Электрофоретическая камера с обменной циркуляцией буферных растворов

 

Изобретение относится к биологии и медицине. Поставленная задача осуществлена с помощью электрофоретической камеры, в которой электродные емкости размещены друг над другом, между которыми циркуляция буферного раствора осуществляется с помощью переливного устройства, а кассета для геля из зеркального стекла расположена вертикально. Технический результат - наличие обменной циркуляции раствора при длительном процессе электрофореза. 2 ил.

Изобретение относится к области биологии и медицины, а именно для проведения аналитического электрофореза биологических макромолекул в полиакриламидном геле.

В электрофотометрических камерах с обменной циркуляцией буферных растворов между анодной и катодной емкостями обычно используются дорогостоящие перистальтические насосы (шланговые дозаторы) сложные по конструкции (Авот А.А., Дуда Я.С. и Экис Ю.Р. Зав. лаборатория, 1966, 32, 12, 1542).

Наиболее близкой по технической сущности к предлагаемому решению является камера Раймонда, в которой электрофорез осуществляется в вертикально расположенной пластине геля (Ларский Э.Г. Методы зонального электрофореза. М., 1971, с. 43 - 47). Гель формируется в пространстве между стенками из плексигласа, имеющих змеевик, через который пропускается водопроводная вода для охлаждения геля.

Однако ввиду отсутствия обменной циркуляции буферного раствора между электродными емкостями длительный, многочасовой электрофорез невозможен из-за истощения буферной емкости, что связано с электролизом химических ингредиентов буферного раствора.

Поставлена задача создания электрофоретической камеры с обменной циркуляцией буферного раствора.

Поставленная задача осуществлялась с помощью электрофоретической камеры (фиг. 1), в которой электродные емкости размещены друг над другом, между которыми циркуляция буферного раствора осуществлялась с помощью переливного устройства (а. с. СССР N 1668741), а кассета для геля из зеркального стекла расположена вертикально. Образец полученных электрофореграмм на фиг. 2.

Электрофоретическая камера состоит из двух электродных емкостей: верхней 1 и нижней 2. На верхней электродной емкости 1 крепится кассета 3 с гелем 4 в вертикальном положении с помощью двух клиновидных зажимов 5 и двух вкладышей 6 из оргстекла на декальтированной перегородке 7. Вкладыши 6 и клиновидные зажимы 5 фиксируют стеклянную кассету с двух краев. Верхняя электродная емкость 1 разделена перегородкой 8 на два отсека: в первом отсеке 9 находится платиновый электрод 10, электродный отсек и второй - сливной отсек 11. На нижней части декальтированной перегородки 7 крепится платиновый электрод 12, погружающийся в нижнюю емкость 2. На крышке 13, закрывающей электродную емкость 1 размещается переливное устройство 14. По трубкам 15, 16 и через отверстия 17 в сливном отсеке 11 осуществляется рециркуляция буферного раствора между электродными емкостями 1 и 2.

Устройство работает следующим образом. После закрепления стеклянной кассеты 3 с гелем 4 на декальтированной перегородке 7 с помощью клиновидных зажимов 5 и вкладышей 6 в электродный отсек 9 наливается буферный раствор, его избыток переливается через край перегородки 8 и поступает в сливной отсек 11, из которого через отверстия 17 заполняется нижняя электродная емкость 2. Всего отверстий 17 четыре. Электрод 12 и нижний край стеклянной кассеты 8 обязательно должны быть погружены в буферный раствор емкости 2. Во время работы переливного устройства 14 буферный раствор из электродной емкости 2 поступает по трубке 15 в переливное устройство 14, из которого периодически изливается по трубкам 16 в электродный отсек 9 электродной емкости 1. Переливаясь через перегородку 8 в сливной отсек 11 буферный раствор поступает через отверстия 17 в нижнюю электродную емкость 2. Затем цикл обменной циркуляции буферного раствора повторяется.

Использование электрофоретической камеры, в которой обменная циркуляция электродного буферного раствора осуществляется с помощью переливного устройства, позволяет проводить аналитический электрофорез длительное время. Применение зеркального стекла в кассете для геля позволяет получить гель толщиной до 1 мм на всей его площадки. Эффективное охлаждение геля из-за его небольшой толщины и хорошей теплопроводности стекла кассеты, контактирующей с электродным раствором, позволяет увеличить градиент напряжения на геле, что улучшает электрофоретическое разделение биомакромолекулярных соединений.

Формула изобретения

Электрофоретическая камера с обменной циркуляцией буферных растворов, состоящая из электродных емкостей и вертикально расположенной кассеты с гелем, отличающаяся тем, что камера снабжена переливным устройством, осуществляющим рециркуляцию буферного раствора между электродными емкостями, стеклянной кассетой с гелем, фиксированной на декальтированной перегородке верхней емкости вкладышами и клиновидными зажимами, причем верхняя электродная емкость имеет сливной отсек для вытекания избытка буферного раствора в нижнюю электродную емкость.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2