Ультразвуковая контрастная среда, содержащая газонаполненные микрочастицы, способ получения микрочастиц (варианты), газонаполненные микрочастицы

 

Изобретение может быть использовано в медицинской диагностике при ультразвуковых исследованиях. Оно позволит расширить область использования контрастных сред, например диагностировать опухоли в печени и селезенке. При этом хорошие контрасты достигаются при значительно меньшем числе частиц, что повысит степень фармакологической безопасности. Контрастная среда содержит газонаполненные микрочастицы с диаметром менее 10 мкм. Оболочка микрочастиц состоит из полиалкилцианакрилатов или сложных полиэфиров γ-,α- или β- гидроксикарбоновых кислот. Микрочастицы суспендированы в фармацевтически приемлемой суспензионной среде. Удельная плотность микрочастиц менее 0,7 г/см³. Микрочастицы получают диспергированием мономерного цианакрилата в водном растворе кислоты в течение 5 мин - 3 ч. Микрочастицы отделяют, помещают в фармацевтически приемлемую суспензионную среду и высушивают вымораживанием. Второй вариант способа: сложный полиэфир α-,β- или γ- гидроксикарбоновой кислоты растворяют в безвредном для здоровья растворителе. Полученный раствор добавляют при диспергировании в газосодержащую жидкость. Продолжают диспергирование в присутствии вододиспергируемого эмульгатора в течение 30 мин - 2 ч. Полученные микрочастицы отделяют, помещают в фармацевтически приемлемую суспензионную среду и высушивают вымораживанием. Заявлены микрочастицы, наполненные газом и имеющие полимерную оболочку, полученные заявленными способами. 5 с. и 23 з.п.ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к специальным контрастным средам для ультразвуковой диагностики, включающие газонаполненные микрочастицы, оболочка которых состоит из полицианакрилатов или сложных полиэфиров α- , β- или γ-гидроксикарбоновых кислот, а также к способам их получения.

Известно, что с помощью периферического введения растворов, которые содержат мелкие пузырьки газа, можно получить контрасты сердечного эха (Roelandt J. Ultrasound Med. Biol., 8:471 - 492, 1982). Эти пузырьки газа получают в физиологически совместимых растворах, например, путем встряхивания, взбалтывания или путем добавления двуокиси углерода. Но они не стандартизированы по их числу и размерам и могут быть воспроизведены только неадекватно. Также они обычно неустойчивы, так что их жизнь коротка. Их средние диаметры большей частью больше, чем размер эритроцитов, так что легочное капиллярное прохождение с последующим контрастированием таких органов, как отделы сердца, печень, почки или селезенки, невозможно. Более того, они непригодны для количественных оценок, поскольку ультразвуковое эхо, продуцируемое ими, состоит из нескольких процессов, которые нельзя отделить друг от друга, таких как рост, соединение и растворение пузырьков. Таким образом, невозможно, например, получить информацию о временах прохождения с помощью этих ультразвуковых контрастных сред путем измерения хода контраста в миокарде. Для этой цели необходимы контрастные среды, чьи рассеивающие элементы имеют адекватную стабильность.

Стабилизация пузырьков газа с помощью сахара описывается в EP 0131540. При этом, хотя воспроизводимость и однородность контрастного эффекта улучшается, эти пузырьки не выдерживают прохождения через легкое.

В EP 0122624 и 0123235 указано, что эффект стабилизации пузырьков газа сахарами, сахарными спиртами и солями улучшается посредством добавления поверхностно-активных веществ. С помощью этих ультразвуковых контрастных сред обеспечиваются легочный капиллярный путь прохождения и возможность для визуализации артериального бедренного кровеносного сосуда и других органов, таких как печень или селезенка. Но в этом случае контрастный эффект ограничивается сосудистыми полостями, поскольку пузырьки не поглощаются клетками тканей.

Ни одна из описанных ультразвуковых контрастных сред не остается неизменной в теле в течение продолжительного периода времени. С помощью этих сред невозможно распознавание органов с достаточной интенсивностью сигнала путем селективной концентрации после внутривенного введения, или количественные оценки.

Инкапсуляция газов, как например, воздуха, в качестве ультразвуковой контрастной среды описывается в EP 0224934. Материал стенок, используемый в этом случае, состоит из протеина, в частности, альбумина сыворотки человека с известными аллергенными свойствами, к которым путем денатурации можно добавить цитотоксические эффекты.

Газонаполненные микрочастицы для ультразвуковой диагностики, основанные на биологически разрушающихся синтетических материалах, описываются в опубликованном патенте EP 0327490. Эти среды имеют достаточное in vivo время жизни, и после внутривенного введения концентрируются внутриклеточно в ретикулоэндотелиальной системе, и, таким образом, в печени и селезенке. В данном патентном описании также указываются полицианакрилаты или α- , β- или γ-гидроаксикарбоновые кислоты, но частицы согласно изобретению отличаются от описанных в EP 0327490 в том, что удельная плотность частиц равна < 0,7 г/см³.

Более низкая плотность частиц в соответствии с изобретением, следовательно, является результатом того, что при том же самом размере они содержат больше газа. Поскольку интенсивность ультразвукового эха, продуцируемого рассеянием и отражением пузырьков газа, зависит от радиуса газового ядра в шестой степени, то, следовательно, частицы согласно изобретению представляют собой значительно более эффективную ультразвуковую контрастную среду, чем среды, описанные в EP 0327490.

Это увеличение объема газа достигается согласно изобретению путем уменьшения толщины стенок. Неожиданно оказалось, что частицы согласно изобретению, несмотря на меньшую толщину стенок, все еще являются достаточно устойчивыми, чтобы выдержать прохождение через легкое.

Новые "тонкостенные" частицы можно получать, используя способы в соответствии с изобретением.

Размер частиц, требуемый с точки зрения капиллярного пути прохождения, составляет < 10 мкм. Предпочтительными являются частицы со средним диаметром 0,2 - 2 мкм. Это требование также выполняется при использовании способа в соответствии с изобретением.

Удельная плотность частиц, полученных в соответствии со способом изобретения, составляет 0,05 - 0,7 г/см³, из чего вычисляется средняя толщина стенки частиц, составляющая 10 - 50 нм.

Сравнение свойств полицианакрилатных частиц по изобретению, полученных в соответствии с примером 9 данной заявки, со свойствами частиц, полученных в соответствии с примером 2 EP 0327490, представлено в таблице.

На основе удельного веса частиц, составляющего 0,15 г/см³, полученных в соответствии с примером 9 изобретения, вычислено, что средняя толщина стенки примерно в 10 раз меньше, а объем газа приблизительно на 60% больше.

Эти значения хорошо согласуются с результатами снимков, полученных с помощью сканирующего электронного микроскопа .

Неожиданно оказалось, что для частиц в соответствии с изобретением при ультразвуковых исследованиях помимо усиления сигнала, вызываемого рассением, наблюдается также повышение контраста частицами вследствие того, что они возбуждаются до независимых сигналов при облучении ультразвуком подходящего звукового давления и подходящей частоты.

Из-за этого неожиданно наблюдаемого явления, во-первых, возникает новая область использования сред согласно изобретению для диагностики опухолей в печени и селезенке. Таким образом, здоровая ткань оказывается окрашенной по методу Доплера кодирования цветом после периферического венозного введения микрочастиц согласно изобретению, в то время как области опухолей оказываются в меньшей степени или вообще не кодированы цветом.

Кроме того, благодаря описанным преимуществам частиц - большему объему газа плюс независимые ультразвуковые сигналы - можно достичь хороших контрастов уже при значительно меньшем числе частиц. В результате этой повышенной эффективности необходимы лишь малые количества (в диапазоне мкг) полимерного вещества для хорошего ультразвукового контраста, посредством чего повышается степень фармакологической безопасности.

Таким образом, в типичном эксперименте на животных, на бигле (коротконогой гончей), уже 25 мкг частиц на кг массы тела (кг T) давало оптимальный, однородный контраст левых полостей сердца. При использовании частиц по EP 0327490 нельзя было добиться сравнимого контраста, до тех пор, пока не использовали дозу 2 мг/кг массы тела.

Частицы, описанные в EP 0327490, добавляли при дозе примерно 3 мг/мл, а частицы в соответствии с изобретением - при дозе 0,04 мг/мл. Видно, что, несмотря на очевидно меньшую концентрацию, достигнут значительно лучший контрастный эффект.

Другой аспект изобретения относится к способам получения микрочастиц согласно изобретению.

Для получения микрочастиц на основе полицианакрилата процедуру проводят таким образом, что мономерный цианакрилат в кислом водном растворе, насыщенном газом, который необязательно содержит по крайней мере одно поверхностно-активное вещество, диспергируют роторно-статорным смесителем, полученные частицы после диспергирования в течение от 5 минут до 3 часов отделяют, необязательно промывают водой, затем абсорбируют в фармацевтически приемлемой суспензионной среде и высушивают вымораживанием, а суспензию преимущественно взбалтывают в течение замораживания. Предпочтительно в качестве цианакрилата используют бутиловый сложный эфир, в качестве газа используют воздух, азот, кислород, благородные газы или двуокись углерода. Вместо роторно-статорного смесителя можно также использовать сравнимые устройства (такие как, например, сосуд с мешалкой), которые обеспечивают интенсивное диспергирование смеси. В качестве поверхностно-активного вещества используют вещество (вещества) из группы полисорбатов, октил- или нонил-фенолов, сложных эфиров макроголь-глицерина или цетомакроголей или Полоксамеров ^(R) или их смесей. pH водного насыщенного газом раствора предпочтительно составляет 1,8 - 4,5, для подгонки pH особенно пригодны соляная кислота и фосфорная кислота. Отделение частиц происходит путем центрифугирования или флотации. Пригодной суспензионной средой является вода для целей инъекции, необязательно с добавлением поваренной соли, и/или глюкозы, и/или маннита, и/или лактозы, которая необязательно дополнительно также содержит поверхностно-активное вещество, такое как, например, из группы полисорбатов, октил или нонил-фенолов, сложных эфиров макроголь-глицерина или цетомакроголей или веществ из группы Полоксамеров ^(R) или их смесей и/или многоатомных спиртов.

Для получения микрочастиц на основе сложных полиэфиров процедуру проводят таким образом, что сложный полиэфир α-, β- или γ- гидроксикарбоновой кислоты, необязательно вместе с вододиспергируемым эмульгатором, растворяют в безвредном для здоровья растворителе, и этот раствор добавляют при диспергировании мешалкой-растворителем или ультразвуковой мешалкой в жидкость, которая, если эмульгатор уже не был добавлен вместе со сложным полиэфиром, содержит вододиспергируемый эмульгатор, полученные частицы после диспергирования в течение 30 минут - 2 часов отделяют, необязательно промывают водой, затем их помещают в фармацевтически приемлемую суспензионную среду и высушивают вымораживанием.

Согласно изобретению предпочтительным являются полимеры молочной кислоты или гликолевой кислоты, а также их сополимеры. В качестве безвредного растворителя предпочтительно используют нагретый этиловый спирт. В качестве газообразной жидкости предпочтительно используют воду или глицерин 87%, предпочтительными газами являются воздух, азот, кислород, благородные газы или двуокись углерода. В качестве вододиспергируемого эмульгатора можно упомянуть фосфатидилхолин или сахарозо-пальмитатстеарат 15, а также их смеси. В качестве фармацевтически приемлемой суспензионной среды пригодными являются те же самые среды, что и в случае частиц на основе полицианакрилата.

Сушка вымораживанием микрочастиц согласно изобретению преимущественно происходит посредством добавления веществ, которые защищают частицы в сушке вымораживанием от разрушения и/или агломерации (так называемых криопротекторов). В качестве криопротекторов можно благоприятно добавить при концентрации 1 - 15% суспензии биополимеры (например, альбумин, стерилизованный желатин, оксиполижелатин, желатинполисукцинат, сшитые полипептиды), синтетические макромолекулярные вещества (например, повидон, поливиниловый спирт), сахара (например, сахарозу, лактозу, трегалозу, рафинозу), сахарные спирты (например, маннит, сорбит) или смеси этих фамацевтических вспомогательных средств. Добавление криопротекторов в соответствии с изобретением происходит либо в среде получения, путем абсорбции микрочастиц после отделения флотацией в растворе криопротектора, либо путем добавления к суспензии непосредственно перед сушкой вымораживанием.

Неожиданно было обнаружено, что дополнительно к криопротектору благоприятно добавление вещества, оптимизирующего сушку вымораживанием, из группы полиолов (т.е. глицерина, пропиленгликоля) или DMCO (диметилсульфоксида) при концентрации 0,1 - 3%.

Сушка вымораживанием преимущественно происходит таким образом, чтобы предотвратить флотацию микрочастиц согласно изобретению в течение вымораживания. Для этой цели благоприятно предварительно охлаждать суспензию микрочастиц согласно изобретению, замораживать ее при скорости замораживания 2 градуса Кельвина в минуту или более и сушить ее вымораживанием.

Другим важным преимуществом способа получения в соответствии с изобретением по сравнению со способами, описанными в EP 0327490, является то, что газонаполненные частицы можно получать одностадийным способом без применения вредного для здоровья и экологически опасного органического растворителя или вспомогательного средства.

Получение инъецируемого препарата частиц согласно изобретению, готового для применения, происходит путем ресуспендирования лиофилизата в фармацевтически приемлемой суспензионной среде, такой как, например, воде, водных растворах одной или более неорганических солей, таких как физиологические растворы электролитов и буферные растворы, такие как, например, водные растворы Тирода моно- или дисахаридов, таких как глюкоза или лактоза, сахарных спиртов, таких как маннит, которые необязательно дополнительно содержат поверхностно-активное вещество, например, из группы полисорбатов, октиловых или нониловых фенолов, сложных эфиров макрогольглицерина или цетомакроголей или веществ из группы Полоксамеров или их смесей, и/или физиологически совместимый многоатомный спирт, такой как глицерин, но предпочтительно в воде, пригодной для инъекций. Общая концентрация необязательно растворенных веществ составляет 0 - 15 мас.%.

Альтернативный способ для получения инъецируемых препаратов, готовых для применения, состоит в том, что в способе согласно изобретению для получения микрочастиц обходятся без конечной сушки вымораживанием. Для повышения безопасности введения можно непосредственно перед инъекцией выполнить фильтрацию суспензии. Это осуществляется преимущественно с помощью фильтра, прикрепленного между шприцем и канюлей, который служит для удержания агрегатов, необязательно встречающихся в случае ошибок при работе, но позволяет проходить неагрегированным частицам. В качестве материала фильтра пригодным являются в основном имеющиеся в продаже мембранные фильтры. Но неожиданно, при выборе фильтров оказалось, что наилучшие результаты достигаются с помощью специальных многослойных мембран из полипропиленовых микронитей. Особенно удобными оказались фильтры с абсолютной скоростью удержания 10 - 20 мкм. Эти фильтры также способны задерживать меньшие агрегаты частиц, но которые нежелательны при внутривенном использовании, например 5 - 10 мкм.

Концентрацию контрастной среды, готовой для применения, можно установить в диапазоне 0,1 - 20 мг, предпочтительно 2 - 6 мг частиц/мл суспензионной среды. Инъецируемая доза зависит от желательного применения и составляет, например, в цветовой ультразвуковой эхографии Доплера, а при исследовании сосудов в диапазоне 1 - 500, предварительно 10 - 100 мкг частиц/кг массы тела, при исследовании печени и селезенки в диапазоне 50 - 1000, предпочтительно 200 - 600 мкг/кг массы тела.

Изобретение поясняется следующими примерами.

Пример 1 0,4 мл бутилового сложного эфира цианакриловой кислоты диспергировали в 60 мл раствора HCl при pH 2,0, который содержал 1% Полоксамера 407, с помощью роторно-статорного смесителя в течение 5 минут. Микрочастицы со средним размером 2 мкм центрифугировали и помещали в 300 мл водного раствора 1% Полоксамера и 5% глюкозы. При определении плотности получили удельный вес 0,2 г/см³.

Пример 2 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 1, но раствор соляной кислоты имел pH 2,5, а Полоксамер 407 заменяли октоксинолом-9. Микрочастицы имели средний размер примерно 0,9 мкм и удельный вес 0,2 г/см³. Их помещали в 300 мл 5% раствора маннита, который содержал 0,1% полисорбата 20.

Пример 3 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 1, но раствор соляной кислоты имел pH 3,0, а Полоксамер 407 заменяли цетомакроголем 1200. Средний размер частиц составлял 1,5 мкм, а удельный вес 0,3 г/см³. Их помещали в 300 мл 5% раствора маннита, который содержал 0,1% цетомакроголя 1200 и 5% повидона.

Пример 4 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 1, а Полоксамер 407 заменяли 5% полисорбатом 40. Средний размер микрочастиц составлял 1,0 мкм, а удельный вес 0,4 г/см³. Их помещали в 300 мл 5% раствора маннита, который содержал 1% макроголглицерин гидроксистеарата.

Пример 5 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 1, а Полоксамер 407 заменяли 5% макроголглицерин-гидроксистеаратом. Средний размер частиц составляли 0,9 мкм, и они имели удельный вес 0,3 г/см³. Их помещали в 300 мл 5% раствора маннита, который содержал 1% макроголглицерин-гидроксистеарата и 10% пропиленгликоля.

Пример 6 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 1, но бутиловый сложный эфир цианакриловой кислоты заменяли этиловым сложным эфиром цианакриловой кислоты. Микрочастицы имели средний размер 1,5 мкм и удельный вес 0,2 г/см³. Их помещали в 300 мл водного раствора 1% Полоксамера 407 и 5% глюкозы.

Пример 7 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 1, но бутиловый сложный эфир цианакриловой кислоты заменяли изопропиловым сложным эфиром цианакриловой кислоты. Микрочастицы имели средний размер 1,3 мкм, и удельный вес 0,2 г/см³. Их помещали в 300 мл водного раствора 1% Полоксамера 407 и 5% маннита и 10% пропиленгликоля.

Пример 8 3 мл бутилового сложного эфира цианакриловой кислоты диспергировали в 300 мл раствора HCl с pH 2,0, который содержал 1% Полоксамера 407, с помощью смесителя в течение 120 минут. Микрочастицы со средним размером 2 мкм и удельным весом 0,1 г/см³ отделяли флотацией и помещали в 5 л 5% раствора маннита, который содержал 1% Полоксамера 407 и 10% пропиленгликоля.

Пример 9 Повторяли ту же процедуру, что и в примере 8, но Полоксамер 407 заменяли октоксинолом-9, а pH устанавливали 2,5. Средний размер микрочастиц составлял 0,8 мкм, их удельный вес был 0,15 г/см³. Их помещали в 5 л 0,9% раствора поваренной соли, который содержал 0,1% цетомакроголя 1200.

Пример 10
Повторяли ту же процедуру, что и в примере 8, но Полоксамер 407 заменяли цетомакроголем 1200. Средний размер микрочастиц составлял 1,8 мкм, а их удельный вес равнялся 0,4 г/см³. Их помещали в 5 л 5% раствора глюкозы, который содержал 0,2% цетомакроголя 1200.

Пример 11
Повторяли ту же процедуру, что и в примере 8, но Полоксамер 407 заменяли 5% полисорбатом 60. Средний размер микрочастиц составлял 1,0 мкм, а их удельный вес равнялся 0,4 г/см³. Их помещали в 5 л 5% раствора маннита, который содержал 1% Полоксамера 407 и 10% пропиленгликоля.

Пример 12
Частицы, полученные в примере 8, 9, 10 или 11, вместо помещения их в растворы, указанные там, помещали в 5 л 5% раствора маннита в каждом случае, и этот раствор содержал 0,1% цетомакроголя 1200 и 5% повидона, замораживали 15 мл порциями при интенсивном встряхивании и высушивали вымораживанием. Перед применением лиофилизат ресуспендировали водой для инъекций и необязательно профильтровали.

Пример 12а
Частицы, полученные в примере 8, 9, 10 или 11, вместо помещения их в растворы, указанные там, помещали в 5 л 10%-ного раствора лактозы, который содержал 0,1% цетомакроголя 1200, замораживали 15 мл порциями при интенсивном встряхивании и высушивали вымораживанием. Перед применением лиофилизат ресуспендировали водой для инъекций и необязательно профильтровывали.

Пример 13
1,0 г гидрогенизированного лецитина из соевых бобов диспергировали в 200 мл глицерина с помощью смесителя. По истечении 60 минут в дисперсию вводили 2,0 г поли-L-лактида (средняя молекулярная масса 1100), растворенного в 10 мл кипящего этанола. Диспергирование продолжали свыше 60 минут. Полученные микрочастицы центрифугировали при 1000 об/мин, отстоявшуюся жидкость помещали в 50 мл воды, снова центрифугировали (1000 об/мин), отстоявшуюся жидкость помещали в 5% раствор маннита. Эту суспензию разделяли на 10 мл порции и высушивали вымораживанием. Перед применением лиофилизат ресуспендировали водой для инъекций.

Пример 14
1,0 г сахарозо-пальмитат-стеарата (ГЛБ 15) диспергировали в 200 мл глицерина с помощью смесителя, по истечении 30 минут в дисперсию вводили 1,0 г поли-L-лактида (средняя молекулярная масса 1100), растворенного в 10 мл кипящего этанола. Диспергирование продолжали свыше 60 минут. Полученные микрочастицы имели средний размер 2 мкм. Их центрифугировали при 1000 об/мин в течение 30 минут, отстоявшуюся жидкость помещали в 50 мл воды, снова центрифугировали (1000 об/мин), отстоявшуюся жидкость помещали в 50 мл 5% раствора маннита. Эту суспензию разделяли на 10 мл порции и высушивали вымораживанием. Перед применением лиофилизат ресуспендировали водой для инъекций.

Пример 15
Микрочастицы, полученные в соответствии с примером 8 (250 мкг/мл) при дозе 25 мкг/кг массы тела инъецировали собаке (12,5 кг, ингаляционный наркоз) внутривенно при скорости 2 мл/мин. В ультразвуковом исследовании в β- изображении в левой половине сердца заметно интенсивное продолжительное усиление сигнала.

Пример 16
Пример 15 повторяли с частицами, полученными в примерах 1 - 7 или 9 - 14. В этом случае также в левой половине сердца появлялись интенсивные продолжительные усиления сигнала.

Пример 17
Микрочастицы, полученные в соответствии с примером 8 (250 мкг/мл) при дозе 300 мкг/кг массы тела инъецировали собаке (11 кг, ингаляционный наркоз) внутривенно при скорости 0,1 мл/с. По истечении 10 минут печень оказывалась однородно кодированной цветом в цветном исследовании Доплера в течение периода, достаточно длительного для исследования.

Пример 18
Повторяли пример 17 с частицами, полученными в примерах 1 - 7 или 9 - 14. И в этом случае печень также оказывалась однородно кодированной цветом.

Пример 19
Микрочастицы, полученные в примере 8, смешивали 1 : 1 с сывороткой собаки и инкубировали при 37^oC. Через 4 часа изначально мутная суспензия становилась полностью прозрачной, и почти 100% содержание бутанола, предполагавшееся теоретически, было обнаружено с помощью гель-хроматографии.

Пример 20
3 мл бутилового сложного эфира цианакриловой кислоты диспергировали в 300 мл раствора HCl при pH 2,5, который содержал 1% ноноксинола, с помощью смесителя в течение 90 минут. Микрочастицы со средним размером 1,4 мкм отделяли флотацией, помещали в 100 мл воды и затем смешивали с 5% альбумином. Затем смесь замораживали 5 мл порциями при легком перемешивании и высушивали вымораживанием.

Пример 21
3 мл бутилового сложного эфира цианакриловой кислоты диспергировали в 300 мл раствора HCl с pH 2,5, который содержал 1% октоксинола, с помощью смесителя в течение 90 минут. Микрочастицы со средним размером 1,4 мкм отделяли флотацией, помещали в 100 мл выдержанного в автоклаве раствора желатина, доведенного с помощью HCl/NaOH до pH 5,0, и затем замораживали 5 мл порциями при легком перемешивании, и также высушивали вымораживанием.

Пример 22
3 мл бутилового сложного эфира цианакриловой кислоты диспергировали в 300 мл раствора HCl с pH 2,5, который содержал 1% октоксинола и 5% повидона, с помощью смесителя в течение 90 минут. Микрочастицы со средним размером 1,4 мкм отделяли флотацией, помещали в 5% раствор повидона и разливали 5 мл порциями. Затем разлитую суспензию термостатировали в течение одного часа до 0^oC и замораживали, а также высушивали вымораживанием.

Пример 23
3 мл бутилового сложного эфира цианакриловой кислоты диспергировали в 300 мл раствора HCl с pH 2,5, который содержал 1% октоксинола, с помощью смесителя в течение 90 минут. Микрочастицы со средним размером 1,4 мкм отделяли флотацией. Помещали в 300 мл воды, смешивали с 0,1% глицерина и 10% лактозы и после замораживания сушили вымораживанием.

Формула изобретения

1. Ультразвуковая контрастная среда, содержащая газонаполненные микрочастицы с диаметром менее 10 мкм, оболочка которых состоит из полиалкилцианакрилатов или сложных полиэфиров α-, β- или γ- гидроксикарбоновых кислот, суспендированных в фармацевтически приемлемой суспензионной среде, отличающаяся тем, что микрочастицы имеют удельную плотность менее 0,7 г/см³.

2. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что средний диаметр микрочастиц составляет 0,1 - 5 мкм, предпочтительно 0,2 - 2 мкм.

3. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что удельная плотность микрочастиц составляет 0,05 - 0,07 г/см³.

4. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что полиалкилцианакрилатом является полибутил-, полиизопропил- или полиэтилцианакрилат.

5. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что сложным полиэфиром является поли-L-лактид.

6. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что микрочастицы наполнены воздухом, азотом, кислородом, благородными газами, двуокисью углерода или их смесями.

7. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что в качестве фармацевтически приемлемой суспензионной среды она содержит воду для инъекций.

8. Контрастная среда по п.7, отличающаяся тем, что вода для инъекций дополнительно содержит поваренную соль, глюкозу, маннит и/или лактозу.

9. Контрастная среда по п.7 или 8, отличающаяся тем, что вода для инъекций дополнительно содержит поверхностно-активное вещество и/или многоатомный спирт.

10. Контрастная среда по п.1, отличающаяся тем, что она возбуждена облучением ультразвуком до независимых сигналов.

11. Способ получения газлнаполненных микрочастиц, отличающийся тем, что в водном растворе кислоты диспергируют мономерный цианакрилат, полученные микрочастицы диспергируют в течение 5 мин - 3-х ч, отделяют, помещают в фармацевтически приемлемую суспензионную среду и высушивают вымораживанием.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что водный раствор кислоты дополнительно содержит по крайней мере одно поверхностно-активное вещество.

13. Способ по п.11 или 12, отличающийся тем, что перед помещением в фармацевтически приемлемую суспензионную среду микрочастицы промывают водой.

14. Способ по п.11, отличающийся тем, что pH водного раствора равно 1,8 - 4,5.

15. Способ по п.11, отличающийся тем, что pH водного раствора поддерживают соляной или фосфорной кислотой.

16. Способ по п.12, отличающийся тем, что в качестве поверхностно-активного вещества используют полисорбат, октил- или нонилфенолы, сложные эфиры макрогол-глицерина или цетомакроголя, или вещества из группы полоксамеров^(R), или их смеси.

17. Способ получения газонаполненных микрочастиц, отличающийся тем, что сложный полиэфир α-, β- или γ- гидроксикарбоновой кислоты растворяют в безвредном для здоровья растворителе, полученный раствор добавляют при диспергировании в газосодержащую жидкость, продолжают диспергирование в присутствии вододиспергируемого эмульгатора в течение 30 мин - 2-х ч, полученные микрочастицы отделяют, помещают в фармацевтически приемлемую суспензионную среду и высушивают вымораживанием.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что вододиспергируемый эмульгатор вводят в раствор, содержащий сложный полиэфир.

19. Способ по п.17, отличающийся тем, что вододиспергируемый эмульгатор вводят в газосодержащую жидкость.

20. Способ по п.17, отличающийся тем, что перед помещением в фармацевтически приемлемую дисперсионную среду отделенные микрочастицы промывают водой.

21. Способ по п.17, отличающийся тем, что в качестве вододиспергируемого эмульгатора используют фосфатидилхолин, или сахарозо-пальмитат-стеарат, или их смеси.

22. Способ по п. 17, отличающийся тем, что в качестве безвредного для здоровья растворителя используют низший спирт, предпочтительно этиловый.

23. Способ по п.17, отличающийся тем, что в качестве газосодержащей жидкости используют воду или 87%-ный глицерин.

24. Способ по п.11 или 17, отличающийся тем, что в качестве суспензионной среды используют воду для инъекций.

25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что вода для инъекций дополнительно содержит поваренную соль, и/или глюкозу, и/или маннит, и/или лактозу.

26. Способ по п.24 или 25, отличающийся тем, что вода для инъекций дополнительно содержит поверхностно-активное вещество по п.16 и/или многоатомный спирт.

27. Микрочастицы, наполненные газом и имеющие полимерную оболочку, отличающиеся тем, что они получены способом, охарактеризованным в п.11.

28. Микрочастицы, наполненные газом и имеющие полимерную оболочку, отличающиеся тем, что они получены способом, охарактеризованным в п.17.

РИСУНКИ

Рисунок 1