Частицы, включающие плохо растворимое кристаллическое терапевтическое или диагностическое средство, и способ их получения

 

Изобретение предназначено для использования в медицине при диагностике и лечении людей и животных. Частицы содержат плохо растворимое кристаллическое терапевтическое или диагностическое средство. На поверхности средства адсорбирован тилоксапол в количестве 0,1-90% по весу. Средний размер частиц менее 400 нм. Для получения частиц диспергируют плохо растворимое кристаллическое терапевтическое или диагностическое средство в жидкой дисперсионной среде. Средство измельчают в присутствии измельчающей среды для снижения его размеров до менее 400 нм. Частицы средства контактируют с тилоксаполом во время или после измельчения. Получают частицы со средним размером менее 400 нм с адсорбированным на их поверхности тилоксаполом в количестве 0,1-90% по весу. Получение частиц может быть осуществлено в присутствии модификатора поверхности частиц. Частицы не агломерируют при получении из них готовых лекарственных и диагностических средств. Небольшой размер частиц повысит скорость их поступления в кровяное русло и, следовательно, эффективность применения содержащих эти частицы лекарственных и диагностических средств. 2 с. и 11 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к наночастицам, содержащим диагностическое или лечебное средство, и к тилоксаполу, связанному с такими частицами.

Наночастицы, описанные в патенте США N 5145684, представляют собой частицы, состоящие из плохо растворимого лечебного или диагностического средства, на которых адсорбирован не дающий поперечных связей модификатор поверхности и которые имеют средний размер менее 400 нанометров (нм).

Тилоксапол (сополимер 4-(1,1,3,3-тетраметилбутил)фенола с этиленоксидом и формальдегидом) представляет собой неионогенный жидкий полимер - простой алкиларилполиэфир типа спирта. Тилоксапол, известный также под названием "Superinone", описан как пригодный в качестве неионогенного поверхностно-активного вещества в легочной поверхностно-активной композиции в патенте США N 4826821 и в качестве стабилизатора для 2-диметиламиноэтил-4-н-бутиламинобензоата в патенте США N 3272700.

Настоящее изобретение относится к применению тилоксапола в композициях с наночастицами. Тилоксапол может действовать как стабилизатор и/или диспергатор. Тилоксапол также действует как модификатор поверхности. Тилоксапол служит в качестве отличного увлажняющего агента и способствует усиленному пребыванию в кровяных депо через уменьшенное поглощение макрофага.

Краткое изложение сущности изобретения.

Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим наночастицы, на поверхности которых адсорбирован тилоксапол. В предпочтительном варианте осуществления изобретения наночастицы содержат диагностическое или лечебное средство. В другом варианте осуществления изобретения наночастицы содержат дополнительный связанный с ними модификатор поверхности, функция которого может состоять в снижении агломерации частиц в процессе стерилизации.

Далее, настоящее изобретение раскрывает способ изготовления наночастиц, на поверхности которых адсорбирован тилоксапол, причем упомянутый способ заключается в приведении в контакт упомянутых наночастиц, которые содержат нерастворимое диагностическое или лечебное вещество, с тилоксаполом в течение времени и при условиях, достаточных для образования соответствующей композиции наночастиц и тилоксапола.

Настоящее изобретение также относится к способу диагностики, заключающемуся во введении млекопитающему контрастно-эффективного количества частиц в виде наночастиц, на поверхности которых адсорбирован тилоксапол, и генерировании диагностического изображения упомянутого млекопитающего.

Настоящее изобретение далее в качестве модификатора поверхности для наночастиц описывает в первую очередь тилоксапол. Однако предполагается, что изобретение может быть осуществлено на практике с другими неионогенными жидкими полимерами типа простого полиэфира алкиларильного спирта.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения наночастицы содержат дополнительный связанный с ними модификатор поверхности. Пригодные для применения модификаторы поверхности сцепляются с поверхностью наночастицы за счет физического взаимодействия, но не реагируют химически с наночастицей или сами с собой. Молекулы, адсорбированные отдельно на модификаторе поверхности, по существу не образуют межмолекулярных связей. Подходящие модификаторы поверхности могут быть выбраны среди известных органических и неорганических фармацевтических наполнителей, таких как различные полимеры, низкомолекулярные олигомеры, природные продукты и поверхностно-активные вещества. Предпочтительные модификаторы поверхности включают неионогенные и анионогенные поверхностно-активные вещества.

Характерные примеры модификаторов поверхности включают желатин, казеин, лецитин (фосфатиды), аравийскую камедь, холестерин, трагакант, стеариновую кислоту, хлорид бензалкония, стеарат кальция, глицерилмоностеарат, цетостеариловый спирт, цетомакроголовый эмульгируемый воск, сложные эфиры сорбитана, простые алкилэфиры полиэтиленоксида, например макрогол-эфиры, такие как цетомакрогол 1000, производные полиэтиленоксида и касторового масла, полиоксиэтиленсорбитановые эфиры жирных кислот, например коммерчески доступный Tweens^TM, полиэтиленгликоли, полиоксиэтиленстеараты, коллоидный диоксид кремния, фосфаты, додецилсульфат натрия, кальцийкарбоксиметилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, некристаллическую целлюлозу, алюмосиликат магния, триэтаноламин, поливиниловый спирт и поливинилпирролидон (PVP). Большинство из этих модификаторов поверхности являются известными фармацевтическими наполнителями и подробно описаны в Handbook of Pharmaceutical Excipients, опубликованной совместно American Pharmaceutical Association и The Pharmaceutical Society of Great Britain, the Pharmaceutical Press, 1986.

Особенно предпочтительные модификаторы поверхности включают PVP, полоксамеры, такие как плюроник ^тмF68 и F108, которые представляют собой блок-сополимеры этиленоксида и пропиленоксида, и полоксамины, такие как Tetronic^тм 908 (также известный как Poloxamine 908), который представляет собой тетрафункциональный блок-сополимер, образовавшийся при последовательном добавлении пропиленоксида и этиленоксида к этилендиамину, поставляемый BASP, декстран, лецитин, натрийдиалкилэфиры сульфоянтарной кислоты, такие как Aerosol OT^тм, который является натрийдиоктиловым эфиром сульфоянтарной кислоты, поставляемый American Cyanamid, Duponol^тм P, который представляет собой натрийлаурилсульфат, поставляемый Du Pont, Triton^тм X-200, который представляет собой простой полиэфир алкиларилсульфоната, поставляемый Rohm and Haas, Tween 80, который представляет собой полиоксиэтиленсорбитановый эфир жирной кислоты, поставляемый ICI Speciality Chemicals и Carbowax^тм 3350 и 934, которые являются полиэтиленгликолями, поставляемыми Union Carbide. Установлено, что особенно пригодными модификаторами поверхности являются Tetronic 908, Tweens^тм, плюроник F-68 и PVP. Другие подходящие модификаторы поверхности включают деканоил-N-метилглюкамид; н-децил-β-D-мальтопиранозид; н-децил-β-D-глюкопиранозид; н-додецил-β-D-глюкопиранозид; н-додецил-β-D-мальтозид; гептаноил-N-метилглюкамид; н-гептил -β-D-глюкопиранозид; н-гептил-β-D-тиоглюкозид; н-гексил-β-D-глюкопиранозид; нонаноил-N-метилглюкамид; н-нонил-β-D-глюкопиранозид; октаноил-N-метилглюкамид; н-октил-β-D-глюкопиранозид; октил-β-D-тиоглюкопиранозид; и т.п.

Особенно предпочтительными дополнительными модификаторами поверхности являются такие модификаторы, которые обеспечивают сопротивление слипанию частиц в процессе стерилизации, и к ним относятся диоктилсульфосукцинаты (DOSS), полиэтиленгликоль, глицерин, додецилсульфат натрия, бромид додецилтриметиламмония и заряженный фосфолипид, такой как димиристоилфосфатидил глицерина. Модификаторы поверхности являются коммерчески доступными материалами и/или могут быть получены техническими приемами, известными в технике. Два или большее число модификаторов могут быть использованы в сочетании.

Тилоксапол, который связывается с наночастицами, может действовать как модификатор поверхности, как стабилизатор и/или как диспергатор. Альтернативно тилоксапол может служить для других целей. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения тилоксапол осуществляет все три функции. В другом варианте осуществления изобретения тилоксапол может служить в качестве стабилизатора и/или диспергатора, поскольку другое соединение действует как модификатор поверхности, как это обсуждается в другом месте.

Наночастицы, о которых идет речь в настоящем изобретении, содержат диагностическое или лечебное средство. Наночастицы, пригодные для практического применения настоящего изобретения, могут быть получены в соответствии со способами, раскрытыми в патенте США N 5145684. Коротко, наночастицы получают путем диспергирования плохо растворимого терапевтического или диагностического средства в жидкой дисперсионной среде и посредством мокрого измельчения средства в присутствии перемалывающей среды для уменьшения размера частиц контрастного вещества до среднего эффективного размера, который составляет менее 400 нм. Частицы могут быть уменьшены в размере в присутствии модификатора поверхности.

Общая методика получения частиц, пригодных для практики настоящего изобретения, выглядит следующим образом. Выбранное лечебное или диагностическое средство закупают и/или получают техническими приемами, известными в технике, о которых упоминалось выше, в обычной крупнозернистой форме. Предпочтительно, но не обязательно, чтобы размер частиц выбранного крупнозернистого лечебного или диагностического вещества составлял менее 100 мкм при определении гранулометрическим анализом. Если размер частиц такого вещества превышает 100 мкм, тогда предпочтительно, чтобы размер частиц лечебного или диагностического средства был уменьшен до размера менее 100 мкм обычными способами измельчения, такими как воздушное распыление или перемалывание. Крупные частицы терапевтического или диагностического средства затем могут быть добавлены в жидкую среду, в которой средство по существу нерастворимо, чтобы получить премикс. Содержание терапевтического или диагностического средства в жидкой среде может изменяться в интервале 0,1 - 60%, предпочтительно в интервале 5 - 30% (в/в). Предпочтительно, но необязательно, чтобы в премиксе присутствовал модификатор поверхности. Концентрация модификатора поверхности может изменяться от 0,1 до 90%, предпочтительно - от 1 до 75 вес. %, предпочтительнее - от 10 до 60 вес.% и наиболее предпочтительно - от 10 до 30 вес.% по отношению к объединенному весу лекарственного вещества и модификатора поверхности. Кажущаяся вязкость суспензии премикса составляет предпочтительно менее 1000 сП.

Премикс может быть непосредственно использован при мокром перемалывании, чтобы получить средний размер частиц в дисперсии менее 400 нм. Премикс предпочтительно использовать тогда, когда для истирания пользуются шаровой мельницей. С другой стороны, лечебное или диагностическое средство и необязательно модификатор поверхности могут быть диспергированы в жидкой среде при использовании подходящего перемешивания, например в валковой мельнице или в смесителе Cowles, до образования гомогенной дисперсии, в которой не наблюдается крупных агломератов, видимых невооруженным взглядом. Предпочтительно, чтобы премикс подвергался такой стадии предварительного измельчения дисперсии, когда для истирания используют мельницу с рециркулирующей средой.

Мокрое измельчение может происходить в любой подходящей дисперсионной мельнице, включая, например, шаровую мельницу, атриторную мельницу и вибромельницу, и в мельницах со средой (media mills), таких как бисерная мельница и песочная мельница. Мельница со средой предпочтительна потому, что требуются относительно более короткие промежутки времени измельчения, чтобы достичь ожидаемого результата, т.е. нужного уменьшения размера частиц. Для измельчения со средой кажущаяся вязкость премикса составляет от 100 до 1000 сП. Для измельчения в шаровой мельнице кажущаяся вязкость премикса составляет предпочтительно от 1 до 100 сП. Такие интервалы приводят к оптимальному балансу между эффективным измельчением частиц и эрозией среды.

Абразивный материал для уменьшения размера частиц может быть выбран среди жестких материалов, предпочтительно - сферических, или с частицами, имеющими средний размер менее 3 мм, предпочтительнее - менее 1 мм. Такие материалы могут дать нужные для изобретения частицы за более короткое время и приводят к меньшему износу оборудования, на котором производят измельчение. Полагают, что выбор материалов измельчающей среды не является критическим. Однако предпочтительные материалы имеют плотность, превышающую 3 г/см³. Оксид циркония, такой как 95% ZrO, стабилизированный оксидом магния, силикат циркония и стеклянные абразивные материалы дают частицы, имеющие уровень загрязнения, который, как полагают, является приемлемым для приготовления лечебных или диагностических композиций. Однако полагают, что пригодны и другие материалы, такие как нержавеющая сталь, оксид титана, оксид алюминия и 95% ZrO, стабилизированного иттрием.

Время истирания может изменяться в широких пределах и зависит в первую очередь от выбранной конкретно мельницы для влажного измельчения. Для шаровых мельниц время обработки может составлять пять суток или дольше. С другой стороны, при использовании мельницы с высоким сдвигом нужные результаты достигаются при времени обработки менее 1 суток (от одной минуты до нескольких часов).

Частицы должны быть уменьшены в размере при температуре, которая по существу не вызывает разрушения лечебного или диагностического средства. Обычно предпочитают температуры процесса менее 30 - 40^oC. Если желательно, оборудование, в котором осуществляют процесс, может охлаждаться обычным оборудованием для охлаждения. Способ обычно осуществляют при температуре окружающей среды и при давлении, которое является безопасным и эффективным для процесса измельчения. Например, давление окружающей среды является типичным при осуществлении процесса в шаровых мельницах, в атриторных мельницах и в вибрационных мельницах. Давление процесса до 140 кПа (приблизительно 20 ф/дюйм²) является типичным при измельчении с абразивной средой.

Модификатор поверхности, если он не присутствует в премиксе, должен быть добавлен в дисперсию после измельчения в количестве, которое определено для премикса. После этого дисперсия может быть перемешана, например, путем энергичного встряхивания. Необязательно дисперсия может быть подвергнута обработке звуком, например при использовании ультразвукового источника. Например, дисперсия может быть подвергнута воздействию ультразвука с частотой 20 - 80 кГц в течение 1 - 120 секунд.

Соотношение количества лечебного или диагностического средства и модификатора поверхности может изменяться в широких пределах, и оптимальное количество модификатора поверхности может зависеть, например, от выбранного конкретно лечебного или диагностического средства, критической концентрации мицелл модификатора поверхности, если он образует мицеллы, гидрофильно-лиофильного баланса (HLB) стабилизатора, температуры плавления стабилизатора, его растворимости в воде, поверхностного натяжения водных растворов стабилизатора и т.д. Модификатор поверхности предпочтительно присутствует в количестве 0,1 - 10 мг/м² площади поверхности лечебного или диагностического средства. Модификатор поверхности может присутствовать в количестве 0,1 - 90 вес.%, предпочтительно - 1 - 75 вес.%, более предпочтительно 10 - 60 вес.% и наиболее предпочтительно - 10 - 30 вес.% по отношению к общему весу сухих составляющих.

Лечебные и диагностические средства, пригодные для композиции настоящего изобретения, включают средства, раскрытые в патенте США N 5145684 и в описании опубликованной заявки на Европейский патент EP-A-0498482. Предпочтительные диагностические средства включают этил-3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоат, этил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,6-трииодобензоилокси)бутират, диэтил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,3-трииодобензоилокси)малонат и 6-этокси-6-оксогексил-3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,6-трииодобензоат. Особенно предпочтительным диагностическим средством является средство для усиления рентгеновского изображения - 3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоат.

Используемый здесь термин "размер частиц" означает средний размер частиц, измеренный обычными техническими приемами для измерения размеров частиц, хорошо известными специалистам, такими как седиментационное фракционирование (sedimentation field flow fractitionation), фотонно-корреляционная спектроскопия или дисковое центрифугирование. Выражение "эффективный средний размер частиц составляет менее 400 нм" означает, что по крайней мере 90% частиц имеет размер менее 400 нм при измерении вышеупомянутыми техническими приемами. В предпочтительных вариантах осуществления изобретения эффективный средний размер частиц составляет менее 300 нм, предпочтительнее - менее 250 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения эффективный средний размер частиц составляет менее 200 нм. Что касается эффективного среднего размера частиц предпочтительно, чтобы по крайней мере 95%, предпочтительнее - по крайней мере 99% частиц имели размер менее эффективного среднего размера, например менее 400 нм. В конкретно предлагаемых вариантах осуществления изобретения по существу все частицы имеют размер менее 400 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения по существу все частицы имеют размер менее 250 нм.

Настоящее изобретение включает композицию из наночастиц с тилоксаполом, связанным с их поверхностью, как описано здесь в другом месте, которую вместе с одним или большим числом нетоксичных физиологически приемлемых носителей, адъювантами или наполнителями, которых здесь всех вместе называют носителями, вводят в лекарственные композиции, предназначенные для парентеральных инъекций, для орального введения в твердой или жидкой форме, для ректального или локального введения, или т.п.

Композиции могут быть введены человеку или животному либо орально, ректально, парентерально (внутривенно, внутримышечно или подкожно), внутриполостно, интравагинально, интраперитонеально, локально (порошки, мази или капли), либо опрыскиванием в рот или в нос.

Композиции, пригодные для парентеральной инъекции, могут содержать физиологически приемлемые стерильные водные или неводные растворы, дисперсии, суспензии или эмульсии и стерильные порошки для восстановления стерильных растворов или дисперсий, которые можно вводить инъекцией. Примеры подходящих водных и неводных носителей, разбавителей, растворителей или наполнителей включают воду, этанол, полиолы (пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, глицерин и т.п.), их подходящие смеси, растительные масла (такие как оливковое масло) и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Подходящая текучесть может быть сохранена, например, с помощью лецитина в качестве покрытия путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий и путем использования поверхностно-активных веществ.

Эти композиции могут также содержать адъюванты, такие как консерванты, смачиватели, эмульгаторы и распределяющие вещества. Предотвращение действия микроорганизмов также может быть обеспечено различными антибактериальными и противогрибковыми средствами, например парабеном, хлорбутанолом, фенолом, сорбиновой кислотой и т.п. Также может быть желательно включение изотонических средств, например сахаров, хлористого натрия и т.п. Пролонгированное поглощение инъецируемой фармацевтической формы может быть обеспечено применением средств, замедляющих поглощение, например моностеаратом алюминия и желатином.

Твердые формы дозировки при оральном введении включают капсулы, таблетки, порошки и гранулы. При таких твердых формах дозировки активное соединение смешивают по крайней мере с одним обычным инертным наполнителем (или носителем), таким как цитрат натрия, или дикальцийфосфат, или с (a) наполнителями или сухими разбавителями, например с крахмалами, лактозой, сахарозой, глюкозой, маннитом и кремниевой кислотой; (b) связующими, например с карбоксиметилцеллюлозой, альгинатами, желатином, PVP, сахарозой и аравийской камедью; (c) увлажнителями, например глицерином; (d) диспергирующими средствами, например агар-агаром, карбонатом кальция, картофельным или тапиоковым крахмалом, альгиновой кислотой, некоторыми силикатными комплексами и карбонатом натрия; (e) ингибиторами растворения, например парафином, (f) ускорителями поглощения, например соединениями четвертичного аммония, (g) смачивателями, например петиловым спиртом и моностеаратом глицерина; (h) адсорбентами, например каолином и бентонитом, и (i) смазками, например тальком, стеаратом магния, твердыми полиэтиленгликолями, лаурилсульфатом натрия или их смесями. В случае капсул, таблеток и пилюль формы дозировки могут также содержать буферы.

Твердые композиции подобного типа могут также использоваться для наполнения мягких и твердых желатиновых капсул при использовании таких наполнителей, как лактоза или молочный сахар, так же, как и при использовании высокомолекулярных полиэтиленгликолей и т.п.

Твердые дозировочные формы, такие как таблетки, драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут быть получены с покрытиями и в оболочке, такой как энтеросолюбильная оболочка, и с другими, хорошо известными в технике. Они могут содержать контрастные вещества и могут также представлять собой такую композицию, в которой активное соединение или соединения освобождаются в определенной части кишечного тракта на протяжении некоторого времени. Примерами заливающих составов, которые могут быть использованы, являются полимеры и воски.

Активные соединения могут находиться также в форме микрокапсул, если это является подходящим, в смеси с одним или большим числом вышеупомянутых наполнителей.

Жидкие дозировочные формы для орального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активному соединению жидкие дозировочные формы могут содержать инертные разбавители, обычно применяемые в технике, такие как вода или другие растворители, солюбилизаторы и эмульгаторы, как, например, этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла, в частности хлопковое масло, арахисовое масло, кукурузное масло, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло; глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбитана, или смеси этих веществ и т.п.

Кроме таких инертных разбавителей, композиция может также включать адъюванты, такие как смачиватели, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подслащивающие вещества, вкусовые добавки и отдушки.

Суспензии, кроме активных соединений, могут содержать суспендирующие агенты, например этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сорбитан-эфиры, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, или смеси этих соединений и т.п.

Композиции для ректального введения представляют собой предпочтительно суппозитории, которые могут быть получены смешением соединений настоящего изобретения с подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозитория, которые являются твердыми при обычных температурах, но становятся жидкими при температуре тела, и, следовательно, плавятся в ректальной или вагинальной полости, и освобождают активный компонент.

Формы дозировки для местного введения соединения настоящего изобретения включают мази, порошки, аэрозоли и ингаляционные препараты. Активное соединение смешивают в стерильных условиях с физиологически приемлемым носителем или любыми консервантами, буферами и пропеллентами, которые могут потребоваться. Глазные композиции - глазные мази, порошки и растворы также рассматриваются как входящие в объем настоящего изобретения.

Фактический уровень дозировки активных соединений в композициях настоящего изобретения может изменяться таким образом, чтобы иметь количество активного ингредиента, которое является эффективным для получения желательного терапевтического отклика для конкретной композиции и способа введения. Следовательно, выбранный уровень дозировки зависит от требуемого терапевтического эффекта, от способа введения, от требуемой продолжительности лечения и других факторов.

Общая суточная доза соединений настоящего изобретения, вводимых пациенту в виде единичной или дробной дозы, может составлять от 1 нмоль до 5 мкмоль на килограмм веса тела. Дозировочные единицы композиций могут содержать такое количество веществ, которое может быть использовано для суточной дозы. Следует понимать, однако, что конкретный уровень дозы для каждого конкретного пациента будет зависеть от различных факторов, включая вес тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время и способ введения, скорости поглощения и выделения, сочетание с другими лекарствами и тяжесть конкретного заболевания, от которого лечат.

Способ получения композиции наночастиц, соответствующий настоящему изобретению, включает стадии введения лечебного или диагностического средства, жидкой среды, абразивного материала и необязательно модификатора поверхности в емкость для измельчения; мокрого измельчения для уменьшения размера частиц лечебного или диагностического средства до величины менее 400 нм; и выделения частиц и необязательно жидкой среды из емкости для измельчения и отделения от измельчающей среды, например, путем отсасывания, фильтрации или упаривания. Если модификатор поверхности не присутствует на стадии мокрого измельчения, он может быть смешан с частицами позже. Жидкая среда, чаще всего вода, может служить также фармацевтически приемлемым носителем. Процесс предпочтительно осуществлять в асептических условиях. Соответственно композицию наночастиц предпочтительно подвергают стерилизации.

Способ получения наночастиц, на поверхности которых адсорбирован тилоксапол, включает получение наночастиц лечебного или диагностического средства, как описано ранее, и приведение в контакт этих наночастиц с тилоксаполом. Контакт может осуществляться путем смешения суспензии наночастиц с раствором тилоксапола в течение времени и при условиях, которые подходят для образования композиции наночастиц с тилоксаполом.

Содержание тилоксапола может изменяться от 0,1 до 90 вес.%, предпочтительно - от 1 до 75 вес.%, предпочтительнее - от 10 до 60 вес.% и наиболее предпочтительно - от 10 до 30 вес.% по отношению к общему весу лекарственного вещества и тилоксапола. Время контакта может составлять от 60 секунд до 48 часов.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения способ включает также добавление других модификаторов поверхности, связывающихся с наночастицами. Способ осуществляют на практике в соответствии с техническими приемами, описанными в другом месте описания.

Способ получения диагностического изображения для применения в медицине в соответствии с настоящим изобретением включает введение в тело исследуемого субъекта, изображение которого нужно получить, количества вышеупомянутой контрастной диагностической композиции, достаточного для получения эффективного контраста. Помимо пациента-человека исследуемыми субъектами могут быть такие млекопитающие, как кролики, собаки, кошки, обезьяны, овцы, свиньи, лошади, коровы и т. п. Затем по крайней мере часть тела, которая содержит введенное контрастное средство, экспонируют рентгеновским излучением или в магнитном поле, чтобы получить рентгеновское изображение или картину магнитного резонанса, соответствующие присутствию контрастного вещества. Затем может быть осуществлена визуализация изображения.

При получении рентгеновского изображения используют проходящее излучение, чтобы получить рентгенограмму, основываясь на общем свойстве тканей поглощать излучение. Рентгеновское излучение проходит сквозь различные ткани и затухает за счет рассеяния, т.е. отражения, или преломления, или поглощения энергии. Однако некоторые органы тела, сосуды и анатомические сайты показывают настолько малое поглощение рентгеновского излучения, что получить рентгенограммы этих частей тела становится затруднительным. Чтобы преодолеть эту проблему, радиологи по установившейся практике вводят в такие органы тела, сосуды и анатомические сайты среду, поглощающую рентгеновское излучение, которая содержит контрастное вещество.

Любая техника визуализации, предпочтительно - высококонтрастная техника, такая как компьютерная томография, может быть применена обычным образом. С другой стороны, изображение можно наблюдать непосредственно при использовании сочетания чувствительных к рентгеновскому излучению фосфорного экрана и галоидсеребряной фотографической пленки.

Визуализация магнитно-резонансного изображения может быть осуществлена коммерчески доступными системами магнитного изображения, такими как система 1,5 Т Sigma General Electric (1Н-резонансная частота 63,9 МГц). Коммерческие системы различаются обычно величиной магнитного поля - от силы поля 2,0 тесла при максимальном токе до 0,2 тесла при минимальном токе. Для данной силы поля каждое обнаруживаемое ядро имеет характеристическую частоту. Например, при силе поля 1,0 тесла резонансная частота для водорода составляет 42,57 МГц, для фосфора-31 - 17,24 МГц и для натрия-23 - 11,26 МГц.

Контрастно-эффективное количество композиций настоящего изобретения является количеством, необходимым для обеспечения визуализации тканей, например, с помощью магнитно-резонансного или рентгеновского изображения. Величина, определяющая контрастно-эффективное количество для конкретного субъекта будет зависеть, как хорошо известно в технике, от природы используемого магнитоактивного материала, от массы исследуемого субъекта, чувствительности магнитно-резонансной или рентгеновской системы и т.п.

После введения композиций настоящего изобретения исследуемое млекопитающее выдерживают в течение времени, достаточного для распределения введенных композиций в субъекте и для внедрения их в ткани млекопитающего. Как правило, достаточным периодом времени является промежуток от 20 минут до 30 минут, предпочтительно - от 20 минут до 60 минут.

Теперь изобретение будет иллюстрироваться следующими далее примерами, но не следует их истолковывать как какое-либо ограничение изобретения.

Пример 1. Исследование получения изображения с применением тилоксапола и этил-3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоата.

Готовят композицию из этил-3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоата с тилоксаполом в качестве стабилизатора, для которой берут 20 г этил-3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоата на 100 мл суспензии и 3 г тилоксапола на 100 мл суспензии в фосфатном буферном солевом растворе (PBS). Суспензию измельчают в течение 7 суток, после чего средний размер частиц, определенный светорассеянием, составляет 185 нм. Испытания на устойчивость в свежеприготовленной кровяной плазме крысы и в моделированной желудочной жидкости показали отсутствие какой-либо агрегации. Композицию отправляют на исследование рентгеновского изображения, получаемого компьютерной томографией, в Center for Imaging and Pharmaceutical - Research (CIPR) в Massachusetts General - Hospital и в Stanford University - Medical School, Departament of Radiology.

В CIPR с суспензией с тилоксаполом получили отличные изображения подмышечного и подлопаточного лимфоузлов при инъекции в передние лапы самцам белого новозеландского кролика (приблизительный вес = 2,5 кг), которые получали через 12 - 36 часов после единичной инъекции ударной дозы вещества в 0,5 мл. В Stanford инъекция 3 мл/кг дала отличное изображение сосудистой сети и вслед за этим - контрастирование как печени, так и селезенки при длительном времени после инъекции (т.е. > 30 мин).

Пример 2. Исследование получения изображения с применением тилоксапола и этил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)2,4,6-трииодобензоилокси)бутирата.

Готовят композицию на основе этил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)2,4,6-трииодобензоилокси)бутирата так, как описано в примере 1, используя только 10 г этил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)2,4,6-трииодобензоилокси)бутирата на 100 мл формулировки и 3,4 г тилоксапола на 100 мл композиции, и время измельчения составляет 14 дней. В конце этого процесса размер частиц, определенный методом светорассеяния, составляет 289 нм. Для исследования образования изображения композицию отправляют в Stanford, где внутривенная (IV) инъекция дает в результате пролонгированное контрастирование кровяных депо с последующей концентрацией в печени и селезенке.

Пример 3. Исследование получения изображения с применением тилоксапола и этил-3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоата.

Готовят композицию так, как описано в примере 1, используя 10 г 3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоата на 100 мл композиции и 3 г тилоксапола на 100 мл формулировки. После измельчения в течение 7 дней размер частиц, определенный методом светорассеяния, составляет 170 нм. В CIPR получили отличные изображения подмышечных и подлопаточных лимфоузлов через 12 часов после инъекции.

Пример 4. Исследование получения изображения с применением тилоксапола и диэтил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,6-трииодобензоилокси)малоната.

Готовят композицию, как в примере 1, только используя 15 г диэтил-2-(3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,6-трииодобензоилокси)малоната на 100 г композиции и 4,0 г тилоксапола на 100 мл композиции. После измельчения в течение 3 дней размер частиц, определенный методом светорассеяния, составляет 207 нм. Изображения, полученные в CIPR, показывают отличное контрастирование подмышечных и подлопаточных лимфоузлов через 12 часов после инъекции в передние лапы кроликов 0,5 мл.

Пример 5. Исследование получения изображения с применением тилоксапола и 6-этокси-6-оксогексил-3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,6-трииодобензоата.

Готовят композицию, как в примере 4, используя только 6-этокси-6-оксогексил-3,5-бис-(ацетамидо)-2,4,6-трииодобензоата. Суспензию перемешивают в течение 3 дней, и достигают размера частиц 186 нм при определении светорассеянием. Изображения, полученные в CIPR, показывают отличное контрастирование подмышечного и подлопаточного лимфоузла через 12 часов после подкожной инъекции в переднюю лапу кролика 0,5 мл.

Пример 6. Во время обширных рентгеноскопических исследований, в которых испытывалось более 40 плохо растворимых соединений, обнаружено, что тилоксапол стабилизирует значительно большее число соединений в виде наночастиц (порядка 80%), чем другие испытанные модификаторы поверхности.

Пример 7. Наночастицы ретиноевой кислоты, стабилизированные тилоксаполом.

Оказалось, что тилоксапол является хорошим стабилизатором для такого лечебного средства, как ретиноевая кислота. Композиция с наночастицами (7% ретиноевой кислоты, 3% тилоксапола), полученная мокрым измельчением в соответствии с техникой, описанной в патенте США N 5145684, с размером частиц (в основном) 130 нм через семь месяцев обнаруживает основной размер частиц 145 нм.

Формула изобретения

1. Частицы, включающие плохо растворимое кристаллическое терапевтическое или диагностическое средство, отличающиеся тем, что содержат абсорбированный на их поверхности тилоксапол в количестве 0,1 - 90% по весу, при этом частицы имеют средний размер менее 400 нм.

2. Частицы по п.1, отличающиеся, тем что их средний размер составляет менее 300 нм.

3. Частицы по п.2, отличающиеся, тем что их средний размер составляет менее 250 нм.

4. Частицы по п.3, отличающиеся, тем что средний размер составляет менее 200 нм.

5. Частицы по любому из пп.1 - 4, отличающиеся, тем что дополнительно содержат связанный с ними модификатор поверхности.

6. Частицы по любому из пп.1 - 5, отличающиеся, тем что диагностическое средство представляет собой этил-3,5-диацетамидо-2,4,6- трииодобензоат.

7. Способ получения частиц, содержащих плохо растворимое кристаллическое терапевтическое или диагностическое средство, отличающийся тем, что диспергируют плохо растворимое кристаллическое терапевтическое или диагностическое средство в жидкой дисперсионной среде, измельчают это средство в присутствии измельчающей среды для снижения размеров частиц этого средства до среднего размера менее 400 нм и контактируют его с тилоксаполом во время или после измельчения с получением частиц со средним размером менее 400 нм, имеющих абсорбированный на их поверхности тилоксанол в количестве 0,1 - 90 мас.%.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что средний размер частиц составляет менее 300 нм.

9. Способ по п.8, отличающийся тем, что средний размер частиц составляет менее 250 нм.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что средний размер частиц составляет менее 200 нм.

11. Способ по любому из пп.7 - 10, отличающийся тем, что его осуществляют в присутствии дополнительного модификатора поверхности частиц.

12. Способ по любому из пп.7 - 10, отличающийся тем, что диагностическое средство представляет собой этил-3,5-диацетамидо-2,4,6-трииодобензоат.

13. Способ по любому из пп.7 - 12, отличающийся тем, что частицы дополнительно стерилизуют.