4,10-диацетат-2-бензоат 5, 20-эпокси-1,2, 4,7; , 10, 13- гексагидрокситакс-11-ен-9-она со сложной эфирной группой в положении 13, образованной (2r, 2s)-n-гексаноил-3- фенилизосерином, способ его получения и фармацевтическая композиция

 

Изобретение относится к новому таксану, а именно 4,10-диацетат-2-бензоат 5 , 20-эпокси-1,2 , 4,7 , 10 , 13 -гексагидрокситакс-11-ен-9-она со сложной эфирной группой в положении 13, образованный (2R, 2S)-N-гексаноил-3-фенилизосерином, имеющему структурную формулу I, который выделяют из коры корней растений рода Taxus экстракцией. Соединение I обладает большей противоопухолевой активностью, чем таксол. Кроме того, в отличие от таксола, соединение I активно против опухолевых клеток, устойчивых к адриамицину, и в качестве лекарственного средства против лейкоза. 3 с. и 4 з.п.ф-лы, 1 табл.

Настоящее изобретение относится к новому дитерпену с таксановым ядром, обладающему противоопухолевой активностью. Согласно данным спектрофотометричекого анализа, новое соединений имеет структурную формулу I, т.е. представляет собой 4,10-диацетат-2-бензоат 5, 20-этокси-1,2, 4,7, 10, 13-гексагидрокситакс-11-ен-9-она со сложноэфирной группой в положении 13, образованной (2R, 3S)-N-гексаноил-3-фенилизоприном.

Соединение формулы 1 было выделено из коры корней рода Taxus. Выход целевого соединения составлял от 0,02 до 0,06%.

Для выделения соединений 1 предпочтительнее всего использовать растительный материал, состоящий из корней культурного сорта тиса (например, из коры корней Taxus культурный сорт (CV) Hicksii). Этот сорт широко используется в декоративных целях для украшения садов, что позволяет избежать смешанного сбора корней тиса случайного, который характеризуется чрезвычайно медленным ростом и, в результате этого, быстрой гибелью.

Соединение 1 экстрагировали хлорированными растворителями, например дихлорметаном (чистым или в смеси со спиртами (метиловым или этиловым). Экстракция растительного материала также может быть проведена кетонами (например, ацетоном - чистым или в смеси с водой).

Экстракт коры корней, наряду с соединением (1), содержит ряд других хорошо известных таксанов, как, например, таксол (2), цефаломанин (3) и их 10-диацетиопроизводные (соединения (4) и (5), соответственно). Для выделения соединения (1) из смеси указанных выше таксанов необходимо провести очистку при помощи колоночной хроматографии.

2,R'=C6H5;R''=COCH3.

3,R'= -C(CH3)=CHCH3;R''=H.

4,R'=C6H5;R''=H, 5,R'= -C(CH3)=CHCH3;R''=H.

Для этого предпочтительнее всего в качестве стационарной фазы использовать силикагель. В качестве элюентов могут быть использованы смеси растворителей, состоящие из алифатического углеводорода (например, Н-гексана, циклогексана или н-гептана) или из ароматического углеводорода (например, толуола) с высокополярным растворителем, таким как, например, этилацетат или ацетон.

Соединение 1, содержащееся во фракциях, полученных после хроматографирования, в дальнейшем выделяют кристаллизацией из ацетона или диизопропилового эфира или их смеси с н-гексаном или н-гептаном.

Новое соединение 1 проявляет существенное структурное сродство с противоопухолевым средством таксолом (2), от которого оно отличается характером боковой цепи в положении 13 таксонового ядра. Поэтому соединение 1, помимо экстракции из растительного материала, может быть получено полусинтетическим путем, согласно методу получения таксола (2) (I.Ojima et. al., Tetrahedron 48, 6985.1992).

Вследствие структурного сродства соединений (1) и (2) можно было ожидать, что соединение 1 будет проявлять такую же противоопухолевую активность, что и (2).

Действительно, in vitro активность соединения 1 по отношению к различным опухолевым линиям, например, к раковым клеткам молочной железы, легкого, толстой кишки и яичника, сравнима с активностью таксола (как показано с таблице в конце описания). Однако новый таксан (1) неожиданно проявил более высокую активность, чем таксол, по отношению к адриамицин-устойчивым (ADP) опухолевым клеткам и клеткам лейкоза.

При исследовании in vivo, соединение (1), введенное в виде водного раствора, содержащего Cremophor(R), оказалось более эффективным против опухолей, имплантированных голой мыши. Соответственно, предполагается, что таксан (1) может быть использован в качестве противоопухолевого препарата для лечения жидких опухолей и опухолей, устойчивых к лекарственным средствам, таких как адриамицин-устойчивые опухоли.

Согласно активным дозам, полученным для животных, дозировка соединения 1 для человека составляет от 150 до 250 мг/м2 с циклами, повторяемыми с интервалом две три недели до исчезновения метастаз.

Следующий пример иллюстрирует получение соединения, представленного в настоящем изобретении.

Пример1.

4,10-диацетат-2-бензоата 5, 20-эпокси-1,2, 4,7, 10 13-гексагидрокситакс-11-ен-9-она со сложной эфирной группой в положении 13, образованной (2R,3S)-N-гексаноил-3-фенилизосерином (формула I).

50 кг измельченной коры Taxus media cv Hicksii экстрагировали при комнатной температуре 130 л смеси метиленхлорида с метанолом в соотношении 961. Затем последовательно три раза проводили экстракцию 80 л той же смесью растворителей. Каждая экстракиця проводилась в течение 24 часов.

Объединенные экстракты концентрировали под вакуумом и осадок (4300 г) обрабатывали 23 литрами смеси ацетона с толуолом, взятых в соотношении 9:1. После отделения нерастворимых частиц фильтрованием, раствор очищали при помощи колоночной хроматографии. Для этого исследуемый раствор пропускали через колонку, содержащую 27 кг силикагеля. Для элюирования также использовали смесь ацетона с толуолом (9:1). Фракции, содержащие соединение (1), объединяли и выпаривали под вакуумом до получения сухого остатка. Остаток кристаллизовали из 80 мл смеси н-гексан-ацетон в соотношении 1:1. Получали 17,5 г соединения (1), т.пл. 209o []D-42, (c=0.3, MeOH), M+a m/z 847.

Были получены следующие данные спектрофотометрического анализа соединения 1: IR (nujol): 3500-3300, 1 710, 1640 cm-1 UV (MeOH): 222 (13900), 2,2 (16250), 274 (1130), 282 (960) nm CIMS (NH3), m/z 865 (40%, M+NH4), 848 (10, MH), 586 (30, M+NH4-279) 1H-NMP (300 NHz, CDCl3, ppm, J in Hz) 5,66 (d, J=7,0; H-2), 3,78 (d, J= 7,0; H-3), 4,93 (dd, J1=9,4, J2=2,0; H-5), 2,54 (ddd, J1=15,5, J2=9,4, J3= 6,6; H-6), 1,84 (ddd, J1=15,5, J2=10,9; J3=2,0; H-6), 4,39 (ddd, J1=10,9, J2= 6,6, J3= 4,1; H-7), 6,28 (s, H-10), 6,23 (t, J=6,23; H-13), 2,24 - 232 (2H, m; H-14), 1,26 (s, H-16), 1,14 (s, H-17), 1,81 (d, J=1,2; H-18), 1,67 (s, H-19), 4,17 (d, J=8,6; H-20), 4,28 (d, J=8,6; H-20b), 4,65 (dd, J1= 4,9, J2=2,5; H-2'), 5,56 (dd, J1=8,9, J2=2,5; H-3'), 2,18 (t, J=7,3; H-2''), 1,56 (m; H-3''), 1,28 - 1,20 (m; H-4'' e H-5''), 0,83 (t, J=6,7; H-6''), 8,10 (d, J= 7,8; PhCO H-2 e 6), 7,50 (t, J=7,8; PhCO H-3 e 5), 7,61 (t, J= 7,8; PhCO H-4), 7,38 (m; 3'-Ph H-2,3,4,5,6), 2,34 (s, COCH3), 2,24 (s, COCH3), 6,25 (d, J=8,9; NH), 2,49 (d, J=4,1; 7-OH), 1,84 (s, 1-OH), 3,55 (d, J=4,9; 2'-OH).

13C-NMR (75,43 Hz, CDCl3): 78,99 (C-1), 74,93 (C-2), 45,57 (C-3), 81,07 (C-4), 84,37 (C-5), 35,59 (C-6), 72,15 (C-7), 58,56 (C-8), 203,63 (C-9), 75,55 (C-10), 138,06 (C-11), 142,05 (C-12), 72,29 (C-13), 35,59 (C-14), 43,18 (C-15), 26,79 (C-16), 21,86 (C-17), 14,81 (C-18), 9,54 (C-19), 76, 46 (С-20), 72,78 (C-1'), 73,16 (C-2'), 54,53 (C-3'), 172,90 (C-1''), 36,55 (C-2''), 25,34 (C-3''), 31,29 (C-4'') 22,28 (C-5''), 13,83 (C-6''), 129,09 (PhCO C-1), 130,19 (PhCO C-2 e C-6), 128,68 (PhCO C-3 e C-5), 133,68 (PhCO C-4), 133,11 (Ph C-1), 126,94 (Ph C-2 e C-6), 128,93 (Ph C-3 e C-5), 128,23 (Ph C-4), 22,58 (COCH3), 20,84 (COCH3), 171,23 (COCH3), 170,23 (COCH3), 166,95 (PhCO).

C46H57NO14: определено,%: C=65,11; H=6,86; N=1,60; рассчитано, %: C=65,15; H=6,78; N=1,65.

Пример 2 препаративной формы композиции
Раствор для перорального введения
Соединение (1) - 30 мг
полисорбат 80 - 0,5 мг
Безводная лимонная кислота - 0,005 мл
Дегидрированный спирт по потребности - До 1 мл4


Формула изобретения

1. 4, 10-Диацетат-2-бензоат 5, 20-эпокси-1,2, 4,7, 10, 13-гексагидрокситакс-11-ен-9-она со сложной эфирной группой в положении 13, образованной (2R, 2S)-N-гексаноил-3-финилизосерином формулы I

2. Способ получения соединения I, включающий экстракцию растительного материала культурного сорта тиса хлорированными углеводородами или их смесями с низкомолекулярными спиртами, хроматографирование полученного выпариванием под вакуумом высушенного экстракта с применением смесей алифатических или ароматических углеводородов с высокополимерными растворителями в качестве элюентов и очистку выделенного из полученных фракций соединения I кристаллизацией.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что растительный материал состоит из коры корня Taxus media cv Hicksii.

4. Способ по пп.2 - 4, отличающийся тем, что экстракцию проводят смесью метиленхлорида с метанолом.

5. Способ по пп. 2 - 4, отличающийся тем, что для хроматографического разделения применяют силикагель в качестве стационарной фазы и смеси толуола с ацетоном в качестве элюента.

6. Способ по пп.2 - 5, отличающийся тем, что для кристаллизации применяют ацетон, диизопропиловый эфир или их смеси с н-гексаном или н-гептаном.

7. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента она содержит соединение формулы I по п.1.

РИСУНКИ

Рисунок 1



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новому способу получения 7-триалкилсилил-баккатина III общей формулы 1 в которой символы R, одинаковые или разные, обозначают алкильные радикалы с 1-4 атомами углерода, в случае необходимости замещенные фенильные радикалом, из 10-дезацетил-баккатина III формулы II В общей формуле (1) каждый из символов R обозначает предпочтительно линейный или разветвленный алкильный радикал с 1-4 атомами углерода
Изобретение относится к способу очистки 10-дезацетилбаккатина III и таксотера

Изобретение относится к способам получения таксанов с боковой цепью и их интермедиатов и к новым соединениям формулы III, полученным этими способами

Изобретение относится к области макролидов
Изобретение относится к способу очистки 10-дезацетилбаккатина III и таксотера

Изобретение относится к способам получения таксанов с боковой цепью и их интермедиатов и к новым соединениям формулы III, полученным этими способами

Изобретение относится к сосудосуживающим /(бензодиоксан, бензофуран и бензопиран)-алкиламино/-алкил-замещенным гуанидинам формулы I, их фармацевтически приемлемым солям, или их стереохимическим изомерам, где X = O, CH2 или прямая связь; R1 = H, C1-C4 алкил, R2 = H, C1-C6 алкил, C3-C6 алкенил, C3-C6 алкинил, R3 = H, C1-C4 алкил; или R2 и R1 взятые вместе, могут образовывать двухвалентный радикал формулы -/CH2/m-, где m = 4 или 5; или R1 и R2, взятые вместе, могут образовывать двухвалентный радикал формулы -CH=CH- или формулы -/CH2/n-, где n = 2, 3 или 4; или R3 может обозначать связь, когда R1 и R2, взятые вместе, образуют двухвалентный радикал формулы -CH=CH-CH= -, -CH= CH-N= или -CH=N-CH=; где один или два водородных атома замещены атомом галогена, C1-C6 алкоксигруппой, C1-C6 алкилом, CN, NH, моно- или ди(C1-C6 алкил) аминогруппой, аминокарбонилом, C1-C6 алкиламинокарбониламиногруппой, R4-H или C1-C6-алкил; Alk1 обозначает двухвалентный C1-C3-алкандиильный радикал, A обозначает двухвалетный радикал формулы /a/, /b/, /c/, /d/, /e/, где каждый R5=H или C1-C4-алкил, где каждый R6=H или C1-C4-алкил, Alk2 обозначает C2-C15-алкандиил или C5-C7-циклоалкандиил, и каждый "р" обозначает 0, 1, 2, R7 и R8 каждый независимо является H, атомом галогена, C1-C6 алкилом, гидроксилом, C1-C6 алкилоксикарбонилом, C1-C6 алкоксигруппой, цианогруппой, амино C1-C6 алкилом, карбоксилом, нитро- или аминогруппой, аминокарбонилом, C1-C6 алкилкарбониламиногруппой или моно- или ди-(C1-C6)алкиламиногруппой, при условии, что исключается /2-/ (2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-2-ил)-метил/-амино/-этил-гуанидин

Изобретение относится к новым производным таксана III формулы 1, в которой R1 - H; R14 - H, C2-C9-алканоил, незамещенный атомом галогена, или R1 и R14, взятые вместе, представляют собой карбонил или низший алкилиден; R7= R10 - H, три(низший алкил)силил или C2-C9-алканоил, незамещенный или моно-, ди-, тризамещенный атомом галогена; R13 - H, -COCHOHCH-(C6H5) NHCOC6H5 или -COCHOHCH (C6H5)NHCOOC(CH3)3-группа; Ас - ацетил, эти соединения обладают противоопухолевой активностью

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается противоопухолевой композиции, содержащей производные таксана

Изобретение относится к новому таксану, а именно 4,10-диацетат-2-бензоат 5, 20-эпокси-1,2, 4,7, 10, 13 -гексагидрокситакс-11-ен-9-она со сложной эфирной группой в положении 13, образованный -N-гексаноил-3-фенилизосерином, имеющему структурную формулу I, который выделяют из коры корней растений рода Taxus экстракцией

Наверх