Способ консервации гидробионтов с сохранением их естественной окраски

 

Изобретение относится к области медицины и сельскому хозяйству, а именно к способам консервации. Технический результат достигается путем заключения гидробионта, поверхность которого предварительно отмыта от слизи, в водный раствор бальзамирующего агента, например формальдегида, со следующим составом входящих в него компонентов, вес.%: динатриевая соль этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты (ЭДТА) 0,5 - 8; N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД) 0,05 - 3; метиленовый синий 0,0001 - 0,0004; бальзамирующий агент (например, формальдегид) 0,2 - 10; вода остальное; с последующей герметизацией и воздействием на вещество светом, при этом для усиления естественной окраски и удаления слизи с поверхности гидробионта при подготовке к консервации его помещают в вещество со следующим соотношением компонентов, вес. %: акриламид (АКА) 3 - 20; тиомочевина 0,1 - 5; азотнокислый калий 1 - 7; вода остальное, а также для сохранения естественной окраски и формы тела гидробионтов, в состав которых, например медузы, входят значительные количества воды, их пропитывают в темноте и заключают в вещество с последующим воздействием на него света со следующим соотношением компонентов, вес. %: акриламид (АКА) 5 - 15; N,N'-метилен-бис-акриламид (БИС) 0,17 - 0,5; динатриевая соль этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (ЭДТА) 0,5 - 8; N, N, N', N'-тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД) 0,05 - 3; метиленовый синий 0,0001 - 0,0004; бальзамирующий агент (например, этанол) 10 - 25; вода остальное. Способ обеспечивает постмортальное сохранение естественной окраски и формы гидробионтов. 2 с. и 1 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способам консервации гидробионтов, и может найти применение в изготовлении демонстрационных препаратов, наглядных пособий, украшений.

Известный способ консервации объекта путем заключения его в гель 10% водно-глицеринового раствора поливинилового спирта (Авторское свидетельство N 322166 Ю.А.Черненко, В.А.Кропачев, В.М.Лаврентьев и К.С.Подгорская "Консервирующее средство для биологических тканей", 1971) приводит к растворению пигментов в консервирующей среде, деформации формы и просветлению тканей объекта из-за высокой осмотичности глицерина. Недостатками этого способа является низкая прозрачность геля поливинилового спирта.

Известные способы высушивания (Г.В.Самохвалова "Изготовление коллекций мелких рыб с сохранением их окраски", "Зоологический журнал", т. XXXIV, вып. 5, стр. 1178-1179, 1955) или обезвоживания объекта с последующим заключением его в нерастворимые в воде среды, например эпоксидные смолы (Б.Уикли "Электронная микроскопия для начинающих", Изд. "Мир", Москва, 1975), плексиглас (В.Д.Дульчевский "Способ коллекционирования биологических объектов", Труды Института океанологии, Т. V, из-во АН СССР, 1951) приводят к деформации формы или потере цвета при обезвоживании спиртами.

Известный способ консервации, позволяющий сохранять естественную каротиноидную окраску объекта, путем заключения его в глицерин (А.А.Яржомбек "Каротиноиды лососевых и их связь с воспроизводством этих рыб", Труды Всесоюзного научно-исследовательского института морского рыбного хозяйства и океанографии (ВНИРО), т. 69, стр. 234-267, 1970) приводит к деформации формы объекта и выходу пигментов объекта в глицерин.

Наиболее близким техническим решением предлагаемого способа служит способ консервации объекта с использованием альдегидов и спиртов (Г.И.Роскин. Микроскопическая техника. Государственное издательство "Советская наука", Москва, 1946; Y. Obata, K. Matano "A New Method to Make Specimens of Fishes". Bulletin of the Japanese Society of the Scientific Fisheries. Vol. 18, N 11, p. 39-40, 1953; Э. Пирс Гистохимия. Изд. иностранной литературы. Москва, 1962; А.И.Кононский. Гистохимия. Издательское объединение "Вища школа". Головное издательство. Киев, 1976). Недостатками этого способа являются: помутнение объекта из-за взаимодействия консерванта с веществами объекта, исчезновение естественной окраски гидробионта.

Цель изобретения - постмортальное сохранение естественной окраски и формы гидробионтов для создания демонстрационных экспонатов.

Поставленная цель достигается путем заключения гидробионта, поверхность которого предварительно отмыта от слизи, в водный раствор бальзамирующего агента, например формальдегида, со следующим составом входящих в него компонентов, вес.%: Динатриевая соль этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (ЭДТА) - 0,5 - 8 N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД) - 0,05 - 3 Метиленовый синий - 0,0001 - 0,0004 Бальзамирующий агент (например, формальдегид) - 0,2 - 10 Вода - Остальное Бальзамирующий агент, например формальдегид, предотвращает гниение объекта, блокирует лизирующее действие пищеварительных ферментов, легко проникает в ткани объекта.

При содержании формальдегида менее 0,2% объект сгнивает, при содержании его более 10% у рыб пропадает гуаниновый блеск чешуи. Недостатками применения формалина являются: побеление слизи на поверхности тела гидробионта и помутнение его тканей. Первое можно исправить, удалив слизь с поверхности гидробионта еще до его помещения в фиксатор. В качестве вещества восстанавливающего, поддерживающего или усиливающего прозрачность структур фиксируемого объекта использован N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД).

ТЕМЭД в присутствии формальдегида усиливает жесткость структур фиксируемого объекта. ЭДТА, ТЕМЭД и метиленовый синий в присутствии света, достаточного для обесцвечивания метиленового синего, препятствуют выцветанию красных пигментов объекта. Содержание этих компонентов ниже указанного диапазона не обеспечивает сохранности естественного цвета гидробионта, избыток приводит к образованию белого налета на теле, а также к исчезновению блеска гуанофоров.

Полученные препараты гидробионтов, хранятся в герметичном состоянии, без доступа воздуха, при постоянной комнатной температуре.

С целью усиления естественной окраски и удаления слизи с поверхности гидробионта, его помещают в вещество со следующим соотношением компонентов, вес.%: Акриламид (АКА) - 3 - 20 Тиомочевина - 0,1 - 5 Азотнокислый калий - 1 - 7
Вода - Остальное
АКА способствует удалению слизи с поверхности гидробионта, усиливает яркость естественной окраски гидробионтов за счет экспансии пигментных клеток. Азотнокислый калий осуществляет контракцию меланофоров. Тиомочевина в присутствии АКА усиливает экспансию пигментных клеток и увеличивает продолжительность сохранности красных пигментов объекта.

С целью сохранения естественной окраски и формы тела гидробионтов, в состав которых, например медузы, входят значительные количества воды, их пропитывают в темноте и заключают в вещество с последующим воздействием на него света, со следующим соотношением компонентов, вес.%:
Акриламид (АКА) - 5 - 15
N,N'-метилен-бис-акриламид (БИС) - 0,17 - 0,5
Динатриевая соль этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (ЭДТА)) - 0,5 - 8
N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД) - 0,05 - 3
Метиленовый синий - 0,0001 - 0,0004
Бальзамирующий агент (например, этанол) - 10 - 25
Вода - Остальное
Полиакриламидный гель пространственно фиксирует структуру объекта. БИС, сополимеризуясь с АКА, создает пространственную структуру геля. Соотношение БИС и АКА должно быть 1:30. Изменение этого соотношения приводит к помутнению объекта и геля. ЭДТА, ТЕМЭД и метиленовый синий в присутствии света, достаточного для обесцвечивания метиленового синего, препятствуют выцветанию красных пигментов объекта, а ТЕМЭД и метиленовый синий в присутствии света участвуют в сополимеризации БИС и АКА. Такой способ позволяет создать полимерные структуры не только вокруг, но и внутри объекта.

Полученные препараты гидробионтов, хранятся в герметичном состоянии, без доступа воздуха, при постоянной комнатной температуре.

Примеры конкретного использования.

Пример 1. Рыбу, например карась, ротан, форель, гуппи, амфиприон, живой поместили до гибели в растворы АКА с концентрацией 2, 3, 10, 20, 30%. После выдерживания рыб в растворах оказалось, что в растворах АКА с концентрацией 2 и 30% окраска рыбы усиливалась незначительно. Более яркая окраска наблюдалась у рыб, выдержанных в растворах АКА с концентрацией 3 - 20%. Наибольшая интенсивность окраски наблюдалась у рыб, выдержанных в 10% АКА. Таким образом, оптимальным интервалом содержания АКА следует считать 3 - 20%.

Пример 2. Рыбу, например карась, ротан, форель, гуппи, амфиприон, живой поместили до гибели в растворы 10% АКА с концентрацией тиомочевины 0,05; 0,1; 5 и 8% и в раствор, несодержащий тиомочевину, являющийся контролем. Рыба, выдержанная в растворе, содержащем 8% тиомочевины, имела менее яркую окраску, чем в контроле; не отличаются от контроля - в растворе, содержащем 0,05%; более яркую, чем в контроле, - в растворе, содержащем 0,1 - 5%. Таким образом, оптимальным интервалом содержания тиомочевины следует считать 0,1 - 5%.

Пример 3. Рыбу, например гурами, хирурговые, гулярисы, калиурусы, живой поместили до гибели в растворы, содержащие АКА 3 - 20%, тиомочевину 0,1 - 5% и азотнокислый калий с концентрацией 0,5; 1; 4; 7 и 10%. В растворах с концентрацией азотнокислого калия меньше 1 и больше 7% окраска рыбы менее яркая, чем в растворах с концентрацией его 1 - 7%. Таким образом, оптимальным интервалом содержания азотнокислого калия следует считать 1 - 7%.

Пример 4. Рыб, например карасей-вуалехвостов, предварительно отмытых от слизи, помещали в водные растворы состава: ЭДТА 0,5 - 8%, ТЕМЭД 0,05 - 3%, метиленовый синий 0,0001 - 0,0004%, формальдегид 0,2 - 10%, с последующим воздействием на растворы светом - контрольные и в растворы, содержащие повышенную или пониженную концентрацию одного из этих ингредиентов, также подверженные воздействию света - опыт. Показано, что повышение концентрации ЭДТА относительно оптимума приводит к помутнению консервирующей среды, обезвоживанию объекта, понижение - к набуханию тела объекта, образованию мутного ореола вокруг объекта; повышение концентрации ТЕМЭД - к набуханию и неестественной прозрачности тела объекта, побелению глаз, понижение - также к побелению глаз и потере прозрачности плавников и иных структур; повышение концентрации метиленового синего - к появлению белого налета на поверхности объекта, понижение - к исчезновению красных пигментов; повышение концентрации формальдегида - к исчезновению пигментации, понижение - к деструкции объекта. Таким образом, вышеуказанные интервалы содержания ингредиентов следует считать оптимальными.

Пример 5. Медузы-корнероты помещены в водные растворы состава: АКА 5 - 15%, БИС 0,17 - 0,5%, ЭДТА 0,5 - 8%, ТЕМЭД 0,05 - 3%, метиленовый синий 0,0001 - 0,0004%, этанол 10 - 25%, пропитаны ими с последующим воздействием на раствор светом - контрольные, и в растворы, содержащие повышенную или пониженную концентрацию одного из этих ингредиентов, также подверженные воздействию света - опыт. Показано, что повышение концентрации АКА относительно оптимума приводит к обезвоживанию объекта и его нагреву в процессе полимеризации мономеров АКА и БИС, приводя к денатурации белков объекта, понижение - к набуханию объекта; повышение концентрации БИС - к помутнению геля, понижение - к потере гелем жесткости молекулярной структуры. Оптимумы содержания остальных ингредиентов рассмотрены выше (пример 4). Таким образом, вышеуказанные интервалы содержания ингредиентов следует считать оптимальными.

Формула изобретения

1. Способ консервации гидробионтов, заключающийся в том, что объект помещают в водный раствор бальзамирующего вещества, например формальдегида, отличающийся тем, что объект помещают в вещество, дополнительно содержащее динатриевую соль этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (ЭДТА), N,N, N',N'-тетраметилэтилендиамин (ТЕМЭД), метиленовый синий и воду при следующем соотношении веществ, вес.%:
Динатриевая соль этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты - 0,5 - 8
N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамин - 0,05 - 3
Метиленовый синий - 0,0001 - 0,0004
Бальзамирующий агент (например, формальдегид) - 0,2 - 10
Вода - Остальное
после чего вещество подвергают воздействию света до полного его обесцвечивания.

2. Способ консервации гидробионтов по п.1, отличающийся тем, что их предварительно живыми помещают в вещество, содержащее акриламид (АКА), тиомочевину, азотнокислый калий и воду при следующем соотношении веществ, вес. %:
Акриламид - 3 - 20
Тиомочевина - 0,1 - 5
Азотнокислый калий - 1 - 7
Вода - Остальное
3. Способ консервации гидробионтов, заключающийся в том, что объект помещают в водный раствор бальзамирующего вещества, например этанола, отличающийся тем, что объект помещают в вещество, дополнительно содержащее акриламид (АКА), N, N, -метилен-бисакриламид (БИС), динатриевую соль этилендиамин-N, N,N',N'-тетрауксусной кислоты (ЭДТА), N,N,N',N'-тераметилэтилендиамин (ТЕМЭД), метиленовый синий и воду при следующем соотношении веществ, вес.%:
Акриламид - 5 - 15
N,N'-метилен-бис-акриламид - 0,17 - 0,5
Динатриевая соль этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты - 0,5 - 8
N,N,N',N'-тераметилэтилендиамин - 0,05 - 3
Метиленовый синий - 0,0001 - 0,0004
Бальзамирующий агент (например, этанол) - 10 - 25
Вода - Остальное
после чего вещество подвергают воздействию света до полного его обесцвечивания.