Способ получения красителя кислотного ярко-синего

 

Использование: способ получения красителя кислотного ярко-синего, используемого в микробиологии для анализа иммунных преципитатов при электрофорезе . Сущность изобретения: способ получения красителя кислотного ярко-синего заключается в том, что триарилметановый зеленый краситель подвергают взаимодействию с п-фенетидином в присутствии вторичного или третичного ароматического или гетероциклического амина - М,М-диметиланилина или пиридина, или о -пиколина, или хинолина. Выход красителя 62-70%, молярный коэффициент светопоглощения водного раствора красителя составляет (8,0-8,5) .Ш дм3-моль- .смпри 552 нм. 1 табл. Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СО ЦИАЛ И СТИЧ ЕС КИХ

РЕСПУБЛИК (gg)s С 09 В 11/20

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) (21) 4846060/05 1 (22) 02.07,90 (46) 23.08,93. Бюл. Ю 31 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт химических реактивов

I и особо чистых химических веществ (72) И,А.Красавин, Н.Л,Родионова, В,Н.Глушко, И.В.Авраменко и Н.Н.Высокова (56) С.M.!Jitson, — analit. Biochim, 1979, 96, р. 263-278.

Патент Германии !" 293352, кл. 22Ь, 15, 1913. Патент Германии " 292998, кл, 22Ь, 16, 1913.

Патент Германии Р 293352, кл. 22Ъ, 16, 1913.

Авторское свидетельство СССР

h" 159907, кл. С 09 В 11/20, 1964.

Изобретение относится к органической химии, а именно к технологии получения красителя кислотного ярко-синего (С.1. 42660), который широко применяется в микробиологии для анализа иммунных преципитатов при электроФорезе.

Для более тонкой и дифференцированной характеристики преципитата окрашивание белков должно быть контраст.ным, интенсивным, высокочувствительным. ЭФфективность окрашивания зависит от качества красителя, основным показателем чистоты которого является молярный коэФФициент при максимуме светопоглощения его водного раствора. Ы 1835414 А1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КРАСИТЕЛЯ КИСЛОТНОГО ЯРКО-СИНЕГО (57) Использование: способ получения красителя кислотного ярко-синего, используемого в микробиологии для анализа иммунных преципитатов при электрофорезе. Сущность изобретения: способ получения красителя кислотного ярко-синего заключается в том, что триарилметановый зеленый краситель подвергают взаимодействию с и-фенетидином в присутствии вторичного или третичного ароматического или гетероциклического амина — N,N-диметиланилина или пиридина, или в -пиколина, или хинолина. Выход красителя 62-703, молярный коэффициент светопоглощения волного раствора красителя составляет (8,0-8,5) 1О дмз моль см при

552 нм. 1 табл. вювй ,Для высокочувствительных анализов

ОО молярный коэффициент светопоглощения при длине волны 552 нм должен быть

7,0 !04

Однако образцы красителя, получаемые известными методами, содержат це- Ф лый ряд примесей окрашенных и неокрашенных органических веществ неиз! вестного строения, а также значитель.ное количество неорганических примесей.

Недостаточная чистота влияет на связывание красителя с белком и затрудняет его практическое применение.

Окрашивание полос должно быть интенсивным и четким. Количественная ин1835414.".l!i".p<:т -л !}(}с}}11,}х п<>лу -!е!!Iных при .1! }}и". 1: 1 : J! . ь" лае! 3" т1 урн". ! с>.-. -,, --.Л:; í" Oeo!- I-IC.", т.Е.

1}р.;,, .: }л c<>uné !}!}д}«ь!кдуальное имич„с,<".. !1:.!:, е тво, 0 1<ат:}„ !ог» <1}лр>«ы "301v» (ФРГ) лл англ .11! }..о} о кислотному ярко-сиему кр:1;:и!. !!}, Яегта В}1«}е 1!, указан

oJl!!1>!!!!й I T!: .!1}1!циент свстопо лощевод! < го раствора 1>,/ ° 10 при длие !!олг! i„},2 } lм.

Выли .-.:!«:"! риментально оп1>еделень> оллрные ко.:: .,ицие!!}ы сиетопоглощения ри 552+2 }-!с:, в<>дного раствора obpaaов красителя <}>!<р!}и "В1о-Rad" (СШд) ,А1 10, фирмы "Р1 (Е!сейцария) ,3 10< H с>ирмы "harv;." (<1>Рг) 4,7.10 .

1<раситеJIL может бь!Ть си>}тезирован агреванием п.-фен тидина при темпера» 2О уре 120-130 С с зелен>:ми диаминориаркл-матановыми красителями, полуенными кон,г«енсацией N-зтил-N - ((3сульфса>енил) метил)гнили>!а с паразаещенными бензальдегидами, в част- 25 ости с п=хлорбензальдегидом, и-нитобензальдегидом или анисовым альдеидом, Накболее близким к предложенному

:пособу по технологии и достигаемому 3О

}езультату является способ получения .расктелл кислотного ярко-синего, С,1„42<>60) путем конденсации диами«отриарилметанового крас;}телл Кис:отный зеленый 2Р с и-фенетидином прису-}стеки ки лых катализаторов, -: качестве катализатора применяют

:оляную кислоту или нитротолуолсуль, >окислоту, реакцию проводят при тем «ературе .20-130 C. Выход целевого «родукта в описании изобретения не

> казан, показатели качества отсутствуют. Проведенная проверка метода, выписанного в прототипе, показала, что он не позволяет получить краситель с молярным коэффициентом светопоглощенил при 55?+2 нм выше 4,0.10

Выход целевого продукта не превышает

403 от теоретического в связи с тем, что при исг}ользованик кислотных катализаторов образуется большое количество побочных продуктов, происходит осмолен}«е и спекание реакционной массы, Целью изобретенил является повышеjIHe чист}оти красителл 1!ислотного ярко-си}-,-r o, !

Поставлсс}!1«;}л цсль достигаетсл тем, что реакцию исходных зеленых красителей с и-фе>«е 1.«ди}-}о>«проводят в пр!«сутствии вто}>1«иных или третичНЫХ аРОМатИЧЕС1<ИХ HJ!H ГЕтс РОЦИКЛИЧЕС»

lмк1 нов (!11 N ДI, тилан «л1«н > пири дин„ с<,-пиколин, хинолин) при 80100ОС„

В реакцию с и-фенетидином можно вводить различные зеленые диамкнотриарилметановые красители (см. таблицу), При проведен.ли реакции с кислотным зеленым 2К (смесь кзомеров) молярный коэффициент водного раство-, ра красителя достигает 6,1" 10- при ф. длине волны 552 ". нм.

При введении в реакцкю зеленых диаминотриарилметановых красителей

I, II, III, содержащих сульфогруппы в бензильнь!х радикалах в метаполо>!«енки, получены образцы с молярным козффкциен!-ом светопогяощенил (8,08,5) 10 дмз- моль см при 552+1 нм..

Выход красителя составляет б5-703.

Приме р ы 1-10. 100 г (0,14 моль) зеленого красителя, 288 г (2,10 моль) и-фенетидина и 100 смз амина (И,N-диметиланилина, N-метиланилина,<}<,-пиколина, пиридина, хинолина) нагревают при перемешивании

4 ч при температуре 80-100 С, Реакционную мaññó выливают в разбавленную соляную кислоту, перемешивают и охлаждают до комнатной температуры. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат при температуре 105 С. Высушеннь!й краситель промывают ацетоном, а затем переводят в натриевую соль, применяя изве-. стные методы.

Выходы и моллрные коэффициенты поглощения водных растворов красителл кислотного ярко-синего приведены в таблице длл соответствующих аминов и заместителей у зеленого красителя.

Формула исходного соединения

P ñí;N-< >-с N-сн,-Г

1 КО С Н 1. С Н $0, R, формула и з обретен и я

Способ получения красителя кислотного лрко-синего путем взаимодействия триарклметанового красителя с п-«1>ejleтидином, о т л и ч а ю щ и йс л тем, что, с целью повышенил чистоты целевого продукта, в качестве триарилметанового красителя используют соеди:«ение общей формулы

83У,1с, 6

ГД» R — OCH" "0 if(Cl

1 а взаимодействие l..-.2äóò в присутствии вторичного или т()етичн ;2ГО аромз тического или Гетероциклического амина пр«, 80-100 С, о

С ()

R (i y .— /

F3&gl 1

«

Пои..:,=-р

Выход, 3 Е „, ВОДНОГО раствора

Катализатор

ИсхОднОе соединение

-ncI-

3I, »н»

-0CH >

-0 Na

II»

-ОСНN,N-диметиланилин

7,3 10

N-метиланилин

Составитель Т.Калинина

Редактор Г.Нельникова Техред И.Иоргентал Корректор Т.Вашкоаич

Подписное по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

И-35, Раушская наб,, д. 4/5

:1аказ 2";- /О TH pe%

ВНИИПИ Осударственного комитета

113035, Москва, Производственно-издательский комбинат "Патент", f, Ужгород, ул, Гагарина, 101

6

Пиридин

М-пиколин

Хинолин

Пиридин

Пиридин

Ы пиколин

Пиридин

Пиридин

68

62

",3 10

8,4 10

8,0 10

8,3 10

8,1 ° 10

8,Z 104

6,1 10

7,1.104

7,1 10