N-дифенилфосфинилацетил, n-2-гидрокси(2-натрокси)-3,5- дибромфенилметилиденгидразины, проявляющие нейротропную активность

 

Использование: в медицине в качестве нейротропного препарата. Сущность изобретения: продукт - N_β -дифенилфосфинилацетил- N_α -2-гидрокси-3,5-дибромфенилметилиденгидразин, БФ C₂₁ H₁₈ Br₂ N₂ O₄ P, выход 94%, т.пл. 226 - 228°С: N_β -дифенилфосфинилацетил N_α - 2 натрокси-3, 5-дибромфенилметиленгидразин БВ С₂₁ H₁₇ Br₂ N₂ Na O₄ P, выход 80%. Реагент 1: гидрозидодифенилфосфинилуксусная кислота. Реагент 2: 3,5-дибромсалициловый альдегид. Реагент 3: NaOH. Условия реакции: в среде органического растворителя. 1 табл.

Изобретение относится к новым химическим соединениям, а именно, к N_β-замещенным гидразонам: N_β-дифенилфосфи- нилацетил, N_α-2-гидрокси-(I) и N_α-2-натрокси (II)-3,5-дибромфенилметилиденгидразинам формулы (C₆H₅)CHNHN=CH где Х=ОН(I), ONa(II), проявляющим нейротропную активность. Заявляемые соединения можно рассматривать как N-бензилидензамещенный гидразид дифенилфосфинилуксусной кислоты.

В литературе известны гидразиды фосфорилированных карбоновых кислот и окисей фосфинов, содержащие при фосфоре алкильную или алкоксильную группы формулы R₂P(O)CH₂C(O)NHNH₂, обладающие невысокой антимикробной активностью [1] Известен также гидразид дифенилфосфинилуксусной кислоты (ГДФК), проявляющий нейротропную активность [2] В спектре нейротропного действия ГДФК более выраженным является анксиолитический эффект, антидепрессивное действие у ГДФК не выявлено. По результатам токсикологических исследований ГДФК относится к среднетоксичным соединениям.

Сведения о биологической активности гидразонов (I, II) в литературе нет.

Целью изобретения является синтез новых, более эффективных и с более широким спектром нейротропного действия соединений в ряду производных фосфорилированной уксусной кислоты.

Поставленная задача решается путем синтеза гидразонов (I, II), проявляющих нейротропную активность, сочетающую анксиолитическое, антидепрессивное и антиалкогольное действие.

Синтез заявляемых соединений (I, II) осуществляют взаимодействием гидразидодифенилфосфинилуксусной кислоты (ГДФК) с 3,5-дибромсалициловым альдегидом [3] Пример синтеза гидразона (I). К раствору 5,5 г (0,02 М) ГДФК в 70 мл этанола при комнатной температуре прибавляют раствор 5,6 г (0,02 М) 3,5-дибромсалицилового альдегида в 50 мл этанола. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают спиртом. Выделено 10,1 г гидразона (I). Выход 94% Т.пл. 226-228^оС.

Найдено, C 47,31, 47,37; H 3,26, 3,43; N 5,60, 5,43; P 5,68, 5,54.

С₂₁Н₁₈Br₂N₂O₄P.

Вычислено, C 47,01, H 3,17, N 5,22, P 5,78.

Спектр ЯМР ³¹Р: δ p25.5 м.д. 24,80 (син- и антиизомеры).

Спектр ИК (см^-1(ν_Р=0 1175, ν_С=0 1690; ν_NH 3130-3200.

Пример синтеза гидразона (II). К взвеси 5,4 г (0,01 М) гидразона (I) в 80 мл этанола прибавляют раствор 0,8 г (0,02 М) гидроокиси натрия в 20 мл этанола. Взвесь доводят до кипения и кипятят 10 мин до полного растворения осадка. После охлаждения выпадает порошок желтого цвета. Его отфильтровывают, промывают этанолом и высушивают. Получено 4,5 г гидразона (II). Выход 80% Найдено, N 4,40, 4,37; P 5,00, 5,23.

Вычислено, N 5,01; P 5,55.

Спектр ЯМР³¹Р: δ p25.7 м.д. 25.1 (син- и антиизомеры).

При изучении биологической активности заявляемых соединений были использованы следующие методы.

Исследование общего действия и токсичности при внутрибрюшинном введении.

Влияние на поведение крыс в условиях конфликтной ситуации (тест Vogel, 1971).

Влияние на длительность иммобилизации мышей в тесте "поведенческого отчаяния" (Porsolt, 1977; в модификации Русакова Д.Ю. и Вальдмана А.В. 1983).

Влияние на продолжительность этанолового наркоза.

Влияние на реакцию отмены этанола у алкоголизированных крыс (тест Majchrowicz в модификации Абдрашитова и соавт. 1983).

Полученные данные обрабатывались статистическим методом с использованием критерия Стьюдента. Опыты проведены на 50 мышах и 150 беспородных белых крысах.

Проведено сравнение полученных данных с ближайшим аналогом по строению и назначению гидразидом дифенилфосфинилуксусной кислоты (ГДФК).

Заявляемые соединения (I, II) и стандартное соединение ГДФК по перечисленным выше тестам изучались на группах из 7-10 животных.

Острая токсичность и характер общего действия.

Предлагаемые соединения вводились внутрибрюшинно крысам-самцам весом 200-300 г в максимально высоких дозах, которые возможно было ввести в максимально высоких дозах в виде 10%-ной взвеси в 2%-ной крахмальной слизи. ДМТ соединений превышает 5 г/кг, что позволяет отнести их к практически нетоксичным соединениям. Введение указанной дозы вызывало угнетение животных, торможение двигательной активности. Аналог ГДФК относится к среднетоксичным соединениям: ДЛ₅₀ 315 ± 24,8 мг/кг, ДМТ 200 мг/кг.

Влияние соединений на поведение крыс в условиях конфликтной ситуации.

Животное (крысы-самцы массой 220-300 г) подвергались трехдневной водной депривации. Перед опытом животных обучали подходу к поилке в тест-камере, снабженной поилкой и электродным полом, через которые имеется возможность наносить электроболевое раздражение. Через 60 мин после интергастрального введения препаратов в дозе 500 мг/кг крыс помещали в тест-камеру. При завершении 10 лизаний поилки животное получало электроболевое раздражение (0,5 мА, 50 Гц). Оценивали число подходов к поилке в течение 5 мин наблюдения. Результаты проведенных экспериментов показали, что заявляемые гидразоны (I, II) увеличивают количество наказуемых подходов к поилке в 2,2-2,9 раза. Наибольшую активность в этом тесте проявил гидразон (II). ГДФК в дозе 30 мг/кг (1/10 ДЛ₅₀) не проявил активности по этому тесту.

Влияние соединений на время иммобилизации мышей в тесте "поведенческого отчаяния".

Опыты проводились на мышах тетрагибридах линии СВWA массой 20-30 г. Животных помещали в стеклянный цилиндрический сосуд высотой 15 см и уровнем воды 6 см, температура воды 21^оС. Исследуемые соединения вводили интергастрально в дозе 500 мг/кг за 60 мин до тестирования. Учитывали в секундах общую длительность неподвижности животного в течение 6 мин.

Данные экспериментов показали, что гидразоны (I, II) при однократном введении уменьшали длительность периодов "замирания" на 21,9-24,4% что может указывать на наличие антидепрессивного компонента в спектре действия исследуемых соединений. ГДФК не проявлял активности по данному тесту ни при однократном, ни при многократном введениях.

Влияние соединений на продолжительность "бокового положения", вызываемого наркотической дозой этанола.

Соединения вводили интергастрально в дозе 500 мг/кг за 60 мин до наркотической дозы этанола (4,5 г/кг внутрибрюшинно). Показателем активности соединений служило изменение продолжительности "бокового положения: крыс в опытных группах по сравнению с контрольными.

Предварительное введение гидразонов (I, II), так же как и ГДФК, не потенцировало наркотическую дозу этанола.

Влияние соединений на реакцию отмены этанола у алкоголизированных крыс.

25% -ный раствор этанола вводили крысам-самцам массой 200-300 г интергастрально 2 раза в сутки в течение 4,5 сут. При первых трех интубациях использовали дозу 5 г/кг. В дальнейшем доза составляла 1-5 г/кг в зависимости от степени угнетения животного. Признаки физической зависимости (реакции отмены этанола) появлялись через 14-20 ч. Тестирование проводили через 18 и 42 ч после последней интубации этанола. Исследуемые соединения вводили интергастрально в дозе 500 мг/кг. Вводили однократно за 60 мин до первого тестирования. Контрольной группе вводили по 0,5 мл дистиллированной воды. Оценку выраженности реакции отмены проводили в баллах.

Как видно из таблицы, оба гидразона (I, II) уменьшают степень тяжести постинтоксикационного синдрома, вызванного отменой этанола у алкоголизированных крыс. ГДФК также проявлял активность в этом тесте, сравнимую с действием изученных гидразонов (I, II).

Фармакологическое изучение гидразонов (I, II) показало, что заявляемые соединения являются биологически активными веществами с выраженным нейротропным действием. В сравнении со структурным аналогом ГДФК гидразоны (I, II) являются значительно менее токсичными и в отличие от аналога проявляют выраженную анксиолитическую и антидепрессивную активность. Так же, как и ГДФК, эти соединения обладают антиалкогольным действием. Более эффективное, чем у ГДФК, нейротропное действие гидразонов (I, II) дает основание предполагать, что в случае клинических испытаний заявляемые соединения будут проявлять более выраженный психотропный эффект.

Формула изобретения

N_β-Дифенилфосфинилацетил,N_α-2-гидрокси(2-натрокси)-3,5-дибромфенилметилиденгидразины общей формулы где Х - ОН или ONa, проявляющие нейтротропную активность.

РИСУНКИ

Рисунок 1