Способ получения кристаллического циклоспорина в несольватированной орторомбической форме

 

Сущность изобретения, переведение кристаллического циклоспорина в несольватированную орторомбическую форму. Условия процесса: в растворителе с молм более 200. обеспечивающим его растворение при повышенной температуре. 3 таба

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К. ПАТЕНТУ

Ь>

СР

СР

ЬЭ

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 461 3289/04, (22) 21.12.88 (31) 87 136230 (32) 21.12.87 (ЗЗ) VS (46) 15.11.93. Бюл. Иа 41 — 42 (71) Сандос АГ (СН) (72) Даниэль Жирон(Щ; Мартин Лист(ОЕ); Фридрих

Рихтер(ОЕ); Ясуиуки Ywe(JP); Ханс Петер Вебер(СН) (73) Сандос АГ (СН) (v) Е1Д пц 2002754 1 (5Ц5 С07К7 64 А61К9 00 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО ЦИКЛОСПОРИНА В НЕСОЛ6ВАТИРОВАННОЙ ОРТОРОМБИЧЕСКОЙ ФОРМЕ (57) Сущность изобретения: переведение кристаллического цикпоспорина в несольватированную орторомбическую форму. Условия процесса: в растворителе с моли более 200, обеспечивающим его растворение при повышенной температуре. 3 табл.

2002754

Изобретение относится к синтезу терапевтически активных соединений и касается получения. кристаллического циклоспорина в несольватированной орторомбической форме.

Циклоспорин или циклоспорин А, является известным грибковым метаболитом, имеющим ценную фармацевтическую активность.

Циклоспорин является циклическим полй-Nметилированным эндекапептидо формулы

MeBmt -дАБи-5ar-МеЛей-Вал-МеЛей1 2 3 4 5 6

-Ала-(0)Ала-МеЛей-МеЛей-МеВал

7 8 9 10 . 11 в которой -MeBmt- представляет N-метил-(4й)-4-бут-2Е-ен-1-ил-4-метил-(() треониловый остаток.

В твердом состоянии циклоспорин существует и в аморфной, и в кристаллической форме. В кристаллическом состоянии известными являются тетрагональная, и opto ромбическая модификация.

Тетрагональная модификация (Р4 1), обозначенная здесь для удобства как "СуА/Х-1", описывается вместе со способами его получения, например, в описании изобретения к патенту Австрии N 353961 СуА/Х-1 имеет кристаллическую решетку

0 0 а=в=13,8 А с = 41,2 А, объем на асимммето . рическую единицу = 1974 А 3, температуру плавления приблизительно при 140-150 С и содержит приблизительно 2 молекулы Н20 на молекулу Циклоспорина.

Первая орторомбическая модификация (Р212121) получается путем перекристаллизации из диизопропилового эфира.

Эта отдельная модификация содержит сольват Циклоспорин/диизопропиловый эфир (Приблизительно 1;2), с кристалличео 0 ской решеткой а = 12,5А, в = 22,9.А, с = 28,4 о

А, об..=-м на асимметрическую единицу =

=2027 АЗ, и температуру плавления приблизительно при 150 С. Орторомбические кристаллы Циклоспоринового сольвата получаются путем перекристаллизации перенасыщенных растворов Циклоспорина в соОтветствующей растворяющей среде в пределах продолжительного периода времени. Орторомбическую модификацию сольвата Циклоспорин/диизопропиловый эфир, получают добавлением концентрированного раствора Циклоспорина в хлористом метилене (в котором Циклоспорин довольно легко растворяется) к диизопропиловому эфиру (в котором Циклоспорин относительно менее растворяется) и выпариванием хлористого метилена. Кри55 повышенной температуре, и затем охлаждают, Таким образом, подходящим для использования в вышеуказанном способе являются, в частности, растворяющие среды для Циклоспорина, включающие компоненсталлизации из остающегося диизопропипоаого эфира позволяют затем протекать в течение 7-дневного периода времени при температуре окружающей среды; Орторомбическая кристаллическая форма, включающая такие Циклоспориновые сольваты, обозначена здесь как "Су-А/Х-П".

Использование циклоспорина на прак. тике выдвигает проблему обеспечения гале10 новых форм, позволяющих удобный и удовлетворительный прием, а также наиболее пригодных Циклоспорин уже идентифицирован в .качестве сильнодействующего лекарственного средства.

Эти трудности связаны с физическими характеристиками циклоспорина, например с его относительно ограниченной растворимостью или, совместимостью с доступным, фармацевтически применимым носителем.

Разнообразные системы предложены для ввода циклоспорина, включая галеновые формы, предназначенные для местного или кожного применения или для офтальмологического применения, т.е. наружного

25 применения для глаз, для возможного использования при лечении псориаза, других дерматологических болезней и состояний, например, атопического {аллергического) дерматоза и алопеции (облысения), или для

30 лечения увеита. Такие системы, однако, до сих пор не дают удовлетворительных результатов.

Способ по изобретению направлен на получение новой кристаллической формы, имеющей улучшенную или благоприятную биодоступность. и терапевтическую актив-. ность, или улучшенную перерабатываемость в галеновые препараты, или улучшенные характеристики употребления.

40 В соответствии с изобретением неожиданно было выявлено, что орторомбические кристаллические формы циклоспорина представляют особенное преимущество и выгоду при приготовлении галеновых соста45 вов циклоспорина разнообразного и разного вида.

Согласно изобретению способ получения кристаллического циклоспорина в несольватированной форме отличается тем, 50 что циклоспорин в форме, отличной от несольватированной орторомбической формы, растворяют при нагревании в растворителе с молекулярным весом более

200, обеспечивающем растворение его при

2002754 ты высокомолекулярных растворителей, например, имеющие мол.м. 200. Особенно подходящими являются среды, включающие высокомолекулярные простые эфиры, в частности, полимерные эфиры, например, полиакриловые эфиры, например, полиэтилен-и полипропилен-гликоли. Примерами полимерных эфиров которые, как было найдено, являются соответствующими, являются полиэтилен- и пропилен-гликоли, например, имеющие мол. м. 200; глицерин-полиэтиленгликолевые сложные эфиры, например, глицерин-полиэтиленгликоль-рицинолеаты и глицерин-полиэтиленгликоль-оксистеараты; полиоксиэтилен-сорбитановые сложные эфиры; полиоксиэтиленовые сложные эфиры, например, сложные эфиры полиоксиэтилена и стеариновой кислоты; и продукты транс-этерификации триглицеридов натуральных масел и полиалкиленполиол о в, в кл ючая продукты транс-этерификации маисового масла, пальмоядрового масла, миндального масла. арахисового масла, оливкового масла, пальмового масла и их смесей и полиэтиленгликолями, в частности с полиэтиленгликолями, имеющими мол,м. от 200 до 800.

Особенно подходящими являются среды, включающие полиэтиленгликоли, имеющие молекулярную массу приблизительно

200 до примерно 600, в особенности от

300до примерно 400.

Растворяющая циклоспорин среда может включать один или более компонентов в дополнение к перечисленным выше компонентам, например, более низкомолекулярных спиртов и/или воды, в качестве средства модифицирования характеристик кристаллизации растворителя. Особенно пригодной является смесь приблизительно

0,5 ч на объем эталона, приблизительно 8,0 ч на объем полиэтиленгликоля (300) и приблизительно 1,0 части на объем Нг0.

Способ по изобретению включает сначала растворение циклоспорина, например, в аморфной или тетрагональной форме, в выбранной среде при повышенной температуре. Температура растворения конечно должна. изменяться в зависимости от конкретно выбранной среды, но в большинстве случаев должна быть > 40сС, особенно

>50 С. В случае сред на основе полиэтиленгликоля температура растворения в большинстве случаев должна составлять 70 С, например, приблизительно 75-130 С. Соответствующим образом полученный раствор должен включать > 5% предпочтительно

10%, например, вплоть до примерно 4060%, предпочтительно вплоть до максимального 20 мас,% Циклоспорина в расчете на общую массу раствора. Затем оставляют

15 . жет быть легко инициировано при темпера35

50

30 протекать кристаллизации циклоспорина с охлаждением в течение относительно продолжительного периода времени, например, порядка 10-35 мин или более в зависимости от желательного роста кри. сталлов.

Если необходимо могут быть использованы приемы создания центров кристаллизации, например, ультразвуком или затравкой. Когда применяются содержащие кристалл среды типа этанол/полиэтиленгликоль/Н20, например, как это описано выше, было найдено, например, что образование центров кристаллизации мотурах приблизительно 60-90 С, например, приблизительно 65-86 С путем применения ультразвуковых колебаний при приблизительно 20.000 циклов в сек (герц). Как показано ниже в примере 2, путем непрерывного ультразвукового воздействия таким образом на всем протяжении хода кристаллизации, микрокристаллы могут быть получены с весьма мелким и относительно постоянным размером частиц.

Скорость роста кристаллов и размер полученных должны, конечно, зависеть от конкретно выбранной среды и условий, при которых осуществляется кристаллизация, например, применяется или нет ультразвуковое воздействие и при какой частоте. Для использования в соответствии с настоящим изобретением, например для получения галеновых рецептурных составов, кристаллический орторомбический циклоспорин должен предпочтительно применяться в тонко размолотой форме, например, со средним размером частиц < 200 ммк, например от 0,5 до 200 ммк. Когда первоначально полученные кристаллы имеют относительно большой размер, размолоты препараты, имеющие характеристики необходимого размера, могут быть получены, конечно, с помощью общепринятых методик размел ьчения, например, дроблением, раэмалыванием. превращением в порошок, микронизирования (порошкованием до микронных размеров) или в других случаях фрагментированием до измельченного размера. Хотя размолотые препараты, полученные таким образом, могут быть целиком пригодными для некоторых целей, например, при получении композиций для наружного нанесения на кожу, использование дробления или размалывания или эквивалентных методов во многих случаях не должны быть предпочтительными, Причинами для этого является то, что продукты таких методик обнаруживают относительно широкое распределение разме2002754 ра частиц и имеют грубую или шероховатую структуру в результате излома кристаллов.

Кроме того. размельчение должно вести к разрешению физических характеристик у естественной структуры кристалла и является во всяком случае трудным или дорогим, . чтобы осуществить поддержание при этом требуемых условий стерильности, например, при производстве галеновых рецептурных составов для интраартикулярного ввода. По таким причинам обычно является предпочтительным проводить способ настоящего изобретения таким образом, чтобы получить кристаллы, например;. микрокристаллы, с размерами в, пределах желаемого предела размеров конечных части ц.

Таким образом, для использования в. получении, например, композиций для интраартикулярного или другого парентерального применения, должно . быть предпочтительным использование частиц орторомбического циклоспорина в нераэмолотом микрокристаллическом состоянии (т.е. микрокристаллов в естественном или неразмолотом состоянии, которые ве были подвергнуты дроблению, размалыванию, микронизации или другим методам измельчения).

Для того, чтобы получить микрокристал-. лы орторомбического циклоспорина, которые . могут быть использованы непосредственно в неразмолотом состоянии по вышеописанному методу, способ настоящего изобретения проводить желательно с перемешиванием, например, со скоростью 200-300 об/мин, повышающейся до, например, 700 аб/мин во время кристаллизации,.и, особенно, путем применения ультразвукового колебания, например, в пределах 10000-30000 циклов (периодов) в сек,, желательно порядка примерно 20000 периодов в сек.

Пу.гам.варьирования растворителя и регулирования скорости охлаждения и степени перемешивания . во время перекристаллизации, микрокристаллы . могут быть получены с изменяющимся сред ним размером частиц, для использования индивидуальных галеновых рецептурах.

Кристаллизация в способе по изобретению должна быть осуществлена в стерильных условиях. Очистку полученного кристаллического орторомбического циклоспорина можно осуществить, например, путем промывания с помощью полиэтиленгликоля (300) и воды, в соотношении 3-4:1 вес. частей/.промывания теплой водой. Вышеуказанная стадия промывания предотвращается образованием аморфного Циклоспорина.

Циклоспорин в орторомбической кристаллической форме включают в фармацевтическую композицию в качестве активной составной части, вместе с фармацевтически приемлемым . раэбавителем или носителем его.

Хотя Циклоспорин в композициях в твердой. (кристаллической) форме, компози10 ции сами могут иметь любой соответствующий состав. Это могут быть твердые формы, такие как капсулы, таблетки, драже, порошки и гранулы, полутвердые формы, такие как мази, гели, кремы и пасты, а также жидкие формы, например, включающие определенный компонент Циклоспорина в тонко раэмолотой форме (например, . в микрониэированной или микроразмолотой форме), суспендированной или диспергиро20 ванной в жидком фармацевтическом разбавителе или носителе, в котором выбранная кристаллическая форма может быть сохранена. кристаллический Циклоспорин, должен присутствовать.. в композициях изобретения в тонкоразмолотой форме. например, микронизированной, микроизмельченной или неразмельченнрй микрокристаллической

30 форме, как это описано выше. Соответствующий размер частиц должен конечно варьировать 8 зависимости от конкретной природы композиции, ее предполагаемого использования и способа применения и же35 лаемого эффекта. Однако вообще средний размер частиц должен составлять предпочтительно от 0,5 до 20 микрон.

Компоненты фармацевтических композиций должны быть пригодны для фармацевтического применения, которое требуются, например, в случае композиций для перорального ввода, или в случае композиций для наружного нанесенйя, которые

40 являются, например, для кожи или для глаз, применимыми, приемлемыми йли допустимыми.

Дополнительные галогеновые формы для ввода эквивалентными или альтерна50 тивными методами должны быть понятны для специалиста, П р.и м е р 1. Получение кристаллическо. го орторомбического циклоспорина. а/ 100

r циклоспорина в аморфной форме раство55 ряют с перемешиванием в 400 r полиэтиленгликоля 300 при .50 С. Выделение кристаллов циклоспорина начинается вскоре после завершения. растворения. Раствор оставляют стоять в течение 24-48 ч приблизительно при 35-40 С, чтобы завершить кри25 Предпочтительно -орторомбический

2002754

Таблица1

Диаграмма рентгеновских лучей для СУ-А/Х,1 сталлизацию и затем разбавляют с 100 мл воды с энергичным перемешиванием. Пол::: ученный осадок разделяется фильтрацией, промывается водой для удаления оставшегося полиэтиленгликоля и высушиввется с

: получением орторомбического кристаллического Циклоспорина в основном в чистой форме: т. пп. 195 С, размер частиц- прибли. зительно 100-200 мкм.

Кристаллический Циклоспорин может быть получен аналогично вышеприведен - ной методике, но применяя следующие ве:щества в качестве растворителя вместо

-:.:, ;: ",йолизтиленгликоля 300.

РАСТВОРИТЕЛЬ T.ïë. для полученно го кристаллического Циклоспорина (град. С) б) Полиэтиленгликоль 300/Кремофор

RH 40 {1:1 объем) в) Кремофор EL 190

r) Солутол HS 15. 188 д) Гелукайр 44/14 180 е) Мирдж 52 184 ж) Твин 80 186

3) Кемофор РН 40 190

В каждом случае полученный средний размер частиц составляет порядка от около

50 до примерно 200 .мкм. Определенная структура решетки соответствует величинам дифракции рентгеновских лучей, представленных ниже в табл.3, Пример 2. Получение Су-А/Х-Ш (кристаллического Циклоспорина в орторомбической форме).

20 г циклоспорина в виде Су-А/Х-1 растворяют в 60 мл этанола и сгущают до 1/6 первоначального объема путем перегонки при пониженном давлении при > 60 С. Затем добавляют медленно 160 мл полиэтиленгликоля (М 300) и 20 мл воды при 50-85

С с перемешиванием со скоростью 300 об/мин. Ультразвуковой вибратор/миксер действует при 20000 Гц (периодов в с). Образование центров кристаллизации начинается при 65-75 С в пределах от 3 до 5 мин.

Полученная дисперсия затем охлаждается

5 линейно в пределах 10-20 мин до 40 С с продолжающимся перемешиванием со скоростью 700.об/мин и с ультразвуковой вибрацией. Полученная густая пастообразная смесь фильтруется, промывается теплой во10 дой (30 С) и высушивается при 50 С при высоком вакууме, чтобы получить Су-А/Х-Ш в чистой форме: т. пл. 192 С. Размер частиц

= 3-15 мкм. Определенная структура решетки такая, как это определено выше. Данные

15 дифракции рентгеновских лучей даны в табл.3.

На размер кристаллов влияют температура образования центров кристаллизации и скорость. роста кристаллов, а не продолжи20 тельности обработки. Таким путем инициирования образования центров кристаллизации приблизительно при 75 С и продолжительной кристаллизации при той же температуре получается средний размер

25 частиц кристаллов, равный приблизительно

50 мкм, Для идентификации циклоспорина в орторомбической -кристаллической форме, в

30 частности, Су-А/Х-Ш, данные дифракции рентгеновских лучей в порошке для Су-А/ХШ для двух форм Су-А/Х-1 и Су-А/Х-П, предлагаются в табл.1-3. Дифракционная диаграмма была получена, применяя камеру

35 Гянира-Де-Вольфа, используя СиК -излучео ние, 1=1,542A. (56) В Wenger. Total Synthesis-change in

40 molecular structur-biological effect:

Clclosporin as example Sandorama 1984

/ш.

2002754. Рентгенодиаграмма для СУ-А/Х-П

Продолжение табл.3

Та 6 ли ца 2

2002754

ТаблицаЗ

Рентгенодиаграмма для СУ-А/Х-Ш

Примечание. ОС вЂ” очень сильная

С вЂ” сильная

CP — средняя

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО ЦИКЛОСПОРИНА В НЕСОЛЬВАТИРОВАННОЙ ОРТОРОМБИЧЕСКОЙ

ФОРМЕ, отличающийся тем, что циклоспорин в форме, отличной от несольватированной орторомбической формы, растворяют при нагревании в растворителе с мол.м. более 200, обеспечивающем растворение его при повышенной температуре, и охлаждают.