Способ получения липосомальной композиции (варианты)

 

Предлагаемый простой и высокопроизводительный способ обеспечивает приготовление липосомальной композиции, содержащей мелкие однобислойные везикулы. Сущность способа получения липосомальной композиции, включающего формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, сводится к тому, что в качестве добавки используют либо субмикропорошок вещества, не растворимого в воде и в органическом растворителе, либо набухающие в воде полимеры, либо жидкость, не смешивающуюся с водой и другими компонентами смеси. 3 с. и 21 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в биологии, фармакологии и пищевой промышленности для создания систем направленного транспорта физиологически активных веществ в клетки, в частности, для повышения терапевтической активности лекарственных препаратов.

Препараты на основе липосом или везикул появились сравнительно недавно и за короткий срок получили широкое распространение сначала в медицине, а затем в косметике. Эффективность воздействия липосом обусловлена возможностью их глубокого проникновения в ткани. Таким путем может быть обеспечена глубинная доставка не только полезных для организма липидов, из которых обычно состоит липосомальная мембрана, но и других веществ, транспортируемых липосомами.

В зависимости от способа приготовления липосомы могут иметь большие или меньшие размеры, один или несколько липидных бислоев, образующих мембрану. В случаях, когда требуется заключить в липосому какой-либо крупный объект (например, при решении задач генной инженерии), используются большие липосомы, в том числе мультислойные. В остальных случаях обычно предпочтительнее мелкие однобислойные везикулы.

Из предшествующего уровня техники известен способ получения липосомальной композиции (см. патент РФ N 2014070, кл. A 61K 9/127, 1991), включающий растворение липидов в органическом растворителе, диспергирование полученного раствора в водном растворе, содержащем низкомолекулярные соединения, упаривание растворителя в вакууме и удаление невключенных компонентов, причем водный раствор одновременно с включенным низкомолекулярным соединением содержит 5-10% криопротектора, а полученную водную суспензию подвергают лиофилизации и регидратируют до исходного объема.

Недостаток этого способа заключается в том, что он не обеспечивает получение липосом, имеющих маленькие размеры. Кроме того, известный способ характеризуется значительной трудоемкостью.

Известен также способ получения липосомальной композиции (см. Европейский патент N 0130577, кл. A 61K 9/50, 1989), включающий смешивание компонентов липосомальной мембраны с водорастворимым нелетучим физиологически приемлемым органическим растворителем и диспергирование полученной смеси в водной среде при помощи обычной мешалки. Компоненты могут содержать мембранные стабилизаторы, модификаторы заряда, антиоксиданты, а также лекарства, которые оказываются потом заключенными в липосомы.

Полученные этим способом липосомы имеют сравнительно большие размеры ≈ 2500 нм, что является основным недостатком известного способа.

В основу изобретения поставлена задача разработать способ получения липосомальной композиции, содержащей мелкие однобислойные липосомы, с использованием обычных перемешивающих устройств.

Согласно первому варианту поставленная задача решена тем, что в способе получения липосомальной композиции, включающем формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, согласно изобретению в качестве добавки используют субмикропорошок вещества, не растворимого в воде и в органическом растворителе.

Если в качестве порошкообразного вещества используют двуокись кремния с размером зерен не более 10 нм, то диспергирование ведут при числе оборотов не менее 3500 об/мин.

Если в качестве порошкообразного вещества используют мел, то диспергирование ведут при числе оборотов не менее 9000 об/мин.

Если в качестве порошкообразного вещества используют иммуностимулятор зимозан, то диспергирование ведут при числе оборотов не менее 2000 об/мин.

Выгодно перед смешиванием компоненты липосомальной мембраны распределять по стенкам вблизи дна рабочей емкости.

Целесообразно при формировании смеси использовать растворы компонент липосомальной мембраны в по крайней мере одном физиологически приемлемом органическом растворителе.

Предпочтительно в качестве органического растворителя использовать этанол и/или глицерин.

Формирование и диспергирование смеси целесообразно осуществлять в проточном режиме.

Целесообразно после диспергирования смеси добавку удалять из целевого продукта.

Согласно второму варианту поставленная задача решена тем, что в способе получения липосомальной композиции, включающем формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, согласно изобретению в качестве добавки используют набухающие в воде полимеры, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 3000 об/мин.

Выгодно в качестве набухающего в воде полимера использовать энтеросгель на основе полиметилсилоксана или САКАП.

Согласно третьему варианту поставленная задача решена тем, что в способе получения липосомальной композиции, включающем формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, согласно изобретению в качестве добавки используют жидкость, не смешивающуюся с водой и другими компонентами смеси.

Если в качестве не смешивающейся с водой жидкости используют фреон, то диспергирование ведут при числе оборотов не менее 5000 об/мин.

Если в качестве не смешивающейся с водой жидкости используют перфторуглерод, то диспергирование ведут при числе оборотов не менее 3500 об/мин.

Выгодно в смесь дополнительно вводить суспензию зимозана.

Целесообразно перед смешиванием распределять компоненты липосомальной мембраны по стенкам вблизи дна рабочей емкости.

Целесообразно также при формировании смеси использовать растворы компонент липосомальной мембраны в по крайней мере одном физиологически приемлемом органическом растворителе - этаноле и/или глицерине.

Кроме того, формирование смеси и диспергирование осуществляют в проточном режиме.

Физическая сущность предложенного способа сводится к следующему. Механическое диспергирование липидов в водной среде с образованием липосом происходит в результате сложного взаимодействия на поверхности раздела фаз, вблизи которой скорость движения жидкости резко меняется, вследствие того, что большинство молекул липидов, из которых формируют липосомы, состоят из гидрофобной и гидрофильной частей, т.е. являются поверхностно-активными веществами. Поэтому в гетерогенной системе они стремятся расположиться на границе раздела фаз, а именно вблизи мешалки, субмикропорошков нерастворимых веществ, набухающих в воде полимеров и пузырьков не смешивающейся с водой жидкости. Наличие в объеме большого числа диспергирующих микрочастиц резко увеличивает площадь поверхности, на которой может протекать процесс образования липосом.

Существенное увеличение площади поверхности, на которой может протекать процесс образования липосом, привело к качественно новым результатам - при помощи простых перемешивающих устройств без использования других специальных добавок были получены мелкие однобислойные везикулы.

В дальнейшем изобретение иллюстрируется примерами осуществления различных вариантов способа получения липосомальной композиции.

Согласно первому варианту способ осуществляется следующим образом. Приготавливают смесь, содержащую по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, в качестве которой используют субмикропорошок вещества, которое не растворяется в воде и в органическом растворителе. Затем осуществляют диспергирование смеси, например, в гомогенизаторе. Простейший с физико-химической точки зрения случай - использование субмикропорошка двуокиси кремния - аэросила. В этом случае липосомы размером, не превышающим 100 нм, получаются при числе оборотов не менее 3500 об/мин. Если в качестве добавки использовать мел, то для получения мелких однобислойных везикул требуются более высокие обороты - не ниже 9000 об/мин. Компоненты липосомальной мембраны вносят либо в виде раствора в спирте и/или глицерине, либо в сухом виде. В последнем случае раствор компонентов липосомальной мембраны в органическом растворителе вносят в пустую рабочую емкость и постепенно, испаряя растворитель, распределяют компоненты по стенкам емкости вблизи дна.

Различные полезные для организма вещества могут быть включены в липосомы при добавлении их в смесь, подлежащую диспергированию. Гидрофобные вещества встраиваются в мембрану липосомы, а гидрофильные попадают во внутренний объем липосомы. В качестве таких веществ могут быть использованы витамины, экстракты лекарственных трав и т.п.

В зависимости от назначения целевого продукта добавка может быть удалена после операции диспергирования.

В промышленных условиях формирование и диспергирование смеси целесообразно вести в проточном режиме.

Пример 1. В пробирку большого диаметра вносят 1 мл. 1%-ного раствора в хлороформе фосфатидилэтаноламина и 0,5 мл. 1%-ного раствора в хлороформе фосфатидилхолина. Содержимое пробирки перемешивают, например, встряхиванием, а затем испаряют растворитель путем вакуумирования внутреннего объема пробирки. В процессе испарения хлороформа осуществляют распределение липидов по стенке пробирки вблизи ее дна. После полного испарения растворителя в разгерметизированную пробирку вносят 5 мл дистиллированной воды и 250 мг аэросила A-300, перемешивают содержимое пробирки при помощи гомогенизатора в течение 30 с.

В зависимости от числа оборотов мешалки гомогенизатора готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют следующие размеры (нм): 100-500 при 2000 об/мин, 60-80 при 6000 об/мин.

Пример 2. В пробирку большого диаметра вносят 2 мл спиртового раствора, содержащего 5% фосфатидилэтаноламина и 2,5% фосфатидилхолина, и 100 мг аэросила A-300. Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием. Затем добавляют 20 мг дистиллированной воды и осуществляют перемешивание содержимого пробирки при помощи гомогенизатора в течение 60 с.

В зависимости от числа оборотов мешалки гомогенизатора готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют следующие размеры (нм): 100-150 при 2000 об/мин, 80-100 при 3000 об/мин, 30-60 при 6000 об/мин.

Пример 3. В рабочий объем проточного гомогенизатора с помощью перистальтического насоса подают 1%-ный раствор кардиолипина в этиловом спирте и 3%-ную суспензию аэросила A-300 в дистиллированной воде, причем суспензию подают из сосуда, снабженного постоянно работающей мешалкой. В таблице приведены зависимости размеров (нм) основной массы (80%) липосом от величины расхода суспензии аэросила - P_A, соотношения расходов смешиваемых компонентов (P_A/P_K, где P_K - расход раствора кардиолипина в этиловом спирте) и скорости вращения - n мешалки гомогенизатора. Липосомы минимальных размеров были получены при расходе суспензии аэросила P_A = 10 мл/мин, соотношении расходов раствора кардиолипина и суспензии аэросила P_K/P_A = 1/20 и скорости вращения мешалки n = 9000 об/мин.

Пример 4. В пробирку большого диаметра вносят 2 мл 10%-ного спиртового раствора яичного лецитина (общая фракция) и 1 мл глицерина. Содержимое пробирки перемешивают, например, встряхиванием, а затем вносят в нее 500 мг порошкообразного мела и 20 мл дистиллированной воды. Перемешивают содержимое пробирки при помощи гомогенизатора в течение 30 с. В зависимости от числа оборотов гомогенизатора готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют следующие размеры (нм): 120-200 при 2000 об/мин, 70-90 при 9000 об/мин. Смешивая при помощи обычных операций полученную липосомальную суспензию с гелеобразующими веществами, многоатомными спиртами, мелом и консервантами, получают зубную пасту, обладающую сильным лечебно-профилактическим действием.

Аналогичные результаты были получены при использовании в качестве добавки сухого талька, крахмала, оксида цинка, диоксида титана и т.д. Полученные липосомальные композиции являются основой для приготовления пудр.

Пример 5. В пробирку большого диаметра вносят 10 мл дистиллированной воды и 1 г иммуностимулятора зимозана (компонент клеточной стенки дрожжей). Выдерживают смесь в течение 3 ч, а затем вносят в пробирку 0,5 мл спиртового раствора, содержащего 10% яичного лецитина и 1% провитамина A. Перемешивают содержимое пробирки при помощи гомогенизатора в течение 60 с. В зависимости от числа оборотов гомогенизатора готовая суспензия сдержит липосомы, 80% которых имеют следующие размеры (нм): 100-120 при 2000 об/мин, 60-100 при 6000 об/мин. Электронно-микроскопические исследования показали, что мембрана полученных липосом содержит включения в виде мелких частиц зимозана, а крупные частицы зимозана были облеплены липосомами. После высушивания полученной суспензии, таблетирования или гранулирования получают целевой продукт - иммуностимулирующий препарат.

Согласно второму варианту способ получения липосомальной композиции осуществляется следующим образом. Приготавливают смесь, содержащую по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, в качестве которой используют набухающий в воде полимер. Затем осуществляют диспергирование смеси, например, в гомогенизаторе при скорости вращения не менее 3000 об/мин. Компоненты липосомальной мембраны вносят либо в виде раствора и/или глицерина, либо в сухом виде. В последнем случае компоненты распределяют по стенкам емкости вблизи дна.

В промышленных условиях формирование и диспергирование смеси целесообразно проводить в проточном режиме.

При использовании добавки в виде набухающих в воде полимеров дополнительная турбулентность обеспечивается не только за счет наличия в системе микрочастиц - молекул полимера, сохраняющих при набухании в воде достаточную механическую жесткость, но и за счет сцепления макромолекул между собой. Это позволяет получить липосомы размером, не превышающим 100 нм, при несколько меньших оборотах (3000 об/мин), чем в первом варианте осуществления способа. Набухающие полимеры, несущие поверхностный заряд, обладают большей эффективностью за счет физико-химического взаимодействия с липосомообразующими веществами.

Пример 6. В качестве добавки, оказывающей эффективное диспергирующее действие, может быть использован энтеросгель на основе полиметилсилоксана (CH₃SiO_3/2)_n, не имеющий поверхностного заряда, используемый в медицине в качестве энтеросорбента. В этом случае в пробирку большого диаметра вносят 1 мл 1%-ного раствора в хлороформе фосфатидилэтаноламина, испаряют растворитель путем вакуумирования внутреннего объема пробирки. В процессе испарения хлороформа осуществляют распределение липида по стенке пробирки вблизи ее дна. После полного испарения растворителя в разгерметизированную пробирку вносят 20 г пасты энтеросгеля (сухой остаток 20%). Содержимое пробирки перемешивают при помощи гомогенизатора в течение 30 с. В зависимости от числа оборотов мешалки гомогенизатора готовая паста содержит липосомы, 80% которых имеют размеры (нм): 120-200 при 2000 об/мин и и 60-80 при 4000 об/мин.

Пример 7. В рабочий объем проточного гомогенизатора с помощью перистальтического насоса подают 10%-ный раствор яичного лецитина в этиловом спирте и суспензию энтеросгеля в дистиллированной воде (сухой остаток 7%), причем суспензию подают из сосуда, снабженного постоянно работающей мешалкой. Соотношение расходов раствора лецитина и суспензии энтеросгеля оставалось постоянным и равным 1:6. Расход суспензии энтеросгеля изменялся в диапазоне от 1 до 200 мл/мин, число оборотов мешалки гомогенизатора составляло 2000-5000 об/мин. Липосомы минимальных размеров (40-60 нм) были получены при числе оборотов, равном 5000 об/мин, и расходе суспензии энтеросгеля 1 мл/мин.

Пример 8. К числу набухающих полимеров, несущих поверхностный заряд, относится в частности САКАП, используемый в косметике. При внесении в воду он набухает, не растворяясь полностью, и понижает pH среды до 3,0±0,2. В этом случае в пробирку большого диаметра вносят 20 мл дистиллированной воды и 200 мг САКАПА, выдерживают 24 ч, а затем вносят 2 мл 10%-ного спиртового раствора соевого лецитина (общая фракция). Содержимое пробирки перемешивают при помощи гомогенизатора в течение 30 с. В зависимости от числа оборотов мешалки гомогенизатора готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют размеры (нм): 80-100 при 2000 об/мин и 40-60 при 4000 об/мин.

После нейтрализации суспензии раствором едкого натрия до pH 7, добавления глицерина, тетракона, консервантов и отдушки получают готовый косметический продукт - гель липосомальный.

Проведенные эксперименты показали, что перемешивание спиртового раствора липидов с водой, содержащей САКАП, приводит к образованию мелких однобислойных везикул вне зависимости от того, произведена была нейтрализация содержимого пробирки раствором едкого натра (до pH 7) или нет. В зависимости от числа оборотов мешалки гомогенизатора готовая суспензия в случае нейтрализации раствором едкого натрия содержит липосомы, 80% которых имеют размеры (нм): 80-100 при 2000 об/мин и 45-65 при 4000 об/мин. На основании этого можно сделать вывод, что величина рН среды мало влияет на диспергирующую эффективность, которая в большей степени обусловлена механическими взаимодействиями компонентов. При концентрации САКАПА 1% полученный гель обладает консистенцией крема. При более низких концентрациях САКАПА целевой продукт - косметическое молочко или лосьон.

Согласно третьему варианту способ получения липосомальной композиции осуществляют следующим образом. Приготавливают смесь, содержащую по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, в качестве которой используют жидкость, не смешивающуюся с водой и другими компонентами смеси. После этого осуществляют диспергирование смеси, например, в гомогенизаторе.

В качестве жидкости, которая не смешивается с водой и другими компонентами смеси, могут быть использованы фреоны и перфторуглероды. Использование последних наиболее предпочтительно по следующим причинам. Во-первых, перфторуглероды имеют высокий удельный вес, что облегчает расслаивание после диспергирования, а во-вторых, они инертны по отношению к воде, липидам, органическим растворителям и большинству других возможных компонентов смеси. Кроме того, многие перфторуглероды настолько безвредны для человеческого организма, что в настоящее время на основе одного из них - перфтордекалина - выпускается кровезаменитель "Перфторан". Следовательно, применение перфторуглеродов при получении липосомальной композиции не внесет каких-либо ограничений для последующего использования ее в медицинских или косметических целях, тем более что перфторуглероды хорошо стерилизуются.

При использовании перфторуглеродов диспергирование необходимо вести при числе оборотов не менее 3500-4000 об/мин. Компоненты липосомальной мембраны вносят либо в виде растворов в спирте и/или глицерине, либо перед смешиванием компоненты липосомальной мембраны распределяют по стенкам вблизи дна рабочей емкости, например, в процессе испарения растворителя.

После операции диспергирования жидкостная добавка отслаивается от полученной суспензии липосом и может быть удалена с помощью делительной воронки. В случае использования жидкости с достаточно низкой температурой кипения добавка удаляется выпариванием. В промышленных условиях формирование и диспергирование смеси целесообразно вести в проточном режиме.

Пример 9. В пробирку большого диаметра вносят 1 мл 1%-ного раствора в хлороформе фосфатидилэтаноламина и 0,5 мл 1%-ного раствора в хлороформе фосфатидилхолина. Содержимое пробирки перемешивают, например, встряхиванием, а затем испаряют растворитель путем вакуумирования внутреннего объема пробирки. В процессе испарения хлороформа осуществляют распределение липидов по стенке пробирки вблизи ее дна. После полного испарения растворителя в разгерметизированную пробирку вносят 5 мл дистиллированной воды и 5 мл фреона-113, перемешивают содержимое пробирки при помощи гомогенизатора в течение 30 с при скорости вращения мешалки не менее 4000 об/мин. Далее пробирку помещают в центрифугу, осуществляют центрифугирование при 5000 об/мин в течение 5 мин. Отслоившийся фреон-113 отбирают пипеткой, а остатки фреона-113 испаряют путем кратковременного вакуумирования объема пробирки. Готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют размеры 60-90 нм.

Пример 10. В пробирку большого диаметра вносят 8 мл 0,1 М раствора хлористого марганца, 1 мл 0,5%-ного раствора кардиолипина в спирте и 2 мл перфторгексана. Содержимое пробирки перемешивают при помощи гомогенизатора в течение 15 с. После перемешивания содержимое пробирки охлаждают до +4^oC и выдерживают при этой температуре в течение 24 ч. Расслоившуюся смесь затем разделяют.

В зависимости от числа оборотов мешалки гомогенизатора готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют следующие размеры (нм): 100-150 при 2000 об/мин, 30-50 при 6000 об/мин. Исследования с помощью ЯМР-спектроскопии показали, что во внутреннем объеме липосом содержатся ионы марганца. Это позволяет использовать полученный продукт в научных исследованиях.

Пример 11. В рабочий объем проточного гомогенизатора с помощью перистальтического насоса подают 10%-ный раствор яичного лецитина (общая фракция) в этиловом спирте, дистиллированную воду и перфтордекалин. Соотношение расходов спиртового раствора лецитина и дистиллированной воды поддерживалось постоянным и равным 1:10. Соотношение расходов перфтордекалина и дистиллированной воды варьировалось от 1:10 до 10:1, а расход дистиллированной воды изменялся в диапазоне от 1 до 200 мл/мин, число оборотов мешалки гомогенизатора составляло 2000-9000 об/мин. Полученный продукт выдерживали в течение 24 ч при комнатной температуре, а затем осуществляли разделение компонентов при помощи делительной воронки. Липосомы минимальных размеров (30-35 нм) были получены при числе оборотов, равном 9000 об/мин, соотношении расходов перфтордекалина и дистиллированной воды, равном единице, и расходе дистиллированной воды, равном 1 мл/мин.

Пример 12. 1 г иммуностимулятора зимозана (компонент клеточной стенки дрожжей) разводят в 10 мл дистиллированной воды. Полученную суспензию обрабатывают в течение 5 мин на ультразвуковом дезинтеграторе, охлаждают до +4^oC и выдерживают в течение 24 ч.

Приготавливают также раствор, содержащий 84% этилового спирта, 5% глицерина, 10% яичного лецитина и 1% провитамина A.

5 мл верхней фракции суспензии зимозана, содержащей мелкие не осевшие частицы зимозана, вносят в пробирку большого диаметра. В пробирку вносят также 0,5 мл спирто-глицеринового раствора лецитина с провитамином A и 5 мл перфтордекалина. Содержимое пробирки перемешивают при помощи гомогенизатора в течение 20 с. Затем суспензию охлаждают до +4^oC и выдерживают в течение 24 ч, после чего отделяют отслоившийся перфтордекалин. В зависимости от числа оборотов гомогенизатора готовая суспензия содержит липосомы, 80% которых имеют следующие размеры (нм): 100-150 при 2000 об/мин, 60-100 при 5000 об/мин. По цвету липосом можно судить о том, что они содержат включения провитамина A и зимозан. Электронно-микроскопические исследования показали, что мембрана липосом содержит включения в виде мелких частиц зимозана, а крупные частицы зимозана были облеплены липосомами. Полученная суспензия может быть использована в медицине в качестве иммуностимулирующего комплекса.

Предлагаемый простой и высокопроизводительный способ обеспечивает приготовление липосомальной композиции, содержащей мелкие однобислойные везикулы.

Формула изобретения

1. Способ получения липосомальной композиции, включающий формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, отличающийся тем, что в качестве добавки используют субмикропорошок вещества, не растворимого в воде и в органическом растворителе.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве порошкообразного вещества используют двуокись кремния с размером зерен не более 10 нм, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 3500 об/мин.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве порошкообразного вещества используют мел, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 9000 об/мин.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве порошкообразного вещества используют иммуностимулятор зимозана, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 2000 об/мин.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что перед смешиванием компоненты липосомальной мембраны распределяют по стенкам вблизи дна рабочей емкости.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что при формировании смеси используют растворы компонент липосомальной мембраны в по крайней мере одном физиологически приемлемом органическом растворителе.

7. Способ по п.6, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют этанол и/или глицерин.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что формирование и диспергирование смеси осуществляют в проточном режиме.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что после диспергирования смеси добавка удаляется из целевого продукта.

10. Способ получения липосомальной композиции, включающий формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, отличающийся тем, что в качестве добавки используют набухающие в воде полимеры, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 3000 об/мин.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что в качестве набухающего в воде полимера используют энтеросгель на основе полиметилсилоксана.

12. Способ по п.10, отличающийся тем, что в качестве набухающего в воде полимера используют САКАП.

13. Способ по п.10, отличающийся тем, что перед смешиванием компоненты липосомальной мембраны распределяют по стенкам вблизи два рабочей емкости.

14. Способ по п.10, отличающийся тем, что при формировании смеси используют растворы компонент липосомальной мембраны в по крайней мере одном физиологически приемлемом органическом растворителе.

15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют этанол и/или глицерин.

16. Способ по п.10, отличающийся тем, что формирование и диспергирование смеси осуществляют в проточном режиме.

17. Способ получения липосомальной композиции, включающий формирование смеси, содержащей по крайней мере один компонент липосомальной мембраны, воду и добавку, диспергирование смеси, отличающийся тем, что в качестве добавки используют жидкость, не смешивающуюся с водой и другими компонентами смеси.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что в качестве не смешивающейся с водой жидкости используют фреон, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 5000 об/мин.

19. Способ по п.17, отличающийся тем, что в качестве не смешивающейся с водой жидкости используют перфторуглерод, а диспергирование ведут при числе оборотов не менее 3500 об/мин.

20. Способ по п.19, отличающийся тем, что в смесь дополнительно вводят суспензию зимозана.

21. Способ по п.17, отличающийся тем, что перед смешиванием компоненты липосомальной мембраны распределяют по стенкам вблизи дна рабочей емкости.

22. Способ по п.17, отличающийся тем, что при формировании смеси используют растворы компонент липосомальной мембраны в по крайней мере одном физиологически приемлемом органическом растворителе.

23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют этанол и/или глицерин.

24. Способ по п.17, отличающийся тем, что формирование смеси и диспергирование осуществляют в проточном режиме.

РИСУНКИ

Рисунок 1