Способ количественного определения сульфаниламидных препаратов

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 21/78

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К. АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4905647/04 (22) 29,01.91 (46) 23.05,93. Бюл. № 19 . (71) Научно-исследовательский институт химии Саратовского государственного университета им. Н,Г, Чернышевского и

Саратовский медицинский институт (72) P.Ê. Чернова, Н.Н. Гусакова, Г.М, Бори.сова, Л.И, Масько и Л,Г. Кошелева (56) Штале Л.Ж.,Эниня Г.Л. Использование . индофенольной реакции для определения некоторых лекарственных препаратов, содержащих аминогруппу. — Рига: Наука— практика, фармации, 1974, с,86-190.

Коренман И,М. еФотометрический анализ". Методы определения органических соединений, — M,: Химия, 1970, с.342..

Авторское свидетельство СССР

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного фотометрического определения сульфаниламидных препаратов (САП) —. сульфацила натрия, стрептоцида, норсульфазола раств., сульфапиридазина, этазола, сульфадимизина, фталазола, уросульфана, сульфалена, Цель изобретения — снижение предела обнаружения и повышение селективности определения.

Поставленная цель достигается тем, что для определения сульфаниламидных препаратов в качестве органического реагента используют и-диметиламинокооич. ный альдегид в количестве 4,57.10

4,57 10 моль в присутствии додецилсуль„„5LJ„„1817008 А1

2 т

¹ 1422118, кл. G 01 N 21/78, 1988. (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕ

ДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАНИЛАМИДНЫХ ПРЕ

ПАРАТОВ (57) Использование; в аналитической химии, а именно в способах количественного фотометрического on ределения сул ьфаниламидных препаратов, Сущность изобретения; анализируемую пробу обрабатывают и-диметиламинокротичн ым альдегидом с концентрацией в реакционной смеси

4,5 10 — 4,5 10 моль в присутствии

4,0 102 — 4,0 10 2 М додецилсульфата натрия, в соеде цитратного буферного раствора при рН среды 2,0-4,0. 9 табл. фата натрия (ОСйа) с концентрацией в реакционной смеси 4,0 10 — 4,0 10 моль в

-3, -2 среде цитратного буферного раствора при рн 2,0-40, При добавлении к анализируемым растворам, содержащим САП, органического (.„) реагента и-диметиламинокоричного аль- С) дегида (n — ДМАКА) в среде цитратных бу- . QQ ферных рвотворов смесь окрашивается в ярко-желтый цвет, при введении s ту же смесь раствора DCNa — визуально наблюдается изменение окраски раствора от яркожелтой до ярко-малиновой.

Установлены оптимальные условия определения сульфаниламидных препаратов с

n — ДМАКА в присутствии DCNa, 1817008

0,05 мкг/мл — следовательно, это и есть уверенно определяемый предел обнаружения.

Изучена зависимость предела обнаружения САП (на примере фталазола) от значения рН, концентрации n — ДМАКА, кон центрации DCNa (табл.4 — 6) Анализ данных, представленных в табл.4 — 6 показал, что ошибки определения

"0 сульфаниламидных препаратов минимальны при концентрации n — ДМАКА 4,57.10

4,57.10 моль, концентрациях DCNa 4 10

4 10 моль и рН среды 2,0 — 4,0.

Исследован широкий круг лекарственных препаратов, которые могут быть назначены больным совместно с САП (табл.7), Соотношен и е сул ь фа н ил а м идн ых

20 препаратов к мешающему компоненту было выбрано 1:1, согласно и риписываемой рецептуре с лечебной целью, причем концентрация мешающего компонента взята на порядок больше, чем используют в медицине. Результаты, приведенные в табл.7, свидетельствуют а том, что совместно применяемые с лечебной целью лекарственные препараты совершенно не оказывают мешающего действия на резульЗ0 таты определения сульфаниламидных препаратов.

Подчинимость системы САП вЂ” ДМАКАDCNa закону Бугера — Ламберта — Бера наблюдается в интервале концентраций САП

0,05 — 5,0 мкг/мл, Установлено, что по заявляемому способу определения сульфаниламидных препаратов возможно нахождения как больших, так и малых концентраций пре40 паратов:

Этазол

Сульфацил натрия

Сульфапиридаэин

Норсул ьфазол

Фталазол

Сульфадемиэин

Уросульфан

Сульфален

Оптимальным количеством п — ДМАКА, необходимым для определения САП, является 0,1 — 1,0 мл 0,2),-ного раствора или в пересчете на Ср ь составляет

4,57 10 — 4,57 10 моль, Ошибки определения сульфаниламидных препаратов в интервале указанных концентраций минимальны и возрастают при Ср г < 4,5 10 и Срв> 4,5 10 моль (табл,1).

Установлено, что концентрация DCNa в реакционной смеси должна составлять

4 10 — 4 10 моль, что достигается при добавлении раствора ПАВ в количестве 1 мл

10 моль — 1 мл моль. При концентрации

- DCNa С < 4 10 моль и С > 4 102 моль ошибка определения САП увеличивается (табл,2).

Все дальнейшие исследования проводили с растворами следующих концентраций и — ДМАКА — 1,14.10 моль (0,2 -ный раствор) вводили 0,1 мл в реакционную смесь и 10 M раствора DCNa вводили 1 мл.

Регистрацию аналитических сигналов системы проводили на КФК-2 А = 540 нм, Доказательство диапазона определяемых содержаний показано на примере двух сульфаниламидных препаратов: сульфапиридазина и уросульфата в табл,З, Таким образом, по заявляемому способу можно определять как большие(1 — 6 мкг/мл), так ю маленькие (0,05 — 2,0 мкг/мл) концентраций сульфаниламидных препаратов, используя при этом кюветы с различной толщиной поглощающего слоя 1 = 1 см и ! - 5 см. Ошибка определения не превышает 4 — 8 .

Нижняя граница диапазона определяемых содерЖаний уросуаьфана составляет

Стрептоцид белый (раств.) 1) 0,1 — 2,0 мкг/мл, 2) 0,05 — 1;0 мкг/мл, 1) 1;0 — 50 мкг/мл, 2) 0,05 — 5,0 мкг/;лл, 1) 1,0 — 50 мкг/мл, 2) 0,05 — 5,0 мкг/мл, 1) 0,1 — 6,0 мкг/мл, . 2) 0,05 — 1,0 мкг/мл, 1) 0,05 — 5,0 мкг/мл, 2) 0,05 — 1,0 мкг/мл, 1) 0,05 — 2,0 мкг/мл, 2) 0,05 — 1,0 мкг/мл, 1) 0,1 — 4,0 мкг/мл, 2) 0,05-1,0 мкг/мл, 1) 0,1-2,0 мкг/мл, 2) 0,05-1,0 мкг/мл, 1) 0,1-5,0 мкг/мл, 2) 0,05-1,0 мкг/мл, 1=1см

1=5 см

1= 1 см

1= 5см

1=1 см

1=5см

1=1 см

1=5см

1=1 см

1=5см

I-1 см

1=5см

1=1 см

1= 5см

1=1 см

1=5см

1=1 см

1= 5см

1817008

В табл,8 представлены данные, показывающие преимущества предложенного способа.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами, Пример 1, Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрического определения больших количеств САП.

Точную навеску субстанции сухого препарата, например, этазола (0,025 г) помещают в мерную колбу емкостью 25 мл и растворяют в 10%-ной соляной кислоте. Стандартный раствор содержит 1 мг/мл этазола, Для построения градуировочной характеристики в мерные колбы емкостью 25 мл отмеряют

0,25 мл (1 мкг/мл) рабочего раствора этазола с концентрацией 100 мкг/мл, 0,12 мл (5 мкг/мл), 0,25 мл (10 мкг/мл), 0,5 мл (20 мкг/мл), 0,75 мл {30 мкгlмл), 1,0 мл (40 мкг/мл), 1,25 мл (50 мкг/мл), 2,5 мл (100 мкг/мл) стандартного раствора этэзола с концентрацией 1 мг/мл, добавляют в каждую колбу по 0,1 мл 0,2%-ного раствора n — ДМАКА, по 1 мл.10 У рас-твора DCNa и доводят объем до метки цитратным буферным раствором с рН 4,0.

Оптические плотности полученных растворов измеряют на КФК-2, в кюветах с толщиной поглощающего слоя! = 1 см при

А - 540 нм, относительно раствора сравнения, содер>кащего 0,1 мл 0,2%-ro раствора .n — ДМАКА и 1 мл 10" M раствора DCNa, буферный раствор с рН 4,0; поркисленный

10%-ой соляной кислотой, По полученным данным оптической плотности строят зависимость А = f(C), Закон Бугера-Ламберта—

Бера выполняется при концентрации этазола 1-50 мкг/мл, Аналогичны методики определения сульфадимезина и фталазола.

Методики определения уросульфата и сульфолена отличаются лишь тем, что среда создается цитрэтным буферным раствором с рН 3,0 и 3,4 соответственно, Пример 2. Построение градуировочной характеристики для количественного фотометрического определения малых количеСтв сульфаниламидных препаратов, Для построения градуировочной характеристики используют раствор уросульфана с концентрацией 10 мкг/мл. В мерные колбы емкостью 25 мл отмеряют 0,12 мл (0,05 мкг/мл), 0,25 мл (0,1 мкг/мл), 1,25 мл (0,5 мкг/мл), 2,5 мл (1,0 мкг/мл), 5 мл (2,5 мкг/мл) рабочего раствора уросульфана с концентрацией 10 мкг!мл, добавля- ют в каждую колбу по 0,1 мл 0,2;4-ного раствора п — ДМАКА и по 1 мл 10 М раство-1 ра DCNa, доводят до метки цитратным бу ферным раствором с рН 3,0. Оптические плотности полученных растворов измеряют на КФК-2 в кюветах с толщиной поглощающего слоя I = 5 см при it= 540 нм, относительно раствора сравнения, содержащего 0,1 мл

5 0,27;-ного раствора и — ДМАКА, 1 мл 10 М раствора DCNa и буферный раствор с рН 3,0. По полученным значениям оптической плотности строят зависимость А = f(C).

Закон Бугера — Ламберта-Бера выполняется

10 при концентрации уросульфэна 0,05-2,0 мкг/мл. Аналогичны методики определения малых количеств сульфалена. Для определения этазола, сульфадимезина, норсульфазола и фталазола используют цитратный

15 буферный раствор с рН 4,0. Для определения сульфацила натрия, стрептоцида белого (раста.), норсульфазола (раств.), сульфапиридизина используют цитратный буфсрный раствор с рН 2,0, 20 Пример 3, Определение сульфаниламидных препаратов в лекарственных формах, Для определения белого стрептоцида и сульфадимезина в таблетках, точную наве25 ску растворяют в 3%-ном растворе соляной кислоты в мерной колбе eìêàcòüþ 100 мл, при этом применяемые порошки полностью растворялись, Затем разба.ляют дистиллированнойй. водой и риблизител ьно до

30 концентрации 0,1%-ного раствора. Далее прибавляют все растворы, как указано в примере 1, Для определения бело о стрептоцида в мази около 1 г мази помешают в стакан

35 емкостью 50 мл, приливают 3 мл хлороформа, 10 мл разведенной соляной кислоты, помешивают стеклянной палочкой в течение 5 минут, Полученную жидкость переносят количественно через бумажный фильтр

40 в. мерную колбу емкостью 50 мл и доводят до метки дистиллированной водой. После этого отбирают аликвоту (7,5 и 12,5 мл „ раствора, разбавленного в 100 раз водой), добавляют 0,1 мл 0,2%-ного раствора

45 и — ДМАКА и 1 мл 10" М раствора ОСКа, доводят до метки буферным раствором с рН

2,5 и измеряют оптическую плотность на

КФК-2 в кюветах с толщиной поглощающего слоя I = 1 см, Результаты представлены в табл,9, Формула изобретения

Способ количественного определения сульфаниламидных препаратов путем обработки анализируемой пробы и-диметиламинокоричным альдегидом в кислой среде с последующим .фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью снижения предела обнаружения и повышения селективности вироделе1817008 ния, и-диметилэминокоричныйальдегидис- сульфата натрия, взятого в количестве пользуют в количестве 4 57 10 — 4,57 10 4.0 10 — 4,0 10 М, в среде цитрэтного

M. обработку ведут в присутствии додецил- буферного раствора при рН 2,0 — 4,0.

Таблица 1

Ф

Определение содержания зтазола при различной концентрации реагента и-диметиламинокоричного альдегида (Сдси = 1,0 М, 1.10 моль, КФК вЂ” 2, 1= 1 см)

Таблица 2

Определение содержания зтазола при.различной концентрации реагента додецилсульфата натрия (Сдмдкд = 1,0 мл 0,2 -ного раствора или 4,57 10 моль, КФК вЂ” 2, I = 1 см)

Таблица 3

Доказательство диапазона определяемых содержаний на примере сульфапиридазина (для больших количеств) и уросульфана (для малых количеств) (Сдмдкд = 1,0 мл 0,2 -ного раствора, Cpctua = 1 мл 10 моль, рН 3,0-4,0) 1817008

Продолжение табл. 3

Таблица 4

Зависимость значения предела обнаружения от концентрации реагента и-диметиламинок0ричного альдегида (рН 2,0, CgcNa = 1мл 10 моль, КФК вЂ” 2,! = 1 см, 1 = 540 нм)

Таблица 5

Зависимость значения предела обнаружения норсульфазола от концентрации ДСйа (pH 2,0, Сдмдкд =4,57 10 М, КФК-.2,Л.=540 нм, I = 1 см) 1817008

Таблица 6

Зависимость значения предела обнаружения от рН среды (Слмдкд = 0,1 мл 0,2 ф -ного раствора, Cpcga - 1 мл 10 1 М, КФК вЂ” 2, il = 540 нм, I = 1 см) Таблица 7

Исследование влияния мешающих компонентов на результаты определения сульфанила-. мидных препаратов (на примере стрептоцида) с и-ДМАКА и ДСИа (рН 2,0, Сдмдкд = 4,57 10 М, CpcNa = 4 10, Смещ . СОАп = 1:1, КФК 2, il = 540 HM) Мешающий компонент

Погрешность,$

Стрептоцид, мкг найдено взято

30,0

29.58

1,4

Эуфилин

ЗО,О

29,49

30,О

29,76

0,8

29,46

1,8

30.0

29;61

1,3

30,0

30,О

1,8

30,0

3,2

30,0

30,0

1,5

2,2

0,9

30.0

29,73

30,0

2,5

30,0

1,2

30,0, 30,0

30,0

1,9

2,4

0,7

2,1

30.0

30,0

1,6

3,4

30,0

30,0

30,0

2,6

3,8

Папаверина гидрохлорид м

Атропина сульфат

Димедрол

Дроп еридол

Дибаэол

Натрия оксибутират

Глюкоза

Хлористый калий

Окситоцин пептидный гормон задней доли гипофиза

Но-шпа

Этионамид

Мочевина

Метионин

Глутаминовая кислота

Аминокапроновая кислота

Аминоуксусная кислота

Д-три птофан

Изониазид (тубэзид)

Фтивазид

29,46

29,04

29,55

29,34

29,25

29,64

29,43

29,28

29.79

29,37

29,52

28,98

29,22

28,86

1817008.

Таблица 8

Показатели!

Селективность см, табл. 7

1,5-3,0

Среда,рН

Предел обнаружения

Диапазон определяемых содержаний

Устойчивость сигналов анализируем, формы, час

Объекты анализа

Органические реагенты

Заявляемый способ

0,05 мкгlмл

1 — 50 мкг/мл, - 1 см

0,05-2,0 мкг/мл,! = 5 см

Цитратный буфер рН 2,0 — 4,0 а) Лекарственные формы б) Возможно определение

САП в присутствии других лекарственных форм

0,2, -ный раствор и-диметиламинокоричного альдегида (n-ДМАКА) с концентрацией в реакционной смеси 4,57 10 моль

Додецилсульфат натрия (ДСйа) в количестве 4 ° 10 М

Продолжение табл. 7

Прототип с ДМБА

0,1 мкг/мл

0 1 — 5,0 мкг/мл, I = 1 см

Сведения не приведены

Лекарственные формы

0,2 -ный раствор и-диметиламинобензальдегида (и-ДМАБА) 1S17008

Таблица 9

Составитель Н, Гусакова

Техред M. È1îðlåíòàë Корректор О. Густи

Редактор Т. Шагова

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 1719 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35, Раушскэя наб., 4/5