Применение бисфосфонатов и экстракта паращитовидных желез для лечения остеопороза

 

Изобретением предлагаются методы увеличения костной массы человека или иных животных субъектов, пораженных остеопорозом, включающие тридцатидневный период лечения, состоящий из режима введения экстракта паращитовидных желез и режима введения бисфосфоната, в котором: а/ указанный режим введения экстракта паращитовидных желез заключается во введении указанному субъекту экстракта паращитовидных желез в объеме приблизительно от 4 МЕ/кг в день до 15 МЕ/кг в день при условии, что указанный экстракт паращитовидных желез вводится по меньшей мере один день каждые семь дней из каждого указанного тридцатидневного периода лечения; б/ указанный режим введения бисфосфоната заключается во введении указанному субъекту бисфосфоната в объеме приблизительно от 0,0005 мг P/кг до 1,0 мг P/кг в день, в который вводится указанный бисфосфонат, при условии, что указанный бисфосфонат вводится по меньшей мере один день в каждый указанный тридцатидневный период. 15 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к способам увеличения костной массы человека и других животных, например для лечения остеопороза и подобных ему расстройств обмена веществ костей. В частности, настоящее изобретение относится к таким способам лечения путем введения воздействующего на кость фосфата и экстракта паращитовидных желез.

Наиболее распространенным видом расстройства обмена веществ костей является остеопороз. Остеопороз можно в целом определить как уменьшение массы кости или атрофию скелетной ткани. Существуют два вида остеопороза: первичный и вторичный. Вторичный остеопороз является результатом влияния поддающегося определению болезненного процесса или агента. Однако приблизительно 90% всех случаев остеопороза приходится на долю первичного. Такой первичный остеопороз включает остеопороз после месячных, остеопороз, связанный с возрастом (поражающий большинство лиц в возрасте от 70 до 80 лет) и идиопатический остеопороз, поражающий мужчин и женщин среднего возраста и молодых.

У некоторых пораженных остеопорозом лиц потеря костной ткани бывает настолько велика, что может привести к механическому разрушению костной структуры. Перелом кости часто случается, например, на бедрах и позвоночном столбе женщин, страдающих остеопорозом после месячных. Может также иметь место и кифоз (ненормально увеличенное искривление грудного отдела позвоночника).

Как полагают, механизм потери массы кости при остеопорозе включает нарушение баланса процесса восстановления кости. Восстановление кости происходит в течение всей жизни, обновляя скелет и поддерживая прочность кости. Это восстановление включает эрозию и заполнение отдельных мест на поверхности кости организованными группами клеток, которые называют БМЕ (базисные многоклеточные единицы). БМЕ состоят в первую очередь из остеопластов, остеобластов и их клеточных предшественников. В ходе цикла восстановления кость в точке с активированной БМЕ поглощается остеокластом, образуя полость поглощения. Затем эту полость заполняет костью остеобласт.

Обычно у взрослых цикл восстановления ведет к возникновению небольшого дефицита кости, связанного с неполным заполнением полости поглощения. Из-за этого даже у здоровых взрослых лиц происходит связанная с возрастом потеря массы кости. Однако при остеопорозе наблюдается увеличение числа активированных БМЕ. Такое повышение активности ведет к ускорению перестройки костей, вызывая ненормально высокую потерю кости.

Хотя этиология остеопороза не вполне ясна, существует много факторов риска, которые, как полагают, с ним связаны. К ним относятся низкий вес тела, плохое усвоение кальция, недостаточная физическая активность и недостаточность экстрагена.

В медицинской литературе описано много составов и способов лечения остеопороза. Многие из этих составов или способов нацелены или на замедление потери костной массы, или на достижение ее прироста. См., например, R. Haynes мл. и др. Agents, affecting Calcification, The Pharmacological Basis of Terapevt, 7-е издание (A.G.. Gilman, L.S.Goodini и др., 1985); G.D.Whedon и др.,An analisis of Current Concept and Research Interest in Osteoporosis, Current Advances in Skeletogenesis l.A. 6-rnoy и др., 1985); W.A. Peck и дp. Physicim Resource Manual on Osteoporosis (1987), опубликованный Национальным Фондом Остеопороза.

Среди методов лечения остеопороза, предлагаемых в литературе, имеет место введение биофосфонатов или иных воздействующих на кость фосфонатов. См., например. Storm и др. Effect of Intermiltent Cyclical Etidronate Therap on Bone Mineralisation and Fracture Rate in Women with Post-Menopausal оsteoporosis, 322, New England Journal of Medicine, 1265(1990); Watts и др., Intermitten Cyclical Etidronate Treatment of Post Menopausal Osteoporosis, 323, Hew England Journal of Medicine 73(1990).

Такие методы лечения с использованием различных бисфосфонатов описаны в патенте США N 4761406, выданном 2 августа 1988 г; патенте США N 4812304, выданном 14 марта 1989 г; патенте США N 4822609, выданном 18 апреля 1989 г. Применение таких фосфонатов для лечения остеопороза, а также других заболеваний, связанных с нарушениями обмена кальция и фосфатов, описано также в патенте США N 3683080, выданном 8 августа 1972 г; патенте США N 4330537, выданном 28 октября 1980 г; патенте США N 4267108, выданном 12 мая 1981 г; публикации Европейского патента N 298553, опубликованной 11 января 1989 г и в статье Francis и др. Chemical, Biochemical and Medicinal Properties of Diphosplunates, The Role of Phosphonates in Living Systems. Chapter 4 (1983).

Для лечения остеопороза предлагали также и экстракт паращитовидных желез. Такое лечение с использованием экстракта паращитовидных желез описано в следующих источниках: Hefti и др. Increase of Whole Body Calcium and Skeletal Mass in Normal and Osteoporotic Adult Rats Treal. with Parathyroid Hormone, 62, Clin. Sci. 389-396 (1982), публикации патента Германии E 3935738, опубликованного 8 мая 1991, г; патенте США N 4698328, выданном 6 октября 1987 г; патенте США N 4833125, выданном 23 мая 1989 г.

Эффект введения биофосфоната и экстракта паращитовидных желез изучали на крысах. Исследование показало, что костная масса растет в большей степени у крыс, лечение которых осуществлялось только экстрактом паращитовидных желез. См. Hock и др. Resorption Is Not Essential for the Stimulation of Bone Grouth by hPTH-(1-34) in Rats in vivo, Inl. of Bone and Mineral Res., 449-458 (1989).

Для лечения остеопороза у человека предложено периодическое введение экстракта паращитовидных желез и воздействующих на кость фосфатов. Такое лечение с использованием бисфосфонатов и экстракта паращитовидных желез описано в следующих источниках, которые все включены в список материалов, а именно: патент США N 4822609, выдан 18 апреля 1989 г; патент N 4812304, выдан 14 марта 1989 г.; публикация патента Германии DE 3243358, опубликована 24 мая 1984 г.; Хеш и др. Results of a Stimulating Therapy of Low Bone Metabolism in Osteoporos with (1-38) n PTH and Diphosphonate EHDP Klin. Wschr. , 976-984 (окт. 1988).

Кроме того, краткосрочное использование экстракта паращитовидных желез и воздействующих на кость фосфонатов описано в следующих источниках: публикация патента Германии E 3243358, опубликована 24 мая 1984 г (ниже DE 3243358); Хеш и др. Results of Stimulating Therapy of Low Bone Metabolism in Osteoporosis with (1-38) hPT and Diphosphonate EHDP 66(19) Klin. Wschr., 976-984 (окт. 1988) (ниже "Хеш и др."); Деллинг и др. Morphologic Study of Pelvic Crest Spongiosa in Patents with Osteoporosis during ADFR Therapy with Parathyroid Hormone and Diphosphonates, 128 (1) Z.Orthop 1-5 (1990) (ниже "Деллинг и др."); Делмас и др. The in vivo Anabolic Effect of hPT -(1-34) Is Blunted When Bone Resorption Is Blocke by A Bisphoshonate" 6(1) J. Bone Mineral Res. (N124) (авг. 1991 (ниже "Делиас").

Однако способы, описанные в DE 3243358, Хешем и др. и Деллингом и др., будучи полезными для активизации обмена веществ в костях, не продемонстрировали эффективности при увеличении массы костей. Деллинг и др. в особенности скептически настроены относительно эффективности применения экстракта паращитовидных желез и биофосфоната для увеличения костной массы. Деллинг и др. пришли к выводу, что значительного изменения в костной структуре не наблюдается и что полезность такого лечения сомнительна. Делмас также скептически расценивает эффективность применения экстракта паращитовидных желез и биофосфоната, поскольку его данные указывают, что экстракт паращитовидных желез эффективно способствует увеличению формирования кости сам по себе, но при введении совместно с бисфосфонатом менее эффективно влияет на увеличение формирования кости, чем в контрольном случае (т.е. без лечения).

Заявитель обнаружил, что введение воздействующих на кость фосфонатов и экстракта паращитовидных желез способствует увеличению костной массы. В соответствии с этим способ, являющийся предметом настоящего изобретения, предоставляет эффективные возможности предупреждения и лечения остеопороза с уменьшением побочных явлений по сравнению с известными способами.

Изобретение предлагает способы увеличения костной массы человека или иного животного субъекта, пораженного остеопорозом, предусматривающие 30-дневный период лечения, предусматривающие режим введения экстракта паращитовидных желез и режим введения бисфосфоната, при которых а) режим введения указанного экстракта паращитовидных желез предусматривает введение указанному субъекту экстракта паращитовидных желез на уровне от приблизительно 4 МЕ/кг в день до приблизительно 15 МЕ/кг в день, в который вводится указанный экстракт паращитовидной железы, при условии, что указанный экстракт паращитовидной железы вводится по меньшей мере один день каждые семь дней из каждого указанного 30-дневного периода лечения; б) режим введения указанного бисфосфоната предусматривает введение указанному субъекту бисфосфоната на уровне от приблизительно 0,0005 мг P/кг до приблизительно 1,0 мг P/кг в день, в который вводится указанный бисфосфонат, при условии, что указанный бисфосфонат вводится по меньшей мере один день в каждый указанный 30-дневный период лечения.

Способ, являющийся предметом настоящего изобретения, предусматривает введение человеку или иному животному субъекту воздействующего на кость фосфата и экстракта паращитовидных желез. Конкретные соединения и составы, которые должны применяться в этих процессах, должны соответственно быть фармацевтически приемлемыми. В данном случае под фармацевтически приемлемым компонентом понимается такой, который удобен для применения к человеку и/или животным без нежелательных отрицательных побочных воздействий (таких, как токсичность, раздражение и аллергические реакции) соразмерно с допустимым соотношением выгоды и риска. Кроме того, в данном случае термин "безопасное и эффективное количество" относится к количеству компонента, достаточному для получения необходимого терапевтического результата без нежелательных отрицательных побочных воздействий (таких, как токсичность, раздражение или аллергические реакции) соразмерно с допустимым соотношением выгоды и риска при использовании способа, являющегося предметом настоящего изобретения. Конкретное значение эффективного и безопасного количества будет, как очевидно, зависеть от таких факторов, как конкретное состояние лица, подлежащего лечению, физического состояния пациента, длительности лечения, характера проводимого одновременно лечения (при его наличии) и конкретных применяемых составов.

Способы, являющиеся предметом настоящего изобретения, включают введение воздействующего на кость фосфоната. Как показано ниже, воздействующий на кость фосфонат включает одно или несколько соединений следующего состава: и его фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры, в котором A, B и R имеют значения, указанные ниже.

В формуле (1) R является гидрокси (для бисфосфонатов) или водородом, или алкилом (для фосфоналкилфосфинатов). В фосфоналкилфосфинатах R предпочтительно является незамещенным алкилом, в особенности низшим алкилом. Когда R является замещенным алкилом, предпочтительные заместители включают галоген, незамещенный или замещенный фенил, незамещенный или замещенный пиридинил, незамещенный амино, амино, замещенный одной или двумя низшими алкильными группами, гидрокси или карбокси. Более предпочтительными заместителями являются фторо, фенил, незамещенный амино и гидрокси; наиболее предпочтительными являются фторо (в особенности в форме трифторметила) и фенил.

В особенности предпочтительной составляющей R в фосфоналкилфосфинатах являются незамещенные низшие алкильные группы, в особенности незамещенные, насыщенные низшие алкильные группы с прямой цепью. Предпочтительны также составляющие R, представленные метилом, этилом, н-пропилом, изопропилом, н-бутилом, изо-бутилом, втор-бутилом, трет-бутилом и н-гексилом. Наиболее предпочтительным являются метил, этил, н-пропил или н-бутил. Наиболее предпочтительным R является метил.

В формуле (1) A является водородом; галогеном; нитро; алкилом; гетероциклом; арилом; гетероарилом; незамещенным амино или его амидом, полученным из карбоновой кислоты замещающей группы; амино, замещенным одной замещающей группой, или его амидом, полученным из карбоновой кислоты замещающей группы; амино, замещенным независимо одной алкильной группой и одной замещающей группой; гидрокси или его сложным эфиром, полученным из карбоновой кислоты замещающей группы; эфиром, включающим замещающую группу; тиолом или эфиром тиоловой кислоты, полученным из карбоновой кислоты замещающей группы; тиоэфиром, включающим замещающую группу, или его сульфоксидная и сульфоновая производные; SO₃H, ее фармацевтически приемлемые соли, ее сложный эфир, полученный из спирта замещающей группы, ее незамещенный амид или же ее амид, замещенный одной или двумя алкильными группами; CO₂H, ее фармацевтически приемлемые соли, ее сложный эфир, полученный из спирта замещающей группы, ее незам щенный амид или же ее амид, замещенный одной или двумя алкильными группами; альдегид; кетоном, включающим замещающую группу; карбаматом, незамещенным или замещенным одной или двумя алкильными группами; пептидами, включающими от приблизительно одной до приблизительно ста аминокислотных составляющих, или же составляющие A и B соединены ковалентной связью, образуя кольцо из 3-7 атомов, в котором от 0 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей азот, серу, фосфор и кислород, причем кольцо является незамещенным или замещенным одним или несколькими из указанных выше заместителей A; или же составляющие A и B заменяются незамещенной или замещенной алкильной составляющей, соединенной с геминальным углеродом (углеродом, показанным в формуле (1)) двойной связью.

Предпочтительно A является одной из следующих составляющих: (1) водород, (2) галоген (предпочтительно фторо или хлоро, более предпочтительно фторо), (3) замещенный или незамещенный алкил, имеющий следующее общее строение: в котором:
а) n - целое число от 1 до 10, предпочтительно от 1 до 5, более предпочтительно 1 или 2, более предпочтительно 1;
б) каждый R¹ является независимо водородом, галогеном, низшим алкилом, незамещенным амино или его амидом, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, амино, замещенным одной низшей алкильной группой или его амидом, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, амино, независимо замещенным двумя низшими алкильными группами, гидрокси или его сложный эфир, полученный из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, -CO₂H или ее фармацевтически приемлемые соли, или ее сложный эфир, полученный из спирта низшей алкильной группы, или ее незамещенный амид, или ее амид, замещенный одной или двумя низшими алкильными группами, эфир, включающий низшую алкильную группу, -PO₃H₂ или ее фармацевтически приемлемые соли и нитро, или же два R₁ с тем же атомом углерода являются =0 или =NR⁹ (где R⁹ является низшим алкилом или может быть водородом, когда имеется другой атом азота, соединенный с тем же атомом углерода как =NR⁹ составляющая), или же два R¹ на соседних атомах углерода могут быть заменены дополнительной связью между атомами углерода; или же R¹ на первом атоме углерода (в правой части формулы (2)) и B (см. формулу (1)) могут быть заменены дополнительной связью;
в) Y является галогеном; нитро; циано; гетероциклом; арилом; гетероарилом; незамещенным амино и его амидом, полученным из карбоновой кислоты алкила, гетероцикла, арильной или гетероарильной группы; амино, замещенным одним алкилом, гетероциклом, арильной или гетероарильной группой и его амидом, полученным из карбоновой кислоты алкильной группы; амино, замещенным независимо одной алкильной группой и одной алкильной, гетероциклической, арильной или гетероарильной группой; гидрокси и его сложным эфиром, полученным из карбоновой кислоты алкильной, гетероциклической, арильной или гетероарильной группы; эфиром, включающим алкильную, гетероциклическую, арильную или гетероарильную группу; тиолом или его эфиром тиоловой кислоты, полученным из карбоновой кислоты алкильной, гетероциклической, арильной или гетероарильной группы; тиоэфиром, включающим алкильную, гетероциклическую, арильную или гетероарильную группы и его сульфоксидной и сульфоновой производными; - SO₃H, ее фармацевтически приемлемыми солями, ее сложным эфиром, полученным из спирта алкильной группы, ее незамещенным амидом и ее амидом, замещенным одной или двумя алкильными группами; -CO₂H, ее фармацевтически приемлемыми солями, ее сложным эфиром, полученным из спирта алкильной группы, ее незамещенным амидом и ее амидом, замещенным одной или двумя алкильными группами; PO₃H₂, ее фармацевтически приемлемыми солями, ее сложным эфиром, полученным из спирта алкильной группы, ее незамещенным амидом и ее амидом, замещенным одной или двумя алкильными группами; -(R⁸)PO₂H (где R⁸ является водородом или незамещенным низшим алкилом), ее фармацевтически приемлемыми солями, ее сложным эфиром, полученным из спирта алкильной группы, ее незамещенным амидом и ее амидом, замещенным одной или двумя алкильными группами; альдегидом; кетоном, включающим алкильную группу; карбаматом, незамещенным или замещенным одной или двумя алкильными группами; или пептилом. Для бисфосфонатов Y предпочтительно является гетероциклом (предпочтительно 5-7-членные гетероциклы с одним или двумя атомами азота); амино и замещенными амино. В особенности предпочтительный вариант составляющей Y включает пиридил, амино и амино, замещенный одной или двумя алкильными группами. В случае фосфоналкилфосфинатов Y предпочтительно является галогеном (предпочтительно фторо); трифторметилом; эфиром, включающим низшую алкильную группу; незамещенным амино и его амидом, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, амино, замещенным одной низшей алкильной группой и его амидом, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы; амино, независимо замещенным двумя низшими алкильными группами; или пептидом, включающим от одной до примерно шести аминокислотных составляющих;
(4) циклоалкил, имеющий от 4 до 10 атомов углерода, предпочтительно 5 или 6 атомов углерода,
(5) гетероцикл, имеющий 5 или 6 атомов в кольце; более предпочтительно один или два атома азота в кольце, более предпочтительно один атом азота в кольце. В особенности предпочтительными гетероциклами являются незамещенный или замещенный пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил и морфолинил
(6) незамещенный и замещенный фенил и нафтил,
(7) незамещенные и замещенные гетероарилы с 5-и 6-членными кольцами, имеющие один или два гетероатома (в особенности гетероатомы азота), предпочтительно пиридинил
(8) аминосодержащая составляющая, имеющая общее строение:

в которой
а) m является целым числом от 0 до 10, предпочтительно от 0 до 5, более предпочтительно 0 или 1, более предпочтительно 0;
б) R¹ и Y соответствуют описанным выше;
в) R² является водородом, низшим алкилом или ацилом, полученным из карбоновой кислоты низшего алкила.

(9) содержащая кислород составляющая, имеющая общее строение:

в которой
а) m является целым числом от 0 до 14, предпочтительно от 0 до 5, более предпочтительно 0 или 1, более предпочтительно 0;
б) R¹ и Y соответствуют описанию выше,
(10) содержащая серу составляющая, имеющая общее строение

в которой
а) m является целым числом от 0 до 10, предпочтительно от 0 до 5, более предпочтительно 0 или 1, более предпочтительно 0; и
б) R¹ и Y соответствуют описанию выше.

В формуле (1) B является водородом; галогеном; незамещенным или замещенным низшим алкилом; незамещенным или замещенным циклоалкилом, имеющим от 3 до 7 атомов в кольце; незамещенным или замещенным фенилом; гидрокси или его сложным эфиром, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы; тиолом, незамещенным амино или его амидом, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы; амино, независимо замещенным двумя низшими алкильными группами; или CO₂H, ее фармацевтически приемлемые соли, ее сложный эфир, полученный из спирта низшей алкильной группы, ее незамещенным амином или ее амидом, замещенным одной или двумя низшими алкильными группами.

Для поддержания химической стабильности этих соединений составляющие A и B предпочтительно не должны одновременно включать гетероатомов (азот, кислород или сера), или гетероатом и галоген, связанный с фосфонатной составляющей (например, атом углерода, геминально замещенный атомами фосфора). Таким образом, когда составляющая А включает атомы кислорода, серы, азота или галогенов, связанные с фосфорозамещенным метиленовым углеродом, то В выбирают из числа водорода; незамещенного или замещенного низшего алкила, циклоалкила, гетероцикла (где атом углерода гетероцикла связан с атомами геминального углерода), или фенила; -CO₂H, ее фармацевтически приемлемых солей, ее сложного эфира, полученного из спирта низшей алкильной группы, ее незамещенного амида и ее амида, замещенного одной или двумя низшими алкильными группами.

Предпочтительно В является углеродом, галогеном, незамещенным или замещенным низшим алкилом, незамещенным или замещенным фенилом, незамещенным или замещенным бензилом, гидрокси или его сложным эфиром, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, тиолом, незамещенным амино или его амином, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, амином, замещенным одной низшей алкильной группой или амидом, полученным из карбоновой кислоты низшей алкильной группы, амино, независимо замещенным двумя низшими алкильными группами, или CO₂H или ее фармацевтически приемлемыми солями, и ее сложным эфиром, полученным из спирта из низшей алкильной группы и незамещенного амида или ее амида, замещенного одной или двумя низшими алкильными группами.

Более предпочтительно В является водородом, хлоро, метилом, этилом, гидрокси, тиолом, незамещенным амино, (N-метил) амино, (N,N-диметил) амино, CO₂H или фармацевтически приемлемыми солями ее, -CO₂CH₃, или -CONH₂. Более предпочтительно B является водородом, метилом, хлоро, амино или гидрокси; более предпочтительно водородом или гидрокси, или амино, или гидрокси; более предпочтительно водородом или гидрокси, или амино, или тиолом; более предпочтительно гидрокси. Особенно предпочтительно воздействующие на кость фосфонаты включают те, в которых A представляет составляющую из указанных выше групп (3) или (8), а B является гидрокси.

В особенности предпочтительные бисфосфонаты, применяемые здесь, имеют формулу

в которой n является целым числом от 0 до 7 (предпочтительно от 0 до 2, более предпочтительно 1); R¹ является водородом, хлоро, амино или гидрокси (предпочтительно водород или гидрокси); X является -NH-, кислородом или одинарной связью (предпочтительно -H- или одинарной связью); R²является 5-7-членным гетероциклом, имеющим от 1 до 3 гетероатомов (предпочтительно 6-членным гетероциклом, имеющим 1 или 2 атома азота), амино, амино, замещенным одной или двумя низшими алкильными группами, или водородом; и их фармацевтически приемлемыми солями и сложными эфирами.

Термин "фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры", применяемый здесь, означает гидролизуемые сложные эфиры и соли воздействующих на кость фосфонатов, обладающих такими же общими фармакологическими свойствами, как кислотная форма, из которой их получают, и которая является фармацевтически приемлемой. Фармацевтически приемлемые соли включают, например, соли щелочных металлов (например натрия и калия), щелочно-земельных металлов (например кальция и магния), нетоксичных тяжелых металлов (например олова и индия), аммония и замещенных солей аммония с низкой молекулярной массой (например моно-, ди- и триэтаноламин). Предпочтительными соединениями являются соли натрия, калия и аммония. Фармацевтически приемлемые сложные эфиры включают сложные эфиры незамещенных и замещенных алкилов, арилов и фосфорилов. Не ограничивающие сферы настоящего изобретения примеры фармацевтически приемлемых сложных эфиров включают, например, изопропил, третичный бутил, 2-хлорэтил, 2,2,2-трихлорэтил, 2,2,2-трифторэтил, n- толуолсульфонэтил, глицил, саркозил, бензил, фенил, 1,2-гексаноилглицерин, n-нитрофенил, 2,2-диметил-1,3-диоксолен-4-метил, изопентенил, O- карбометоксифенил, пиралоилоксиметилсалицил, диэтиламидофосфорил, пиваоилоксиметил, ацилоксиметил, пропионилоксиметил, изобутирилоксиметил, додецил, октадецил и изопропилоксиметил.

Конкретные примеры и описания заместителей, полезных в соединениях с формулами от (1) до (6), описаны в публикации Европейского патента N 298553, опубликованной 11 января 1989 г (включена в прилагаемый список материалов). В этой заявке описывается также фосфоналкилфосфинаты, применимые способами, являющимися предметом настоящего изобретения (где является водородом или алкилом), и способы получения таких соединений. Способы получения фосфоналкилфосфинатов описаны также в публикации Европейского патента N 298555, опубликованном 11 января 1989 г.

Бисфосфонаты, применяемые способами, являющимися предметом настоящего изобретения (в которых R является гидрокси), и способы приготовления таких соединений описаны в следующих патентных документах: патент США N 3553314, выдан 5 января 1971 г; патент США N 3683080, выдан 8 августа 1972 г; патент США N 3846420, выдан 5 ноября 1974 г; патент США N 3899496, выдан 12 августа 1975 г; патент США N 3941772, выдан 2 марта 1976 г; патент США N 3957160, выдан 18 мая 1976 г; патент США N 3962432, выдан 8 июня 1976 г; патент США N 3979385, выдан 7 сентября 1976 г; патент США N 3988443, выдан 26 октября 1976 г; патент США N 4054598, выдан 18 октября 1977 г; патент США N 4113861, выдан 12 сентября 1978 г; патент США N 4117090, выдан 26 сентября 1978 г; патент США N 4134969, выдан 16 января 1979 г; патент США N 4267108, выдан 12 мая 1981 г; патент США N 4304734, выдан 8 декабря 1981 г; патент США N 4330537, выдан 18 мая 1982. г; патент США N 4407761, выдан 4 сентября 1983 г; патент США N 4469686, выдан 4 сентября 1984 г; патент США N 4578376, выдан 25 марта 1986 г; патент США N 4608368, выдан 26 августа 1986 г; патент США N 4621077, выдан 4 ноября 1986 г; патент США N 4687767, выдан 18 августа 1987 г; патент США N 4687768, выдан 18 октября 1987 г; патент США N 4711880, выдан 8 декабря 1987 г; патент США N 4719203, выдан 12 января 1988 г; патент США N 4927814, выдан 22 мая 1990 г; патент США N 4990503, выдан 5 февраля 1991 г; описание изобретения к заявке на патент Германии N 2104476, опубликовано 17 августа 1972 г; описание изобретения к заявке на патент Германии N 2343147, опубликовано 3 апреля 1975 г; описание изобретения к заявке на патент Германии 2360798, опубликовано 26 июня 1975 г; описание изобретения к заявке на патент Германии N 2513966, опубликовано 7 октября 1976 г; описание изобретения к заявке на патент Германии N 2541981, опубликовано 24 марта 1977 г; описание изобретения к заявке на патент Германии N 3334211, опубликовано 4 апреля 1985 г; публикация патента Японии N 78/59674, опубликована 29 мая 1978 г.; публикация патента Японии N 79/135724, опубликована 22 октября 1979 г; публикация патента Японии N 80/98193, Судзуки и др., опубликована 25 июля 1980 г; публикация Европейского патента N 88359, Блюм и др., опубликована 14 сентября 1983 г.; публикация Европейского патента N 100718, Брельер и др., опубликована 15 февраля 1984 г; публикация Европейского патента N 186405, опубликована 2 июля 1986 г; публикация Европейского патента N 197478, опубликована 15 октября 1986 г; публикация Европейского патента N 230068, опубликована 29 июля 1987 г; публикация Европейского патента N 273514, опубликована 6 июля 1988 г; публикация Европейского патента N 274158, опубликована 13 июля 1988 г; публикация Европейского патента N 282309, опубликована 14 сентября 1988 г; публикация Европейского патента N 282320, опубликована 14 сентября 1988 г; публикация патента PCT N 87/03598, опубликована 18 июня 1987 г; публикация патента PCT N 88/00590, опубликована 28 января 1988 г.

Предпочтительные воздействующие на кость фосфонаты, применимые способами, являющимися предметом настоящего изобретения, включают: N-/2'-/3' -метил/-пиридил/аминометанфосфонометилфосфиновую кислоту; N-/2'-/3'-метил/-пиперидинилиден/аминометан фосфонометилфосфиновую кислоту;N-/2'-/5'-метил/-пиперидинилииден/аминометан фосфонометилфосфиновую кислоту; 2-/2'-пиридинил/этан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 2-/2'-пиридинил/этан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 2-/2'-пиперидинил/этан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 2-m-аминофенил/-1-гидрокси-этан-1-фосфоно-1-метил-фосфиновую кислоту; 2-/m-аминофенил/-1-гидрокси-этан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; /N-/1-/5-амино-2-метил-1-оксо-/пентил/аминометан фосфонометилфосфиновую кислоту; N -/2'-/3'-метил/- пиперидинилиден/аминометан фосфонобутилфосфиновую кислоту; S-/2'-пиридинил/тиометан фосфонометилфосфиновую кислоту; 2-/2-пиридил/-1- гидроксиэтан-1фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 2-/3-пиридил/-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-2-метилфосфиновую кислоту; 2-/N-имидазоил/-1- гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 3-/N-имидазоил/-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 3-N-пентил-N- метиламино/-1-гидроксипропан-1-фосфоно-1-метилфосфоновую кислоту; 4-амино-1-гидроксибутан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 3-N-пироллидино/-1- гидроксипропан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; N-циклогептил аминометанфосфонметилфосфиновую кислоту; S-/п-хлорфенил/тиометанфосфонметилфосфиновую кислоту; /7-дигидро-1-пиридин/метанфосфонметилфосфиновую кислоту; /7-дигидро-1- пиридин/гидроксиметанфосфонметилфосфиновую кислоту; /6-дигидро-2- пиридин/гидроксиметанфосфонметилфосфиновую кислоту; 2-/6-пиролопиридин/-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновую кислоту; 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 1-гидрокси пентан-1,1-бисфосфоновую кислоту; метан бисфосфоновую кислоту; дихлорметанбисфосфоновую кислоту; гидроксиметанбисфосфоновую кислоту; 1-аминометан-1,1-бисфосфоноую кислоту; 2-аминоэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-аминопропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-аминопропан-1-гидрокси-1,1-бис-фосфоновую кислоту; 3-/диметиламино/-1-гидроксипропан- 1,1-бисфосфоновую кислоту; 3,3-диметил-3-амино-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; фениламинометанбисфосфоновую кислоту; N,N-диметиламинометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-гидроксиэтил/аминометан-бисфосфоновую кислоту; 5-амино-1-гидроксипентан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 6-амино-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; индан-2,2-бисфосфоновую кислоту; гексагидроиндан-2,2-бисфосфоновую кислоту; 2-метилциклобутан-1,1-бисфосфоновуго кислоту; 3-хлорциклопентан-1,1-бисфосфоновую кислоту; циклогексан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/2-пиридил/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; N-/2-/5-амино/-пиридил/-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-/5-хлоро/-пиридил/-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-/3-пикоил//-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-/4-пиколил/-аминометан бисфосфоновую кислоту;N-/2-/5-пиколил//-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-/6-пикоил//-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-/3,4-лютидин//-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-пиримидил/-аминометан бисфосфоновую кислоту; N-/2-пиридил/-2-аминоэтан- 1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/2-пиридил/-этан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/3-пиридил/-этан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/4-пиридил/-этан- 1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/2-/3-пиколил//-оксаэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/3-пиридил/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/N- имидазоил/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/N/-имидазоил/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-//N-пентил-N-метиламино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-/N-пентил-N-метил-амино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-/N-пироллидино/-1- гидроксипропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; N- циклогептиламинометанбисфосфоновую кислоту; S/n-хлорфенил/тиометанбисфосфоновую кислоту; /7-дигидро-1-пиридин/метан-бисфосфоновую кислоту; /7-дигидро-1-пириндин/гидроксиметанбисфосфоновую кислоту; /6-дигидро-2-пириндин/гидроксиметанбисфосфоновую кислоту; 2-/6- пиролопиридин/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.

В особенности предпочтительные воздействующие на кость фосфонаты, применимые предложенными способами, включают: 1-гидроксиэтан-1,1-бис-фосфоновую кислоту; дихлорметан бисфосфоновую кислоту; 3-амино-1-гидроксипропан-1,1- бисфосфоновую кислоту; 6-амино-1-гидрокси-гексан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 4-амино-1-гидроксибутан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/3-пиридил/- 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/N-имидазоил/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-/N-пентил-N-метиламино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 3-/N-пироллидино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновую кислоту; N-циклогептиламинометанбисфосфоновую кислоту; S-/n-хлорфенил/тиометанбисфосфоновую кислоту; /7-дигидро-1-пиринаин/метан бисфосфоновую кислоту; /7-дигидро-1-пириндин/гидроксиметан бисфосфоновую кислоту; /6-дигидро-2-пириндин/ гидроксиметанбисфосфоновую кислоту; 2-/6- пиролопиридин/-1-гидрокеиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту; 2-/6-пиролопиридин/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.

Способ, являющийся предметом изобретения, включает также введение экстракта паращитовидных желез. Как указано здесь, термин "экстракт паращитовидных желез" относится к экстракту паращитовидных желез естественного происхождения, его синтетическим аналогам, экстракту паращитовидных желез и фрагментов экстракта, полученных с помощью технологии рекомбинирования ДНК, и фрагментам экстракта паращитовидной железы и аналогам фрагментов экстракта паращитовидных желез. Экстракт паращитовидных желез, применяемый способами, являющимися предметом настоящего изобретения, включает, например, hPTH/1-38/, hPTH/1-34/, hPTH/1-37/.

Детальное описание типов существующих экстрактов паращитовидных желез и способов получения экстрактов паращитовидных желез приведено в следующих источниках: патент США N 4105602, выдан 8 августа 1978 г; патент США N 4698328, выдан 6 октября 1987 г; патент США N 4833125, выдан 23 мая 1987 г; DE 3243358, дата публикации 24 мая 1984 г; DE 3935738, дата публикации 8 мая 1991 г.

Изобретение предлагает способы увеличения костной массы человека или иного животного, пораженного остеопорозом, составляющие тридцатидневный (30 дней) период лечения, включая режим введения экстракта паращитовидных желез и режим введения бисфосфоната, в котором:
а) указанный режим введения экстракта паращитовидных желез заключается во введении указанному субъекту экстракта паращитовидных желез на уровне от приблизительно 4 МЕ/кг в день до приблизительно 15 МЕ/кг в день, в который вводится указанный экстракт паращитовидных желез, при условии, что указанный экстракт паращитовидных желез вводится по меньшей мере один день каждые семь дней из каждого тридцатидневного периода лечения;
б) указанный режим введения бисфосфоната заключается во введении указанному субъекту бисфосфоната на уровне от приблизительно 0,0005 мг P/кг до приблизительно 1,0 мг P/кг в день, в который вводится указанный бисфосфонат, при условии, что указанный бисфосфонат вводится по меньшей мере один день в каждый указанный тридцати-дневный период лечения.

В соответствии с этим тридцатидневный период лечения включает отдельный режим введения каждого активного ингредиента, т.е. один режим для экстракта паращитовидных желез и один режим для бисфосфоната. Экстракт паращитовидных желез должен даваться по меньшей мере один день каждые семь дней из каждого тридцатидневного периода лечения, чтобы поддержать физиологическое воздействие экстракта паращитовидных желез на субъект, подлежащий лечению. Экстракт паращитовидных желез может также даваться каждый день указанного тридцатидневного периода лечения или через день, или каждый третий день, или каждый четвертый день, или каждый пятый день, или каждый шестой день указанного тридцатидневного периода лечения. Единственное ограничение заключается в том, что экстракт паращитовидных желез должен даваться дозой в 4-15 МЕ/кг в день, по меньшей мере один день каждые семь дней указанного тридцатидневного периода лечения. Пока экстракт паращитовидной железы выдается в дозе 4-15 МЕ/кг в день, он может выдаваться различными дозами в диапазоне 4-15 МЕ/кг в день в разные дни, пока он выдается каждые семь дней в указанный тридцатидневный период лечения. Желательно вводить экстракт паращитовидных желез одного типа в один лечебный день и экстракт паращитовидных желез другого типа в другой лечебный день.

Кроме того, по меньшей мере один день в каждый тридцатидневный период лечения должен даваться бисфосфонат. Однако бисфосфонат можно давать каждый день в указанный тридцатидневный период лечения или каждый второй день указанного тридцатидневного периода лечения, или каждый третий день, или каждый четвертый день, или каждый пятый день, или каждый шестой день указанного тридцатидневного лечебного периода. Единственное ограничение заключается в том, что бисфосфонат должен выдаваться дозой в 0,0005 мг P/кг-1,0 мг P/кг в день по меньшей мере один день в течение указанного тридцатидневного периода лечения. Пока бисфосфонат выдается в дозе 0,0005 мг P/кг - 1,0 мг P/кг в день, он может выдаваться различными дозами в диапазоне 0,0005 мг P/кг - 1,0 мг P/кг в различные дни, пока он выдается, по меньшей мере один день в каждый указанный тридцатидневный период. Желательно вводить один тип бисфосфоната в один день лечения и другой тип - в другой день лечения.

Эти режимы лечения применяются последовательно, один за другим, до тех пор, пока не будет достигнута нужная скелетная масса. Служащие целям иллюстрации, но не ограничивающие пределов настоящего изобретения, примеры режимов лечения, возможных в соответствии с методами настоящего изобретения, описаны ниже:
1) экстракт паращитовидных желез вводится в объеме приблизительно 13 ME/кг в день каждый день указанного тридцатидневного периода лечения; на седьмой день указанного тридцатидневного периода лечения вводят высокодейственный бисфосфонат в объеме около 0,001 мг P/кг в день для одного дня;
2)в течение пяти дней вводят бисфосфонат средней действенности в объеме около 0,01 мг P/кг в день; на шестой день начинают вводить экстракт паращитовидных желез в объеме 5 ME/кг в день в течение пятнадцати дней; на двадцать первый день начинают вводить бисфосфонат средней действенности в течение пяти дней, и на двадцать шестой день начинают вводить экстракт паращитовидных желез в течение пяти дней;
3) бисфосфонат средней действенности начинают вводить на уровне около 0,002 мг P/кг в день и вводят в течение четырнадцати дней; на четвертый день начинают вводить экстракт паращитовидных желез на уровне 5 ME/кг в день и вводят в течение двадцати шести дней;
4) экстракт паращитовидных желез вводят в течение тридцати дней в объеме около 4 ME/кг в день; на пятнадцатый день вводится бисфосфонат низкой действенности в объеме около 0,2 мг P/кг в день и вводится в течение пяти дней;
5) экстракт паращитовидных желез вводится в течение тридцати дней в объеме 8 ME/кг в день; на десятый, семнадцатый и двадцать третий день вводится бисфосфонат высокой действенности на уровне 0,001 мг P/кг;
6) бисфосфонат низкой действенности вводят в объеме около 0,2 мг P/кг в день в течение четырнадцати дней; на седьмой день начинают вводить экстракт паращитовидных желез в объеме около 4 ME/кг в день и вводят в течение двадцати трех дней;
7) бисфосфонат высокой действенности вводят в объеме около 0,01 мг P/кг в день в течение двадцати дней; на седьмой день начинают вводить и вводят через день экстракт паращитовидной железы в объеме около 10 ME/кг в течение двадцати трех дней;
8) бисфосфонат средней действенности вводят через день в объеме около 0,02 мг P/кг в день в течение семи дней; и на третий день начинают вводить экстракт паращитовидной железы в объеме около 10 ME/кг в день и вводят в течение пятнадцати дней; на восемнадцатый день начинают вводить бисфосфонат в объеме около 0,02 мг P/кг и вводят его через день в течение, двенадцати дней; на двадцать пятый день начинают вводить экстракт паращитовидной железы в объеме 10 ME/кг в день и вводят в течение пяти дней;
9) экстракт паращитовидной железы вводят на уровне около 4 ME/кг в день в течение пятнадцати дней; на двадцатый и двадцать пятый день вводят бисфосфонат высокой действенности в объеме около 0,002 мг P/кг в день, а на двадцать третий и двадцать седьмой день вводят экстракт паращитовидных желез в объеме около 4 ME/кг в день.

Термины "низкая действенность", "средняя действенность" и "высокая действенность" используются для описания антиресорбционной способности бисфосфоната. Так, например, минимальная действующая доза бисфосфонатов низкой действенности составляет 1,0-0,5; бисфосфонатов средней действенности - 0,5-0,03 и бисфосфонатов высокой действенности - более чем 0,03-0,0001.

Действенность конкретного бисфосфоната может быть выражена в "минимальной действующей дозе" (МДД), которая представляет собой минимальную дозу бисфосфоната, выраженную в миллиграммах фосфора на килограмм, оказывающую эффективное воздействие и значительно подавляющую ресорбцию костей. Конкретные значения МДД бисфосфонатов будут меняться в зависимости от их химического состава и метода их введения (например через рот или парентерально). Чем ниже значение МДД, тем выше действенность бисфосфоната, в целом желательно вводить более действенные бисфосфонаты меньшими дозами и меньшее число дней в течение указанного тридцатидневного периода лечения. Аналогичным образом, чем выше значение МДД, тем менее действенным является бисфосфонат и в целом желательно вводить бисфосфонат низкой действенности более высокими дозами в течение большего числа дней во время указанного тридцатидневного периода лечения.

В частности, значение МДД воздействующих на кость фосфонатов может быть определено с использованием любой из признанных специалистами моделей in vivo. Одной из таких моделей является модель использования крыс с удалением щитовидной и околощитовидной железы (ТРТХ). В этой модели соединения испытывают на действенность подавления ресорбции костей in vivo путем измерения их способности препятствовать увеличению содержания кальция в кровяной сыворотке, вызванному введением экстракта паращитовидных желез крысам, у которых удалена паращитовидная железа. Эта модель описана. Расселом и др. в 6 Calcified Tissue Research, 183 (1970) ; Милбауэром и др.5 Mineral Electrolite Metabolism, 296, (1981); патенте США N 4761406, выданном 2 августа 1988 г; публикации Европейского патента N 298553, опубликованной 11 января 1989 г.

Другой моделью является "модель Шенка", в которой измеряется воздействие воздействующих на кость фосфонатов на рост костей молодых крыс. Эта модель описана Шенком и др., 11 Calcif. Tissye Research,196 (1973); Шинодой и др., 35 Calcif. Tissue Int., 87 (1983); в патенте США N 4761406, выданном 2 августа 1988 г.; публикации Европейского патента N 298553, опубликованной 11 января 1989 г.

Еще одной моделью является модель с удалением яичников у крыс или ОУХ, в которой измеряется способность воздействующих на кость фосфонатов предупреждать потери кости у самок крыс, подвергнутых удалению яичников. Эта модель описана Вронски и др., 125, Endocrinalogy, 810 (1989).

МДД при парентеральном дозировании предпочтительных воздействующих на кость фосфонатов, применяемых в данном случае, равна 1 мг P/кг для 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,5 мг P/кг для дихлорметанбисфосфоновой кислоты; 0,03 мг P/кг для 3-амино-1- гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,001 мг P/кг для 4-амино-1- гидроксибутан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,1 мг P/кг для 6-амино-1- гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,01 мг P/кг для N-/2-пиридин/ аминометан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,0003 мг P/кг для 2-/3-пиридин/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,0001 мг P/кг для N- циклогептиламинометанбисфосфоновой кислоты; 0,0001 мг P/кг для 3-/N-пентил-N-метиламино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,01 мг P/кг для 3-/диметиламино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,01 мг P/кг для 3-N-пироллидино/-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 0,03 мг P/кг для N -циклогептиламинометанбисфосфоновой кислоты и 0,3 мг P/кг для S-/n-хлорфенил/тиометанбисфосфоновой кислоты/. МДД при дозировании для приема через рот должна быть выше, в зависимости от систематического поглощения фосфоната. Обычно поглощение при приеме через рот составляет от примерно от 1 до 10%. Таким образом, МДД при приеме через рот должны быть в десять-сто раз выше, чем при парентеральном дозировании.

При использовании в настоящем случае термин "мг P/кг" относится к количеству соединения, выраженному в миллиграммах фосфора, содержащегося в соединении в расчете на килограмм веса субъекта, проходящего лечение. Поскольку бисфосфонаты различаются по молекулярной массе, выражение количества введенного вещества в мг P/кг позволяет привести в сопоставимый вид биофосфонаты различной действенности. Для того, чтобы определить количество мг P/кг, введенного пациенту согласно способам, являющимся предметом настоящего изобретения, применяется следующая форма пересчета:

Так, например, молекулярная масса 2-/3-пиридинил/-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоната равна 350. Два атома фосфора имеют молекулярную массу 62. Таким образом, если пациенту прописано 0,01 мг/кг соединения, это означает, что было введено около 0,002 мг P/кг.

Экстракт паращитовидных желез обычно дозируют в Международных Единицах (ME).

Методы, являющиеся предметом настоящего изобретения, включают лечение остеопороза на всех стадиях заболевания. Поскольку остеопороз является скорее процессом прогрессирующей потери костной массы, чем заболеванием, которое имеет начало и конец, "лечение", упоминаемое здесь, включает любой метод, который способствует остановке, замедлению или развороту в обратном направлении процесса потери кости, происходящего при остеопорозе.

Предпочтительные методы этого изобретения включают лечение остеопороза у субъектов, уже потерявших скелетную массу (называемое здесь "установившийся остеопороз"). Такие методы, применяемые для лечения установившегося остеопороза, предпочтительно представляют собой введение активных веществ в течение периода времени, достаточного для увеличения чистой скелетной массы указанного субъекта. Увеличение массы может иметь место в корковом веществе кости, костных перекладинах или и там, и там. Предпочтительным является увеличение чистой скелетной массы приблизительно на 1% в год.

Конкретная длительность периода, достаточного для достижения увеличения чистой скелетной массы субъекта, может зависеть от различных факторов. Такие факторы включают, например, конкретные применяемые активные вещества, количество введенного активного вещества, возраст и пол субъекта, конкретное заболевание, которое приходится лечить, другие применяемые одновременно лечебные процедуры (если они применяются), общее физическое состояние субъекта (включая присутствие других заболеваний), степень потери костной массы данным лицом, привычки лица в области питания.

Терапевтический режим применения методов, являющихся предметом, настоящего изобретения, имеет предпочтительную длительность, по меньшей мере около двенадцати месяцев. Конечно, терапевтическое лечение может продолжаться неопределенное время в соответствии с должной медицинской практикой. Предпочтительно продолжать лечение до тех пор, пока достигнутая чистая скелетная масса окажется соответствующей пониженному риску перелома (по оценке лечащего врача).

В методах, являющихся предметом настоящего изобретения "введение" относится к любому методу, который в принятой медицинской практике означает доставку применяемых активных веществ в организме проходящего лечение субъекта таким образом, чтобы добиться эффективного строительства костей. Активные вещества могут вводиться любым из разнообразных известных способов введения, например через рот, через кожу и слизистую оболочку (например через кожу, под язык, через нос, через прямую кишку), парентерально (например путем подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, внутрисуставной инъекции " внутривенной инъекции), а также путем ингаляции. Таким образом, конкретные способы введения включают, не ограничиваясь ими, например, введение, через рот, через кожу, через слизистую оболочку, под язык, внутримышечно, внутривенно, внутрибрюшинно, подкожно, а также местное применение.

Предпочтительный способ лечения остеопороза включает начальный диагностический этап, нацеленный на выявление наличия заболевания. Таким образом, предпочтительный способ, являющийся предметом настоящего изобретения, включает этапы выполнения диагностики человека с целью выявления остеопороза и после получения положительного результата такой диагностики введение активных веществ в соответствии со способами, являющимися предметом настоящего изобретения. При таких методах лечения пациента женского пола после месячных перед значительной потерей костной массы указанный первый этап диагностики включает выполнение диагностики определения менопаузы. Такие методы хорошо известны специалистам и включают определение костной массы и темпов восстановления кости. Темпы восстановления кости могут быть определены путем измерения биохимических маркеров. См. Хюи и др. "The Contribution of Bone Los to Postmenopausal Osteoporosis", J Osteoporosis Int. 30 (1990).

Подходящие методы диагностики установившегося остеопороза также хорошо известны специалистам в этой области. Такие методы включают измерение плотности изображения на рентгенограмме кости, компьютерную томографию, одно- и двухэнергетическую фотонную абсорбциометрию. Техника применяемой диагностики описана В.А. Пеком и др. в Руководстве лечащего врача по остеопорозу (1987), опубликованном Национальным Фондом остеопороза.

Формы дозирования:
Воздействующие на кость фосфонаты и экстракт паращитовидных желез могут вводиться в любом из разнообразных приемлемых фармацевтических составов. Такие составы могут включать активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтически приемлемые носители могут включать твердые или жидкие заполнители, разбавители или формирующие капсулу вещества, а также их смеси, пригодные для введения человеку и животным. Применяемый здесь термин "совместимый" означает, что компоненты фармацевтического состава могут быть смешаны с активными ингредиентами, а также друг с другом таким образом, что не будет иметь места взаимодействие, которое могло бы значительно снизить фармацевтическую эффективность фармацевтического состава при обычных условиях использования. Конечно, фармацевтически приемлемые носители должны обладать достаточно высокой чистотой и достаточно низкой токсичностью, чтобы быть пригодными для введения подвергаемому лечению человеку или животному.

Некоторыми примерами веществ, которые могут служить фармацевтическими носителями, являются: сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы; трагант в порошке; солод; желатин; тальк; стеариновая кислота; стеарат магния; растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, кукурузное масло и масло какао; многоатомные спирты, такие как пропиленгликоль, глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; агар-агар; альгиновая кислота; безпирогеновая вода; изотонический раствор; буферные фосфатные растворы; смачивающие агенты и смазки, такие как лауросульфат натрия; окрашивающие реагенты; ароматизирующие вещества и консерванты. Для использования в составах, являющихся предметом настоящего изобретения, в фармацевтически приемлемый носитель могут быть включены другие совместимые фармацевтические добавки и активные ингредиенты.

Выбор фармацевтически приемлемого носителя, который должен использоваться совместно с активным ингредиентом, определяется способом введения активного ингредиента. Если активный ингредиент вводится путем инъекции, предпочтительным фармацевтическим носителем является стерильная вода, физиологический раствор или их смесь. Значение pH такого парентерального состава предпочтительно доводят до приблизительно 7,4. К подходящим фармацевтически приемлемым носителям для местного применения относятся такие известные в медицине средства, как кремы, гели, клейкие ленты, накладки и т.п.

Фармацевтически приемлемый носитель, применяемый совместно с активными ингредиентами, используется в концентрации, достаточной для того, чтобы обеспечить практически приемлемые размеры дозы. В целом фармацевтически приемлемые носители могут составлять от приблизительно 0,1% до приблизительно 99,9% по весу от фармацевтического состава, являющегося предметом настоящего изобретения, предпочтительно - от приблизительно 5% до приблизительно 80% и наиболее оптимально - от приблизительно 10% до приблизительно 50%.

Предпочтительным способом введения бисфосфонатов является прием через рот, в форме разовых доз (т.е. доз, содержащих количество активного ингредиента, пригодное для введения в одной дозе, согласно проверенной медицинской практике). Предпочтительные формы разовых доз включают таблетки, капсулы, суспензии и растворы, содержащие безопасное и эффективное количество активного ингредиента. Фармацевтически приемлемые носители, пригодные для приготовления форм разовых доз для приема через рот, хорошо известны специалистам. Их выбор может зависеть от вторичных факторов, таких как вкус, стоимость, устойчивость при сушке, что не является определяющим в отношении целей настоящего изобретения, и они могут без труда быть приготовлены специалистом в этой области. Предпочтительно разовые дозы для приема через рот воздействующего на кость фосфоната составляют от приблизительно 0,0005 мг P/кг до приблизительно 1,0 мг P/кг в день фосфоната.

Предпочтительным способом введения экстракта паращитовидных желез является подкожная инъекция разовых доз. Предпочтительными средствами дозирования инъектируемого экстракта паращитовидных желез являются стерильная вода, физиологический раствор или их смесь. Значение pH указанных растворов должно быть доведено до приблизительно 7,4. Предпочтительно разовые дозы экстракта паращитовидных желез составляют приблизительно от 4 ME до 15 ME в день.

Изобретение предлагает также наборы для удобного и эффективного осуществления методов настоящего изобретения. Такие наборы включают одну или несколько разовых доз воздействующего на кость фосфоната, одну или несколько разовых доз экстракта паращитовидных желез и средства для облегчения соответствия с методами, являющимися предметом настоящего изобретения. Такие наборы включают удобные и эффективные средства гарантии того, что проходящий лечение субъект получит нужный ингредиент в правильной дозе и должным образом. Средства соответствия в таком наборе включают любые средства, облегчающие введение активных ингредиентов в соответствии с методами, являющимися предметом изобретения. Такие средства соответствия включают инструкции, упаковку, средства дозирования и их сочетание. Примеры упаковки и средств дозирования, хорошо известные специалистам, включают те, которые описаны в патенте США N 4761406, выданном 2 августа 1988 г; патенте США N 4812311, выданном 14 марта 1989 г, и в патенте США N 4833125, выданном 23 мая 1989 г.

Приведенные ниже примеры, не ограничивающие сферы изобретения, иллюстрируют составы, процессы и применение настоящего изобретения.

Пример 1. Женщина кавказского происхождения весом приблизительно 60 кг с диагнозом остеопороз после месячных проходила лечение по методу, являющемуся предметом настоящего изобретения. В течение одного года:
1) Экстракт паращитовидных желез (человеческий синтетический фрагмент 1-34 или hPTH 1-34) вводился самостоятельно подкожной инъекцией в дозе 13 ME/кг шприцем для инсулина в переднюю поверхность бедра по пять дней каждую неделю;
2) бисфосфонат, 2-/3-пиридил/-1-гидроксиэтан-1,1-бис-фосфоновая кислота, принимался орально в таблетках, содержащих 0,002 мг P/кг в день.

Через год была выполнена биопсия гребешка подвздошной кости, показавшая увеличение средней толщины стенок восстанавливающихся единиц по сравнению с исходными образцами. Частота появления и глубина полостей резорбции на губчатых, корковых и подкорковых поверхностях возросла незначительно по сравнению со значениями, наблюдавшимися на исходных образцах,
Пример 2. Мужчина афро-американского происхождения (с нетравматическими переломами) весом приблизительно 68 кг проходил лечение идиопатического остеопороза методами, являющимися предметом настоящего изобретения. Каждый день в течение двух лет пациент самостоятельно осуществлял подкожную инъекцию экстракта паращитовидных желез (hPTH 1-38) дозой 8 ME/кг. Кроме того, один раз в неделю он принимал орально бисфосфонат, 4-амино-1-гидроксибутан-1,1-бисфосфоновую кислоту в форме таблетки, содержащей 0,03 мг P/кг в день. Реакцию на лечение губчатой части кости изучали с помощью компьютерной томографии позвоночного столба; в конце двухлетнего периода пациент продемонстрировал увеличение плотности костного материала позвоночника на 14,5 мг/см³ по сравнению с исходными показателями. Реакция на лечение коркового вещества кости измерялась однофотонной абсорбиометрией на радиусе, который не показывал потери содержания минеральных веществ в кости (а в действительности некоторое увеличение) по сравнению с исходным показателем. Больше нетравматических переломов не наблюдалось.

Пример 3. Женщине восточного происхождения с хронической астмой, весом около 60 кг был поставлен диагноз гормонального остеопороза. Пациентку подвергали лечению методами настоящего изобретения. Конкретно пациентке ежедневно впрыскивали в нос hPTH 1-34 в объеме 5 ME/кг. Кроме того, ей еженедельно накладывали накожную повязку, позволяющую вводить систематически дозу бисфосфоната 0,005 мг P/кг в день в форме 3-амино-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты. После одного месяца лечения взяли пробу крови, которую анализировали на специфичный костный маркер, остеокальция, а также на содержание щелочной фосфотазы костного происхождения и общее содержание щелочной фосфотазы. Значения остеокальцина выросли на 57%, а содержание костной и общей щелочной фосфотазы несколько выровнялось по сравнению со значениями, определенными до начала лечения. Эти данные соответствуют усилению действия остеобластов без значительного ускорения обмена веществ в кости.

Пример 4. Мужчину кавказского происхождения весом примерно 65 кг подвергли лечению способом, являющимся предметом настоящего изобретения, а именно - лечению экстрактом паращитовидных желез, со следующим непосредственно за ним лечением бисфосфонатом, 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфонатом. Экстракт паращитовидных желез hPTH 1-34 вводили самостоятельно, делая инъекции в течение трех месяцев по 10 МE/кг. Сканирование плотности кости двухфотонной абсорбциометрией продемонстрировало увеличение костной массы. Для того, чтобы закрепить это достижение, введение экстракта паращитовидных желез приостановили и пациенту был предписан курс бисфосфоната, 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоната, с началом со следующей недели и продолжительностью 3 месяца в форме таблеток, содержащих 0,90 мг P/кг в день и принимаемых в рот один день в неделю. В конце курса лечения 1- гидроксиэтаном-1,1-бисфосфонатом денситометрическая оценка кости продемон- стрировала сохранение костной массы. Пациенту вновь будет прописано лечение экстрактом паращитовидных желез, если в конце следующего трехмесячного периода обнаружится заметная потеря кости.

Формула изобретения

1. Способ увеличения костной массы человека или животного, пораженного остеопорозом, включающий введение гормона паращитовидной железы и бисфосфоната, отличающийся тем, что курс лечения включает один или более тридцатидневных курсов, причем указанный режим введения гормона паращитовидной железы включает введение пациенту гормона паращитовидной железы из расчета от 4 до 15 МЕ/кг в день, при условии, что этот гормон паращитовидной железы вводят по меньшей мере в течение одного дня каждые семь дней каждого указанного 30-дневного периода лечения, причем режим введения бисфосфоната включает введение бисфосфоната от 0,0005 до 1,0 мгР/кг в день, при условии, что указанный бисфосфонат вводят по меньшей мере в течение одного дня от каждого 30-дневного периода лечения.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный способ применяют до того, как произошла значительная потеря чистой скелетной массы.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный бисфосфонат является бисфосфоновой кислотой, или ее фармацевтически приемлемой солью, или сложным эфиром.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная бисфосфоновая кислота имеет формулу

где n целое число от 0 до 7;
R¹ водород, хлор, аминогруппа, или гидроксильная группа;
Х -NH-, кислород, или одинарная связь;
R² 5 7-членный гетероцикл, имеющий 1 3 гетероатомов, аминогруппа, аминогруппа, замещенная одной или двумя низшими алкильными группами, или водород,
и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанную бисфосфоновую кислоту выбирают из группы, состоящей из 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты; дихлорметан бисфосфоновой кислоты; 3-амино-1-гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 6-амино-1-гиидроксигексан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 4-амино-1-гидроксибутан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 2-(3-пиридил)-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 2-(N-имидазоил)-1-гидрокосиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 3-(N-пентил-N-метиламино)-1-гидрооксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; 3-(N-пироллидино)-1 -гидроксипропан-1,1-бисфосфоновой кислоты; N-циклогептиламинометанбисфосфоновой кислоты; S-(р-хлорфенил)тиометанбисфосфоновой кислоты; (7-дигидро-1-пиридин)метанбисфосфоновой кислоты; (7-дигидро-1-пиридин)-гидроксиметанбисфосфоновой кислоты; (6-дигидро-2-пиридин)-гидроксиметанбисфосфановой кислоты; 2-(6-пиролопиридин)-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновой кислоты, 2-(2-пиридил)-1-гидрокси-этан-1,1-бисфосфоновой кислоты, и их фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что указанная бисфосфоновая кислота представляет собой 1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту, или фармацевтически приемлемую соль, или сложный эфир.

7. Способ по п.5, отличающийся тем, что указанная бисфосфоновая кислота представляет собой 2-(3-пиридил)-1-гидроксиэтан-1,1-бисфосфоновую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль, или сложный эфир.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный воздействующий на костную массу фосфонат представляет собой фосфоноалкилфосфинат, или его фармацевтически приемлемую соль, или сложный эфир.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что указанный фосфоалкилфосфинат выбирают из группы, состоящей из N-(2'-(3'-метил)-пиридинил)аминометан фосфонометилфосфиновой кислоты; N-(2'-(5'-метил)-пиридинил)-аминометан фосфонометилфосфиновой кислоты; N-(2'-(3'-метил)пиперидинилиден)- аминометан фосфонометилфосфиновой кислоты; N-(2'-(5'-метил)- пиперидинилиден)аминометан фосфонометилфосфиновой кислоты; 2-(2'-пиридинил)этан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; 2-(2'-пиперидинил)этан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; 2-(р-аминофенил)-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; 2-(m-аминофенил)-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; N-(1-(5-амино-2-метил-1-оксо)пентил)аминометан фосфонометилфосфиновой кислоты; N-(2'-(3'-метил)пиперидинилиден)аминометан фосфонобутилфосфиновой кислоты; S-2'-пиридинил) тиометан фосфонометилфосфиновой кислоты и 2-(2-пиридил)-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; 2-(3-пиридил)-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; 2-(N-имидазоил)-1-гидроксиэтан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; 3-(N-пентил-N-метиламино)-1-гидроксипропан-1-фосфино-1-метилфосфиновой кислоты; 4-амино-1-гидроксибутан-1- фосфоно-1-метилофосфиновой кислоты; 3-(N-пироллидино)-1- гидроксипропан-1-фосфоно-1-метилфосфиновой кислоты; N-циклогептиламинометанфосфонометилфосфиновой кислоты; S-(р-хлорфенил)тиометанфосфонометилфосфиновой кислоты; (7-дигидро-1-пиридин)метанфосфонометилфосфиновой кислоты; (7-дигидро-1-пиридин)-гидроксиметанфосфонометилфосфиновой кислоты; (6-дигидро-2-пиридин)-гидроксиметанфосфонометилфосфиновой кислоты; 2-(6-пиролопиридин)-1-гидроксиэтан-1-фосфино-1-метилфосфиновой кислоты, и их фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров.

10. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный гормон паращитовидной железы выбираюит из группы, состоящей из hРТН (1-38), hРТН (1-34) и hРТН (1-37).

11. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный гормон паращитовидной железы вводят каждый день в течение указанного 30-дневного периода лечения.

12. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный гормон паращитовидной железы вводят через день в течение указанного 30-дневного периода лечения.

13. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный гормон паращитовидной железы вводят каждый третий день в течение указанного тридцатидневного периода лечения.

14. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный бисфосфонат вводят через день в течение указанного 30-дневного периода лечения.

15. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный бисфосфонат вводят каждый третий день в течение указанного 30-дневного периода лечения.

16. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный бисфосфонат вводят каждый день в течение указанного 30-дневного периода лечения.