Способ получения кристаллов гр или производных гр, кристаллы человеческих гр или производных человеческих гр и фармацевтический препарат

 

Способ получения гормонов роста или производных ГР, кристаллы человеческих ГР или производных человеческих ГР и фармацевтический препарат в виде фармацевтически приемлемой суспензии кристаллов ГР. Кристаллы ГР выращивают в растворе, содержащем органический растворитель или комбинацию органических растворителей в присутствии катионов цинка, pH раствора составляет от 5,0 до 6,8. Температура раствора составляет от 0 до 30^oС. Выращенные кристаллы выделяют известными методами. Выращенные кристаллы ГР содержат катионы цинка, предпочтительно при молярном соотношении от 0,2 до 10. 3 с. и 19 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение касается способа получения кристаллов гормона роста в присутствии катионов, новой разновидности кристаллов гормонов роста, а также фармацевтических препаратов, содержащих указанные кристаллы нового типа.

Гормоны роста человека (чел. ГР) и обычных домашних животных представляют собой протеины, содержащие приблизительно 191 аминокислоту, которые синтезированы и выделены из передней доли (anteriorlope) гипофиза. Гормон роста - это ключевой гормон, задействованный не только в процессе регулирования роста тела, но также и в процессах регулирования метаболизма протеинов, карбогидратов и липидов.

На протяжении последних 40 и более лет основное внимание было направлено на разгадывание биохимической функции гормонов роста, взятых от тех или иных биологических видов. Причина такого интереса к указанной молекулярной функции кроется в производственном интересе, проявляемом как ветеринарными, так и медицинскими кругами. За это время был клонирован ген ГР, а человеческий гормон роста (чел. ГР, Мет-чел. ГР) был получен методом биосинтеза с использованием культур клеток как бактерий, так и животных.

Фармацевтическим препаратам ГР свойственна нестабильность, вследствие чего (в особенности в растворах ГР) появляются продукты разложения, а именно деамидированные или сульфоксидированные продукты, а также димерные или полимерные формы. Таким образом, сегодня ГР лиофилизируют и хранят в лиофилизированном виде при 4^oC до тех пор, пока перед употреблением он не будет восстановлен пациентом. Подобные вновь восстанавливаемые до рабочей консистенции препараты предпочтительно хранить именно при 4^oC с целью сведения к минимуму риска разложения в растворе. Однако при таком хранении, которое может длиться до 14 сут, некоторое разложение все же будет иметь место. Следовательно, необходим метод получения более стабильных препаратов ГР.

Кроме того, заметное преимущество дало бы исключение стадии лиофилизирования в производстве препаратов ГР. Лиофилизирование - это процесс, который отнимает время и стоит недешево, а кроме того, он налагает ограничения, связанные с вместимостью вымораживающей сушилки.

Настоящее изобретение основано на неожиданном установлении того факта, что упомянутые выше требования могут быть удовлетворены посредством введения в процесс получения ГР стадии кристаллизации. Хотя ГР легко доступен в количествах, достаточных для кристаллизации, успешная кристаллизация ГР редко кому удавалась. В ряде литературных источников сообщалось о микрокристаллах (аморфном веществе), см. работы Джоунса и сотр., Вилхелми и сотр., Кларксона и сотр., Белла и сотр.: Jones et al Bio - Technology 1987, 5, 499 - 500; Wilhelmi et al-J.Biol Chem 1984, 176, 735 - 745; Сharkson et al - J. Mol. Bio; 1989, 208, 719 - 721; Bell et al - J.Biol. Chem, 1985, 260, 8520 - 8525.

Наиболее общеупотребителен для данной цели метод висящей капли (hanging drop method). Сообщалось, что размеры и конфигурация кристаллов значительно варьируют - явно вследствие гетерогенности между теми или иными препаратами гормона роста. О наибольших кристаллов сообщили Джоунс и сотр. (Jones et аl, 1987). Для осуществления их успешных экспериментов они использовали смесь полиэтиленгликоля 3500 и бета-октилгликозид при нейтральном значении pH. Кларксон и сотр. (Clarkson et al 1989) сообщили, что использование низших спиртов и ацетона позволило получить кристаллы объемом 0.001 - 0,005 мм³ различных конфигураций. Однако ни один из известных способов не подходит для промышленного получения кристаллов ГР, главным образом из-за того, что для выращивания требуется время от нескольких недель до одного года.

J. Amer. Chem.Soc., 4429 (1958) раскрывает коммерческий способ получения кристаллов ГР, в котором кристаллы выращивают в растворе KCl и этанола при pH 7,5. Однако полученный продукт представляет собой микрокристаллы.

Для целей ветеринарии была приготовлена рецептура бычьего гормона роста в смеси, содержащей двухвалентные ионы и масло (Европейская патентная заявка N 343696). С целью формирования рецептуры, характеризующейся продленным высвобождением активного компонента, получили добавлением ZnCl₂ (в присутствии липидов) как к бычьему, так и к овечьему гормону роста, бесформенные частицы. Этот гормон роста диспергировали в носителе таким образом, чтобы каждая молекула гормона роста удерживала 1 - 4 атомов цинка. Подобные растворы были получены в присутствии денатурирующих растворов различных концентраций (1 - 4М мочевина) при высоком значении pH (9,5). Попытка воспроизведения этого процесса для человеческого ГР показала, что таким путем получить кристаллы невозможно.

Из литературных источников хорошо известно, что присутствие двухвалентных катионов в ходе процесса кристаллизации позволяет не только осуществить превосходное ориентирование при анализе, что также обеспечить улучшенные физические условия кристаллизации инсулина, (патент США N 2174862). Однако молекула гормона роста более чем втрое крупнее молекулы инсулина и характеризуется совершенно иной конфигурацией. Против ожидания введение катионов в растворы, содержащие чел. Гр, в настоящее время позволило получить стабильные, одинаковые кристаллы гормона роста при высоких значениях выхода. Кроме того, необходимое для формирования кристаллов чел. ГР высокого качества, относительно невелико.

В своем наиболее широком аспекте изобретение касается способа получения катионных кристаллов ГР или производных ГР, который состоит их таких стадий, как: a) введение катионов неорганической или органической природы в раствор ГР или его производство при величине pH, равной 5 - 8; b) выращивание кристаллов при температуре от примерно 0 до примерно 30^oC и c) выделение катионных кристаллов известными методами.

В рассматриваемом контексте под ГР подразумеваются все его разновидности, включая человеческий, бычий, свиной, лососевый, форелевый или тунцовый. Под производными ГР подразумевается ГР человека или животных видов, характеризующихся малыми отклонениями в протеиновой последовательности. Так, несколько аминокислотных остатков могут быть стерты или замещены другими аминокислотными остатками. Сюда же относятся усеченные формы гормона роста и его производных, а также гормоны роста с аминокислотными остатками, добавленными к N - и/или C-окончанию протеина, например, Мет-чел. ГР.

Способ, отвечающий изобретению, прежде всего позволил получить химически стойкие и однородные кристаллы катионного ГР. Кроме того, этот способ допускает получение в случае необходимости как более крупных, так и более мелких кристаллов гормона роста.

Предпочтительно, чтобы величина pH на стадии a) составляла 5,0 - 7,5, предпочтительно 5,0 - 6,8, еще предпочтительнее 5,8 - 6,5, а лучше всего 6,0 - 6,5.

Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения гормон роста является человеческим гормоном роста.

Катионы могут иметь неорганическую или органическую природу. Предпочтительны двухвалентные катионы, причем установлено, что неорганический катион, такой как Zn⁺⁺ хорошо подходит для быстрого формирования стабильных кристаллов ГР. Можно также применять различные смеси упомянутых катионов.

Катион следует вводить в количестве, обеспечивающем быстрое и эффективное образование хорошо сформировавшихся кристаллов. Верхним пределом является такое количество вводимого катиона, которое вызвало бы неспецифическое осаждение значительных количеств аморфного вещества.

Если применяют Zn⁺⁺, то, как правило, подходящие концентрации составляют от примерно 0,2 до 10 моль Zn⁺⁺ на 1 моль ГР. Однако, если реакционная смесь, из которой осуществляют кристаллизацию, содержит буфер или иное соединение, способное связать некоторое количество катиона, например переведя его в комплексную форму, потребуются повышенные концентрации катиона, так как некоторое количество катиона не будет участвовать в процессе кристаллизации.

Предпочтительно использовать Zn⁺⁺ в количестве, обуславливающем образование кристаллов ГР при молярном соотношении Zn⁺⁺ к ГР, равном от примерно 2 : 10 до примерно 10 : 1, лучше от примерно 5 : 10 до примерно 5 : 1, а еще лучше от примерно 1 : 2 до примерно 2 : 1.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения на стадии a) добавляют органический растворитель или смесь органических растворителей. Органический растворитель можно выбрать из группы, состоящей из алифатических, циклических или ароматических спиртов и кетонов с короткими цепочками. Подходящими органическими растворителями являются ацетон, метанол, этанол и 2-пропанол. Предпочтительный органический растворитель - это этанол или ацетон. Концентрация органического растворителя может составлять 0,1 - 50% (об. /об. ), предпочтительно 0,1 - 30%, предпочтительнее 0,1 - 20%, еще лучше 5 - 15%, а самое лучшее 6 - 12% (об./об.).

Предложенный способ можно использовать для осуществления быстрого и эффективного технологического процесса получения рассматриваемого гормона роста благодаря образованию кристаллов из больших объемов растворов.

Настоящее изобретение касается также неизвестных ранее катионных кристаллов ГР или производных ГР.

Упомянутые кристаллы предпочтительно представляют собой кристаллы чел.ГР или кристаллы производных чел. ГР. Предпочтительным катионом является Zn⁺⁺, причем молярное соотношение Zn⁺⁺ к ГР составляет, как правило, от примерно 2 : 10 до 10 : 1, предпочтительно от 5 : 10 до 5 : 1, а еще лучше от 1 : 2 до 2 : 1. Размеры кристаллов будут зависеть от соотношения Zn⁺⁺ к ГР, а также от выбора и состава растворителя, использованного при осуществлении процесса.

Кристаллы чел. ГР, отвечающие изобретению, показали биологические возможности, аналогичные тем, что показал стандартный переведенный в раствор чел. ГР в испытаниях как в лаборатории (in vitro), так и в живом организме (in vivo). Тем самым новые кристаллы ГР можно применять в случае тех же показаний, что и препарат чел. ГР, имеющийся в продаже, Как правило, фармацевтические препараты, содержащие новые кристаллы ГР, будут представлять собой растворы или суспензии и могут содержать обычные адъюванты и добавки, применяющиеся в фармацевтических препаратах чел.ГР, такие как буферы, глицерин и консерванты. Эти препараты можно назначать точно также же, как и препараты чел.ГР, имеющиеся в продаже. Кристаллы можно готовить в сухом виде с последующим восстановлением их рабочей консистенции перед началом применения по назначению.

Фармацевтические препараты, содержащие новые кристаллы ГР, против ожидания отличаются очень высокой химической стойкостью по сравнению с препаратами, приготовленными из ГР, имеющегося в продаже.

Таким образом, изобретение дает возможность получения фармацевтических препаратов, оказывающихся более удобными, в особенности для пациентов. Благодаря высокой стойкости кристаллов в суспензии изобретение является примером того, как можно получить готовые к употреблению фармацевтические препараты в виде суспензий, не нуждающихся в восстановлении рабочей консистенции препаратов самим пациентом перед употреблением.

Другим аспектом изобретения является то, что в нем предложен удобный инструмент для целей получения и очистки ГР.

Исходное вещество, а именно гормон роста, который может иметь любое происхождение и (по желанию) переведен в виде производного в раствор, регулируют до концентрации, предпочтительно превышающей примерно 0,1 мг/мл, лучше составляющей от примерно 4 до примерно 7 мг/мл, а еще лучше - примерно 6 мг/мл. Предпочтительная величина pH составляет 6,0-6,3.

К упомянутому выше раствору можно добавить органический растворитель. Предпочтительным органическим растворителем является этанол, концентрация которого может варьировать от 0,1 до 20%, лучше в пределах 5-15%, а самое лучшее в пределах 6-12%.

Вместо этанола или вместе с ним можно использовать самостоятельно или в смеси другие растворители, такие как ацетон, метанол или пропанол, в концентрациях, находящихся в интервале 1-50%.

Затем в полученный раствор вводят катионы неорганической или органической природы или их смеси.

Предпочтительным катионом является Zn⁺⁺, который обычно применяют в концентрации от 0,5 до 10 моль на 1 моль ГР, предпочтительнее 1,0-3,0 моль/моль ГР, еще лучше 1,1-2,2 моль/моль ГР, а самое лучшее 1,2-2,0 моль/моль ГР.

Если используют неорганический катион иной нежели Zn⁺⁺, то концентрация может варьировать между 0,5 и 10 моль на 1 моль ГР.

Далее кристаллы выращивают в течение времени от 1 до 120 ч, предпочтительно в течение 5-72 ч, лучше всего в течение 20-48 ч, при температуре 0-30^oC, предпочтительно 4-25^oC.

Эти кристаллы можно выделить центрифугированием или фильтрованием с последующей операцией промывки и/или высушивания вымораживанием с целью удаления оставшихся органических растворителей.

После этого фармацевтические препараты высушенных кристаллов или кристаллов в виде суспензии можно приготовить в виде рецептур с использованием тех или иных буферов и других фармацевтически приемлемых добавок.

Пример 1. Кристаллизация чел. ГР в присутствии Zn⁺⁺.

Раствор чел. ГР в количестве 500 мл, полученный по методике Далбоджа и сотр. (Dalboge et al -Bio-Techology 1987, v.5, p. 161-164)и имеющий концентрацию 6 мг/мл, инкубировали в 10 мкМ фосфатном (N aH₂PO₄) буферном растворе при условии регулирования pH до 6,1 при помощи H₃PO₄. Далее вводили ацетон до конечной концентрации 10% (об/об) и затем вводили раствор ацетата цинка до конечной концентрации 0.08 мг ZnAc₂·2H₂O в 1 мл (1,34 моль Zn⁺⁺ на 1 моль чел. ГР).

Полученный раствор оставляли при 15^oC на 20 ч, предоставляя кристаллам возможность за это время сформироваться.

После этого кристаллы отделяли и троекратно промывали кристаллизационным буфером без ацетона. Процесс кристаллизации контролировали под микроскопом, причем измеренные размеры кристаллов составили 8-12 мкм.

Выход кристаллов чел. ГР определяли, переведя промытые кристаллы в 7М мочевину с последующим анализом методом ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Выход составил свыше 50%.

Пример 2. Была повторена процедура Примера 1 за исключением того, что вместо чел. ГР взяли Мет-чел.ГР. Кристаллы, выделенные в ходе этого процесса, были идентичны по конфигурации и размерам кристаллам, полученным в случае чел. ГР. Выход составил свыше 50%.

Пример 3. Была повторена процедура Примера 1 за исключением того, что было исключено введение ацетона.

Кристаллы, полученные в результате такой процедуры, оказались гораздо мельче кристаллов, полученных в Примере 1, а именно, они были мельче 2 мкм.

Пример 4. Была повторена процедура примера 1 в условиях, когда ацетон заменили этанолом, а температуру во время выращивания установили равной 20^oC вместо 15^oC. Все остальные условия проведения эксперимента были те же, что описаны в Примере 1. Варьированием концентрации этанола была установлена оптимальная концентрация, равная 7,5% (об./об.). Выход возрос и превысил 80%, когда после 16-часовой первоначальной кристаллизации матричной жидкости добавляли 4% (об./об.) этанола, а температуру кристаллизации в течение 16 ч снижали с 20 до 10^oC. Размеры кристаллов составили 3-6 мкм, причем их конфигурация была аналогична описанной в Примере 1.

Пример 5. Определение количества цинка, связанного в кристаллах чел.ГР Была повторена процедура Примера 1 за исключением того, что вместо ацетона вводили этанол с концентрацией 7,5% (об./об.), после чего кристаллам давали сформироваться при 20^oC в течение 16 ч. Далее кристаллы отделяли от матричной жидкости центрифугированием и промывали один раз 10 мМ фосфатным буферным раствором. Эти кристаллы переводили в раствор, повышая pH до 8,0 при помощи NaOH/ Измерения чел. ГР проводили методами ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии или УФ поглощения. Концентрацию цинка измеряли методом атомного поглощения, после чего результаты сравнивали с соответствующими значениями, полученными для всей суспензии кристаллов. Было найдено, что отношение связывания цинка человеческим гормоном роста составляет 1,9 моль цинка на 1 моль чел. ГР.

Пример 6. Рецептура фармацевтического препарата, содержащего чел. ГР Кристаллы были выращены, как это описано в Примере 5, и хранились при 4^oC. Затем эти кристаллы выделяли в чистом виде центрифугированием с последующим удалением матричной жидкости. Далее кристаллы высушивали вымораживанием на протяжении ночи, с тем чтобы получились сухие кристаллы, не содержащие органического растворителя. Фармацевтическую суспензию высушенных кристаллов готовили согласно следующей рецептуре, мг/мл: Кристаллы чел. ГР - 1,3 NaH₂PO₄·2H₂O - 3,0 Zn(Ac)₂·H₂O - 0,1
Глицерин - 15,0
Бензиловый спирт - 15,0
Величину pH регулировали до 6,2.

Пример 7. Была повторена процедура Примера 6 за исключением того, что Zn(Ac)₂ · H₂O не использовали, вследствие чего рецептура суспензии имела вид, мг/мл:
Кристаллы чел.ГР - 1,3
NaH₂PO₄ · 2H₂O - 3,0
Глицерин - 15,0
Бензиловый спирт - 15
Величину pH регулировали до 6,2.

Пример 8. Кристаллы обрабатывали точно таким же образом, что и в примере 6, а рецептура суспензии имела следующий вид, мг/мл:
Кристаллы чел.ГР - 1,3
NaH₂PO₄ · 2H₂O - 2,5
NaCl - 5,7
Бензиловый спирт - 15,0
Величину pH регулировали до 6,2.

Пример 9. Кристаллы обрабатывали точно таким же образом, что и в примере 6, а рецептура суспензии имела следующий вид, мг/мл:
Кристаллы чел.ГР - 1,3
NaH₂PO₄ · 2H₂O - 2,14
NaCl - 9,0
Величину pH регулировали до 6,1.

Пример 10. Для оценки непосредственно в живом организме (in vivo) биологических возможностей кристаллов чел.ГР, полученных согласно настоящему изобретению, было проведено испытание на большой берцовой кости крыс (с рассечением гипофизом). Это испытание проводили по методике, описанной в руководстве "Европейская фармакопея".

Два препарата кристаллов чел.ГР, полученных согласно примеру 1 и представленных рецептурами, отвечающими Примеру 9 (препараты F-7 и F-8) и содержащими оцениваемый количественный эквивалент до 4IU каждый, были испытаны в сравнении с растворенным стандартом препаратом чел.ГР.

Были получены следующие результаты (табл.1):
По результатам проведенного испытания был сделан вывод о том, что кристаллы чел. ГР, отвечающие настоящему изобретению, по своим биологическим возможностям равны стандартному препарату чел.ГР, переведенному в раствор, и, следовательно, по биологической ценности будут равны обычному чел.ГР, переведенному в раствор.

Пример 11. Кристаллы чел.ГР были выращены так, как это описано в Примере 5. Перед самым употреблением суспензию готовили центрифугированием кристаллов с последующим удалением матричной жидкости и повторным переводом кристаллов в суспензию в стерильном растворе 10 мМ NaH₂PO₄ (pH 6,2) и в результате была получена суспензия с конечной концентрацией 0,16 мг чел.ГР в 1 мл.

Полученную суспензию использовали для оценки возможностей препарата кристаллов чел. ГР проведением испытаний на увеличение массы. Это испытание было проведено согласно методике, описанной в руководстве "Европейская фармакопея", за исключением того, что продолжительность дозировки был продлена до 10 сут с целью оптимизации биологической реакции.

Были использованы два препарата кристаллов чел.ГР (причем каждый содержал некоторое количество протеина чел.ГР), испытываемые по отношению к стандарту гормона роста. Стандартом служил препарат чел.ГР, высушенный замораживанием (с последующим восстановлением консистенции). Все животные получили одно и то же количество чел.ГР.

Было найдено, что возможности препаратов кристаллов чел.ГР составляют 92,6% по отношению к стандартному препарату. Пределы 95%-ной достоверности составили 79,1-126,4% по отношению к стандартному препарату.

Таким образом было показано, что препарат кристаллического чел.ГР обладает биологическими возможностями, равными возможностям переведенного в раствор стандартного препарата чел.ГР.

Пример 12. Стабильность кристаллов чел.ГР при их хранении в виде суспензии при 22-24^oC в течение 6 мес.

Кристаллы были сформированы, как это описано в Примере 1, за исключением того, что концентрация вводимого ацетона составляла не 10% (об/об), а 7,5%.

Этим кристаллам в виде суспензии в матричной жидкости давали отстояться при 22-24^oC в течение 6 мес. Далее центрифугированием снимали пробу кристаллов чел.ГР, промывали эти кристаллы один раз кристаллизационным буферным раствором без ацетона и переводили в раствор, повышая pH до 8,0.

Переведенные в раствор кристаллы чел.ГР были подвергнуты анализу методами ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии и гель-проникающей хроматографии с целью обнаружения дезамидированных и расщепленных форм или де димеров и полимеров соответственно.

Сравнение полученных данных для лиофилизированного препарата чел.ГР восстановленной консистенции, находившегося на хранении при 25^oC в течение 32 суток, показывает, что главный пик для кристаллов чел.ГР, возвращенного в рабочее состояние, выше, чем для лиофилизированного чел.ГР восстановленной консистенции, хранившегося в сопоставимых условиях (табл.2).

Формула изобретения

1. Способ получения кристаллов ГР или производных ГР, включающий рост кристаллов в растворе, содержащем органический растворитель, отличающийся тем, что к раствору ГР или производных ГР добавляют катионы цинка с концентрацией ниже предельной для неспецифического осаждения аморфного материала и органический растворитель или смесь органических растворителей при рН 5,0 - 6,8, выращивают кристаллы при температуре 0 - 30^oС и выделяют указанные кристаллы известными методами.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что величину рН поддерживают от 5,8 до 6,5.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что величину рН поддерживают от 6,0 до 6,5.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что органический растворитель выбирают из группы, состоящей из алифатических, циклических или ароматических спиртов или кетонов с короткими цепочками.

5. Способ по п.4, отличающийся тем, что органический растворитель выбирают из группы, состоящей из ацетона, метанола, этанола и 2-пропанола.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что органический растворитель представляет собой этанол или ацетон.

7. Способ по любому из пп.1 - 6, отличающийся тем, что органический растворитель вводят с концентрацией от примерно 0,4 до примерно 50% (об/об).

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что органический растворитель вводят с концентрацией 0,1 - 30%.

9. Способ по п.7, отличающийся тем, что органический растворитель вводят с концентрацией 0,1 - 20%.

10. Способ по п.7, отличающийся тем, что органический растворитель вводят с концентрацией 5 - 15%.

11. Способ по п.7, отличающийся тем, что органический растворитель вводят с концентрацией 6 - 12%.

12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что катионы цинка вводят с концентрацией 0,5 - 10 моль катионов цинка на 1 моль ГР.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что концентрация катионов цинка составляет 1,0 - 3,0 моль катионов цинка на 1 моль ГР.

14. Способ по п.12, отличающийся тем, что концентрация катионов цинка составляет 1,1 - 2,2 моль катионов цинка на 1 моль ГР.

15. Способ по п.12, отличающийся тем, что концентрация катионов цинка составляет 1,2 - 2,0 моль катионов цинка на 1 моль ГР.

16. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что ГР представляет собой человеческий ГР или его производное.

17. Способ по любому из пп.1 - 16, отличающийся тем, что при выделении кристаллов из раствора температуру раствора поддерживают от 4 до 25^oС.

18. Кристаллы человеческих ГР или производных человеческих ГР, отличающиеся тем, что они содержат катионы цинка.

19. Кристаллы по п.18, отличающиеся тем, что молярное отношение катионов цинка и ГР составляет от примерно 0,2 до 10.

20. Кристаллы по п.18, отличающиеся тем, что молярное отношение катионов цинка и ГР составляет от 0,5 до 5.

21. Кристаллы по п.18, отличающиеся тем, что молярное отношение катионов цинка и ГР составляет от 0,5 до 2.

22. Фармацевтический препарат, отличающийся тем, что он содержит кристаллы ГР согласно любому из пп.18 - 21 в виде фармацевтически приемлемой суспензии.

РИСУНКИ

Рисунок 1