Способ сертификации лекарственных средств

 

Изобретение относится к области медицины. Способ сертификации лекарственных средств, подвергавшихся радиации путем измерения амплитуд интенсивности вспышек при хемилюминесценции суспензии полиморфоядерных лейкоцитов клеток живого организма в присутствии анализируемых веществ и люминола при температуре порядка 37oC (сертифицируемым средством является облученное гамма-лучами лекарственное средство) и регистрирует его воздействие на клетки живого организма, после чего сравнивают результаты измерений с необлученными лекарственными средствами; так повторяют каждые трое суток в течение месяца, при этом к измеряемым параметрам относят максимальную амплитуду первой вспышки хемилюминесценции в 107 квант/с4 при добавлении необлученного лекарственного средства, амплитуду интенсивности через 1 мин после закрытия шторки хемилюминометра для введения пробы облученного лекарственного средства в 107 квант/с4, а величину токсичности облученного лекарственного средства определяют по величине разности амплитуд интенсивности первой вспышки с добавлением необлученного лекарственного средства и интенсивности хемилюминесценции при наличии облученного сертифицируемого лекарственного средства. Таблетки предварительно измельчают и растворяют в воде 2 мг/мл, используют кровь кролика или человека с 5% цитрата натрия в соотношении 4:1, калибруют хемилюминесцентную аппаратуру. Способ позволяет оценить токсичность и биологическую активность облученных гамма-лучами лекарственных средств противорвотного и противосудорожного действия.1 с. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил. , 4 табл.

Изобретение относится к области фармации и может быть использовано для оценки токсичности и биологической активности облученных гамма-лучами лекарственных средств /ЛС/ противорвотного /типа диметкарба/ и противосудорожного /типа феназепама/ действия.

Известно, что в реальной обстановке мирного и военного времени ЛС могут подвергаться влиянию неблагоприятных факторов окружающей среды как естественно, так и техногенного характера, в частности, ионизирующих излучений /ИИ/.

Ионизирующие излучения способны вызывать в лекарственных средствах различные изменения, в том числе химической структуры, физико-химических свойств, приводящих к изменению токсичности и биологической активности этих средств, характеризующих их качественное состояние. Интерес к оценке влияния ионизирующих излучений на лекарственные средства обусловлен необходимостью принятия решений по дальнейшему хранению и использованию этих лекарственных средств после воздействия на них ИИ в результате взрывов ядерных боеприпасов в военное время и крупномасштабных аварий на атомных энергетических установках в мирное время.

После радиационного воздействия на ЛС происходит уничтожение микроорганизмов в ЛС и, в какой-то степени, повреждается ЛС, при этом повышается токсичность ЛС, что может причинять вред живому организму. Поэтому для оценки степени опасности ЛС проводится определение их токсичности /острой, подострой и хронической/ с помощью животных /биологический способ/. Для определения острой токсичности ЛС вводят однократно в увеличивающихся дозах животным различных групп /Государственная фармакопея СССР. XI издание, М.: Медицина, т. 1, 1987, с.336; т.2, 1990, с.398/. Основная цель определения острой токсичности - это не только определение средней сертельной дозы /ЛД 50/ ЛС/доза, приводящая к гибели половины животных в группе, состоящей из особей одного вида и одной линии/, но и установление характера действия яда. ЛД 50 выбрана в качестве основного показателя токсичности вещества в связи с тем, что она является наиболее статистически точной величиной в диапазоне смертельных доз /там же/. Известный способ требует содержания в виварии 30-40 животных /кроликов/ и выполнения инъекций этим экспериментальным животным. Причем стоимость одного кролика составляет в среднем 30000 рублей, стоимость одной крысы - 5000 рублей, а в эксперименте задействованы, как правило, 30 животных. Тогда стоимость одного эксперимента достигает 150000 рублей. Более того, выполнение анализа с использованием экспериментальных животных требует времени от 6 до 24 часов. Таким образом, известный способ /см. выше/ очень сложен, является дорогостоящим, требует больших затрат времени и плохо воспроизводим.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному способу сертификации ЛС является способ определения цитотоксичности пыли / а.с. N 1010561, 02.07.81/. Этот способ выбран в качестве прототипа. Изучение действия различных видов пыли на клетки живого организма с помощью хемилюминесценции - слабого свечения, сопровождающего химические реакции и физико-химические процессы, - обусловлено цитотоксическими свойствами пыли, связью между воздействиями пыли на человека и развитием пневмокониозов и участием активных форм кислорода в мутагенном действии промышленной пыли. Для определения цитотоксичности пыли к суспензии полиморфоядерных лейкоцитов в присутствии люминола, усиливающего интенсивность свечения, добавляют исследуемую пыль и измеряют интенсивность вспышки хемилюминесценции /ХЛ/. Измерения производят при температуре 37oC. Конечная концентрация люминола составляет 5,510-4М. Для определения цитотоксичности пыли в клювету хемилюминометра /ХЛМ/ помещают суспензию клеток с люминолом, спустя 10-15 мин вводят 0,2 мл взвеси пылевых частиц в физиологическом растворе. Через 20-30 с развивается вспышка ХЛ, которая достигает максимального значения через 1 мин. Чем выше цитотоксичность исследуемой пыли, тем выше амплитуда вспышки ХЛ. Так, при введении пылевых частиц Люберецкого кварца, характеризующегося высокой цитотоксичностью, амплитуда вспышки ХЛ составляла 190-210 отн.единиц. Если вводят малотоксичные пылевые частицы. Основным недостатком прототипа является отсутствие технологии определения специфической биологической активности и токсичности лекарственных средств в виде базисного экспрессного способа сертификации облученных гамма-лучами лекарственных средств с использованием оценки разности амплитуд интенсивности ХЛ при наличии необлученных и облученных лекарственных средств в хемилюминометре.

Целью изобретения является сокращение времени сертификации лекарственных средств путем инспекционного контроля и экспресс-оценки биологической активности и токсичности гамма-облученных лекарственных средств противорвотного /типа диметкарба/ и противосудорожного /типа феназепама/ действия за счет измерений и регистрации реакций клеток цельной крови кролика или человека в виде их хемилюминесцентного ответа - отклика на воздействие ЛС с изменившимися качественными характеристиками, обусловленными ионизирующим излучением.

Поставленная цель достигается тем, что ЛС, облученное гамма-лучами, подготавливают к сертификации, в частности, жидкие формы ЛС не требуют подготовки, а твердые, таблетированные формы, предварительно измельчают в фарфоровой ступке и растворяют в дистиллированной воде в концентрации 2,0 мг/мл и приготавливают рабочие растворы, для чего используют кровь кролика или донорскую кровь человека с антикоагулянтом - 5% цитратом натрия /натрия лимоннокислого/ при соотношении крови и цитрата натрия -лимонно-кислого 4:1, причем до проведения сертификационных анализов кровь хранят в холодильнике при температуре +4oC не более 8 ч после чего измеряют и регистрируют хемилюминесценцию, для чего используют стандартную среду следующего состава: 165 мМ NaCl, 15 мМ Трис-HCl, 2,25 мМ CaCl, 25 мM BaSO4, pH 7,40,5 /полный буферный раствор/, причем сульфат бария находится в этой среде в виде суспензии, а люминол в концентрации 2,0 мг/мл растворяют в диметилсульфоксиде и используют этот раствор, как маточный, причем непосредственно перед измерением маточный раствор разводят в 100 раз в дистиллированной воде, в полный фосфатный буфер приготавливают так, - 1000 мл дистиллированной воды растворяют 6,72 г NaCl и 1,825 г Трис-HCl /оксиметиламинометан/, затем из приготовленных 1000 мл раствора отливают в два химических стакана по 125 мл, в одном из них растворяют 6,107 г BaCl2, а в другом - 3,55 г NaSO4, далее при смешивании этих растворов образуют 250 мл 100 мМ суспензии BaSO4, которые добавляют в к 750 мл первоначального раствора, в результате получают полный буферный раствор, который имеет щелочную pH, и для доведения раствора pH до 7,40,05 его титруют раствором HCl и к 1000 мл полного буферного раствора добавляют 2,5 мл 10% раствора CaCl2, после чего для измерения и регистрации хемилюминесценции в кювету хемилюминометра /ХЛМ/ наливают 1 мл полного буферного раствора и 0,1 мл рабочего раствора люминола в концентрации 1,1410-4 М, 0,1 мл дистиллированной воды, при этом в кювету добавляют 20 мкл цельной крови с антикоагулянтом 4:1 и помещают кювету в темновую камеру ХЛМ, открывают шторку темновой камеры и регистрируют хемилюминесценцию, причем измерения проводят без перемешивания при температуре (37,0-1,0oC), затем на максимуме медленной вспышки хемилюминесценции закрывают шторку хемилюминофора и добавляют 0,05 мл сертифицируемого лекарственного средства, после чего открывают шторку темновой камеры и через 1 мин после закрытия шторки темновой камеры для введения пробы оцениваемого лекарственного средства, анализируют интенсивность хемилюминесценции. Процедура добавления пробы ЛС занимает время менее 1 мин, поэтому для стандартизации результатов измерений берут промежуток времени несколько больший, равный 1 мин. Все ЛС сертифицируют по вышеуказанной технологии. К измеряемым параметрам хемилюминесценции относят H1 - максимальную амплитуду вспышки Хл и H2 - интенсивность хемилюминесценции через 1 мин (интервал - ) после закрытия шторки хемилюминометра для введения пробы при анализе облученного ЛС (фиг. 1). На фиг. 1 приведена типичная кинетика вспышки стимулированной сульфатом бария люминолзависимой хемилюминесценции цельной крови при добавлении на максимуме вспышки 0,85%-ного раствора хлористого натрия (контроль) или сертифицируемого ЛС /0/. Начало отсчета времени совпадает с моментом смешивания кристаллов сульфата бария с лейкоцитами крови. Стрелками обозначены моменты закрытия и открытия шторки хемилюминометра, = 1 мин.

Чтобы достичь цели анализа - определить: изменилось или нет качественное состояние сертифицируемого ЛС и в чем выражаются эти изменения - необходимо, во-первых, установить сам факт изменения качественных показателей; во-вторых, определить связь между силой воздействия повреждающего фактора и выраженностью найденных изменений качества ЛС, и наконец, в-третьих, попытаться выяснить - какой из градиентов сертифицируемого лекарственного средства подвергся наиболее существенной модификации. Ответ на последний вопрос в наибольшей степени определяет, в конечном итоге, судьбу лекарственного препарат, т. е. перспективы его хранения и использования в дальнейшем по назначению. В заключении необходимо оформить сертификат качества ЛС. В сертификат на пробу ЛС включают следующие данные: а/ сведения о ЛС /наименование, серия, дата изготовления, лекарственная форма/; б/ установление факта изменения качественного состояния ЛС под влиянием ионизирующего излучения, подтвержденного объективными характеристиками; в/ показатель или показатели, позволяющие дать сравнительную оценку /в абсолютных или условных единицах/ облученного лекарственного препарата с интактным ЛС. Сертификат должен заканчиваться рекомендациями, касающимися порядка хранения или применения облученных ЛС.

Пример сертификата: в анализируемой пробе ЛС /препарат, серия.. 08.03.95 г., раствор/, подвергшегося воздействию ИИ, выявлены изменения биологической активности и увеличение токсичности, определенные по ингибированию регистрируемой хемилюминесценции на 25-30% по сравнению с интактной пробой того же препарата. Регистрируемые изменения связаны с модификацией субстанции /действующего начала/ сертифицируемого лекарственного средства. Хранение ЛС в условиях продолжающего воздействия ионизирующих излучений недопустимо.

С целью повышения точности измерений величины амплитуд интенсивности хемилюминесценции, периодически производят калибровку и поверку хемилюминесцентной аппаратуры с помощью стандартного источника излучения, при этом в качестве эталона для оценки интенсивности хемилюминесценции используют стекло ЖС-19 (ГОСТ 9411-81), испускающее свет в видимой области спектра и прокалиброванное в абсолютных величинах (квант/с4мг) по стандартному радиолюминесцентному источнику, для чего на дно кюветы хемилюминометра типа ПХЛ-1 или серии "ИРА" помещают эталон-стекло ЖС-19 с известным суммарным световым потоком (Iо) и регистрируют соответствующий его суммарному световому потоку (Iо) фототок в условных единицах (Aо), затем в такой же кювете проводят регистрацию фототока (Ax) в условных единицах при анализе данной хемилюминесцентной реакции и по формуле Ix= 0,75Io-(Ax/Ao) вычисляют суммарный световой поток Ix данной хемилюминесцентной реакции на разных стадиях ее развития, например, на максимуме ее интенсивности, при удельной интенсивности эталонов ЖС-19, равной 1,45103 квант/с4мг.

В качестве примеров проведения сертификации ЛС приводятся результаты проб, проведенных стабельными лекарственными препаратами феназепамом (3%-ный раствор) и диметкарбом (табл.1), облученными гамма-излучателями в дозах 0,7 и 5 кГр.

Сразу же после добавления в стандартную хемилюминесцентную среду, указанную выше, 50 мкл необлученного раствора феназепами /конечная концентрация 3,7 мМ/ интенсивность хемилюминесценции (ХЛ) составляла (3,00,3)107/квант c4 и через 6 мин снизилась до нуля. Если же добавляли облученный раствор феназепама, то ингибирование ХЛ при дозе облучения 5 кГр было на 27% больше, чем при добавлении необлученного феназепама: интенсивность ХЛ сразу же после введения препарата составляла Хемилюминесценция снизилась до нуля через 4 мин. Как видно из табл. 1. при увеличении концентрации феназепама в пробе его тушащая активность возрастает, но тушащая активность облученного раствора феназепама возрастает в большей степени.

Полученные данные свидетельствуют о том, что сам по себе раствор феназепама в диметилсульфоксиде обладает способностью ингибировать генерацию стимулированными лейкоцитами цельной крови активных форм кислорода. Чтобы ответить на вопрос о механизме этого ингибирования изучают зависимость между концентрацией феназепама в пробе и приростом тушащей активности раствора феназепама после облучения. На фиг. 2 приведена зависимость между конечной концентрацией феназепама в пробе и приростом тушащей активности раствора феназепама после облучения. На фиг. 2 видно, что тушащая активность облученного раствора феназепама при небольших концентрациях резко возрастает с ее увеличением, а в последующем, начиная с концентрации в пробе 2 мМ, не сопровождается увеличением тушащей активности феназепама. Таким образом, после гамма-облучения ЛС феназепама в дозе 5 кГр, в нем появляются изменения, которые проявляются в том, что препарат феназепама ингибирует способность фагоцитов крови генерировать активные формы кислорода. Этот факт свидетельствует об изменении биологической активности и повышении токсичности феназепама. Теперь необходимо ответить на вопрос о зависимости величины тушения ХЛ от дозы облучения. Для выяснения этой зависимости на максимуме вспышки ХЛ в стандартную систему добавляют 20 мкл раствора феназепама с разными дозами облучения (0,7 и 5 кГр). На фиг. 3 видно, что чем больше доза облучения, тем выше тушащая активность сертифицируемого ЛС, т.е. тем ниже интенсивность ХЛ после добавления оцениваемого препарата. На фиг. 3 приведена кинетика вспышки стимулированной сульфатом бария люминолзависимой ХЛ цельной крови при добавлении на максимуме вспышки 20 мкл раствора феназепама, облученного в дозах 0,7 и 5,0 кГр /цифры указаны у кривых/. Начало отсчета времени совпадает с моментом смешивания кристаллов сульфата бария с кровью. Стрелки указывают моменты закрытия и открытия шторки хемилюминометра. На фиг. 3 видно, что кинетика ХЛ существенно не меняется. Обнаруживаемый спад свечения происходит практически параллельно в обоих случаях. Это свидетельствует о том, что раствор феназепама действует только на один механизм в генерации активных форм кислорода стимулированными фагоцитами. Кинетика ХЛ изменяется в тех случаях, когда оцениваемый объект оказывает действие на два и более механизмов, приводящих к образованию квантов света. Нелинейность возникает при наложении этих эффектов.

В табл. 2 показано изменение некоторых параметров ХЛ при добавлении раствора феназепама в диметилсульфоксиде в зависимости от дозы облучения, т.е. влияние дозы облучения растворов феназепама в диметилсульфоксиде на тушение им стимулированной сульфатом бария люминолзависимой ХЛ цельной крови.

Из табл. 2 видно, что до добавления пробы феназепама интенсивность ХЛ (H1) практически не отличалась во всех трех случаях. Параметр H2 подтвержден значительными колебаниям, связанным, по-видимому, с нестабильностью используемой клеточной системы хемилюминесценции. Наилучшие результаты получены при измерении параметра тушащей активности T= H1-H2. Таким образом, можно сделать вывод о том, что с увеличением дозы облучения более существенными становятся изменения биологической активности и токсичности раствора феназепама, о чем свидетельствует увеличение способности феназепама тушить стимулированную сульфатом бария ХЛ цельной крови.

Более сложной, но в то же время и более чувствительной системой сертификацией ЛС, является система-способ, в котором стимул (сульфат бария) добавляют после введения в нее оцениваемого ЛС. В этом случае ЛС оказывает влияние не только на этап генерации активных форм кислорода, но и этап взаимодействия клеток со стимулом. На фиг. 4 приведена кинетика стимулированной сульфатом бария люминолзависимой ХЛ цельной крови при добавлении раствора феназепама до стимулирования клеток /цифры у кривых: 1 - контроль, добавлено 20 мкл 0,85 % раствора NaCl, 2 - добавлено 20 мкл необлученного раствора феназепама; 3 - добавлено 20 мкл раствора феназепама, облученного в дозе 5,0 кГр/. Таким образом, установлено (фиг. 4), что добавление 20 мкл необлученного раствора феназепама привело к снижению интенсивности ХЛ. Добавление же облученного раствора фенозепама приводит к еще более значительному ее снижению. При этом кинетика свечения существенно не изменяется. Снижение ХЛ становится более выраженным, чем в случае добавления раствора феназепама на максимуме вспышки; при добавлении на максимуме вспышки величина T составляла 1,0107 квант /с4 , а при добавлении раствора феназепама вначале, до стимуляции клеток, величина T составляла 1,3107 квант /с4 . На этой, более чувствительной, модели расширяется задача, состоящая в определении этого, такой из ингредиентов и в какой степени изменил свои свойства.

Пример 2. Для того, чтобы доказать, что изменения биологической активности и токсичности препарата феназепама связаны с изменениями, произошедшими в молекуле самого феназепама, а не применяемого для изготовления препарата растворителя - диметилсульфоксида - раствор феназепама развести в дистиллированной воде в 4 раза. В разведенном таким образом растворе, феназепам неустойчив и выпадает в осадок. Для исследования берут надосадочную жидкость. Оказалось, что супернатант от облученных и необлученных препаратов практически одинаково тушили ХЛ, а находящаяся в осадке суспензия облученного препарата тушила ХЛ на 32%, чем такая же суспензия феназепама /табл. 3/, не облученного ионизирующим излучением.

В табл. 3 приведены результаты влияния раствора феназепама на тушащую активность супернатанта и осадка, образовавшихся после обработки раствора феназепама дистиллированной водой. Следовательно, изменения связаны с молекулой феназепама, которая становится более активной в отношении ингибирования функции фагоцитов крови. Таким образом, можно сделать еще один вывод о том, что не растворитель, а именно феназепам изменяет свои физико-химические свойства, биологическую активность и токсичность, которые проявляются в усилении его способности ингибировать генерацию фагоцитами цельной крови активных форм кислорода.

Итак, в сертифицируемой пробе раствора феназепама 3% после воздействия ионизирующих излучений обнаружены изменения биологической активности и увеличение токсичности; указанные изменения становятся более выраженными при увеличении дозовой нагрузки гамма-излучения: при дозе 0,7 и 5 кГр тушащая активность облученного раствора феназепама соответственно возросла в 2,7 и 3,2 раза; выявленные изменения обусловлены модификациями, произошедшими в самом феназепаме /субстанции/ и не связаны с растворителем /диметилсульфоксидом/. Рекомендации: реализацию облученного препарата начинают с запасов, облученных в дозе 5,0 кГр, выборочные повторные анализы всех облученных препаратов проводят через каждые трое суток в течение месяца; при нарастании величины выявленных эффектов решают вопрос об изъятии облученных препаратов из запасов, их использовании или уничтожении. Твердые формы ЛС предварительно измельчают и растворяют в различных растворителях, затем сертифицируют по заявленному способу.

Пример 3. Сертификация препарата диметкарба. Сначала регулируют кинетику вспышки ХЛ по вышеописанному способу сертификации ЛС, не добавляя при этом ничего. Затем раствор диметкарба, предварительно приготовленный /диметкарб измельчают и растворяют в дистиллированной воде из расчета, чтобы его концентрация оставила 12 мг/мл, или дистиллированную воду /контроль / в объеме 0,1 мл добавляют на максимуме вспышки ХЛ. Доза облучения составляла 0,7 кГр. Регистрируют амплитуду вспышки ХЛ до и после добавления 0,1 мл пробы. Результаты влияния облучения таблеток диметкарба на тушащую активность их растворов приведены в табл. 4.

Из табл. 4 видно, что добавление к суспензии клеток необлученного диметкарба не приводило к изменению интенсивности свечения.

Хотя учитывая, что в контроле добавление дистиллированной воды сопровождалось увеличением интенсивности свечения, можно говорить о тушащем эффекте раствора таблеток интактного диметкарба. Добавление облученного диметкарба приводит к тушению ХЛ на 21% как по сравнению с исходным уровнем, так и по сравнению с необлученным диметкарбом. На основании полученных данных можно сделать вывод, что диметкарб, облученный в дозе 0,7 кГр, изменяет свою биологическую активность и повышает токсичность. Обнаруженные эффекты проявляются в ингибировании стимулированной сульфатом бария люминолзависимой хемилюминесценции цельной крови. Таким образом, в сертифицируемой пробе таблеток препарата диметкарба выявлены изменения качественного состояния, выразившиеся в модификации биологической активности и увеличении токсичности под влиянием ионизирующего излучения, определенные по ингибированию стимулированной хемилюминесценции на 21% по сравнению с контрольным препаратом. Рекомендации: лабораторный контроль за облученными препаратами осуществлять в течении месяца. При нарастании выявленных изменений решить вопрос об изъятии этих препаратов из запасов, выдаче на снабжение или уничтожении.

Заявляемый способ сертификации ЛС, в особенности лекарственных препаратов противорвотного и противосудорожного действия, позволяет быстро и информативно выявить токсические эффекты облученных ионизирующими излучениями ЛС на ферментные системы и клеточные структуры живого организма человека. Перечень достоинств заявляемого способа сертификации ЛС включает в себя высокую чувствительность, малое время, затрачиваемое на проведение анализа, удобство в работе, возможность получения принципиально новой информации о свободно-радикальных процессах в биологических образцах. Оценка изменений физико-химических свойств лекарственных средств после их облучения ионизирующим излучением с помощью заявляемого способа сертификации позволяет определять возможность дальнейшего хранения ЛС в реально сложившейся обстановке, в запасах на складах, а также для выработки практических рекомендаций по дальнейшему использованию этих лекарственных препаратов по назначению.

Формула изобретения

1. Способ сертификации лекарственных средств, подвергшихся радиации, путем измерения амплитуд интенсивности вспышек при хемилюминесценции суспензии полиморфоядерных лейкоцитов клеток живого организма в присутствии анализируемых веществ и люминола при температуре порядка 37oC, отличающийся тем, что в качестве сертифицируемого вещества берут облученное гамма-лучами лекарственное средство и регистрируют его воздействие на клетки живого организма, после чего сравнивают полученные результаты измерений с показателями интенсивности хемилюминесценции при воздействии на клетки тех же, но не облученных лекарственных средств, при этом выборочные повторные измерения с облученными средствами проводят через каждые трое суток в течение месяца и к измеряемым параметрам относят максимальную амплитуду первой вспышки хемилюминесценции в 107 квант/с 4 при добавлении необлученного лекарственного средства, амплитуду интенсивности через 1 мин после закрытия шторки хемилюминометра для введения пробы облученного лекарственного средства в 107 квант/с 4, а величину токсичности облученного лекарственного средства определяют по величине разности амплитуд интенсивности первой вспышки с добавлением необлученного лекарственного средства и интенсивности хемилюминесценции при наличии облученного сертифицируемого лекарственного средства.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что твердые таблетированные лекарственные формы предварительно измельчают в фарфоровой ступке и растворяют в дистиллированной воде в концентрации 2 мг/мл.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве клеток живого организма используют кровь кролика или донорскую кровь человека с 5% цитрата натрия при соотношении крови и цитрата 4 : 1.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что производят калибровку хемилюминесцентной аппаратуры.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной и клинической кардиологии, патологической анатомии и судебной медицине

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным исследованиям

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано при прогнозировании невынашивания беременности

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургической стоматологии, и может быть использовано для прогнозирования исходов тяжелых воспалительных заболеваний челюстно - лицевой области
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в хирургии пищеварительного тракта

Изобретение относится к медицине, а именно к экологической иммунологии в ревматологии

Изобретение относится к медицине, в частности к способам определения функционального состояния людей и касается диагностики симптомокомплекса патологических проявлений в организме человека в ответ на воздействие неблагоприятного фактора производственной среды - вибраций

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики состояния различных биологических объектов (ткани, органы, биологические жидкости и др.)

Изобретение относится к медицине, а конкретно - к технике дифференциальной диагностики асептического некроза головки бедренной кости и деформирующего артроза тазобедренного сустава (коксартроза), и может быть использовано в практической медицине специалистами хирургами-ортопедами, а также врачами-лаборантами клинико-диагностических и биохимических лабораторий

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике заболеваний костей, и может найти применение при ранней диагностике острого гематогенного остеомиелита

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине и нейрохирургии

Изобретение относится к медицине, в частности к урологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики травмы органов мошонки в ее остром периоде
Наверх