Этсу- Кемикал, Япония) и 0,5 мас.$ полиэтиленгликоля-6000 (Шин-Ува Якухин, Япония) в растворе, содержащем 47,3 об.ч. дихлорметана и 37,8 об.ч. этанола. Раствор затем разбав5 ляют водой до оптимальной концентрации так, чтобы частицы с липидным слоем затем покрыть энтеросолюбильной оболочкой с толщиной приблизительно 0,1 мкм. 250 мг частиц с энтеросолюбильным покрытием за10 тем упаковывают вручную в твердые желатиновые капсулы.

Композицию получают с использованием модифицированного "Фреунд" $р!г-AFlow модель SFC-Мини-S 220 с, 60 Гц, 3 П

15 (поставляется Фреунд Интернэшнл, Токио, Япония). Стандартный Яр!г-А-Flow модифицирован следующим образом. Отверстия в роторе были найдены слишком большими.

Поэтому добавляют два дополнительных си20 товых кольца. Ситовые кольца также ориентируют с тем, чтобы частицы не могли бы сквозь них падать.

Spir-А-Flow также модифицировать так, чтобы накачиваемый воздух был сухим и не

25 имел бы никаких масляных микрочастиц, Воздух сушат до 20 абсолютной влажности. Давление воздушного потока также повышают до 920 л в минуту и воздушный поток ориентируют так, чтобы он продувал30 ся через основание. Кроме того, вместо одного отверстия для входа воздуха в основании используются четыре отверстия, Отверстия ориентированы в основании под углом О, 90, 180 и 270 .

35 Рукавные фильтры и пульсирующие фильтры разрезают по половине их длины.

Кроме того, вместо одного сопла, расположенного на дне сосуда, используют три сопла, ориентированные на дне сосуда. Чет40 вертое сопло для покрытия также располагают вверху сосуда. Нижние сопла используютдля связывания и верхнее сопло — для нанесения покрытия.

Фиг.3 иллюстрирует устройство Sptr-A45 Нow, обозначенное позицией 20. Устройство 20 функционирует следующим образом.

Частицы помещают на вращающийся диск

22, Вращающийся диск 22 содержит ситовые отверстия 31. Вибратор 29 и смеситель

50 21 взаимодействуют с диском 22, образуя частицы данного размера. Затем подают воздух и частицы суспендируются в сосуде

26, Вырабатываются два типа воздушного потока; щелевой воздух и флюидный воздух.

55 Щелевой воздушный поток проходит сквозь апертуру 33, тогда как флюидный воздушный поток сквозь апертуру 32. Суспендированные частицы затем могут быть покрыты связующим раствором, распыляемым из нижних сопел 27. Хотя только одно нижнее

1814559

12 сопло 27 иллюстрировано в модифицированном устройстве Splr-А-Яоа, обозначенном позицией 20, используют три нижних распылительных сопла 27. После того как частицы покрыты, они падают вновь на диск

22. После того как все частицы покрыты связующим, воздушный поток возрастает и покрытые частицы можно покрывать вновь и т,д. Как описано выше, частицы также можно покрывать раствором, распыляемым из верхнего сопла 28.

Благодаря повторяющимся перемещениям при связывании и покрытии порошкообразных частиц, последние хорошо смешиваются, смачиваются, пластицируются и галтуются и превращаются очень быстро в гранулы высокого качества. Поток горячего воздуха через перфорированную площадь диска сушит гранулы весьма эффективно. Если вырабатываются пыльные вещества и поднимаются вверх, эта пыль собирается рукавными фильтрами 24. Сопла для очистки воздушной струей 25 используются для Дутья пыльных веществ, собираемых фильтрами обратно к диску 22 в основании, как необходимо.

Вращающийся диск 22 и вибратор 29 объединены с тем, чтобы образовывать частицы, имеющие сферические и ровные поверхности, высокую механическую прочность, высокую объемную плотность и узкий гранулометрический состав. Для создания композиции данного примера твердые эмульсиясолюбилизирующие вещества, поверхностно-активные вещества, противомикробные консерванты помещают в сосуд через входное отверстие. Как только порошковидное сырье поместилось в сосуде, потоки воздуха вдувают по направлению вверх через перфорированные части вращающегося диска и круговой промежуток между вращающимся диском и внутренней стенкой камеры (сосуда). Поток воздуха предохраняет вещества от падения вниз через промежуток и перфорированные части.

Вращающийся диск 22, смеситель 21 и вибратор 29 запускаются после внесения сырья. Для создания композиции примера 1 ротор, а следовательно, и перфорированный диск вращают ее скоростью 300 об/мин, вибратор — 2000 об/мин и смеситель вращается со скоростью 500 o6/мин. Воздушные потоки при 32-35 С проходят через отверстия в роторе ("флюидный воздухи) со скоростью потока 8-10 л/мин, а также через щель между ротором и стенкой ("щелевой воздух") с расходом от 7 до 8 л/мин, Объединенные частицы сушат в течение 30 мин, Кристаллический инсулин (Novo — одноком50 ве стабилизатора инсулина и в качестве противовсненивающего вещества, Испытание 1-А. В данном испытании композицию для перорального введения инсулина примера 1 сравнивают химическим с образом раствора для внутривенного вливания инсулина Actripld (Novo). Одну капсулу с композицией для перорального введения инсулина, содержащей 8 международных единиц (1.Ч.) однокомпонентного свиного кристаллического инсулина фирмы понентный свиной кристаллический инсулин, Группа N. 833115, Партия N- 69195-01) тщательно растворяют в растворе, содержащем гидроксипропилцеллюлоэу, лаурил5 сульфат натрия, лимонную кислоту и тризтиламин-HCI, pH 2.

Когда частицы подаются воздухом вверх внутри оборудования для устройства покрытия и связывания, причем используют

10 как "щелевой воздух", так и ифлюидный воздух", связывающий раствор распыляют в виде мелкого тумана через двойное распылительное сопло при давлении распылительного воздуха 3 кг/м и скорости воз15 душного потока 10 л/мин.

Инсулинсвяэанные твердые эмульгирующие частицы затем покрывают липидным слоем, содержащим раствор сложных полиэтиленгликолевых эфиров жирных кислот

20 (KAO $ЕККЕП, Япония: EMANON 3199, Партия М 12744V) со скоростью распылительного воздушного потока 10 л/мин и давлении распылительного воздуха 3 кг/м2.

Вышеприведенные покрытые инсулинс25 вязанные твердые эмульгирующие частицы затем помещают s твердые гель-капсулы, после чего капсулы покрывают энтеросолюбил ьной оболочкой.

Каждая полученная 350 мг капсула со30 держит:

Холестерин (Фулука, А.Г.; Швейцария;

Партия М 24657-784) 6,76х10 М; . Л а ура сульфат натрия Я кури, Ката ку, Япония: S316 — 06) 1-377х10 М;

35 Триэтиламин-НС1 (уако Сеи-Яку, Япония) 4,089х10 6 М;

Лимонная кислота (Якури Кагаку, Япония: КА9105) 5,965х10 М

Гидроксипропилецеллюлоза (Шин-Уа

40 Якухин, Япония: 191184) 1,234х10 Г

Сложные полиэтиленгликолевые жирнокислотные эфиры (КАО Sekken, Япония;

EMAN0N 3199, 12744Y) 1,543х10 2 Г

Инсулин (NOV0) 8 единиц.

45 Лимонную кислоту используют как ингибитор инсулин-инактивирующих ферментов, а также в качестве стабилизатора инсулина и регулятора рН.

Триэтиламин-HO используют в качест13

1814559

По, полученного в соответствии с примером

1, растворяют разрушением ультразвуком с использованием ультрасонификатора в течение 5 мин в воде, Половину(1/2) раствора, содержащего 4 1,V. композиции для перорального введения инсулина, анализируют с использованием хроматографии с обращенной фазой. 4 1.V, инсулина actrapid

NoVo также анализируют с.исопльзованием хроматографии с обращенной фазой, Результаты показывают, что оба образца содержат одинаковое количество химически эквивалентного инсулина (см.фиг.4).

Испытание 1-В, в данном испытании снимают микрофотографии композиции для перорального введения инсулина пример 1, используя для этого сканирующий электронный микроскоп, Энтеросолюбильное и липидное покрытия частиц удаляют при помощи растворителя, содержащего 47,3 об.ч. дихлорметана и 37.8 об.ч, этанола в воде.

Микрофотографии частиц при 500-кратном увеличении показывают наличие относительно малых частиц (около 5 — 10 мкм в среднем диаметре) инсулина и гидроксипропилцеллюлозных связующих материалов, присоединенных к относительно большим частицам (около 50 мкм в среднем диаметре) холестерина и лаурилсульфата натрия (см,фиг,5). При увеличении в 3000 раз видны стержнеобразные инсулиновые кристаллы, пропитанные частицами гидроксипропилцеллюлозы (см.фиг.6), Испытание С-1, В данном испытании композицию для перорального введения инсулина примера 1 сравнивают с раствором для внутривен ного вливания инсулина

Actrapld (NoVo) в количественном определении биологической активности. Две свиньи породы Yorkshire выдерживают голодом в течение ночи и одной свинье дают 8 1,V. инсулина Actrapld внутривенно. Другой свинье вводят внутривенно в течение периода в 15 мин 8 1. V инсулина для перорального введения по примеру 1, который растворен в 50 мл воды, Пробы крови берут от пары свиней и измеряют уровни сывороточного сахара. Уровни венозного сывороточного сахара двух свиней понижаются почти в равной степени, хотя продолжительность гипокгликемического действия для композиции примера 1 является более длительной, чем продолжительность действия инсулина Actrapld (см,фиг.7).

Испытание 1-D, В данном испытании композицию для перорального введения инсулина по примеру 1 сравнивают с однокомпонентным свиным кристаллическим инсулином NoVo и регулярно вводимым инсулином-40 (Тонг-Шин фармасьютикал Ком5

15 пани) при количественном определении биологической активности в отношении кроликов при внутривенном введении лекарственного средства. Трех белых кроликов, каждый весом 1,8 кг, выдерживают голодом в течение ночи и обрабатывают внутривенным вливанием в течение 10 мин 4 1.Ч. либо инсулина

NoVo, Тонг-шин инсулина 40, либо эмульсией, содержащей композицию для перорального введения инсулина по примеру 1. Пробу венозной крови собирают из ушной вены каждого кролика за 30 мин до инсулинового введения и О, 15, 30, 45, 60, 75, 90 и 105 мин после завершения вливаний.

Каждая из трех форм инсулина проявляет приблизительно одинаковые гипогликемические эффекты с началом гипогликемического действия через 30 мин после проведения вли20 вания. Время пика гипогликемического действия инсулина NoVo продолжается в течение 30 мин после завершения вливания, - тогда как для Тонг-Шин инсулина-40 оно составляет 60 мин. Эмульсия композиции

25 для перорального введения инсулина по примеру 1 проявляет пик гипогликемической активности в промежутке между инсулином NoVo и Тонг-Шин (см,фиг.8).

Испытание 1-Е. В данном испытании

30 композицию для перорального введения инсулина по примеру 1 применяют для двух здоровых людей из числа мужчин-добровольцев. Введение перорального инсулийа вызывает гипогликемические эффекты, 35 сравнимые с теми, которые вызывает подкожное введение эквивалентного количества инъекцируемого инсулина (Тонг-Шин).

В испытании участвуют двое мужчиндобровольцев возрастом 37 и 38 лет, весом

40 52 и 54 кг, Каждый получают 16 1.V. композиции для перорального введения инсулйна по примеру l во время испытания. Вместе с композицией для перорального введения инсулина по примеру 1 каждый испытуемый

45 получает две капсулы липолитических ферментов, каждая капсула содержит:

Панкреатическую липазу 1000 единиц

Амилазу 7500 единиц

50 Протеазу 7500 единиц

Соли желчных кислот 40 кг на капсулу емкостью 350 мг с использованием кукурузного крахмала в качестве

"наполнителя".

55 Капсулы с ферментами получают следующим образом, Панкреатическую липазу покрывают слоем гидроксипропил целлюлозы толщиной 0,1 — 0,3 мкм и энтеросолюбильной оболочкой по примеру 1, Затем прибавляют

1814559

16 амилаэу и протеазу. Полученную композицию покрывают слоем гидроксипропилцеллюНоэытолщиной 0,1 мкм. Затем прибавляютсоли желчных кислот, IloKpbITbfe гидроксипропил" целлюлозой (0,1 мкм), получая панкреатическую липазу в твердых гель-капсулах, В 7 ч 30 мин утра каждый участник испытания получает стандартный завтрак, состоящий из двух жареных яиц, двух . кусочков бекона, двух ломтиков обжаренного черного хлеба, столовой ложки масла и чашки черного кофе, Композицию инсулина примера 1 вводят перорально в 10 ч обоим участникам. Инсулин вводят в капсулах, содержащих 16 1.V, кристаллического монокомпонентного свиного инсулина Novo, В

12 ч оба участника получают стандартный ленч, состоящий из 180 r бифштекса, зеленого салата с маслом и уксусом, кусочка черного хлеба и чашки черного кофе, Пробы крови собирают в 10:00, 13:ОО и

16:00 и анализируют нэ уровне содержания глюкозы в крови, Пробы показывают, что композиция для перорэльного введения инсулина проявляет сильное гипогликемическое действие в отношении обоих субъектов через 3 ч, однако через 6 ч уровни кровяной глюкозы возвращаются до их начальных уровней.

Уровни содержания глюкозы быстро спадают у обоих пациентов через 3 ч после введения инсулина. Приблизительно в 10:45 первый субъект начинает жаловаться на помутненное зрение, неспособность к концентрации и тошноту. В 11:20 тот же субъект начинает жаловаться на судороги и тремор в руках и ногах и холодное потение. Второй субъект также жалуется на аналогичные симптомы, однако меньшей интенсивности.

В 11:30 оба пациента получают 250 мл чистого апельсинового сока и первый пациент дополнительно получает 250 мл легкого алкоголя, Через одну неделю оба добровольца получают стандартный завтрак, т.е. завтрак, подаваемый в первый день испытания, в то же самое время. В 10:00 оба субъекта получают подкожное вливание 16 1.V. регулярно инъецируемого инсулина -40 Тонг-Шин.

Приблизительно в 10:30 оба пациента начинают проявлять гипогликемические реакции, продолжающиеся примерно 2 ч. Оба субъекта получают в 11:20 чистый апельсиновый сок и стандартный ленч в 12;00. Уровни содержания глюкозы в крови измеряют в

10:00, 13:00 и 16:00 и они показывают, что инъецируемый инсулин продуцирует пиковый гипогликемический эффект примерно через 3 ч после введения инсулина и что как и для композиции для перорального введения инсулина по примеру 1 эффект исчезает через 6 ч после введения (см.фиг.9), Испытание 1-F. В данном испытании композицию для перорального введения

5 инсулина по примеру 1 применяют для пяти человек, страдающих инсулиннезависимым сахарным диабетом (IDDM,) и пяти человек, страдающих инсулиннезависимым сахарным диабетом (NIIDDM). Пациенты IDDM

10 наблюдаются в госпитальных условиях как минимум три дня перед испытанием, их уровни содержания сахара в крови регулируют должной больничной диетой и рядом подкожных вливаний регулярно инъецируе15 мого инсулина Тонг-Шин. Пациенты NIDDM подвергаются наблюдению за их уровнем содержания сахара в крови путем регулиро.вания больничной диеты и перорального введения гипогликемических средств, таких

20 как хлоропропамид (Диабиназа, изготовленная Пфайэер Лабораториз Дивижн, Нью-Йорк, штат Нью-йорк).

Утром первого дня испытания каждый пациент получает стандартный завтрак, од25 нако пациенты воздерживаются от получения пероральных гипогликемических средств и подкожных вливаний инсулина.

Вместо этого пациенты получают перорально соответствующую дозу композиции для

30 перорального введения инсулина по примеру 1 и две капсулы композиции липолитических ферментов, приведенной в испытании

1-Е. Пробы крови берут от пациентов непосредственно перед введением пероральной инсулиновой композиции и через 2 и 4 ч после введения. Эти пробы измеряют затем на уровни содержания глюкозы в крови.

Каждый пациент получает стандартизированный больничный ленч через 2 ч после введения пероральной композй1ии.

Результаты испытания приведены в табл.1 и 2.

Как показано s табл 1 и 2 уровни содержания глюкозы в крови всех пациентов падают значительно между введением композиции для перорального вливания инсулина и 2 ч позже, Однако уровни глюкозы пациентов, страдающих IDDM, возрастают вновь быстро между 2 и 4ч и у трех из пяти пациентов приблизительно равны или превосходят начальные уровни. С другой стороны, уровни содержания глюкозы в крови тех пациентов. которые страдают NIDDM, продолжают понижаться между 2 и 4 ч у четырех из пяти пациентов. У пятого пациента уровень содержания глюкозы в крови поднимается между 2 и 4, однако не приближается к первоначальному уровню.

Пример 2, В данном примере композицию для перорального введения инсули17

1814559

5

20

55 на пролонгированного действия получают в соответствии с основным методом примера

1. Частицы, содержащие холестерин, лаурилсульфат натрия и метил, а также пропилпарабены, покрывают частицами, содержащими монокомпонентный свиной инсулин Novo, связанный с гидроксипропилцеллюлозой (40 г гидроксипропилцеллюлозы в 600 мл воды; 607% и раствор), лаурилсульфат натрия, триэтиламин-HCI u лимонную кислоту. Эти частицы с инсулином, связанным с их поверхностями, затем покрывают моностеаратом полизтиленгликоля с образованием липидного покрытия вокруг частиц толщиной приблизительно

0,3 мкм в противоположность толщине приблизительно 0,1 мкм покрытия композиции примера 1. Частицы затем покрывают знтеросолюбильной оболочкой. содержащей те же вещества, которые используются для композиции примера 1, с толщиной покрытия приблизительно 0,1 мкм.

Испытание 2 — А. В данном испытании инсулиновая композиция пролонгированного действия по примеру 1 вводится трем субъектам, страдающиим IDDM и рем субьектам, страдающим NIDDM (субьекты А, D,, Е, G, 1 И J из испытания 1 — F). Утром в день испытания каждый пациент получает обычный завтрак, однако им не полагается принимать пероральные гипогликемические средства и подкожные вливания инсулина, что составляет часть их нормального лечения, Вместо этого, они обрабатываются перорально вводимыми дозами композиции примера 2 и двумя капсулами, содержащими композицию липолитических ферментов, приведенную в испытании 1 — E. Пробы крови берут во время введения пероральной инсулиновой композиции и в различные периоды после введения, Стандартный больничный ленч получают все пациенты через 4 ч после введения инсулиновой композиции.

Анализ уровней содержания глюкозы в крови различных проб показывает, что композиции примера 2 проявляют более продолжительное гипогликемическое действие, чем композиции примера 1. Композиции с более толстыми липидной и энтеросолюбильной оболочками проявляют пиковые гипогликемические эффекты через

4-6 ч и они продолжаются до 7 ч, что составляет полную продолжительность испытания (см.табл.3 и 4).

Испытание 2 — В. В данном испытании осуществляют сравнительные тесты в отношении композиции для перорального введения инсулина по примеру 1 и композиции для перорального введения инсулина пролонгированного действия по примеру 2, Трем пациентам, страдающим IDDM, и трем пациентам, страдающим NIDDM, вводят либо композицию примера 1, либо композицию примера 2 вместе с двумя капсулами, содержащими липолитические ферменты, приведенные в испытании 1-Е, Для каждой пероральной дозы инсулина дают две капсулы. Каждого субъекта заставляют голодать в течение ночи и не дают завтрак, а также его обычные противодиабетические терапевтические средства. Уровни содержания глюкозы. в крови каждого объекта анализируют во время введения пероральной композиции и в разные временные интервалы после введения лекарственного средства.

Результаты введения субъектам IDDM композиций примеров 1 и 2 показывают, что композиция примера 1 проявляет сильное гипогликемическое действие в пределах 2 ч введения, однако уровни содержания глюкозы в крови возвращаются к своим первоначальным значениям через 4 ч, Композиции примера 2 показывают более плавное действие и не продуцируют их пиковый гипогликемический эффект вплоть до значения от 4 до 6 ч после введения лекарства, Даже через 7 ч они проявляют выраженный гипогликемический эффект, Результаты введения композиций пациентам, страдающим NIDDM, показывают, что различия между двумя композициями менее выражены, Пиковое гипогликемическое действе обеих композиций, по-видимому, происходит примерно через 4 ч, хотя композиция примера 2 может иметь более продолжительное действие нежели композиция примера 1, Обе композиции проявляют более пролонгированный период

"нормогликемического" режима у пациентов NIDDM, чем у пациентов IDDM, Предполагают, что более короткий период гипогликемического воздействия композиции примера 1 у пациента IDDM вызван тем, что инсулин в композиции высвобождается с более высокой скоростью, чем инсулин композиции примера 2, но он инактивируется с более высокой скоростью у пациентов IDDM, поскольку присутствуют антиинсулиновые антитела; которые часто обнаруживаются у страдающих IDDM (инсулинсвязанным сахарным диабетом) (см,фиг.10 и 11).

Пример 3. В данном примере альтернативную композицию для перорального введения инсулина пролонгированногодействия получают в соответствии с основной методикой примера 1. Частицы, имеющие средний диаметр около 50 мкм, получают из

1814559

50 смеси холестерина, лаурилсульфата натрия и метила, а также пропилпарабенов. Кристаллический монокомпонентный инсулин фирмы Мачо затем связывают с частицами, используя связующие, содержащие гидроксипропилцеллюлозу, лаурилсульфат натрия, триэтиламин-HCI и лимонную кислоту.

Частицы с инсулином, связанным с их поверхностями, затем покрывают дважды моностеаратом полиэтиленгликоля, каждое покрытие имеет толщину 0,15 мкм. Частицы с двойными липидными покрытиями затем покрывают энтеросолюбильной оболочкой в соответствии с композицией примера I, имеющей толщину 0,1 мкм, Испытание 3-А. В данном испытании композицию инсулина пролонгированного действия примера 3 вводят трем пациентам, страдающим IDDM, Лечение проводят в соответствии с основной методикой, которой придерживаются в клиническом испытании

1, когда субъективно подвергают голоданию в течение ночи и не проводят нормальной терапии гипогликемическими средствами.

Пациентам дают стандартный больничный завтрак и вводят пероральную дозу инсулиновой композиции примера 3, а также две капсулы композиции липолитических ферментов, приведенной в испытании 1-Е. Пациентам дают стандартный больничный ленч через 3 ч после введения пероральной инсулиновой композиции примера 3.

Уровни содержания глюкозы в крови пациентов измеряют из проб венозной крови, собранных у пациентов в различные периоды времени вслед за введением перорального инсулина. Данные. представленные в табл.5 и 6, показывают на пролонгированное гипогликемическое действие с пиком гипогликемического эффекта, происходящим через 4-6 ч, но при гипогликемической активности, продолжающейся целых 9 ч.

Один пациент, страдающий NIDDM, также получает композицию примера 3, и липолитические ферменты, приведенные в испытании 1— - Е, Этот пациент голодает в течение ночи перед испытанием, а также в течение последующего испытания. Пациента, страдающего NIDDM, обрабатывают лекарственным средством в 10 ч утра, уровень содержания глюкозы в его крови продолжает падать в течение 5.5 ч проведения испытания.

Пример 4, В данном примере инсулин для перорального введения, имеющий состав, аналогичный составу перорального инсулина примера 1, получают путем изменения липидного покрытия композиции примера 1. Липидное покрытие изменяют так, что кроме моностеарата полиэтиленгли20 коля. добавляют фосфотидилфосфат (количество, достаточное для получения конечной концентрации 0,046x102 r), фосфолипиды (количество, достаточное для получения ко5 нечной концентрации 0,046х10 г) и холестерин (количество, достаточное для получения конечной концентрации

2,628х10 моль). Это липидное покрытие наносят на инсулин с толщиной 0,3 мкм. 240 мг

10 продукта инсулина для перорального введения затем упаковывают вручную в твердые гель-капсулы. Гель-капсулы покрывают энтеросолюбильной оболочкой по примеру 1.

Пример 5. В данном примере перо15 ральный инсулин, аналогичный композиции перорального инсулина примера 3, получают следующим образом. Пероральный инсу. лин модифи цируют так, что холестерин примера 3 замещают комбинацией холесте20 рин-аргинин HCI. Холестерин-аргинин HO приводит к получению композиции, которая имитирует композицию липопротеина малой плотности in vivo. Кроме того, изменяют липидные материалы для покрытия. После

25 покрытия композиции липидным слоем, аналогичным тому, который использовали в примере 4 с толщиной покрытия 0,15 мкм, наносят второй липидный слой. Второй липидный слой включает олеиновую кислоту

30 (количество, достаточное для получения конечной концентрации 8,776х10 моль) и трометан (количество, достаточное для получения конечной концентрации 8,764х10 моль) в качестве "вулканизатора" или "пластификатора" жидких мембран для покрыПероральный инсулин данного примера состоит из "ниэкоплотного липопротеинподобного" твердого эмульгатора в качестве основы. Монокомпонентный кристаллический свиной инсулин ПО О связывают с эмульгатором и полученный продукт покрывают водорастворимым слоем гидроксипропилметилцеллюлозы с толщиной 0,1 мкм, который затем покрываютдважды липидными материалами покрытия до конечной толщины мембраны, равной 0,3 мкм (0.15 мкм на слой липидного покрытия), после чего добавляют "стабилизирующий трометан" и продукт упаковывают вручную в твердую гель-капсулу так, что каждая капсула содержит 240 мг композиции. Капсулу затем покрывают слоем энтеросолюбильного вещества примера 1. Водорастворимое покрытие позволяет покрывать инсулин-холестерин-аргинин НС! липидной оболочкой, Испытание 5-А. Биологическая доступность инсулина композиции примера 4 приблизительно s 3 раза выше, чем биодоступность обычно вводимого инсулина, однако путем ре1814559

21

22 гулировки дозировки инсулина она почти одинаковая (см.табл.7 и 8).

Испытания также показывают, что инсулиновая композиция примера 5 композиция примера 5 приводит к началу гипогликемии, а также к полной ее продолжительности, которая черезвычайно напоминает то, наблюдается после подкожного введения обычно инъецируемого инсулина. Биологическая доступность инсулина выше для перорального введения композиции по примеру 5, чем по примеру 4.

Пример 6. Композиция, рассмотренная в примере 5, была получена путем связывания инсулина (монокомпонент Novo) с частицами холестеринлаурилсульфата натрия, как описано в примере 1. Затем инсулинсвязанные твердые эмульгирующие частицы покрывались раствором, содержащим сложные эфиры полиэтиленгликовых жирных кислот и лецитин яичного желтка с

5;4-ой фосфатидной кислотой (в количестве, достаточном для того, чтобы конечный продукт в виде 350 мг капсулы содержал

0,309х10 г). Используют желтковый леци-г тин, содержащий 5;4 фосфатидной кислоты, растворенный в этаноле (SICMACHEMICAI,, Ят Louis, Mo).

Результаты исследований показали (см.фиг.12 — 21), что композиция, рассмотренная в примере 6, является перорально активным инсулином для больных 10DM и больных MIDDM. Кроме того, эти анализы показали, что результаты обоих исследований совпадают.

На фиг.12 — 21 сплошные линии иллюстрируют результаты испытаний, проведенных корейскими исследователями, а пунктирные линии означают результаты испытаний, проведенных американскими исследователями. Ось х обозначает время (часы), а ось у — содержание глюкозы в крови (мг/дл). Фиг.9 иллюстрирует результат@ наблюдения над пациенткой в возрасте 46 лет, получившей 6 капсул, содержащих композицию, описанную в примере 6, Фиг.10 — результаты для пациента (мужчина, 38 лет, больной РООМ), получившего 10 единиц обычного инъецируемого инсулина, обозначенного х, а затем 6 капсул (24 ед.) композиции, описанной в примере 6.

На фиг.11 приводятся данные для пациента 47 лет, получившего 10 ед. инъецируемого инсулина (обозначенного П), и через дня два после этого 6 капсул (24 ед.) композиции, описанной в примере 6 (х). На фиг,11 приводятся данные для пациента IDDM, 45 лет, получившего 10 ед. инъецируемого инсулина (Ц), и через два дня 8 капсул (32 ед.). рассмотренного в примере 6 препарата (х), 50

Липидные и аминокислотные частицы, связанные с кристаллическим инсулином, покрывались водорастворимой пленкой, содержащей гидроксипропилметилцеллюлозу (Shin-Etsu-Kagaku, Япония, Упомянутые связанные с инсулином липидные аминокислотные частицы покрывались липидным слоем, содержащим сложные эфиры полиэтиленгликолевых жирных кислот, желтковый лецитин, содержащий 5 фосфатидную кислоту, и олеиновую кислоту (Sigma Chem

StLouIs). Трометамин использовался в качестве вулканизатора.

На фиг,12 приводятся данные для пациентки NIDDM, 47 лет получившей 6 капсул (24 ед,) рассматриваемого в примере 6 препарата. На фиг.13 приводятся данные для

5 пациента IDDM, получившего 14 капсул (56 ед.) указанного препарата, На фиг.14 представлены результаты для больного IDDM, получившего 12 капсул (48 ед.) данного и репарата. На фиг.15 приводятся данные для

10 пациента IDDM 38 лет, получившего 10 ед. инъецируемого инсулина Q, и через 2 дня

10 капсул (40 ед.) препарата примера 6 (x).

На фиг.16 приводятся результаты для пациента 1DDM, 47 лет, получившего 10 ед. обыч15 ного инъецируемого инсулина Я) и через два дня 8 капсул (32 ед.) препарата, рассматриваемого в примере 6 (х). На фиг.17 приводятся данные для пациента 1DDM, 49 лет, получившего 10 ед. обычного инъецируемо20 ro инсулина Q и через два дня 6 капсул (24 ед,) препарата примера 6(х), Все пациенты вместе с дозой препарата, рассмотренного в примере 6, получили по две капсулы липолитических ферментов испытания 1 — Е.

25 Пример 7, Для получения композиции примера 7 холестерин (F ка, А.G., Швейцария) и 1-аргинин HCI (Wako Jun-Yaku, Япония, K!WJ 3778) тщательно размешивались в сосуде в отношении два к одному. В качест30 ве наполнителя использовалась Gum Acacia (Yakurl-Kagaku, Япония, АОО1 — 03).

Липид (холестерин) и аминокислота ((— агринин HCI) были связаны гидроксипропилцеллюлоэой, содержащей инсулин

35 (монокомпонент Novo). Лимонная кислота была использовано как ингибитор инсулиннеактивных ферментов, а также в качестве рН-регулятора. Триэтиламин использовался в качестве инсулинстабилиэатора, а также

40 как противовспенивающий агент. . Метод соединения инсулина с частицами использовался аналогично описанному в примере 1, т.е. путем распыления потоком воздуха с расходом 12 л/мин и путем распы45 ления сжатым воздухом под давлением 2,5 кг/мг.

1814559

Полученная в результате композиция помещалась в твердую гельную капсулу и покрывалась энтеросолюбильным слоем, как это было описано в примере 1.

Полученные описанным методом капсу- 5 лы содержат:

Холестерин -2,011х10 M

Лаурилсульфат натрия -7,982 х10 М, Агринин 10

НО -2,575х10 M

Триэтил амин

НО -2,060х10 6 M

Лимонную кислоту -6,563x10 M 15

Олеиновую кислоту -1,901õ10 М

Тромета мин (Fuluka: Швейцария) -1,902х102 M

bum Acacia (Yakari Kagaku, 20

Япония) -2,147х10 2 r

Гидроксипропилцеллюло-1 -0,733х10 2

Гидроксипропилметилцеллюлозу -0,458x10 г 25

Желтковый лецитин (5 фосфатидная кислота) -0,299x10 2 г

Инсулин (Novo) -8 единиц

M етилпарабен -5,780х10 M 30

Пропилпарабен -1,245x110 М

Силикагель -0,458x10 2 r

Полученная композиция примера 7 имеет действие, сходное с действием подкожной инъекции инсулина, введенного 35 человеку.

Ниже рекомендуются пределы содержания использующихся веществ для композиции в соответствии с примером 7. Каждая

240 мг капсула может содержать: 40

Холестерин - (1,609 — 2,413)х10 4 М

Лаурилсульфат натрия - (5,587 — 9,978)х10 М

Агринин

CI - (1,931-3,219)x10 М 45

Триэтила мин

НС1 -(1,545-2,575)х10 6 М

Лимонную кислоту -(4,266-8,860)x10 з М

Олеиновую 50 кислоту -(1,426-2,376)х10 М

Троэтимин -(1,331-2,568)x10 М

Gum Acaccia -(1,825-2,576)х10 Г

Гидроксипропиленцеллюлозу-1 (0,115-0,298)х10 Г 55

Гидроксипропилметил целлюлозу (0,275-0,641)х10 Г

Желтковый лецитин (5 фосфатидной кислотой) (0,115-0,298)х10 2 r

Инсулин (Novo) или инсулин (ойег) добавляется в каждую капсулу в составе между 4 и 40 ед. на капсулу.

Метилпарабен (3,179-7,803 х10 М, пропилкарабен (0,809 — 0,681)x10 M и силикагель (0,275 — 0,641)х10 г могут быть добавлены к частицам, порошкообразно покрытых инсулином для перорального ввода.

Наконец, покрытые порошком инсулина частицы помещаются в твердую гель-капсулу, мягкую гель-капсулу или прессуются в таблетки. Затем эти формы могут быть покрыты энтеросолюбильным слоем.

Пример 8, Композиция, приготовленная в соответствии с технологией, описанной в примере 7, может быть модифицирована следующим образом;

Каждая 240 мг капсула может содержать:

-2.413 104 М

-2,592 x10 M

-3,024xi0 M

- 0,737х102 Г

Холестерин

Лаурилсульфатнатрия -8,081х10 М

Агринин

НО

Триэтиламин

НС! -2,073х10 M

Лимонную кислоту

Олеи новую кислоту -2,376х10 M

Троэтамин -8,764х10 М

Gum Acaccia -2,119х10 Г . Гидроксипропилцелл юлозу-1

Гидроксипропил метил целлюлозу - 0,461х10 Г

Желтковый лецитин (5 фосфатид, кис-той) - 0,115х10 Г

Инсулин (Novo) -8 единиц

Метил парабен - 5,815х10 М

Пропилпарбен - 1,153х10 M

Силикагель -0,461х 10 2 M

Испытание 8. Семь пациентов (6 мужчин и одна женщина) в возрасте от 24 до 47 лет (средний возраст 34,4). весом от 48 до 68 кг (средний вес 58,6 кг), больных инсулинзависимым диабетом (ЮОМ) получили от, 32 до

48(в среднем 42,6) ед. введенного перорально, полученного по технологии, описанной в примере 7, инсулина при режиме голодания накануне и в течение проводимого испытания.

Пяти пациентам (мужчинам), больным !

ООМ было введено подкожно 0,172 ед./кг обычного инъецируемого инсулина при режиме голодания накануне и в течение проводимого испытания.

1814559

30

45

55

Общий эффект снижения уровня глюкозы в сыворотке после перорально введенного инсулина, приготовленного по технологии примера 7, аналогичен действию обычного инъецируемого инсулина (см. фиг,22) и табл.9, У двух пациентов, больных lDDM, после перорального введения орального инсулина, изготовленного по технологии, описанной в примере 7 (0,63 ед/кг), была измерена инсулиновая доступность (уровень инсулина в сыворотке).

Сравнение этих данных с данными, полученными для 5 пациентов 1DDM, которым было введено подкожно 0,172 ед/кг обычного инъецируемого инсулина, показало следующую "фармакокинетику и биологическую доступность" инсулина (см.табл.10).

Клиническое исследование показало, что препарат инсулина. изготовленного по методике, описанной в примере 7, и вводимого перорально при разовой дозе 0,63 ед/кг, оказывает гипогликемическое действие (снижение уровня глюкозы в сыворотке крови) у больных диабетом (аналогичное действие обычного вводимого подкожно инъецируемого инсулина (Tong-Shin) в количестве 0,172 ед/кг в другой группе больных инсулинзависимы диабетом). Четверо из семи исследуемых больных IDDM были подвергнуты инсулиновому шоку, спровоцированному путем введения перорально сладкой воды и свежего апельсинового сока.

Однако сравнение данных по фармакокинетике и биодоступности, полученных после введения 0,630 ед/кг перорального инсулина, изготовленного по Методике примера 7, и данных, полученных после подкожного введения 0,172 ед/кг обычного инъецируемого инсулина (Tong-Shin), показало, что скорость всасывания инсулина в 2 раза выше после введения перорального инсулина, чем после введения инъекционного инсулина. Инсулиновая доступность (AUC) после введения перорального инсулина 30,630 ед/кг почти в 4,7 раза больше чем после подкожного введения инъецируемого инсулина (0,172 ед/кг). AUC после адекватной дозировки введения инсулина составляет 2264,8 ЕД после введения перорального инсулина и 1775,0/ЕД после введения обычного инсулина. Биодоступность орального инсулина, изготовленного по методу, описанному в примере 7, равна или превышает биодоступность обычного инсулина при данной дозировке.

Введение перорального инсулина, изготовленного по методу описанному в примере 7, дает отличный эффект в понижении уровня глюкозы в сыворотке диабетических больных и в повышении биодоступности инсулина, аналогичный эффекту подкожного введения обычного инъецируемого инсулина больным инсулинзависимым диабетом.

Пример 9. В этом примере липолитические ферменты являются липидным и энтеросолюбильным покрытиями и могут быть связаны с композицией перорального инсулина в разовых консулах или таблетках.

А. Панкреатическая липаза.

Частицы панкреатической липазы могут быть приготовлены следующим способом, Нижеприведенные компоненты помещались в модифицированный ранее описанный распылитель (см.табл. 11).

Компоненты помещаются на диск аппарата Spir-А-Flow и высушиваются при 3032 С, при этом ротор вращается со скоростью 300 об/мин, смеситель со скоростью 500 об/мин, А вибратор 2000 об/мин.

Тщательное высушивание частиц компонентов осуществляется путем их выдувания со дна аппарата горячим воздухом, нагретым до температуры около 30 — 32 С. Горячий воздух выдувается через щель между ротором и стенкой сосуда (щелевой воздух) и через сетку с мелкими отверстиями на вращающемся диске(флюидный воздух). Щелевой воздух и флюидный воздух находятся под давлением в пределах 100 — 450 мм НгО.

Очищенные частицы суспендируются в сосуде аппарата Spir-А-Flow при помощи щелевого воздуха и флюидного воздуха. Затем частицы компонентов покрываются следующим плен кообразующим раствором (см табл,12).

Чтобы покрыть частицы раствором для покрытия, этот раствор наносится распылением на частицы компонентов, которые находятся в суспендированном состоянии в сосуде, при этом скорость равна 10 мл/мин, а давление в пределах 1 — 5 кг/м . Распылег ние проводится в течение 120 мин (сопло распылителя "включено" в течение 20-40 с и "выключено" в течение 60 — 90 с попеременно).

В результате частицы панкреатической липазы покрываются и при этом защищаются тонким слоем пленки HPMC-1, который является водным раствором. Эти покрытые

HPMC-1 — пленкой частицы панкреатической липазы затем покрываются энтеросолюбильным слоем при использовании следующего раствора для энтеросолюбильного покрытия (см.табл.13).

Данный раствор для энтеросолюбильного покрытия имеет рН около 5,2-5,6. С другой стороны, техническая чистота полиакрилата марки EUD RAGiTR - -100-55

1814559

27

28. (или 1 — 100) или EUD RAGTRR-L 30-D 55 позволяет использовать его для покрытия частиц (см,фиг.14).

Частицы покрывались энтеросолюбильным слоем при использовании первого из описанных растворов для энтеросолюбильного покрытия методом распыления раствора для энтеросолюбильного покрытия на покрытые

HPMC-1 — пленкой частицы панкреатической липазы, находящиеся в суспендированном состоянии в сосуде распылителя, при скорости распыления 10 мл/мин и давлении 2,5 кг/м в течение 3-4 ч. Сопло распылителя работало в течение 20 — 40 с и выключалось в течение

60-120 с попеременно.

Полученный в результате продукт растворяется в "желудочном растворе" и в "дуоденальном растворе" в течение необходимого промежутка времени.

8, Соль желчной кислоты.

Частицы соли желчной кислоты формируются при помощи аппарата Зр1г-А-Floe для нанесения покрытия путем распыления с использованием раствора для энтеросолюбильного покрытия и первого из упомянутых растворов, применявшихся для покрытия панкреатической липазы. Соль желчных кислот и avlcel покрывались методом, предложенным в разделе А. Были использованы компоненты соли желчной кислоты и ач1се! в следующем составе (смлабл.15).

С. Технология приготовления перорального инсулина, Пероральный инсулин изготавливается следующим образом. Нижеприведенные компоненты (см.табл.16) смешиваются в устройстве.

Spir - А - Flow, Компоненты тщательно перемешиваются и высушиваются в сосуде устройствз

$р1г-А-Flow. Были использованы следующие параметры работы устройства: скорость вращения ротора 350 об/мин, скорость смесителя 500 об/мин, вибратора 2000 об/мин, давление щелевого воздуха в пределах 100300 мм Hz0. давление флюидного воздуха

100-350 мм Н20, температура воздуха в пределах 24-31ОС; при указанных пзраметрах компоненты смешиваются и высушиваются в аппарате $р!г-à-Floe в течение приблизительно 30 мин. Затем тщательно перемешанные и высушенные компоненты суспендируются в атмосфере сосуда и связываются при помощи следующего связывающего раствора (см.табл.17 .

Чтобы описанные частицы покрыть связываю-щим раствором, этот раствор распыляют при помощи сопла распылителя. помещенного в верхней части устройства

Splr-A-Flow, для этого раствор помещают в цилиндр, а затем охлаждают, погружая его в охладитель со льдом перед и во время процесса распыления. Связывающий рас5 твор покрывают суспендированные очищенным воздухом частицы при скорости от

10 до 14 мл/мин, давлении 1,0-2,0 кг/м и объеме воздуха от 15 до 25 л/мин в течение приблизительно 2 ч до тех пор, пока не будет

10 использован весь раствор. Сопло распылителя "включено" в течение 20-40 с и" выключено" в течение 30-90 с попеременно. На протяжении всего процесса температура воздуха, используемого для суспендирова15 ния частиц, поддерживается в пределах 25-

32 С, Полученные в результате частицы, содержащие кристаллический инсулин, тут же растворяются в воде, имеющей температуру около 24 С, образуя таким образом

20 эмульсию, содержащую очищенные мелкие частицы связанного инсулина. Эмульсия имеет рН в пределах приблизительно 4,25 4.

Немедленно вслед эа этим инсулинсвя25 занные частицы, содержащиеся в эмульсии, покрываются липидным слоем из раствора, приготовленного из компонентов, указанных в табл.18, путем распыления этого раствора на частицы.

30 Полученный раствор имеет рН приблизительно в пределах 5,5 — 6,5. Раствор для липидного покрытия также распыляется при помощи сопла распылителя, расположенного в верхней части сосуда аппарата. Исполь35 зуюхся следующие параметры устройства

$pir-А-Flow: скорость ротора 250 — 300 об/мин, скорость смесителя 500 об/мин и вибратора 2500-3000 об/мин. Скорость распыления сопла 12 мл/мин при давлении

40 воздуха от1,2до1,5кг/м и объеме воздуха от 15 до 20 мл/мин, температура продукта поддерживается в пределах около 30-34 С.

Как и прежде температура продукта поддерживается при помощи установленного в

45 $р!г-А-Flow терморегулятора, который обеспечивает желаемую температуру потоков воздуха в сосуде устройства. Сопло распылителя "включено" в течение 20 с и "выключено" в течение 60-90 с попеременно.

50 Полученные в результате покрытые липидным слоем частицы затем вновь покрываются липидным раствором. Раствор, предназначенный для повторного липидного покрытия, содержит следующие компо55 менты (см.табл. l9).

Раствор для повторного липидного покрытия распыляется из боковой стенки сосуда Spfr-A-Flow при скорости распыления 12 мл/мин, давлении воздуха от 1 0 до

1,5 кг/м и объеме воздуха от 15 до 20

1814559 30 л/мин. Ротор вращается со скоростью 300350 об/мин, смесител ь 500 обмин, вибратор

3000-3500 об/мин, температура продукта поддерживается равной приблизительно от

31 до 35 С. Сопла распылителя включено в 5 течение 20 — 40 мин и выключено в течение

60-90 с попеременно.

По желанию трометамол может быть исключен из раствора для повторного покрытия. Если трометамол исключается из 10 списка компонентов, то необходимо увеличить время сушки и предпринять меры по устранению излишней "сальности, влажности" частиц. Трометамол (трометамин) входит в рецептуру европейской фармакологии 15 и фармакологии CLUA.

После стадии повторного покрытия липидным раствором покрытые и высушенные частицы помещаются каждая в твердогельную капсулу или прессуются в таблетки. Пе- 20 роральный инсулин, связанный покрытыми частицами, может быть помещен в капсулы или таблетки отдельно или смешанным с частицами липазы, покрытыми энтеросолюбильным слоем и частицами солей желчных 25 кислот, описанных выше. Полученные в результате капсулы или таблетки могут быть покрыты энтеросолюбильным слоем.

С другой стороны, покрытые липидным слоем связанные частицы орального инсулина могут сами быть покрыты энтеросолюбильным слоем, Раствор энтеросолюбильного слоя для покрытия липидного слоя, покрывающего частицы орального инсулина, содержит следующие компоненты (см,табл.20), Полученный раствор имеет рН прибли- 35 зительно от 5,5 до 6,5.

Для покрытия энтеросолюбильным слоем покрытых липидным слоем частиц орального инсулина раствор энтеросолюбильного покрытия распыляют при помощи сопла 40 распылителя, расположенного в верхней части сосуда устройства Spir-А-AFlow, прискорости распыления одного грамма на кг/мин для приблизительного 500 r покрытых липидным слоем частиц связанного орального 45 инсулина, Распыление продолжалось в течение 5 с, затем частицы высушивались в течение 5 с попеременно до тех пор, пока не была достигнута желаемая толщина покрытия, 50

Для расчета количества сухого лака, применяемого для энтеросолюбильного покрытия в,("Q"), необходимо площадь поверхности частиц для покрытия (SA) в мм умножить на величину желаемой толщины покрытия (.) в мг/см и все это разделить на

2 величину веса частицы связанного орального инсулина (W) в мг. В соответствии с этим процент сухого лакирующего вещества будет равен:

0=(5А х L)/(Nf).

Предпочтительно, если покрытие энтеросолюбильным раствором частицы перорального инсулина имеют диаметр приблизительно между 0,1 и 0,8 мм (площади поверхностно частиц колеблются в пределах от 0,314 до 2,0 мм ). Было найдено, что частицы орального инсулина весом 450 r, полученные в результате распыления на них энтеросолюбильного раствора приблизительно от 120 до 150 г, не будут растворяться, если поместить их в раствор, имеющий рН около 1,2 (желудочный раствор) по меньшей мере в течение 10 мин, однако будучи помещенным в раствор, имеющий рН.около

6,8 (дуоденальный раствор), они растворяются и диспергируются в течение 30 с. В соответствии с изложенным идеальное энтеросолюбильное покрытие получено, D, Капсулы частиц орального инсулина (липазы) солей желчных кислот.

Получение капсул, содержащих частицы, покрытые оральным инулином, липазой и раствором. солей желчных кислот. С этой целью для каждой Ф 1-размерной твердогельной капсулы частицы орального инсулина, покрытые энтеросолюбильным слоем, приготовленными, как описано в С, частицы липазы, покрытые энтеросолюбильным слоем, приготовленными, как описано в А, и частицы солей желчных кислот, покрытые энтеросолюбильным слоем, приготовленными, как показано в В, смешиваются вместе и повышаются в твердую гель-капсулу в следующем соотношении:

200 мг (12 =Д) орального инсулина;

° 28 мг (1000 ЕД) панкреатической липазы; 25 мг соли желчной кислоты;

50 мг бикарбоната натрия (высушенного в сушильной печи);

50 мг лимонной кислоты в качестве "наполнителя".

Бикарбонат натрия и лимонная кислота обладают "взрывным" действием, позволяющим твердой гель-капсуле открыться в желудке. Размеры гель-капсулы, представляющей собой частицы орального инсулина, липазы и солей желчных кислот, покрытые энтеросолюбильным слоем, составляют менее 1 мм.

Вследствие своих размеров и состава эти частицы быстро проходят через привратник в двенадцатиперстную кишку. Бикарбонат натрия и лимонная кислота выполняют также функцию регулирования внутрикишечного водородного показателя (рН) в направлении увеличения щелочности, увеличивает актив1814559

32 ность панкреатической липазы в присутствии соли желчной кислоты.

E. Сравнительное клиническое исследование перорального инсулина, приготовленного по методике С, и перорального инсулина, приготовленного по методике О.

Шесть больных диабетом (3 инсулинзависимым диабетом и 3 инсулиннезависимым диабетом, пять мужчин и одна женщина) принимали участие в сравнительном эксперименте по испытанию перорального инсулина, приготовленного по методике С, который давался вместе с четырьмя капсулами липолитического фермента, каждая из которых содержит 1000 ед. липаэы и 25 мг соли желчных кислот, и перорального инсулина. приготовленного по методике 1, т.е. перорального инсулина по методике С, комбинированного с покрытой липаэой (методика А); покрытой солью желчной кислоты (методика В), би«арбонатом натрия и лимонной кислОтОЙ, и зэ«люченно го в твердую гель-капсулу.

Каждый пациент получая каждый препарат, но в разные днм. С этой целью «ежаый пациент получал перорально 48 ед. орального инсулине с четырьмя капсулами, содержащими 4000 ед. лмпеаы и 100 мг соли желчной кислоты е первый деиь. и 4 «апеулы,-содержащие 48 ед. перорельмого инсулина и 4000ед. Лмпазы и 100 мг еолм желчной кислоты не другой день испытания, На третий и четвертыйдии режим повторялся.

Если капсулы липоямгичаекого фермента даются отдельно. Ио в сочетании с «епсулами орального инсулина (48 ед.) или липолит№ческие ферменты входят е еосев капсулы орального инсулина и деются е качестве комбинмровенных «епеул, суммарное действие орельного инсулине нэ содержание сахара в крови и гипогликемическое действие/зффе«т в обоих случеях идентичен.

F. Таблетки орального инсулина (липаэы) соли желчных кислот.

Частицы, которые не были покрыты знтеросолюбильным слоем и которые описаны в главах А, 8 и С, могут быть скомбинированы и сделаны в виде твердых спрессованных таблеток. С этой целью были смешаны следующие компоненты, г:

Частицы инсулина (липазы) соли желчных кислот (в пропорциях, рекомендованных в пункте 1) 126,35

Бикарбонат натрия 50,0

Бикарбонат калия 32,0

Лимонная кислота

Тальк

Avlcel

Лактоэа

Кукурузный крахмал

17,65

45,0

28,0

Опйсанная смесь формируется в твер10 дые спрессованные таблетки размером приблизительно 220 мг (по желанию размер таблетки может быть больше или меньше).

Если кристаллический инсулин замещается в препарате С, каждая таблетка может со15 держать 6 ед. инсулина, по желанию доза инсулина может быть увеличена до 40 ед.

Полученные таким образом таблетки .покрываются ЕЧО ЙА61Т"-Е-100 пленкой толщиной приблизительно от 0,1 до 0,15 мм.

20 Установлено, что таблетки с этим покрытием растворяютс» в растворе желудочного сока, имеющего рН до 5, е течение 30 с или меньше. Частицы, покрытые знтеросолюбильным слоем, например частицы орвльно25 го инсулина, липазы и соли желчной кислоты, быстро растворяются в растворе, имеющем рН толь«о ревньею 6 или более, Более того, частицы обычно имеют размеры меньше 1 мм и поэтому они быстро проходят

30 через привратник и растворяются в двенадцатиперстной кимй(е. 8 двенедцатиперстнике частицы змульгмруетея и суспендируют мм«ролипосферичес«ие частицы, содержащие при этом связанный инсулин (размер ме35 нее.1 мкм) и/или покрытого липидным слоем на(размер менее 50 микрон). В соответствии с этим частицы могут быть суспендированы в эмульсии, образованной в полости двенадца40 типерстнай «ишки, Эти частицы в основном абсорбмруются волосками внутрикишечной слизистой оболочки, минуя печень.

Для таблетных форм орального инсулина (липазы} соли желчной кислоты были про45 ведены испытания с тремя больными инсулинзависимым диабетом и получены следующие результаты (см.табл.21).

Использование раствора для энтеросолюбильного покрытия, такого квк EVO

50 RAGlT -1 100 или 1-30, частиц орального

R инсулина, липаэы и соли желчных кислот позволяет укаэанным частицам приобрести следующие свойства:

1. Реэистентность к желудочному соку;

55 2, Защита выстилки желудка от коррозирующих агентов;

3. Отделение несовместимых лекарственных веществ; 4. Увеличение срока годности препаратов;

1814559

5, Изоляция гигроскопических кусочков некротизированной ткани;

6. Защита частиц от атмосферного влияния.

Как указывалось выше, EVD RAGIT защищает стенки желудка от коррозирующего действия желчных солей и улучшает состав препарата орального инсулина, имеющего небольшой срок годности и являющегося слишком лабильным и гигроскопичным.

Пример 10. В этом примере рассматривается приготовление композиции перорального инсулина. В сосуд устройства

Spir-А-Flow помещаются следующие компо. ненты (см,табл.22), Эти компоненты измельчались в порошок при помощи описанной ранее струйной мельницы (см.фиг,1 и 2), так чтобы. размеры частиц были менее 50 мкм, затем тщательно перемешивались, высушивались в сосуде аппарата Spir-А-Flow при следующих параметрах: скорость вращения ротора 250-300 об/мин, давление флюидного потока 40-50 мм Hz0, скорость вращения смесителя 500700 об/мин, давление щелевого потока 2535 мм НгО. скорость вибратора 4000-500 об/мин, давление подачи воздуха 900 — 1000

we H20, Тщательно перемешанные и высушенные компоненты (частицы) затем были суспендированы в сосуде при увеличении давления щелевого воздуха и давлении флюидного воздуха приблизительно до 50 — 100 мм

Нг0, Суспендированные, очищенные, высу. шенные частицы затем покрывались следующим раствором (см.табл.23), Зтот связывающий раствор распылялся при помощи сопла растворителя, расположенного в верхней части сосуда, и таким образом покрывал частицы. Связывающий раствор, содержащий кристаллический инсулин, распылялся при следующих параметрах: вращение ротора 200 — 300 об/мин, расход насоса распылителя 12,0-15,0 мл/мин, вращение смесителя 500-700 об/мин, давление распыляемого воздуха

1,2-1,5 кг/см, скорость вибратора 2800г

3500 об/мин, обьем распыляемого воздуха

20-40 л/мин, давление флюидного воздуха

50-80 мм НгО, давление щелевого воздуха

50-90 мм НгО, давление основной подачи воздуха 800 — 1500 мм Hg, температура продукта 26,7 — 28,5 С.

Частицы распыляются с перерывами в течение приблизительно 90 — 120 мин до тех пор, пока не будет использована вся масса раствора. Частицы распыляются в течение приблизительно 5 с и высушиваются в течение приблизительно 22 с поочередно. объем распыляемого воздуха 20 — 40 л/мин, 45 давление флюидного воздуха 60-110 мм

НгО, давление щелевого воздуха 60 — 110 мм

НгО, давление подачи воздуха 900-1000 мм

Ag, температура продукта 30,0 — 32,5ОС.

Полученные покрытые связанные частицы, содержащие инсулин и покрытые липи50

55 дами, могут быть также приготовлены в виде мелких гранул, имеющих размеры диаметра менее 2 мм (используя отношение 11 и

НСОз: лимонная кислота = 3:1. Эти компоненты, используемые в качестве "затравочных кристаллов" и покрытые крахмалом, покрываются покровным слоем, затем слоем инсулинсвязанных частиц, описанных выше, а затем слоем энтеросолюбильного покрытия или смешиваются с бикарбонатом

Частицы, связанные с раствором кристаллического инсулина (связанные частицы), затем покрывают первым покрывающим раствором. Первый раствор для покрытия содер5 жит следующие компоненты {см.табл.24), Упомянутые связанные частицы затем суспендируются в устройстве Splr-А-Flow u покрываются первым раствором для покрытия в следующих условиях; вращение рото10 ра 220 — 300 об/мин; расход насоса распылителя 12,0-15,0 мл/мин, вращение смесителя 500 — 800 об/мин, давление распыляемого воздуха 1,2-2,0 кг/см, скорость г вибратора 2800-4000 об/мин, объем распы15 ляемого воздуха 20-40 л/мин, давление флюидного воздуха 50-100 мм НгО, давление щелевого воздуха 50 — 100 мм НгО, давление основной подачи воздуха 500-1000 мм Hg, температура продукта 32,0-33,8 С.

20 Связанные частицы распыляются в течение приблизительно 5-10 с и высушиваются в течение 20-22 с.

Затем связанные частицы покрывают вторым раствором для покрытия. Второй

25 раствор для покрытия содержит следующие компоненты

Олеиновая кислота 10 — 15,0 г, Tunsel

Chemical, Япония (914034);

Полисорбат-80 4-6,0 r НауазЫ Pure

30 Chemical Япония, (1ГМО9818).

Зтанол до конечного объема 500 мл, температура 28-30 С, рН 6,0-7,2, Второй раствор для покрытия распыляется на суспендированные покрытые свя35 занные частицы при помощи сопла распылителя, расположенного на боковой стенке сосуда, Покрытие осуществляется при следующих параметрах: скорость вращения ротора 250-300 об/мин, скорость

40 вращения смесителя 500-700 об/мин, скорос гь вибратора 3000.-4500 об/мин. расход насоса распылителя 12,0-15,0 мл/мин, давление распыляемого воздуха 1,2-15 кг/см, 35

1814559

50

55 натрия 20 — 30 мас, (, липидной кислотой 10—

20 мас. и силикагелем 3 — 6 г на 500 — 650 г конечного веса композиции и помещаются в размерные твердые гель-капсулы М 4, Полученные капсулы затем покрываются раствором для энтеросолюбильного покрытия следующего состава (см.табл.25).

С другой стороны, может быть использован раствор для энтеросолюбильного покрытия также следующего состава:

EVD RAGIT -1 30 — 55, 30 раств. 1000 ч (Rohn Pharam, ФРГ)

Полиэтиленгликоль-6000 30 вес, ч.(Као

Sekken, Япония)

Силиконовая эмульсия 2 ч.

Тальк 70 ч.

Вода 898 ч.

Первый из описанных растворов для энтеросолюбильного покрытия используется для покрытия капсул М 4, наполненных частицами связанного инсулина. Частицы связанного инсулина, содержащиеся в капсулах М 4, покрыты так, что они растворяются в желудочном растворе, имеющем рН 12, только после нахождения там в течение 2 или более часов. Однако эти капсулы растворяются в дуоденальном растворе, имеющем р Н около 6,8, в течение 15 мин или менее (как определено фармакопеей США).

Очевидно, что капсулы, покрытые одним или другим из вышеописанных растворов, обнаруживают идентичные свойства.

П р и и е р 11. Для приготовления композиции орального инсулина, представляемой в этом и римере, в сосуд устройства

Splr-А-Flow помещаются следующие компоненты (см,табл,26).

Затем компоненты перемешиваются и высушиваются в сосуде устройства Splr-AFlow, При использовании параметров, описанных в примере 10, эти частицы связываются связывающим раствором, содержащим инсулин. Этот раствор содержит следующие компоненты (см.табл.27), Смешанные и высушенные компоненты суспендируются в сосуде и связывающий раствор, содержащий инсулин, распыляется из сопла 28, расположенного в верхней части сосуда. Связывающий раствор распыляется при условиях, предлагавшихся в примере 10.

Инсулинсвязанные частицы затем покрываются первым раствором. Первый раствор для покрытия содержит следующие компоненты (см.табл.28).

Покрытые инсулинсвязанные частицы покрываются первым раствором с использованием параметров процесса распыления по технологии, описанной в примере 10.

Полученные в результате покрытые частицы затем покрываются вторым раствором для покрытия. Второй раствор для покрытия имеет следующий состав (см.табл,29).

Второй раствор для покрытия распыляют при помощи сопла 27 распылителя, расположенного на боковой стенке сосуда с использованием параметров, аналогичных описанным в примере 10.

Полученные в результате покрытые частицы могут быть сформированы в гранулы размером менее двух 2 мм в диаметре, включающие бикарбонат натрия и лимонную кислоту в смеси в отношении 3;1, как затравка и крахмал как наполнитель, покрытые покровным слоем, инсулинсвязанные частицы в качестве внешнего слоя и энтеросолюбильного слоя или эти частицы могут быть смешаны с приблизительно 20-30 мас.$ бикарбоната натрия, около 10 — 20 мас. лимонной кислоты и около 0,5-2,0 мас,% силикагеля, Полученная в результате смесь может быть упакована в твердую гел ькапсулу М 4 и покрыта энтеросолюбильным слоем, Пример 12. В этом примере описывается технология покрытия композиции перорального инсулина, приготовленного по методу, описанному в примерах 10 и 11, содержащих гранулы диаметром менее 2 мм. С этой целью используется CF-гранулятор (см.фиг.23) и композиция орального инсулина, приготовленного по методу примеров 10 или 11, комбинируется с бикарбонатом натрия, лимонной кислотой в отношении 3:1, имеющим размеры менее 0,5 мм и используемые в качестве "наполнителя", Полученные таким образом гранулы покрываются энтеросолюбильным покрытием— одним из описанных растворов для энтеросолюбильного покрытия, Установлено, что полученные в результате гранулы не могут быть растворены по крайней мере в течение

2 ч в желудочном растворе, имеющем рН приблизительно 1,2, но быстро растворяются (в течение 15 и менее) в дуоденальном растворе, имеющим рН приблизительно 6,8, CF-гранулятор (в техническом отношении пригодным является прибора Freund

industries, Inc., Токио, Япония) предназначен для аггломерирования, гранулирования и покрытия при использовании системы центрифуги и его устройство показано на фиг.23. CF-гранулятор 40 содержит источник питания 42, ротор 44, подачу воздуха 46 и сопло распылителя 48.

Для получения продукта в CF-грануляторе температура подачи воздуха устанавливается между приблизительно 28-34 С, скорость ротора приблизительно 130-200

1814559

35

50

55 об/мин, скорость подачи воздуха между 30в

50 л/мин, скорость распыления сопла 20 — 50 мл/мин при давлении распыления 10 — 30 л/ мин.

Для получения композиции бикарбоната натрия/лимонной кислоты берутся лимонная кислота в количестве от 110 до 150 г как "затравка", порошок бикарбоната натрия в количестве около 400 — 450 r, а также небольшое количество крахмального порошка в количестве 10 — 50 г, который используется в качестве защитного покрытия поверх лимонной кислоты, и высушиваются в течение 30 мин в Spir-А-Flow, Лимонная кислота здесь используется в качестве "затравки", а бикарбонат натрия и крахмал — в качестве защитного покрытия (оба в качестве "наполнителя"). Приготовленный пероральный инсулин (в соответствии с методикой, описанной в примерах 10 и 11) в виде порошка предварительно смешивается с 30 мас.% крахмала и наносится на гранулы наполнителя при использовании около 6-20% (предпочтительно около 10%) гидроксипропилцеллюлозы-1 (HPC-1) в спирте при параметрах: скорость ротора около 100 — 200 об/мин, скорость распыления сопла 15 — 40 мл/мин при давлении от

10 — 30 л/мин в.течение 20 — 40 мин (температура около 25 — 30 С. Полученные таким образом гранулы высушиваются в Spir-А-Flow в течение 30 мин при температуре около

30-35 С.

Полученная композиция, содержащая гранулы размером диаметра около 0,4901,450 мм, покрывается энтеросолюбильным слоем из HPC-метилфталата и полиэтиленгликоля-6000 (0,5%), растворенных в этаноле. Покрытие проводится с использованием параметров: скорость вращения ротора около 150 — 250 об/мин, подача воздуха при 30—

50 л/мин, расход воздуха при распылении

20 мл/мин при давлении 15 — 30 л/мин итемпературе около 25 — 30 С, Полученные в результате гранулы имеют структуру, в основном. сходную с той, что показана на фиг.24. Гранулы 50 включают ядро или "затравочный" кристалл 52, наполнитель 54, HPC-1 покрытие 56, слой инсулина 58 и знтеросолюбильное покрытие 59. Гранулы не растворяются по меньшей мере в течение 2 ч в желудочном растворе, имеющем рН 1,2, но растворятюся в течение 15 мин или менее в дуоденальном растворе, имеющем рН

6,8.

Испытание 12а.

Полученный препарат около 0,9 (0,691,07) ед. на кг веса растворялся In vitro в

10-20 мл солевого раствора и вводился в двенадцатиперстную кишку при помощи двухпросветной интубационной трубки Уолпаса-Диамонда трем собакам. Были взяты пробы венозной крови из бедра через О, 60, 80, 100, 180, 240 и 300 мин после введения препарата трем собакам. Три собаки, один самец и две самки, имели средний вес 4 (приблизительно от 3 до 5,6) кг каждая, Были измерены уровни глюкозы и инсулина в плазме крови при помощи методов радиоиммуноанализа и энзимоиммуноанализа Wako.

Заметная и значительная степень гипокликемии наблюдалась через 80 мин после введения, стабильная стадия наступала через 300 мин после введения, в то время как максимальное содержание инсулина в плазме крови наблюдалось приблизительно через 100 мин после внутридуоденального введения препарата (см. фиг.25 и 26).

Испытание 12в.

Препарат, изготовленный по методике, описанной в примере 11, и модифицированный, как предложено в примере 12, в количестве приблизительно 1 ед. на кг веса вводился внутридуоденально собаке (самке) весом 6 кг. Затем было проведено сравнение гипогл икемического действия указанного препарата с гипогликемическим действием обычного инъецируемого инсулина (быстродействующий инсулин Novo) вводимого в количестве 1 ед, на кг веса внутридуоденально и этого же инсулина в количестве 0 5 ед. на кг веса, вводимого внутривенно. После введения 1,26 ед. иньецируемого инсулина внутривенно уровень глюкозы в крови упал до 102-23 мг/мл в течение 20 мин и восстановился до 100 мг/мл в течение 3 ч. Затем было введено 6 ед. иньецируемого инсулина внутридуоденально. В течение 4ч проводившихся наблюдений никаких изменений в уровне глюкозы в крови не отмечалось, После введения 6 ед. препарата, рассматриваемого в настоящем изобретении, внутридуоденально отмечалось заметное снижение уровня сахара в крови, У испытуемого животного после введения данного препарата наблюдалась стойкая гипогликемия в течение 2 ч (см.фиг.27), Испытание 12с, Три пациента, больных инсулинзависимым диабетом, и два пациента, больных инсулинзависимым диабетом; которые были подвергнуты режиму голодания за ночь до начала испытания и которым за 24 ч до испытания не вводился инсулин и оральные гипогликемические средства, принимали около 0,64-0,73 ед. на кг веса препарата инсулина, изготовленного по технологии, описанной в примере 10 и модифицированного в соответствии с рекомендациями, данными в примере 12. Уровень сахара в крови

1814559

40 измерялся в течение 5 ч, Однако один больной!00М и один больной NIDDM вследствие низкого уровня сахара в крови, наблюдавшегося у них при голодании до испытания, получили обычный завтрак и ис- 5 следовались после приема пищи, У этих пациентов была отмечена клинически значительная степень гипогликемии (см.табл.32).

6 других пациентов, 4 больных lDDM и 10

2 больных NlDDM принимали перорально

0,49-0,63 ед. на кг веса препарата, изготовленного по методике, описанной в примере

11, и модифицированного по методу, описанному в примере 12. Один пациент вслед- 15 ствие низкого уровня сахара в крови, наблюдавшегося у него при голодании, получал стандартный завтрак и исследовался после приема пищи. После перорального введения испытуемого препарата наблюда- 20 лась значительная степень гипогликемии (см,табл.30}.

12Ь. Клинические испытания грануляционных препаратов.

Испытания препарата, изготовленного 25 по технологии, описанной в примерах 10 и

11, проводились в группе диабетических больных дважды в течение двух недель, В течение первой недели каждый больной по 1учал перорально препарат орального 30 инсулина в N. 44 к аeп сoу л еe, покрытого энтеросолюбильным слоем, либо приготовленного по технологии примера 10, либо по технологии примера 11. И неделей позже тот же больной в качестве другого варианта пол- 35 учал перорально этот препарат в гранулах, приготовленный либо по технологии примера 10, либо по технологии примера 11.

Препарат в гранулах, приготовленный по методике примера 11 и вводимый перораль- 40 но при средней дозе инсулина 0,145 ед. на кг веса тела (от 0,11 до 0,18 ед. на кг веса тела), вызывал более быстрое снижение уровня сахара в крови, измерявшегося в течение 2 ч по сравнению с препаратом в М 4 45 капсулах, приготовленным по методике примера 11, и вводимого перорально при средней дозе инсулина 0,583 ед. на кг веса (от 0,49 до 0,63 ед. на кг веса), что почти в 4 раза превышает дозу препарата в гранулах, 50

Однако препарат в N-4-капсулах, изготовленный по примеру 11, показал более длительное сохранение гипогликемического эффекта, а также его предложения более 2 ч после принятия дозы. Степень гипоглике- 55 мии, вызванной в течение часа после приема препарата, приготовленного по методике, описанной в примере 10, незначительно больше при приеме препарата орального инсулина в форме гранул, чем при приеме этого инсулина в форме N. 4 твердых гель-капсул, Однако препарат орального инсулина, приготовленный по методу, изложенному в примере 10, в виде %

4 капсул дольше сохраняет гипогликемическое действие, чем этот же препарат, но приготовленный в виде гранул, Таким образом, комбинация препаратов, изготовленных по методу примера 10, в форме гранул и в форме В 4 твердых гель-капсул и в качестве другого варианта, комбинация препаратов, изготовленных по методу примера 11, в форме гранул и в форме М 4 твердых гель-капсул позволяет вызвать быстрый и стойкий гипогликемический эффект у больных диабетом. Действительно, при введении препарата инсулина, приготовленного по ме.тодике примера 11, в форме гранул(в среднем

0,164 ед/кг веса тела) и в форме М 4 — капсул (в среднем 0,566 ед/кг) у исследуемых больных наблюдался быстро наступавший и долго сохраняющийся гипогликемический эффект (см.фиг.28)..

С другой стороны, CF-гранулированные и негранулированные формы препаратов перорального инсулина, приготовленного по методам, описанным в примерах 10 или

11, могут быть пропорционально скомбинированы и спрессованы в твердые таблетки так, чтобы они могли вызнать у больных диабетом быстрый и стойкий гипогликемический эффект.

Пример 13. Препарат перорального инсулина, вызывающий у больных диабетом хороший гипогликемический эффект, приготавливается следующим образом, Основная масса (дипосферического) химического вещества, рассматривавшегося в примере 11, добавляется в свежий сонный порошок (для ингибирования трипзина, который инактивирует инсулин), Затем приготовленный из свежего яичного белка овомукоид (в соответствии Е.Fredrieg u

Н,F.Deutsln, Т.Bid, Самее 181, 499, 1949) соединяется с кристаллическим инсулином и растворяется в смеси воды со спиртом (в отношении 50:50) при рН 7,2. Хлорид кальция (2 мг) добавляется для повышения физической прочности нейтрального раствора инсулина. Овомукоид из яичного белка является сильнодействующим ингибитором трипсина. И с другой стороны, яичный белок может бить использован для растворения в спирте.

Следующие компоненты помещаются в сосуд устройства Sptr-А-Flow (см.табл,34).

Эти порошкообразные компоненты измельчаются при помощи струйной мельницы до образования частиц размером менее

50 мкм. Затем частицы тщательно переме42

1814559

Таблица 1

Средние суточные требования шиваются и высушиваются в сосуде устройства Spir-А-Flow при параметрах процесса, описанных в примере 10. Высушенный порошок, включающий данные компоненты, суспендируется в сосуде и связывается связывающим раствором, содержащим инсулин, овомукоид(или белок яйца) и лимонную кислоту в качестве суфрактанта, Связывающий раствор содержит следующие компоненты (см.табл.35).

Эти вещества могут быть растворимы в этаноле (100-200 мл).

Аминоуксусная кислота 0,2 M

Полисорбат-80 1,0 — 2,5 г

Гидроксипропилцеллюлоза-1 5

Эти вещества растворяются в приблизительно 100 — 200 мл фосфатного буферного, имеющего рН 8; раствор этанола и фосфатный буферный раствор с растворенными в нем веществами смешиваются, после чего туда добавляется инсулин, рН раствора корректируется до значения 7,2.

Полученный таким образом связывающий раствор наносится путем распыления на высушенные, суспендированные в воз, душном пространстве мелкие липосферические пылинки, содержащие холестерин, суфрактант, соевый порошок и защитные антимикробные вещества, как описано в примере 10.

После тщательной просушки инсулинс-. вязанных липосферических пылинок эти пылинки покрываются следующим покровным раствором (см,табл.36).

Эти вещества растворяются в приблизительно 150-400 мл этанола количестве, достаточном для растворения химических веществ. Этот липидный раствор наносится путем распыления на инсулинсвязанные липосферические пылинки так, как это описа5 но в примере 12.

Испытание 13. Клиническое исследоваwe гипогликемического эффекта препарата перорального инсулина.

4 больных диабетом, 2 мужчины и 2 жен10 щины (средний возраст 46 лет; от 36 до 56 лет, средний вес 60,3 кг; от 50 до 74 кг, средний рост 164,3 см: от 158 до 168 см) после режима голодания получили среднюю дозу 0,573 (0,46 — 0,68) ед/кг препарата перо15 рального инсулина, приготовленного по методике, описанной в примере 13, В результате клинического анализа было отмечено значительное снижение уровня сахара в крови пациентов (см.фиг,29), 20 Формула изобретения

1. Способ получения композиции инсулина для орального введения с использова- нием поверхностно-активных веществ и липидов, отличающийся тем, что, с

25 целью повышения биологической доступности инсулина, получают частицы диаметром от 1 мк до 0;5 мм из твердого эмульгатора и поверхностно-активного вещества, связывают их с помощью связующего агента с

30 активным веществом, покрывают полученные частицы липидным слоем толщиной

0,05 — 1,0 мк с последующим покрытием кишечно-растворимым слоем, 2. Способ по п.1, о т л и ч à ю шийся

35 тем, что перед нанесением липидного слоя, частицы покрывают водорастворимым слоем.

1814559

43

Таблица 2

Таблица 3

Средние суточные требования

Таблица 4

Средние суточные требования

Таблица 5

Средние суточные требования

1814559

Таблица 6

Среднесуточные требования

Таблица 7

Биологическая доступность инсулина и гипогликемические эффекты после перорального введения инсулина примеров 4 и 5 в сравнении с обычным подкожным введением инсулина

Таблица 8

1814559

48

47

Продолжение табл. 8

Примечание.СО - исходное значение сывороточной . глюкозы; C < - минимальное значение глюкозы; Тс-е с - время достижения максимального уровня сывороточного инсулина; Тио-время достижения исходного значения уровня сывороточного инсулина;

dl /dT-скорость повЫшения уровня сыВОРОтОчНОГО инСулииа; АОС-площадь под кривой уровня сывороточного инсулина s течение йериода испытания.Ь двойные пики в уровнях сывороточного инсулина.

Таблица 9

Примечание.

00- основное значение содержания глюкозы;

Сы - минимальное значейие содержания глюкозы, Тс-мин- время, в течение которого наблюдался минимальное значение содержания глюкозы;

Тцю- время, за которое уровень глюкозы достигает 100мг/дл;

dC / dT - скорость гипогликемической реакции.

1814559

Табл ица 10

Примечание.

Io-основное значение инсулина;

1 х-максимальное значение сывороточного инсулина;

Ti-max-время наблюдающегося максимального значения сывороточного инсулина;

Ti-o-время достижения основного значения сывороточного инсулина; б I l dt - скорость нарастания сывороточного инсулина (скорость всасывания );

AVC - площадь под кривой уровня сывороточного инсулина на протяжений исследуемого периода времени.

Таблица 11

Таблица 12

Таблица 13

1814559

51

Количество

Химикат

12,5 раствор

480 вес, ч

502 вес, ч

6 вес. ч

12 вес. ч

1000 вес. ч или

Количество. Химикаты

Количество

Be ество (в граммах, по желанию) 220 мл

EUD PAGT - (-100-55

Этанол или изопропиловый спирт

Полиэтиленгликоль - 6000

Стев ат магния

Е00 REGTT -1 30-D55

Полизтиленгликоль - 6000

Вода

Силиконовая эмульсия

Тальк

Гидрокси - пропилцеллюлоза - (Н РС - L )

Лаурилсульфат натрия

Триметиламин

Лимонная кислота

Кристаллический инсулин

Вода рН раствора равно приблизительно 2 — 3,5, 30 7 раствор

1000 вес. ч

30 вес. ч

898 вес.ч

2 вес. ч

70 вес, ч

1000 вес. ч

16,0 r

1,0815 г

0,8150 г

1,2608 r

Таблица 14

Изготовитель / па тия Ф

Rohm Pharma

Вайтерштадт, ФРГ

Као Sekken, Япония

Изготовитель / па тия

Pohm Pharma

Вайтерштадт, ФРГ

Као Sekken, Япония

Таблица 15

Таблица 16

Таблица 17

Изготовитель / па тия %

Shinwa lakuhln, Япония, (191184)

YakurI- Kagak, Япония (S 316- 06)

Wake Kagaku, Япония

Yakuri- Kagak, Япония (КА 9105) (SIGMA коровий кристаллический инсулин ) 1814559

54

Таблица 18

Таблица 19

Таблица 2О

Таблица 21

Табли

55

Таблица 23

Изготовитель / ЬЬ па тии

Количество

Компонент

15-25 г

Shlnwa Yakuhln, Япония (l91184 ) Wako Kagak, Япония (КА) Уак Каоак, Япония (КА 9105) Уак-аг! Kagak, Япония (316-05) ЕП LI lly (коровий инсулин) Гидроксипропил - метилцеллюлоза - L

Триэтиламин

Лимонная кислота

0,5-1,0 г

005-0,01 M

1,0 - 1,5 г

Лаурилсульфат натрия

Кристаллический инс лин по желанию от 8-20е .

Вода

Таблица 24

До конечного объема 400 мл, при температуре около

10 - 12ОС и конечного M около 1,2 - 2,5 .

1814559

Таблица 25

Be ество

Изготовитель / М па тии

Количество

0,5

47,3

37,8 $

Этан ол

Во а

Н =52-56

Шеллак

Таблица 26

Таблица 27

Изготовитель / Q па тии

Компонент

Количество

15-20 г

0,5-1,0 r

0,05-0,1 r

Лаурилсульфат натрия

1,0-1,5r

0,3-1,0г

Таблица 28

Таблица 29

Фталат гидроксипропилметилцеллюлозы

Полиэтиленгликоль - 6000

Дихлорметан

Гидроксипропил - метилцеллюлоза - !

Тризтиламин

Лимонная кислота

Силиконовая зм льсия

Инсулин

Вода

Shinwa laku hin

Япония

Као Sekken, Япония

Япония, lakurl Kagaku (224144) 0,2 г на 100 мл смешанного раствора, описанного выше, добавляется и растворяется (темно - коричневого цвета ), Н 5,2-5,6 смешивается и и темпе а е около 30-32,5ОC.

Shlnaw lakuhin Япония (191184) Япония, Wako Kagacu

lakuri Kagaku, Япония (КА91-05) lakurl Kagaku, Япония (316- 05) (необходимо для получения конечного содержания в капсуле 2-20 ед.) до получения конечного объема 400 мл, рН равен приблизительно 1,2 - 2,5

1814559

Таблица 30

Табл и ца 31

Таблица33

Табл и ца 34

Табл и ца 32

Уровни содержания сахара в крови после введения орального Инсулина перорально

1814559

Компонент

Количество

Триэтиламин

Лимонная кислота

1,55- 3,22 г

0,08 M

Таблица 35

Изготовитель / Q па тии

Wako Kagaku, Япония

Yakuri Kagaku, Япония

КА 9105

Таблица 36

1ЮОИ

1814559

1814559 (яЗи) 1814559

З00

0 1 2 Э 4 $ Ь

Фие У

Д 200

0 1834559

0 1.0 20 30 4.0 S.О

S0 Ь 0

0 10 20 30 40

Фиг. /5

Фин /2

О 10 20 ЭО

40 SO О

40 50 60

Фиг. Й

bur. /5

Ю

ВФ

10О

0 10 20 30 4.0 3.0

О 10 20 30 40 S..O 6.0,400 О

° Ф з ф

1 350

1814559

400

Зео й

Мо з

«с

0 «о го эо ао з.о

>uz. /В

Фиг. f9 яз

gaS0

«S0 о 10 го Эо 40

S..О Е.О О во г.о з о

Фиг. 2Г

Фиг. РО

«00«4

ЯЭ4е «зг«83

68.6 «48 -68)

ОЕЯВ «ОЗ6-0ЕЗ«

200

Фиг. 22 б

40О

ЧЭ ье

3 360 a

>, зоо о со го зо 4о

1814559

58

Ьи/во ео

2 3 4 В

Фиа. Р5

< mt/dll го

6.0 Kg

Ыо.zIu/ > ко п.O Iu/ а О.OI0/ 1

0 6О В ЕО

Фие.2б, 1814559 (rag /ЮО а() мо

100

40

250

2о 4о

1 2 3 4

Фиг. 37

2 3 4 5 (0.49-0.63)

0,(1-0. (8)

566 /Kg)

4 /Kg)

6 (0.65-073)

2 (0.(9-04Ы

1814559

300

100

4 5

Фие.2Ó

Редактор

Заказ 1836 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

{Mg%)

400

Составитель Н,Дошкина

Техред М.Моргентал Корректор И.Шулла

Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения Способ получения композиции инсулина для орального введения 

 

Похожие патенты:

Изобретение относится к способам получения фторполимерных пленок с капсулированными жидкостями, используемых для футеровки изделий, контактирующих с аммиаком или аминами

Изобретение относится к технологии получения микрокапсул, содержащих активно действующие вещества, способные воздействовать на окружающую среду

Изобретение относится к способам получения компонентов паст для толстопленочной технологии покрытий

Изобретение относится к получению микрокапсул не растворимых или слаборастворимых в воле веществ, используемых в текстильной промышленности

Изобретение относится к способу получения полифосфата аммония, закапсулированного в оболочку из эпоксидной смолы, используемого для снижения горючести полимерных пленок, в частности поливинилацетатных пленок

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности , и касается способа получения масляной суспензии интерферона

Изобретение относится к биотехнологии , в частности к способу получения растительного лецитина, который может использоваться в медицинской, косметической и пищевой промышленности

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, а именно к борьбе к колибактериозом птиц

Изобретение относится к области медицины и касается фармакотерапии инфекционных заболеваний, а именно способов лечения рожистого воспаления

Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности, а именно к способам получения инсулина

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии
Наверх