Инактивированная вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц

 

Изобретение предназначено для специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни (ИББ) птиц. Инактивированная вакцина против ИББ птиц содержит антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц, инактивант димер этиленимина, адъюванты гидроокись алюминия и сапонин в эффективных соотношениях. Штамм "БГ" депонирован в коллекции ВГНКИ под регистрационным номером "БГ" 102 ДЕП". Штамм "БГ" репродуцируется на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур с титром 5,25 - 6,0 lg ЭИД 50/0,2 мл. Вакцина представляет собой жидкость розово-коричневого цвета с рыхлым осадком сорбента, который при встряхивании легко разбивается в гомогенную взвесь. Вакцину применяют клинически здоровой птице в возрасте 110 - 120 суток однократно. Препарат вводят в объеме 0,5 см³ внутримышечно. Вакцина индуцирует высокий уровень антител против ИББ птиц "родительской" стали и обеспечивает надежный пассивный материнский иммунитет у молодняка до 15-25-дневного возраста, что позволяет защитить его от полевого вирулентного вируса ИББ в ранний период жизни. Технический результат - повышение иммуногенной активности и безвредности вакцины. 4 з.п.ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при изготовлении средств для специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни (ИББ) птиц.

ИББ птиц (болезнь Гамборо) - это вирусное высококонтагиозное заболевание, характеризующееся поражением фабрициевой сумки, почек, внутримышечными геморрагиями, диареей. В основном ИББ поражает B-лимфоциты фабрициевой сумки, вызывая атрофию ее лимфоидных фолликулов. Важным средством борьбы против ИББ, причиняющей экономический ущерб за счет гибели 20 - 70% птиц при остром ее течении, снижения привесов и проявления вторичных инфекций на фоне иммунодепрессивного воздействия вируса на организм птиц, является его вакцинопрофилактика. Специфическая профилактика ИББ проводится с помощью живых и инактивированных вакцин.

Хотя преимущество живых вакцин из-за технологичности в производстве и простоты при употреблении не вызывает сомнения, но иммунная реакция у птиц при их введении на всегда стабильна и в ряде случае вызывает осложнения после вакцинации. Кроме того, при ИББ введение живых вакцин взрослой птице не формирует напряженный иммунитет. Для его создания и сохранения на длительный период у кур-несушек с помощью живых вакцин необходимо ревакцинировать птицу через каждые 2 - 3 месяца в 3 - 10-кратной дозе, что связано с возрастными особенностями птицы. Следует учесть также, что подобная передозировка живых вакцин, если она даже для взрослой птицы небезопасна, то с эпизоотической точки зрения в хозяйствах, где на одной площадке выращивают птицу разного возраста, не может быть оправдана. В связи с этим проблема создания инактивированной вакцины против ИББ птиц является актуальной.

В настоящее время для производства живой вакцин против ИББ предложен аттенуированный штамм "ВНИВИП". Указанный штамм репродуцируется в первичной культуре фибробластов эмбрионов кур (ФЭК) с биологической активностью 5,5 - 6,0 lg ТЦД_50/мл и используется для специфической профилактики ИББ в живом виде с питьевой водой на молодняке птиц до 60-дневного возраста (1).

Недостатком данного штамма является то, что после инактивации его антигенная активность значительно снижается, что не позволяет использовать штамм "ВНИВИП" в качестве антигена при изготовлении инактивированной вакцины проти ИББ.

В зарубежной практике при изготовлении инактивированной вакцины широкого используют вирулентные штаммы вируса ИББ птиц.

Известна инактивированная вакцина против ИББ птиц, включающая эффективное количество антигенного материала из штамма BIA 52/70 вируса ИББ птиц, репродуцированного в ткани фабрициевых сумок 30-40-дневных цыплят, β- -пропиолактон в качестве инактиванта и масляный адъювант (2).

Недостаток данной вакцины состоит в ее высокой себестоимости в связи с тем, что для культивирования данного штамма требуются чувствительные цыплята 30-40-дневного возраста, у которых вес фабрициевой сумки не меньше 1,5 - 2,5 г, поэтому выход вирусной массы ограничен. Данная вакцина непригодна для крупномасштабного производства.

Известна также инактивированная вакцина против ИББ птиц, включающая эффективное количество антигенного материала из штамма BIA 52/70, репродуцированного в ткани фабрициевых сумок СПФ-цыплят 30-40-дневного возраста, формалин в качестве инактиванта и масляный адъювант. Формалин вносят до концентрации 3% (3).

Недостатками такой вакцины являются ее высокая себестоимость и непригодность для крупномасштабного производства.

Известна также инактивированная вакцина против ИББ птиц, включающая эффективное количество антигенного материала из штамма BIA 52/70 вируса ИББ птиц, репродуцированного на аллантоисных мембранах куриных эмбрионов, формалин в качестве инактиванта и масляный адъювант. Формалин вносят до концентрации 0,1% (4).

Недостаток данной вакцины состоит в том, что для приготовления вируссодержащего материала используют вирулентный штамм, который всегда создает проблемы при соблюдении ветеринарно-санитарной безопасности.

Известна также инактивированная вакцина против ИББ птиц, включающая эффективное количество антигенного материала из штамма GP/82, NCAIM N V(P)-001033, вируса ИББ птиц, репродуцированного в культуре клеток фибробластов СПФ-эмбрионов кур, инактивант и адъювант. В качестве инактиванта используют формулин, β- -пропиолактон, этиленимин или его производные, а в качестве адъюванта - ГОА или масляную эмульсию (5).

Недостаток этой вакцины состоит в том, что она обладает также слабой иммуногенной активностью.

Наиболее близкой предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является вакцина против ИББ птиц, включающая эффективное количество антигенного материала из штамма Д78, АТСС N VR-2041, вируса ИББ птиц, репродуцированного на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур с титром 5,5 lg ТЦД_50/мл, инактивант и адъювант. В качестве инактиванта используют формалин, β- пропиолактон, этиленимин или его производные. В частности, формалин вносят в вируссодержащую суспензию до концентрации 0,4%. В качестве адъюванта используют гидроокись алюминия (ГОА) или масляный адъювант (6).

Недостаток данной вакцины состоит в том, что она обладает слабой иммугоненной активностью.

В задачу создания настоящего изобретения входила разработка инактивированной вакцины против ИББ птиц на основе нового штамма "БГ" вируса ИББ птиц, обладающего высокой иммуногенностью и безвредностью в нативном виде и после инактивации.

Технический результат от использования изобретения заключается в повышении иммуногенной активности и безвредности предлагаемой вакцины.

Указанный технический результат достигнут созданием вакцины против ИББ птиц, охарактеризованной следующей совокупностью признаков: 1) инактивированная вакцина против ИББ птиц; 2) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц; 3) штамм "БГ" репродуцирован на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур с титром 5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл; 4) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц взят в эффективном количестве; 5) димер этиленимина (ДЭИ) в качестве инактиванта; 6) гидроокись алюминия (ГАО) в качестве адъюванта; 7) из адъювантов вакцина содержит дополнительно сапонин; 8) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц, инактивант ДЭИ и адъюванты ГОА и сапонин взяты в соотношении, мас.%: антигенный материал - 60 - 80
ДЭИ - 0,1 - 0,3
ГОА - 17,7 - 39,4
10% раствор сапонина - 0,5 - 2,0
Предлагаемое изобретение включает следующую совокупность существенных признаков, обеспечивающих получение технического результата во всех случаях, на которые испрашивается правовая охрана:
1) инактивированная вакцина против ИББ птиц;
2) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц;
3) штамм "БГ" вируса ИББ птиц репродуцирован на 10-суточных СПФ-эмбрионных кур с титром 5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл;
4) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц взят в эффективном количестве;
5) инактивант;
6) адъювант.

Предлагаемое изобретения характеризуется также другими признаками, выражающими конкретные формы его выполнения:
1) из инактивантов вакцина содержит ДЭИ;
2) из адъювантов вакцина содержит ГОА;
3) из адъювантов вакцина содержит дополнительно сапонин;
4) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц, инактивант ДЭИ и адъюванты ГОА и сапонин взяты в соотношении, мас.%:
антигенный материал - 60 - 80
ДЭИ - 0,1 - 0,3
ГОА - 17,7 - 39,4
10% раствор сапонина - 0,5 - 2,0
Признаками изобретения, характеризующими предлагаемую вакцину и совпадающими с признаками прототипа, в том числе родовое понятие, отражающее назначение, являются
1) инактивированная вакцина против ИББ птиц;
2) антигенный материал из штамма вируса ИББ птиц;
3) инактивант;
4) адъювант.

По сравнению с вакциной-прототипом существенными отличительными признаками изобретения являются:
1) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц;
2) штамм "БГ" репродуцирован на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур с титром 5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/2,0 мл;
3) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц взят в эффективном количестве.

Предлагаемое изобретение характеризуется также другими отличительными признаками, выражающими конкретные формы его выполнения
1) из инактивантов вакцина содержит ДЭИ;
2) из адъювантов вакцина содержит ГОА;
3) из адъювантов вакцина содержит дополнительно сапонин;
4) антигенный материал из штамма "БГ" вируса ИББ птиц, инактивант ДЭИ и адъюванты ГОА и сапонин взяты в соотношении, мас.%:
антигенный материал - 60 - 80
ДЭИ - 0,1 - 0,3
ГОА - 17,7 - 39,4
10% раствор сапонина - 0,5 - 2,0
По сравнению с прототипом инактивированная вакцина на основе штамма "БГ" обладает более высокой иммуногенной активностью и является безвредной.

Достижение технического результата от использования предлагаемой вакцины можно объяснить использованием в ее составе антигенного материала из штамма "БГ" вируса ИББ птиц, обладающего по сравнению со штаммом Д78 более высокой иммуногенной активностью и безвредностью в нативном виде и после инактивации.

Штаммы "БГ" является новым, ранее неизвестным. Исходный вирус для получения штамма "БГ" выделен из фабрициевых сумок больных бройлеров птицефабрики "Уральская" Оренбургской области в 1993 году. Производственный штамм "БГ" получен путем многократных последовательных пассажей на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур. Штамм "БГ" депонирования в Государственной коллекции микроорганизмов Всероссийского научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) 21.06.96 г. под регистрационным номером "БГ 102 ДЕП". Штамм является безвредным и обладает высокой биологической, антигенной и иммуногенной активностью в нативном виде и после инактивации. Экспериментально подтверждена возможность его использования для изготовления инактивированной вакцины.

Штамм "БГ" вируса ИББ птиц характеризуется следующими признаками и свойствами.

Морфологические свойства
Штамм "БГ" вируса ИББ птиц (Bursitis infectisa gallinae) относится к семейству Birnaviridae, роду Avibirnavirus, серотипу 1, обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ИББ: форма вириона экосаэдрическая, размер вириона - 58 - 60 нм. Капсид -Т13. Оболочка отсутствует.

Антигенные свойства
По своим антигенным свойствам штамм "БГ" относится к сероварианту I. Вирус стабильно нейтрализуется гомологичной антисывороткой. Вирус не проявляет гемагглютинирующей активности. При вакцинации вирус индуцирует образование специфических антител, выявляемых в РДП в разведении 1:1-1:64, в ИФА - 1:400-1:10000 и более, при гипериммунизации - в РДП до 1:4096 и выше, в ИФА > 1:10000. При определении антигенного соответствия вакцинного штамма "БГ" с полевыми изолятами вируса ИББ было проведено сравнение вариабельной области VP₂ 37 полевых изолятов, выделенных в 1993 - 1996 гг. на территории РФ и странах СНГ, и 7 образцов коммерческих живых вакцин.

Для этого в ПЦР амплифицировали, используя специфические олигонуклеотидные праймеры и термостабильную Tag-ДНЦ-полимеразу, вариабельную область гена VP₂, кодирующую основной конформационный эпитоп. Методом прямого секвенирования определяли нуклеотидную последовательность этого наиболее важного в проявлении антигенных свойств участка генома полевых изолятов и вакцинного штамма ИББ.

Установлено, что большинство полевых изолятор вируса ИББ, выделенных на птицефабриках России, антигенно отличаются от импортных вакцинных штаммов фирм "Рон-Мерье" (Франция), "Интервет" (Голландия), "Солвей Дюфар" (США), "Сафит" (Израиль) на 5 - 8% и имеют структуру, близкую к вакцинному штамму "БГ".

Биотехнологические характеристики
Штамм "БГ" проявляет высокую биологическую, иммуногенную и антигенную активность как в нативном виде, так и после инактивации, а также высокую степень гомологии (98%) по сравнению с многочисленной группой изолятор (30), выделенных на территории РФ в 1993 - 1996 гг.. Штамм "БГ" предназначен для использования в качестве сырья для изготовления как живой, так и инактивированной вакцины, а также диагностических биопрепаратов. Штамм "БГ" репродуцируется в 10-суточных СПФ-эмбрионах кур при 37,7^oC и влажности 55 - 64%. В течение 72 - 96 часов инкубирования вирус накапливается до 5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл. Штамм "БГ" является стабильным и безвредным.

Хемо- и генотаксономическая характеристика
Штамм "БГ" является РНК-содержащим вирусом с мол. массой 2,16 · 10⁶Д.

Нуклеиновая кислота является 2-нитевой, 2-сегментной (A и B). Вирус имеет белковую оболочку, содержащую 5 видов белков (VP₁-VP₅). Белковая оболочка обнаруживает следующие ферменты:
VP₁-РНК - зависимая РНК-полимераза;
структурные белки;
VP₄ - протеаза;
VP₅ - не идентифицирован.

Штамм "БГ" проявляет генетическую стабильность. Основная масса мутаций сосредоточена в VP₂. Аминокислотные изменения в VP₂ определяют антигенную вариабельность.

Сегмент A нуклеиновой кислоты содержит 2 частично перекрывающие открытые рамки для считывания малого VP₅ и большого полипротеинового предшественника белков VP₂ и VP₃. Сегмент B кодирует VP₁.

Физические свойства
Масса вириона - 55 · 10⁶Д. Коэффициент седиментации - 460S в градиенте сахарозы. Плавучая плотность 1,33 - 1,34 г/мл в градиенте CsCl.

Устойчивость к внешним факторам
Штамм "БГ" устойчив к растворителям (эфиру, хлороформу) и детергентам, чувствителен к формальдегиду, УФ-облучению, γ- -облучению и высыханию.

Дополнительные признаки и свойства
Иммуногенная активность - 100%.

Реактогенность отсутствует.

Патогенность отсутствует.

Вирулентность отсутствует.

Онкогенность отсутствует.

Контагиозность отсутствует.

Стабильность аттенуации отмечена при проведении 5 пассажей на чувствительных цыплятах.

Проведенный заявителем анализ техники, включающий поиск по патентным и научно-техническим источникам информации, и выявление источников, содержащих сведения об аналогах предлагаемого изобретения, позволил установить, что заявитель не обнаружил источник, характеризующийся признаками, тождественными (идентичными) всем существенным признакам заявленного изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности признаков аналога, позволил установить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков в предлагаемой вакцине, изложенных в независимом пункте формулы изобретения.

Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности "новизна".

Для проверки соответствия предлагаемой вакцины условию патентоспособности "изобретательский уровень" проведен дополнительный поиск известных решений для выявления признаков, включенных в отличительную часть независимого пункта формулы изобретения.

Результаты поиска показали, что предлагаемая вакцина не вытекает для специалиста явным образом из известного уровня техники, изложенного в соответствующем разделе описания (не выявлены решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками предлагаемой вакцины), а также не выявлено влияние предусматриваемых существенными признаками предлагаемой вакцины преобразований для достижения технического результата.

Следовательно, предлагаемая вакцина соответствует условию патентоспособности "изобретательский уровень".

Пример 1.

Для получения вакцины из штамма "БГ" матровым вирусом заражают в объеме 0,2 мл хорошо развитые 10-дневные СПФ-эмбрионы кур на хориоаллантоисную оболочку в области искусственной пуги. Зараженные куриные эмбрионы инкубируют при 37,5^oC и относительной влажности 60 - 70%. Полученный вируссодержащий материал подвергают размолу на коллоидной мельнице в течение 1- 12 минут. После этого вируссодержащую массу смешивают с фосфатным буфером, получая в результате 10% вируссодержащую суспензию. Вируссодержащую суспензию очищают от балластных примесей известным образом. Очищенную суспензию подают в стерильный реактор. Для инактивации вируса используют ДЭИ. Предварительно готовят 10% раствор ДЭИ на деминерализованной воде, pH 7,9 - 8,0. Затем в подогретую до 27^oC вируссодержащую суспензию вносят 10% раствор ДЭИ до концентрации 0,1%. Смесь тщательно перемешивают и выдерживает при 27^oC в течение 24 часов. По окончании инактивации антигенный материал охлаждают до 2 - 8^oC. В качестве адъюванта-сорбента в вакцине используют стерильный 3 - 4% коллоидный раствор ГОА. pH ГОА устанавливают в пределах 7,5 - 7,6 и охлаждают до 2 - 8^oC. К охлажденному антигену при постоянном перемешивании добавляют ГОА до концентрации 1%. Затем к смеси дополнительно добавляют 10% раствор адъюванта сапонина из расчета 0,5 мг на дозу вакцины, доводя концентрацию сапонина в композиции до 0,5 - 2%. После перемешивания смеси в течение часа определяют pH препарата и при необходимости доводят его значение до 7,4 - 7,6. Полученную вакцину контролируют на авирулентность и стерильность и фасуют в стерильные флаконы. Стерильность вакцины определяют в соответствии с ГОСТом 280859-89 (ст. СЭВ 6280 - 88).

Авирулентность препарата определяют методом трехкратных "слепых" пассажей вакцины на развивающихся СПФ-эмбрионах 9-11-суточного возраста.

Полученная вакцина представляет собой жидкость розово-коричневого цвета с рыхлым осадком сорбента, который при встряхивании легко разбивается в гомогенную взвесь.

Вакцину применяют клинически здоровой птице для создания высокого уровня иммунитета. Птиц вакцинируют в возрасте 110 - 120 суток однократно. Препарат в объеме 0,5 см³ вводят внутримышечно.

Иммунитет у привитой птицы наступает на 14 - 21 сутки после вакцинации и сохраняется до 12 месяцев. Вакцина индуцирует высокий уровень антител против ИББ птиц "родительской стаи" и обеспечивает надежный пассивный материнский иммунитет у молодняка до 15 - 25-дневного возраста, что позволяет защитить его от полевого вирулентного вируса ИББ в ранний период жизни.

Полученная вакцина против ИББ птиц имеет оптимальный компонентный состав, мас.%, приведенный в табл.1.

Содержание антигена в вакцине в указанных выше пределах является его эффективным количеством в препарате, обеспечивающим достижение технического результата.

Пример 2.

Проведены испытания вакцины, содержащей, мас.%:
антигенный материал из штамма "БГ" вируса
ИББ птиц, репродуцированного на 10-суточных
СПФ-эмбрионах кур с титром
5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл - 60,0
ДЭИ - 0,1
ГОА - 39,4
10% раствор сапонина - 0,5
Иммуногенную активность вакцины определяли на цыплятах 30-дневного возраста, свободных от антител в вирусу ИББ птиц. Вакцину вводили по 0,5 мл в мышцу бедра. Через 21 день у птиц брали кровь, получали сыворотки и исследовали их в РДП и ИФА. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Результаты, представленные в таблице 1, свидетельствуют о высокой иммуногенной активности инактивированной вакцины против ИББ птиц, приготовленной из антигенного материала штамма "БГ".

Пример 3.

Проведены испытания вакцины, содержащей, мас.%:
антигенный материал из штамма "БГ" вируса
ИББ птиц, репродуцированного на 10-суточных
СПФ-эмбрионах кур с титром
5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл - 70,0
ДЭИ - 0,2
ГОА - 28,8
10% раствор сапонина - 1,0
Определение иммуногенной активности проводили на цыплятах 30-суточного возраста, свободных от антител к вирусу ИББ птиц. Вакцину вводили по 0,5 мл в мышцу бедра.

Через 21 день после вакцинации у птиц отбирали кровь, получали сыворотки и исследовали их в РДП и ИФА на наличие антител. Результаты исследований представлены в таблице N 2.

Результаты, представленные в таблице 2, свидетельствуют о высокой иммуногенной активности инактивированной вакцины против ИББ птиц из штамма "БГ".

Пример 4.

Проведены испытания вакцины, содержащей, мас.%:
антигенный материал из штамма "БГ" вируса
ИББ птиц, репродуцированного на 10-суточных
СПФ-эмбрионах кур с титром
5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл - 80,0
ДЭИ - 0,3
ГОА - 17,7
10% раствор сапонина - 2,0
Иммуногенную активность вакцины определяли на цыплятах 30-дневного возраста, свободных от антител к вирусу ИББ птиц. Вакцину вводили внутримышечно в область бедра по 0,5 мл. Через 21 день у птиц отбирали кровь, получали сыворотки и исследовали их в РДП и ИФА. Результаты исследований представлены в таблице 3.

Результаты, представленные в таблице 3, свидетельствуют о высокой иммуногенной активности инактивированной вакцины птиц из штамма "БГ" вируса ИББ птиц.

Пример 5.

Провели сравнительную оценку иммуногенной активности предлагаемой вакцины и вакцины-прототипа.

Иммуногенную активность вакцин определяли на цыплятах 30-суточного возраста, свободных от антител против вируса ИББ. Вакцины вводили внутримышечно в область бедра по 0,5 мл. Через 21 день после вакцинации у птиц отбирали кровь, получали сыворотки крови и исследовали их в РДП и ИФА на наличие антител. Результаты исследований представлены в таблице 4.

Данные таблицы 4 свидетельствуют о том, что по имуногенной активности жидкая сорбированная инактивированная вакцина против ИББ, изготовления из аттенуированного штамма "БГ" (Россия), значительно превосходит эмульсионную вакцину против ИББ, изготовленную в Голландии, и обеспечивает надежный пассивный материнский иммунитет у молодняка до 15 - 25-дневного возраста, что позволяет защитить его от заболевания ИББ в ранний период жизни.

Таким образом, приведенная выше информация свидетельствует о выполнении при использовании предлагаемого изобретения следующей совокупности условий:
инактивированная вакцина против ИББ птиц, воплощающая предлагаемое изобретение, предназначена для использования в сельском хозяйстве, а именно в ветеринарной медицине и биотехнологии;
для предлагаемого изобретения в том виде, как оно охарактеризовано в независимом пункте формулы изобретения, подтверждена возможность его осуществления с помощью описанных в заявке или известных до даты приоритета средств и методов;
инактивированная вакцина против ИББ птиц, приготовленная из штамма "БГ" в соответствии с предлагаемым изобретением, обладает высокой иммуногенной активностью и является безвредной.

Следовательно, предлагаемое изобретение соответствует условию патентоспособности "промышленная применимость".

Источники информации
1. Авт. свид. СССР N 1824443; МПК⁵ C 12 N 7/00, A 61 K 39/12; 30.06.93 г.

2. Wyeth P.J. The veterinary Record, 1979, 104, 188 - 193.

3. Пат. Румынии N 100319, A 61 K 39/12, 29.10.90 г.

4. Lucia B.e.a. Avian Diseases, 1979, 23, 2, 466 - 478.

5. Пат. Венгрии N 203781; C 12 N 7/00, A 61 K 39/12; 28.08.90 г.

6. Пат США N 4530831; A 61 K 39/12, C 12 N 7/00; 23.07.85 г. (прототип).

7. ГОСТ 280856 - 89.

Формула изобретения

1. Инактивированная вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц, включающая антигенный материал из штамма вируса инфекционной бурсальной болезни птиц, инактивант и адъювант, отличающаяся тем, что в качестве антигенного материала вакцина содержит штамм "БГ" 102 ДЕП" (коллекция микроорганизмов ВГНКИ ветпрепаратов) вируса инфекционной бурсальной болезни птиц, репродуцированный на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур с титром 5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл и взятый в эффективном количестве.

2. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что из инактивантов она содержит димер этиленимина.

3. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что из адъювантов она содержит гидроокись алюминия.

4. Вакцина по пп.1 - 3, отличающаяся тем, что из адъювантов она содержит дополнительно сапонин.

5. Вакцина по пп.1 - 4, отличающаяся тем, что она содержит антигенный материал из штамма "БГ" 102 ДЕП" вируса инфекционной бурсальной болезни птиц, репродуцированного на 10-суточных СПФ-эмбрионах кур с титром 5,25 - 6,0 lg ЭИД_50/0,2 мл, димер этиленимина, гидроокись алюминия и 10%-ный раствор сапонина в соотношении, мас.%:
Антигенный материал - 60 - 80
Димер этиленимина - 0,1 - 0,3
Гидроокись алюминия - 17,7 - 39,4
10%-ный раствор сапонина - 0,5 - 2,0

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 24.02.2004

Извещение опубликовано: 10.11.2004        БИ: 31/2004