N-дифенилфосфинилацетил, n-дифенилфосфинил-(2- гидрокси-3,5-дибром)фенилметилсемикарбазид, проявляющий нейротропную активность, и способ его получения

 

Использование: в медицине в качестве препарата, проявляющего нейротропную активность. Сущность изобретения: N_α -дифенил-фосфинилацетил, N_β-дифенилфосфинил-(2-гидрокси-3,5-дибром) фенилметилсемикарбазид ф-лы I. Б. Ф. С₃₄ Н₂₉ Br₂ N₃ O₅ P₂, выход 59%, т.пл. 200 - 201 ^oС. Реагент 1: соединение ф-лы II. Реагент 2: соединение ф-лы (С₆Н₅)₂РNСО. Условия реакции: в среде органического растворителя при 80 - 100^oС в течение 5 - 10 ч, с последующей обработкой реакционной смеси водой. Структура соединений ф-л I, II: 2 с. п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к новым химическим соединениям, а именно к бис-фосфорилированному N_α-, N_β-замещенному семикарбазиду-N_α-дифенилфосфинилаце- тил, N_β-дифенилфосфинил, (2-гидрокси-3,5-дибром)фенилметилсемикарбазиду формулы I (C₆H₅)N проявляющему нейротропную активность. Заявляемое соединение можно рассматривать как N_β-карбамидо, -N_β-бензилзамещенный гидразид дифенилфосфинил- уксусной кислоты.

В литературе известны гидразиды фосфорилированных карбоновых кислот и окисей фосфинов, содержащие при фосфоре алкильные (арильные) или алкоксильные группы формулы R₂P(O)(CH₂)_nC(O)NHNH₂, обладающие невысокой антимикробной активностью [1] Известен также гидразид дифенилфосфинилуксусной кислоты (ГДФК), проявляющий нейротропную активность [2] В спектре нейротропного действия ГДФК более выраженным является анксиолитический эффект, при этом антидепрессивное действие у ГДФК не обнаружено. По данным токсикологических исследований ГДФК относится к среднетоксичным соединениям.

Сведений о биологической активности семикарбазида (I) и способах получения в литературе нет.

Целью изобретения является синтез новых, менее токсичных соединений, относящихся к новому ряду бис-фосфорили- рованным семикарбазидам, с более широким спектром нейротропного действия.

Поставленная задача решается синтезом семикарбазида (I), проявляющего выраженную активность, сочетающую анксиолитическое, антидепрессивное и антиалкогольное действие.

Поставленная задача решается также разработкой способа получения семикарбазида (I), который осуществляют взаимодействием дифенилфосфинилацетилгидразона 3,5-дибромсалицилового альдегида с изоцианатодифенилфосфином с последующей обработкой водой. Взаимодействие осуществляют при 80-100^оС в течение 5-10 ч в растворителе.

Схема реакции O Исходный гидразон получен реакцией гидразида дифенилфосфинилуксусной кислоты с 3,5-дибромсалициловым альдегидом.

П р и м е р получения соединения (I).

К взвеси 14,8 г (0,028 М) дифенилфосфинилацетилгидразона 3,5-дибромсалицилового альдегида в 200 мл бензола при комнатной температуре и перемешивании прибавляют 6,6 г (0,03 М) изоцианатодифенилфосфина. Реакционную смесь нагревают при 80^оС в течение 10 ч. Контроль за ходом реакции осуществляют методом ЯМР³¹Р спектроскопии до исчезновения сигнала исходного изоцианатодифенилфосфина ( δ_р 53,8 м.д.). После окончания реакции к маточному раствору прибавляют при перемешивании 0,6 мл (0,033 М) воды. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают спиртом. Выделено 11,5 г семикарбазида (I). Т.пл. 200-201^оС. Выход 59% Найдено, C 52,50, 52,85; H 3,63, 3,87; N 5,50, 5,52; P 7,80, 7,53.

C₃₄H₂₉Br₂N₃O₅P₂.

Вычислено, C 52,24; H 3,71; N 5,37, P 7,93.

Спектр ЯМР ³¹Р δ_р1 32,8 м.д. δ_р2 34.9 м.д.

П р и м е р 2. Реакцию проводили аналогично примеру 1 при 90^оС в среде циклогексана в течение 9 ч. Выход целевого семикарбазида (I) составил 53% П р и м е р 3. Реакцию проводили аналогично примеру 1 при 100^оС в толуоле в течение 10 ч. Выход семикарбазида (I) 55% П р и м е р 4. Реакцию проводили аналогично примеру 1 при нагревании в ксилоле при 100^оС в течение 5 ч. Выход семикарбазида (I) 54%
При изучении биологической активности заявляемого соединения были использованы следующие методы:
исследование общего действия и токсичности при внутрибрюшинном введении;
влияние на поведение крыс в условиях конфликтной ситуации (тест Vogel, 1971);
влияние на длительность иммобилизации мышей в тесте "поведенческого отчаяния" (Porsolt, 1977, в модификации Русакова Д.Ю. и Вальдмана А.В. 1983);
влияние на формирование первичной алкогольной мотивации (Буров Ю.В. 1985);
влияние на продолжительность этанолового наркоза;
влияние на реакцию отмены этанола у алкоголизированных крыс (тест Majchrowicz в модификации Абдрашитова и соавт. 1983).

Полученные данные обрабатывались статистическим методом с использованием критерия Стьюдента. Опыты проведены на 20 мышах и 120 беспородных белых крысах. Эксперименты проводились в сравнении с ближайшим аналогом по строению и назначению гидразидом дифенилфосфинилуксусной кислоты (ГДФК). Семикарбазид (I) и стандартное соединение ГДФК изучались по перечисленным тестам в группах животных из 10 особей.

Острая токсичность и характер общего действия.

Семикарбазид (I) является практически нетоксичным соединением. Доза максимальной толерантности (ДМТ) семикарбазида (I) превышает 5 г/кг, а выраженное действие наблюдается уже при введении дозы 500 мг/кг. В то же время ДМТ ГДФК составляет 200 мг/кг, ДЛ₅₀ 315 ± 24 мг/кг.

Влияние соединения (I) на поведение крыс в условиях конфликтной ситуации.

Животные (крысы-самцы массой 220-300 г) подвергались трехдневной водной депривации. Перед опытом животных обучали подходу к поилке в тест-камере, снабженной поилкой и токопроводящим полом, через которые имеется возможность наносить электроболевое раздражение. Через 60 мин после интергастрального введения препарата в дозе 500 мг/кг крыс помещали в тест-камеру. При завершении 10 лизаний поилки животное получало электроболевое раздражение (0,5 мА, 50 Гц). Оценивали число подходов к поилке в течение 5 мин наблюдения.

Заявляемый семикарбазид (I) проявляет выраженное анксиолитическое действие у крыс в условиях конфликтной ситуации. В сравнении с контролем он увеличивает количество наказуемых подходов к поилке в 4 раза. ГДФК не проявлял активности по этому тесту.

Влияние соединения (I) на время иммобилизации мышей в тесте поведенческого отчаяния.

Опыты проводились на мышах тетрагибридах линии СВWA массой 20-30 г. Животных помещали в стеклянный цилиндрический сосуд высотой 15 см и уровнем воды 6 см, температура воды 21^оС. Исследуемое соединение вводили интергастрально в дозе 500 мг/кг за 60 мин до тестирования. Учитывали в секундах общую длителность неподвижности животного в течение 6 мин.

Заявляемое соединение (I) проявляет антидепрессивную активность, уменьшая время иммобилизации мышей в плавательном тесте на 30,7% ГДФК не проявлял активности по этому тесту как при однократном, так и при хроническом (10 дней) введении.

Влияние соединения (I) на формирование первичной алкогольной мотивации.

Заявляемый семикарбазид (I) в дозе 500 мг/кг практически полностью предупреждает формирование первичной алкогольной мотивации у крыс-самцов, помещенных в ситуацию свободного выбора между водой и 15% раствором этанола. ГДФК также проявлял активность в этом тесте.

Влияние соединения (I) на продолжительность "бокового положения", вызываемого наркотической дозой этанола.

Соединение (I) вводили интергастрально в дозе 500 мг/кг за 60 мин до наркотической дозы этанола (4,5 г/кг внутрибрюшинно). Показателем активности соединения служило изменение продолжительности "бокового положения" крыс в опытных группах по сравнению с контрольными. Семикарбазид (I) сокращал время этанолового наркоза в 1,5 раза, тогда как ГДФК не влиял на продолжительность его.

Влияние соединения на реакцию отмены этанола у алкоголизованных крыс.

25% -ный раствор этанола вводили крысам-самцам массой 200-300 г интергастрально 2 раза в сутки в течение 4,5 сут. При первых трех интубациях использовали дозу 5 г/кг. В дальнейшем доза составляла 1-5 г/кг в зависимости от степени угнетения животного. Признаки физической зависимости (реакции отмены этанола) появлялись через 14-20 ч. Тестирование проводили через 18 и 42 ч после последней интубации этанола.

Заявляемый семикарбазид (I) обладал способностью уменьшать степень тяжести состояния, возникшего после отмены этанола у алкоголизованных крыс. ГДФК также проявлял активность по этому тесту.

Проведенные исследования показали, что заявляемый семикарбазид (I) обладает выраженной нейротропной активностью, сочетающей анксиолитическое, антидепрессивное и антиалкогольное действие. По спектру нейротропной активности он значительно отличается от нейротропной активности ближайшего аналога по строению и назначению ГДФК.

Выявленный спектр нейротропного действия показал, что семикарбазид (I) может представлять интерес как новое эффективное лекарственное средство с более выраженным психотропным эффектом и более широким спектром действия, чем у ГДФК.

Формула изобретения

1. N_α -Дифенилфосфинилацетил, N_β -дифенилфосфинил- (2-гидрокси-3,5-дибром)фенилметилсемикарбазид формулы

проявляющий нейтропную активность.

2. Способ получения N_α -дифенилфосфинилацетил, N_β -дифенилфосфинил- (2-гидрокси-3,5-дибром)фенилметилсемикарбазида, отличающийся тем, что дифенилфосфинилацетилгидразон 3,5-дибромсалицилового альдегида подвергают взаимодействию с изоцианатодифенилфосфином в среде органического растворителя - бензола, толуола, ксилола или циклогексана при 80 - 100^oС в течение 5 - 10 ч с последующей обработкой образующейся реакционной смеси водой.

РИСУНКИ

Рисунок 1