Производные 4-оксо-3,5-дигидро-4н-пиридазино[4,5-b]индол-1- ацетамида, их получение и применение в терапии

 

Изобретение относится к новым производным 4-оксо-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамиду формулы I где Х= Н, галоген, метил-, метокси-, фенилметокси-; Y-Н, 1 или 2 атома галогена, ОН, СН₃О-, NO₂-, СН₃; R₁-Н, C₁-C₄ алкил; R₂ и R₃ каждый, независимо друг от друга, представляет Н, С₁-С₄ алкил, фенилметильную группу, или R₂ и R₃ образуют с атомом азота, который их несет, азетидинильную, пирролидинильную, 3-этоксипирролидинильную, пиперидинальную, морфолинильную, 4-метилпиперазинильную или 1,3-тиазолидинильную группу. Соединения I являются агонистами ω₁ и ω₂ бензодиазапиновых рецепторов, расположенных в макромолекулярном комплексе ГАМК и тем самым могут быть использованы для лечения заболеваний, связанных с расстройством ГАМК-ергической передачи. 3 с. и 1 з. п.ф-лы, 1 табл.

Предметом настоящего изобретения являются соединения общей формулы (I) в которой Х представляет собой атом водорода или галогена или метильную, метокси или фенилметоксигруппу, Y представляет собой атом водорода, 1 или 2 атома галогена или гидроксильную, метокси, нитро или метильную группу, R₁ представляет собой атом водорода или (С₁-С₄)алкильную группу, R₂ и R₃ каждый, независимо друг от друга, представляет собой атом водорода, (С₁-С₄)алкильную группу или фенилметильную группу, или же R₂ и R₃ образуют с атомом азота, который их несет, азетидинильную, пирролидинильную, 3-этоксипирролидинильную, пиперидинильную, морфолинильную, 4-метилпиперазинильную или 1,3-тиазолидинильную группу, соответствующие формулы которых следующие:



Предпочтительными соединениями являются соединения, в общей формуле которых Х находится в положении 8 или 9 и представляет собой атом водорода или галогена, Y представляет собой атом водорода, R₁ представляет собой метильную или этильную группу, R₂ представляет собой атом водорода или метильную группу, а R₃ представляет собой метильную группу, или же R₂ и R₃ образуют с атомом азота, который их несет, азетидинильное или пирролидинильное кольцо.

Соединения общей формулы (I) могут быть получены способами, которые проиллюстрированы на схемах (см. в конце описания).

В соответствии со Схемой 1 соединение общей формулы (II), в которой Х и R₁ являются такими, как определено выше, a R' представляет собой (С₁-С₄)алкильную группу, подвергают взаимодействию с оксалилхлоридом в апротонном растворителе, таком как толуол, при температуре между 50^oС и температурой дефлегмации, реакционное промежуточное соединение затем обрабатывают при комнатной температуре спиртом общей формулы R''OH, в которой R'' представляет собой (С₁-С₄)алкильную группу, с получением диэфира общей формулы (III), или же соединение общей формулы (II) подвергают взаимодействию с алкилхлорглиоксилатом в полярном апротонном растворителе, таком как дихлорметан, при комнатной температуре в присутствии кислоты Льюиса, например тетрахлорида титана, с получением диэфира общей формулы (III).

Последний после этого обрабатывают в уксусной кислоте, сначала при комнатной температуре, а затем при температуре дефлегмации, фенилгидразином, возможно замещенным группой Y, как она определена выше, с получением эфира общей формулы (IV). Когда R₁ представляет собой алкильную группу, тогда этот эфир превращают в соответствующий спирт общей формулы (V), посредством восстановления с помощью восстановителя, такого как боргидрид натрия, в растворителе, таком как тетрагидрофуран, в присутствии спирта, например метанола. Этот спирт (V) затем превращают в галогенированное соединение общей формулы (VIII), подвергая любой реакции, известной специалистам, например либо путем обработки тетрабромидом углерода в присутствии трифенилфосфина в растворителе, таком как дихлорметан, или же действием хлорирующим агентом, таким как метансульфонилхлорид, в смеси растворителей, таких как тетрагидрофуран и пиридин.

После этого проводят реакцию нуклеофильного замещения цианидионом либо в смеси полярных растворителей, таких как диметилформамид и вода, при температуре от 20 до 80^oС, либо в двухфазной смеси, такой как вода и дихлорметан, при температуре между комнатной температурой и температурой дефлегмации в присутствии агента фазового переноса, с получением соединения общей формулы (IX).

Затем проводят кислотный гидролиз, например, используя смесь уксусной кислоты и соляной кислоты, при температуре дефлегмации, или же затем проводят основной гидролиз, например, используя гидроксид калия в смеси растворителей, таких как вода и 2-метоксиэтанол, при температуре дефлегмации, с получением соединения общей формулы (X).

Эту кислоту затем превращают во вторичный или третичный амид общей формулы (I) путем взаимодействия с амином общей формулы HNR₂R₃, в которой R₂ и R₃ являются такими, как определено выше, через посредство например имидазолида, полученного взаимодействием с 1,1-карбонил-1Н-имидазолом.

Если желательным является конечное соединение общей формулы (I), в которой R₁ представляет собой водород, соединение общей формулы (IV), в которой R₁ представляет собой водород, может быть превращено в соединение общей формулы (IV), в которой R₁ представляет собой защитную группу, такую как метоксиметильная группа, например, подвергая реакции алкилирования, известной специалистам. Превращения согласно Схеме 1 продолжают до тех пор, пока не получат соединение общей формулы (IX), а затем проводят кислотный гидролиз последнего с одновременным удалением метоксиметильной защитной группы с получением соединения общей формулы (X), в которой R₁ представляет атом водорода.

В соответствии со Схемой 2 соединение общей формулы (II), как оно определено выше, превращают в соединение общей формулы (VI) любым способом, известным специалистам, например, подвергая электрофильной реакции в кислой среде. Последнее соединение после этого обрабатывают в уксусной кислоте, сначала при комнатной температуре, а затем при температуре дефлегмации, фенилгидразином, возможно замещенным группой Y, как она определена выше. Получают соединение общей формулы (VII), которое превращают в соответствующее галогенированное производное общей формулы (VIII) по реакции радикального типа, например с использованием N-бромсукцинимида, в растворителе, таком как четыреххлористый углерод, в присутствии такого агента, как 2,2'-азобис(2-метилпропионитрил). Соединение общей формулы (VIII) затем обрабатывают как описано в отношении
При желании можно превратить соединение общей формулы (I), в которой Х представляет собой атом галогена, в соединение общей формулы (I), в которой Х представляет собой метильную группу, по любой реакции сочетания, известной специалистам, например, используя тетраметилолово в присутствии палладиевого комплекса.

Подобным образом, соединение общей формулы (I), в которой Y представляет собой метоксигруппу, может быть превращено в соединение, в формуле которого Y представляет собой гидроксильную группу, любым известным способом, например действием трибромида бора в хлорированном растворителе, таком как дихлорметан.

Также возможно, при желании, превратить соединение общей формулы (I), в которой Х представляет собой атом хлора, в соединение общей формулы (I), в которой R представляет собой водород, например гидрированием в присутствии палладия-на-угле.

В соответствии со Схемой 3 соединение общей формулы (V), в которой R₁ представляет собой алкильную группу, а Х представляет собой атом хлора, превращают в соединение общей формулы (XI) окислением спиртовой функциональной группы, например, используя диоксид марганца в растворителе, таком как дихлорметан. Альдегид (XI) затем превращают в нитрил общей формулы (XII) путем взаимодействия с (4-метилбензолсульфонил)метилизоцианида ("TosMIC") в растворителе, таком как 1,2-диметоксиэтан, в присутствии основания, такого как 1,1-диметилэтоксида калия. Нитрил (XII) после этого превращают в эфир общей формулы (XIII), в которой R'' представляет собой низшую алкильную группу, действием кислоты, такой как хлористый водород, в спиртовом растворителе формулы R''OH.

В конце этот эфир (XIII) превращают во вторичный или третичный амид общей формулы (I) путем взаимодействия с амином общей формулы HNR₂R₃, в которой R₂ и R₃ являются такими, как определено выше, например в присутствии триалкилалюминиевого производного в растворителе, таком как толуол.

Исходные соединения общей формулы (II), главным образом когда R₁ представляет собой водород, описаны в литературе. При желании соединение, в формуле которого R₁ представляет собой водород, может быть подвергнуто реакции алкилирования с получением соединения, в формуле которого R₁ представляет собой алкильную группу.

Следующие примеры иллюстрируют получение некоторых соединений по настоящему изобретению. Элементные микроанализы и ИК и ЯМР спектры подтверждают структуры полученных соединений.

Цифры, показанные в скобках в заголовках примеров, соответствуют цифрам в первой графе таблицы.

В названиях соединений дефис "-" образует часть слова, а знак подчеркивания "_" использован только для разрыва в конце строки; его следует пропускать в отсутствии разрыва строки и не следует заменять ни дефисом, ни пробелом.

Пример 1 (Соединение 9)
5-Этил-8-фтор-N, N-диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
1.1. Этиловый эфир 1-этил-5-фтор-1Н-индол-2-карбоновой кислоты
Суспензию 3,8 г (95 ммоль) 60% гидрида натрия (промытого предварительно петролейным эфиром) и 15 г (72,4 ммоль) этилового эфира 5-фтор-1Н-индол-2-карбоновой кислоты в 100 мл диметилформамида перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. После этого добавляют 7,5 мл (93,7 ммоль) йодэтана в виде раствора в 20 мл диметилформамида. После перемешивания в течение 10 часов при комнатной температуре реакционную смесь вливают в ледяную воду. Смесь экстрагируют диэтиловым эфиром. Органическую фазу промывают несколько раз водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Получают 17 г (72 ммоль) желтого масла, которое используют на следующей стадии.

1.2. Метиловый эфир 2-(этоксикарбонил)-1-этил-5-фтор-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты
Раствор 17 г (72 ммоль) этилового эфира 1-этил-5-фтор-1Н-индол-2-карбоновой кислоты и 7,4 мл (84,5 ммоль) оксалилхлорида в 500 мл толуола нагревают при температуре дефлегмации в течение 6 часов. Добавляют дополнительные 5 мл (57 ммоль) оксалилхлорида, проводят нагревание в течение 1 часа при температуре дефлегмации и смеси дают возможность остыть до комнатной температуры. Добавляют 200 мл метанола, смесь перемешивают в течение 10 минут и растворители выпаривают при пониженном давлении. Полученное масло переносят в дихлорметан и органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. После перекристаллизации из пропан-2-ола получают 14 г (43,6 ммоль) соединения в форме белого твердого вещества.

1.3. Метиловый эфир 5-этил-8-фтор-4-оксо-3-фенил-3.5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты
К раствору 14 г (43,6 ммоль) метилового эфира 2-(этоксикарбонил)-1-этил-5-фтор-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты в 150 мл уксусной кислоты добавляют 18,4 мл (187,2 ммоль) фенилгидразина при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре, а затем в течение 2 часов при температуре дефлегмации. Смесь охлаждают, добавляют 100 мл воды и нерастворимое вещество отделяют фильтрацией. Нерастворимое вещество промывают на спеченном стекле смесью 70/30 воды и ацетона. Таким образом выделяют 10,5 г (28,6 ммоль) белого твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

1.4. 5-Этил-8-фтор-1-(гидроксиметил)-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
К раствору 10 г (27,3 ммоль) метилового эфира 5-этил-8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-карбоновой кислоты в 200 мл тетрагидрофурана и 5,8 мл метанола при комнатной температуре добавляют 5,1 г (135 ммоль) боргидрида натрия несколькими порциями и смесь перемешивают в течение 4 часов при температуре дефлегмации. Смесь вливают в ледяной 0,1 н. раствор соляной кислоты, нерастворимое вещество отделяют фильтрацией, это нерастворимое вещество промывают водой и диэтиловым эфиром на спеченном стекле, а затем сушат его. Выделяют 7,2 г (21,4 ммоль) соединения в форме белого твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

1.5. 1-(Бромметил)-5-этил-8-фтор-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]ндол-4-он
К раствору 7,2 г (21,4 ммоль) 5-этил-8-фтор-1-(гидроксиметил)-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индо-4-она и 15,3 г (46,13 ммоль) тетрабромида углерода в 500 мл дихлорметана добавляют 11,5 г (43,84 ммоль) трифенилфосфина несколькими порциями и раствор перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре.

Смесь концентрируют до 1/3 при пониженном давлении, осадок собирают фильтрацией, промывают эфиром и сушат при пониженном давлении. Получают 4 г (10 ммоль) твердого вещества. К маточному раствору добавляют 300 мл дихлорметана, 8 г (24,1 ммоль) тетрабромида углерода и 5 г (19,06 ммоль) трифенилфосфина и раствор перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре, а затем концентрируют до 1/3. Осадок собирают фильтрацией, промывают эфиром и сушат при пониженном давлении. Дополнительно получают 3,2 г (8 ммоль) твердого вещества.

1.6. 5-Этил-8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрил
Двухфазную смесь 7,2 г (18 ммоль) 1-(бромметил)-5-этил-8-фтор-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-она, 3,53 г (72 ммоль) цианида натрия и 0,58 г (1,8 ммоль) тетрабутиламмония бромида в 300 мл дихлорметана и 150 мл воды энергично перемешивают в течение 12 часов. Органическую фазу отделяют, промывают несколько раз водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Выделяют 5,8 г (16,8 ммоль) соединения, которое используют на следующей стадии.

1.7. 5-Этил-8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусная кислота
Раствор 5,8 г (16,8 ммоль) 5-этил-8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетонитрила в 200 мл смеси 1/1 концентрированной соляной кислоты и ледяной уксусной кислоты нагревают при температуре дефлегмации в течение 2 часов.

Раствор охлаждают, добавляют 100 мл воды и нерастворимое вещество собирают фильтрацией и обильно промывают водой и эфиром на спеченном стекле.

После сушки в термостате получают 5,2 г (15 ммоль) белого твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

1.8. 5-Этил-8-фтор-N,N-диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
Суспензию 1 г (2,73 ммоль) 5-этил-8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусной кислоты и 0,7 г (4,3 ммоль) 1,1'-карбонилбис-1Н-имидазола в 200 мл тетрагидрофурана перемешивают в течение 3 часов при 50^oС.

Реакционную смесь охлаждают до 25^oС, добавляют избыток сжиженного диметиламина и реакционную смесь перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Ее концентрируют при пониженном давлении, добавляют 100 мл дихлорметана и 100 мл воды и органическую фазу отделяют, промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученное масло кристаллизуется из эфира. После фильтрования и перекристаллизации из этилацетата выделяют 0,75 г (1,9 ммоль) белых кристаллов. Температура плавления: 183-184^oС.

Пример 2 (Соединение 25)
1-[2-(8-Хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ил)-1-оксоэтил]пирролидин
2.1. Метиловый эфир 5-хлор-2-(этоксикарбонил)-1-метил-α-оксо-1Н-индол-2-уксусной кислоты
15 мл (170 ммоль) оксалилхлорида добавляют к раствору 31,5 г (133 ммоль) этилового эфира 5-хлор-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты в 100 мл толуола, нагретого до 60^oС, и смесь нагревают при температуре дефлегмации в течение 1 часа.

Раствор охлаждают, добавляют 50 мл метанола, смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток переносят в 100 мл дихлорметана и 50 мл воды, добавляют гидрокарбонат натрия, органическую фазу отделяют и сушат над сульфатом магния. Растворители выпаривают при пониженном давлении, а остаток растирают в эфире. Осадок собирают фильтрацией и сушат при пониженном давлении. Получают 19 г (59 ммоль) твердого вещества. Температура плавления: 119-120^oС.

2.2. Метиловый эфир 8-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты
Раствор 19 г (59 ммоль) метилового эфира 5-хлор-2-(этоксикарбонил)-1-метил-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты и 26 г (240 ммоль) фенилгидразина в 250 мл уксусной кислоты нагревают при температуре дефлегмации в течение 2 часов. Смесь охлаждают, добавляют 250 мл смеси 1/1 воды и ацетона и смесь оставляют стоять при 4^oС в течение 15 часов.

Осадок собирают фильтрацией, промывают водой и ацетоном и сушат при пониженном давлении.

Получают 17,4 г (47 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 265-266^oС.

2.3. 8-Хлор-1-(гидроксиметил)-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
Раствор 17,2 г (47 ммоль) метилового эфира 8-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-карбоновой кислоты, 8,7 г (230 ммоль) боргидрида натрия и 9,4 мл (230 ммоль) метанола в 300 мл тетрагидрофурана нагревают при температуре дефлегмации в течение 4 часов. Смесь охлаждают и вливают в перемешиваемый раствор 100 мл 2 н. соляной кислоты и 100 мл дихлорметана. Осадок собирают фильтрацией, промывают водой и дихлорметаном и сушат при пониженном давлении. Получают 15 г (44 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 278-280^oС.

2.4. 1-(Бромметил)-8-хлор-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
Получение проводят как в Примере 1.5 из 15 г (44 ммоль) 8-хлор-1-(гидроксиметил)-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-она. После нескольких обработок и очисток хроматографированием на силикагеле выделяют 15 г (37 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 253-254^oС.

2.5. 8-Хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрил
Получение проводят как в Примере 1.6 из 12, 5 г (3 ммоль) 1-(бромметил)-8-хлор-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-4-она в смеси хлороформа и воды. После очистки на колонке из силикагеля получают 10 г (28 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 230^oС.

2.6. 8-Хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусная кислота
Раствор 10 г (28 ммоль) 8-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрила в смеси 200 мл концентрированной соляной кислоты и 200 мл уксусной кислоты нагревают при 100^oС в течение 4 часов. Раствор концентрируют при пониженном давлении, остаток переносят в 250 мл воды и осадок собирают фильтрованием. Его промывают водой и сушат при пониженном давлении. Получают 10,2 г (27 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 206-208^oС.

2.7. 1-[2-(8-Хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ил)-1-оксоэтил]пирролидин
Раствор 1,5 г (4 ммоль) 8-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-уксусной кислоты и 1,2 г (7,4 ммоль) 1,1'-карбонилбис-1Н-имидазола в тетрагидрофуране перемешивают в течение 1 часа при 50^oС.

Смесь охлаждают и добавляют избыток пирролидина. После перемешивания в течение 15 часов осадок собирают фильтрованием, промывают водой и эфиром и перекристаллизовывают из пропан-2-ола. Получают 0,65 г (1,5 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 261-262^oС.

Пример 3 (Соединение 27)
N, N,5-Триметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
3.1. 5-Метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусная кислота
Раствор 3,3 г (9 ммоль) 8-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридизино[4,5-b]индол-1-уксусной кислоты, 2,8 г (44 ммоль) формиата аммония и 1,8 г 10% палладия-на-угле в 500 мл этанола нагревают при температуре дефлегмации в течение 5 часов.

Реакционную смесь охлаждают, добавляют дихлорметан, катализатор удаляют фильтрованием через диатомитовую землю и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Получают 3 г (9 ммоль) соединения, которое используют на следующей стадии.

3.2. N,N,5-Триметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
Суспензию 1 г (3 ммоль) 5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-уксусной кислоты и 0,7 г (4,3 ммоль) 1,1'-карбонилбис-1Н-имидазола в 200 мл тетрагидрофурана перемешивают в течение 2 часов при 60^oС. Реакционную смесь охлаждают до 25^oС, добавляют избыток сжиженного диметиламина в виде раствора в тетрагидрофуране и реакционную смесь перемешивают в течение 72 часов при комнатной температуре.

Ее концентрируют при пониженном давлении, добавляют 300 мл воды и осадок собирают фильтрованием, промывают водой и эфиром и перекристаллизовывают из пропан-2-ола. Выделяют 0,75 г (2 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 214-215^oС.

Пример 4 (Соединение 26)
1-[2-(5-Метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ил)-1-оксоэтил]пирролидин
Получение проводят как в Примере 3.2 из 1 г (3 ммоль) 5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-уксусной кислоты и избытка пирролидина. Продукт перекристаллизовывают из пропан-2-ола. Получают 0,5 г (1,3 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 214-215^oС.

Пример 5 (Соединение 31)
1-[2-(9-Бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ил)-1-оксоэтил]пирролидин
5.1. Метиловый эфир 2-азидо-3-(2-бромфенил)проп-2-еновой кислоты
Раствор 75 мл (624 ммоль) 2-бромбензальдегида и 252 г (2,2 ммоль) метилазидоацетата в 160 мл метанола по каплям добавляют в течение 3 часов при температуре от -10^oС до -8^oС в атмосфере азота и при механическом перемешивании к раствору 476 мл метоксида натрия (30% в метаноле) в 950 мл метанола. Перемешивание поддерживают в течение 2 часов при температуре ниже 5^oС. Смесь выливают на 1,5 кг льда. Осадок собирают фильтрованием, промывают водой и сушат при пониженном давлении, в отсутствии света. Получают 116 г (0,41 ммоль) твердого вещества, которое сразу используют на следующей стадии.

5.2. Метиловый эфир 4-бром-1Н-индол-2-карбоновой кислоты
Раствор 116 г (0,41 ммоль) метилового эфира 2-азидо-3-(2-бромфенил)проп-2-еновой кислоты в 1,5 л толуола по каплям добавляют в течение 4 часов при механическом перемешивании к раствору 2 л толуола, нагретого до температуры дефлегмации, и дефлегмацию поддерживают дополнительно в течение 1 час. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток переносят в 1 л циклогексана. Осадок собирают фильтрованием, промывают толуолом и сушат при пониженном давлении. Выделяют 37,85 г (149 ммоль) продукта. Маточные жидкости концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонке из силикагеля.

Выделяют 12,2 г (48 ммоль) дополнительного продукта.

5.3. Метиловый эфир 4-бром-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты
Получение проводят как в Примере 1.1 из 20 г (79 ммоль) метилового эфира 4-бром-1Н-индол-2-карбоновой кислоты, из 3,8 г 60% гидрида натрия и из 6 мл йодметана. После взаимодействия растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток переносят в воду. Смесь экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу сушат и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Продукт сушат при пониженном давлении. Получают 20,6 ммоль (77 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 85-86^oС.

5.4. Метиловый эфир 3-ацетил-4-бром-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты
33 мл трифторуксусного ангидрида добавляют к раствору 13,2 мл уксусной кислоты, 1,6 мл фосфорной кислоты и 170 мл ацетонитрила. Проводят перемешивание в течение 10 минут при комнатной температуре и добавляют раствор 20,6 г (77 ммоль) метилового эфира 4-бром-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты в 120 мл ацетонитрила. Смесь перемешивают в течение 4 часов при комнатной температуре и выливают на воду и экстрагируют эфиром. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия, растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток переносят в смесь циклогексана и дихлорметана. Осадок собирают фильтрованием, промывают эфиром и сушат при пониженном давлении. Получают 18,8 г (61 ммоль) продукта.

Маточные жидкости концентрируют и остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля. Выделяют 3,2 г (10 ммоль) дополнительного продукта.

Температура плавления 128^oС.

5.5. 9-Бром-1,5-диметил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
22 г (71 ммоль) метилового эфира 3-ацетил-4-бром-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты растворяют при нагревании в 350 мл уксусной кислоты. Добавляют 30 мл (300 ммоль) фенилгидразина, перемешивание продолжают в течение 1 часа при комнатной температуре и реакционную смесь нагревают при температуре дефлегмации в течение 5 часов. Добавляют 28 мл фенилгидразина и процесс повторяют. Смесь концентрируют при пониженном давлении, остаток переносят в воду и осадок собирают фильтрованием, промывают водой и сушат при пониженном давлении. Его очищают хроматографированием на колонке из силикагеля. Выделяют 11,1 г (30 ммоль) продукта.

Температура плавления: 189-190^oС.

5.6. 9-Бром-1-(бромметил)-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
Раствор 10,1 г (27,1 ммоль) 9-бром-1,5-диметил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-она, 6 г (34 ммоль) N-бромсукцинимида и 0,46 г (2,8 ммоль) 2,2'-азобис(2-метилпропионитрила) нагревают при температуре дефлегмации в течение 5 часов. Снова добавляют 3 г (17 ммоль) N-бромсукцинимида и 0,23 г (1,4 ммоль) 2,2'-азобис(2-метилпропионитрила). Смесь нагревают при температуре дефлегмации в течение 2 часов, оставляют стоять при комнатной температуре в течение 15 часов и снова нагревают при температуре дефлегмации в течение 5 часов. Смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток переносят в воду и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу сушат, растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля. Выделяют 5,9 г (13 ммоль) продукта.

5.7. 9-Бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрил
Раствор 6,4 г (14,3 ммоль) 9-бром-1-(бромметил)-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-4-она, 3,6 г (73 ммоль) цианида натрия и 0,57 г (1 ммоль) тетрабутиламмония бромида в смеси 170 мл дихлорметана и 85 мл воды нагревают при температуре дефлегмации в течение 3 часов при механическом перемешивании. Разделение проводят путем расслаивания и реакционную смесь экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу промывают водой и сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Получают 5,6 г (14,2 ммоль) продукта, который используют на следующей стадии.

5.8. 9-Бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусная кислота
Раствор 4,8 г (12,2 ммоль) 9-бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетонитрила в смеси 190 мл уксусной кислоты и 50 мл концентрированной соляной кислоты нагревают при температуре дефлегмации в течение 6 часов. Раствор концентрируют при пониженном давлении и остаток переносят в смесь дихлорметана и воды. Проводят подщелачивание 30% раствором гидроксида натрия, проводят разделение путем расслаивания и проводят экстракцию дихлорметаном. Водную фазу подкисляют концентрированной соляной кислотой при охлаждении на ледяной бане. Осадок собирают фильтрованием, промывают водой и сушат при пониженном давлении. Получают 3,1 г (7,5 ммоль) твердого вещества.

5.9. 1-[2-(9-Бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ил)-10-оксоэтил]пирролидин
Получение проводят как в Примере 3.2 из 3,1 г (7,5 ммоль) 9-бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусной кислоты, из 1,4 г 1,1'-карбонилбис-1Н-имидазола и из 0,7 мл пирролидина. После взаимодействия добавляют воду, осадок собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении. Его перекристаллизовывают из пропан-2-ола и промывают эфиром и пентаном, а затем сушат при пониженном давлении. Получают 2,3 г (4,9 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 209-210^oС.

Пример 6 (Соединение 11)
9-Бром-5-метил-N-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетамид
Получение проводят как в Примере 3.2 из 0,78 г (1,9 ммоль) 9-бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусной кислоты. Продукт перекристаллизовывают из пропан-2-ола. Получают 0,57 г (1,3 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 267-268^oС.

Пример 7 (Соединение 38)
1-[2-(5,9-Диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ил)-1оксоэтил]пирролидин
Раствор 1,2 г (2,6 ммоль) 1-[2-(9-бром-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ил)-1-оксоэтил] пирролидина, 0,22 г (0,3 ммоль) бис(трифенилфосфин)палладия(II) хлорида, 0,41 г (1,55 ммоль) трифенилфосфина и 1,5 мл (10,3 ммоль) тетраметилолова в 15 мл диметилформамида нагревают при 120^oС в течение 18 часов в запаянной пробирке. Смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток переносят в дихлорметан и раствор гидрокарбоната натрия. Органическую фазу промывают 10% раствором фторида калия и сушат над сульфатом натрия, растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонке из силикагеля. Продукт перекристаллизовывают из пропан-2-ола, промывают эфиром и пентаном и сушат при пониженном давлении. Получают 0,82 г (2 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 214-215^oС.

Пример 8 (Соединение 23)
1-[2-(5-Метил-4-оксо-3-фенил-8-(фенилметокси)-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ил)-1-оксоэтил]-пирролидин
8.1. 5-Метил-4-оксо-3-фенил-8-(фенилметокси)-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусная кислота
Раствор 1,15 г (2,7 ммоль) 5-метил-4-оксо-3-фенил-8-(фенилметокси)-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрила и 1,54 г (39 ммоль) гидроксида калия в смеси с 10 мл воды и 20 мл 2-метоксиэтанола нагревают при температуре дефлегмации. Смесь экстрагируют дихлорметаном, водную фазу подкисляют и экстрагируют этилацетатом, органическую фазу сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Выделяют 0,38 г (0,86 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

8.2. 1-[2-(5-Метил-4-оксо-3-фенил-8-(фенилметокси)-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ил)-1-оксоэтил]пирролидин
Получение проводят как в Примере 3.2 из 0,38 г (0,86 ммоль) 5-метил-4-оксо-3-фенил-8-(фенилметокси)-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-уксусной кислоты. Получают 0,35 г (0,7 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 203-204^oС.

Пример 9 (Соединение 17)
N, N, 5,8-Тетраметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетамид
9.1. 1-(Хлорметил)-5,8-диметил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-4-он
50 мл пиридина добавляют к суспензии 9,5 г (29,7 ммоль) 1-(гидроксиметил)-5,8-диметил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-4-она в 600 мл тетрагидрофурана, нагретого до 60^oС. Добавляют 4,5 мл (59,4 ммоль) метансульфонилхлорида и смесь оставляют стоять в течение 15 часов при комнатной температуре. Добавляют 500 мл дихлорметана, осадок удаляют фильтрацией, разделение проводят посредством расслоения и органическую фазу промывают водой. Ее сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Получают 5 г (14,8 ммоль) продукта, который используют на следующей стадии.

9.2. 5,8-Диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрил
Раствор 5 г (14,8 ммоль) 1-(хлорметил)-5,8-диметил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-лиридазино[4,5-b] индол-4-она, 2,7 г (55 ммоль) цианида натрия и 0,5 г (3 ммоль) йодида натрия в смеси 50 мл диметилформамида и 30 мл воды перемешивают в течение 2 часов при 50^oС. Смесь оставляют стоять при комнатной температуре и осадок собирают фильтрованием. Его промывают водой и пентаном и сушат при пониженном давлении.

Получают 3 г (9,1 ммоль) продукта, который используют на следующей стадии.

9.3. 5,8-Диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусная кислота
Получение проводят как в Примере 1.7 из 3,4 (10,4 ммоль) 5,8-диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрила. Получают 2 г (5,8 ммоль) продукта, который используют на следующей стадии.

9.4. N,N,5,8-Тетраметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетамид
Получение проводят как в Примере 3.2 из 1 г (2,9 ммоль) 5,8-диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусной кислоты. Продукт перекристаллизовывают из пропан-2-ола. Получают 0,5 г (1,3 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 209-210^oС.

Пример 10 (Соединение 43)
8-Фтор-N, N-диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
10.1. Этиловый эфир 2-(этоксикарбонил)-5-фтор-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты
Раствор 40 мл (313 ммоль) этилхлорглиоксилата и 36 мл (313 ммоль) тетрахлорида титана в 1 л дихлорметана перемешивают в течение 15 минут при комнатной температуре. Добавляют раствор 50 г (241 ммоль) этилового эфира 5-фтор-1Н-индол-2-карбоновой кислоты в дихлорметане и смесь перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Смесь вливают в воду, органическую фазу отделяют посредством расслоения, промывают разбавленным раствором гидроксида натрия и сушат над сульфатом натрия. Получают 31,5 г (102 ммоль) продукта, который используют на следующей стадии.

10.2. Этиловый эфир 8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты
Получение проводят как в Примере 1.3 из 5 г (16,2 ммоль) этилового эфира 2-(этоксикарбонил)-5-фтор-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты и из 9,5 мл фенилгидразина в 150 мл уксусной кислоты. Выделяют 3,9 г (11 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

10.3. Этиловый эфир 8-фтор-5-(метоксиметил)-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты
Суспензию 3,9 г (11 ммоль) этилового эфира 8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты в 200 мл диметилформамида добавляют к суспензии 0,66 г (16 ммоль) гидрида натрия в 100 мл диметилформамида. Смесь перемешивают в течение 1,5 часа при комнатной температуре и добавляют раствор 1,15 мл (14,3 ммоль) хлорметоксиметана в 10 мл тетрагидрофурана. Смесь перемешивают в течение 2 часов, добавляют раствор разбавленной соляной кислоты, осадок собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении. Выделяют 4,1 г (10,4 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

10.4. 8-Фтор-1-(гидроксиметил)-5-(метоксиметил)-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
Получение проводят как в Примере 1.4 из 4,1 г (10,4 ммоль) этилового эфира 8-фтор-5-(метоксиметил)-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты. Выделяют 3,2 г (9 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

10.5. 1-(Бромметил)-8-фтор-5'-(метоксиметил)-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
4,5 г (17,1 ммоль) трифенилфосфина добавляют к раствору 3,2 г (9 ммоль) 8-фтор-1-(гидроксиметил)-5-(метоксиметил)-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-она и 6,3 (19 ммоль) тетрабромметана в 200 мл дихлорметана. Смесь перемешивают в течение 2 часов, добавляют 50 мл циклогексана, осадок собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении. Выделяют 2,9 г (7 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

10.6. 8-Фтор-5-(метоксиметил)-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрил
Двухфазную смесь 2,8 г (6,7 ммоль) 1-(бромметил)-8-фтор-5-(метоксиметил)-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-4-она, 1,3 г (26 ммоль) цианида натрия и 0,23 г (0,7 ммоль) тетрабутиламмония бромида в 100 мл дихлорметана и 100 мл воды энергично перемешивают в течение 12 часов. Органическую фазу отделяют, промывают несколько раз водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Добавляют диэтиловый эфир, осадок собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении. Выделяют 2,1 г (5,8 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

10.7. 8-Фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-уксусная кислота
Получение проводят как в Примере 1.7 из 1,2 г (3,3 ммоль) 8-фтор-5-(метоксиметил)-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетонитрила. После фильтрования и сушки выделяют 1,1 г (3,2 ммоль) твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

10.8. 8-Фтор-N,N-диметил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетамид
Суспензию 1,7 г (10,5 ммоль) 1,1'-карбонилбис-1Н-имидазола и 3 г (8,9 ммоль) 8-фтор-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-уксусной кислоты в 300 мл тетрагидрофурана перемешивают при 40^oС в течение 3 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют 10 мл сжиженного диметиламина и смесь перемешивают в течение 2 часов. После стояния в течение ночи добавляют 300 мл воды, осадок собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из диметилформамида. Получают 0,8 г (2,2 ммоль) твердого вещества.

Температура плавления: 289-290^oС.

Пример 11 (Соединение 52)
7-Хлор-N, N-диэтил-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
11.1. Этиловый эфир 6-хлор-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты
Получение проводят как в Примере 1.1 из 8,0 г (35,8 ммоль) этилового эфира 6-хлор-1Н-индол-2-карбоновой кислоты, из 1,8 г 60% гидрида натрия и из 2,8 мл йодметана.

После взаимодействия растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток переносят в воду. Смесь экстрагируют дихлорметаном, органическую фазу сушат и фильтруют, растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля. Выделяют 8,5 г (35,8 ммоль) белого кристаллического соединения.

Температура плавления: 75,5-76,5^oС.

11.2. Этиловый эфир 6-хлор-2-(этоксикарбонил)-1-метил-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты
4 мл (36,4 ммоль) хлорида титана (IV) добавляют к раствору 4 мл (36 ммоль) этилхлороксоацетата в 100 мл 1,2-дихлорэтана. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре, затем добавляют 7,8 г (32,8 ммоль) этилового эфира 6-хлор-1-метил-1Н-индол-2-карбоновой кислоты и реакционную смесь перемешивают в течение 4 часов при комнатной температуре.

Смесь охлаждают и добавляют 200 мл дихлорметана и 100 мл воды. Органическую фазу отделяют расслоением, промывают водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля. Выделяют 9,4 г (27,7 ммоль) продукта.

Температура плавления: 94-95^oС.

11.3. Этиловый эфир 7-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоновой кислоты
4 мл (40,6 ммоль) фенилгидразина добавляют при комнатной температуре к раствору 4,6 г (13,6 ммоль) этилового эфира 6-хлор-2-(этоксикарбонил)-1-метил-α-оксо-1Н-индол-3-уксусной кислоты в 120 мл уксусной кислоты. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре, а затем в течение 4 часов при температуре дефлегмации.

Смесь охлаждают и добавляют 350 мл дихлорметана и 100 мл воды. Органическую фазу отделяют посредством расслоения, промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля.

Выделяют 4,1 г (10,7 ммоль) продукта.

Температура плавления: 216-218,5^oС.

11.4. 7-Хлор-1-(гидроксиметил)-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-4-он
2,5 г (66,1 ммоль) боргидрида натрия добавляют к раствору 4,04 г (10,6 ммоль) этилового эфира 7-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] -индол-1-карбоновой кислоты в 150 мл тетрагидрофурана. Постепенно добавляют 2,25 мл метанола при перемешивании, а затем смесь нагревают при температуре дефлегмации в течение 5 часов. Смесь выливают на ледяной 1М раствор соляной кислоты и нерастворимый продукт отделяют фильтрованием на спеченном стекле, причем этот продукт промывают водой и диэтиловым эфиром и затем сушат. 3,3 г (9,7 ммоль) соединения выделяют в форме белого твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

Температура плавления: 219-220,5^oС.

11.5. 7-Хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-карбоксальдегид
5,7 г (65,6 ммоль) диоксида марганца добавляют к раствору 3,3 г (9,7 ммоль) 7-хлор-1-(гидроксиметил)-5-метил-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-4-она в 300 мл дихлорметана и реакционную смесь перемешивают в течение 24 часов при температуре дефлегмации.

Смесь охлаждают и фильтруют через мембрану Teflon® твердое вещество промывают дихлорметаном, а затем фильтрат концентрируют при пониженном давлении.

Выделяют 2,88 г (8,53 ммоль) соединения в форме белого твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

Температура плавления: 235-236^oС.

11.6. 7-Хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетонитрил
1,27 г (10,96 ммоль) 1,1-диметилэтоксида калия добавляют маленькими порциями к раствору 2,14 г (10,96 ммоль) (4-метилбензолсульфонил)метилизоцианида в 50 мл 1,2-диметоксиэтана. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут при -60^oС, добавляют 2,88 г (8,53 ммоль) 7-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-карбоксальдегида и реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов при -60^oС. Добавляют 9 мл метанола и реакционную смесь далее перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре и в течение 1 часа при температуре дефлегмации.

Смесь охлаждают и концентрируют при пониженном давлении, к остатку добавляют воду, 5 мл уксусной кислоты и 200 мл дихлорметана. Органическую фазу отделяют посредством расслаивания, а водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Органические фазы объединяют, промывают водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля.

1,87 г (5,36 ммоль) соединения выделяют в форме белого твердого вещества, которое используют на следующей стадии.

Температура плавления: 305-315^oС.

11.7. Метиловый эфир 7-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-уксусной кислоты
Хлорид водорода добавляют к раствору 1,83 г (5,25 ммоль) 7-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетонитрила в 250 мл метанола до насыщения раствора и реакционную смесь перемешивают в течение 4 часов при температуре дефлегмации.

Смесь охлаждают, реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к остатку добавляют 25 мл воды и 25 мл метанола. После перемешивания нерастворимый продукт собирают фильтрованием, промывают водой и диэтиловым эфиром, сушат и очищают хроматографированием на колонке из силикагеля.

Выделяют 1,00 г (2,62 ммоль) соединения в форме белого твердого вещества.

Температура плавления: 188,5-190^oС.

11.8. 7-Хлор-N, N-диэтил-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетамид
0,41 мл (4 ммоль) диэтиламина добавляют при 0^oС в атмосфере аргона к раствору 2 мл (4 ммоль) триметилалюминия (2М раствор в толуоле), реакционную смесь перемешивают в течение 20 минут при комнатной температуре, добавляют 0,095 г (0,25 ммоль) метилового эфира 7-хлор-5-метил-4-оксо-3-фенил-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b]индол-1-ацетата и реакционную смесь перемешивают в течение 4 часов при температуре дефлегмации.

Смесь охлаждают до 4^oС, добавляют 3 мл воды и дихлорметана, раствор фильтруют и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют воду, 1М соляную кислоту и 150 мл дихлорметана. Органическую фазу отделяют, промывают водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографированием на колонке из силикагеля. После перекристаллизации из диэтилового эфира выделяют 0,10 г (0,24 ммоль) соединения в форме белого твердого вещества, мягкого на вид.

Температура плавления: 167-168^oС.

Химические структуры и физические свойства некоторых соединений по изобретению проиллюстрированы в таблице.

Обозначения
"Me", "Et", "Рr" и "Ph" соответственно обозначают метильную, этильную, пропильную и фенильную группу;
"азетид. ", "пирролид. ", "пиперид.", "морф.", "пипераз." и "тиазолид." соответственно обозначают азетидинильную, пирролидинильную, пиперидинильную, морфолинильную, пиперазинильную и 1,3-тиазолидинильную группу.

Соединения по изобретению были подвергнуты фармакологическим испытаниям, которые показали их преимущества как вещества, имеющие терапевтическую активность.

Исследование мембранного связывания по отношению к ω₁-рецепторам мозжечка (бензодиазепина типа 1) и ω₂-рецепторам спинного мозга (бензодиазепина типа 2)
Аффинность соединений к ω₁-рецепторам мозжечка и ω₂-рецепторам спинного мозга определяли согласно одному из вариантов метода, описанного S.Z. Langer и S. Arbilla в Fund. Clin. Pharmacol., 2, 159-170 (1988), с использованием ³H]флумазенила вместо [³H]диазепама в качестве радиолиганда.

Ткань мозжечка или спинного мозга гомогенизируют в течение 60 с в 120 или 30 объемах соответственно ледяного буфера (50 мМ Трис-HCl, рН 7,4, 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl), а затем, после разведения до 1/3, суспензию инкубируют с [³H] флумазенилом (удельная активность 78 Ки/ммоль, New England Nuclear) при концентрации 1 нМ и с соединениями по изобретению при различных концентрациях, с конечным объемом 525 мкл. После 30 минут инкубации при 0^oС образцы фильтруют при пониженном давлении на фильтрах Whatman GF/B® и сразу промывают ледяным буфером. Специфическое связывание [³H]флумазенила определяют в присутствии 1 мкМ немеченого диазепама. Данные анализируют стандартными методами и вычисляют концентрацию ИК₅₀, концентрацию, которая ингибирует на 50% связывание [³H]флумазенила.

Значения ИК₅₀ большинства близко родственных соединений по изобретению лежат в интервале между 5 и 1000 нМ для ω₁-рецепторов мозжечка и между 20 и 1000 нМ для ω₂-рецепторов спинного мозга.

Исследование анксиолитической активности
Тест на конфликт-реакцию потребления питья
Анксиолитическую активность оценивают у крыс в тесте на конфликт-реакцию потребления питья по методу, описанному J.R. Vogel, В. Beer и D.E. Clody в Psychopharmacologia (Beri.), 21, 1-7 (1971). После того как крыса была лишена воды в течение 48 часов, ее помещают в звуконепроницаемую камеру, снабженную пипеткой для подачи воды, соединенной с анксиометром, который доставляет слабый электрический удар каждые 20 лизательных движений. Количество полученных ударов автоматически подсчитывается в течение 3 минут и дает возможность оценить анксиолитическую активность тестируемых соединений. Результаты выражают в виде минимальной эффективной дозы (МЭД) - дозы, которая вызывает значительное увеличение числа полученных ударов относительно числа ударов, наблюдаемых у контрольных животных.

В этом тесте значения МЭД наиболее активных соединений лежат в интервале между 0,1 и 10 мг/кг при внутрибрюшинном или пероральном введении.

Тест в повышенном крестообразном лабиринте
Протокол данного исследования является модификацией протокола, описанного S. Pellow и S. File в Pharmacol. Biochem. Behav., (1986), 24, 525-529.

После периода привыкания к помещению для экспериментов, длящегося приблизительно 24 часа, крыс помещают по одиночке на центральную платформу, морду направляют к одному из закрытых рукавов лабиринта и в течение 4 минут наблюдают, используя видеокамеру. Регистрируют время, потраченное животным в открытых рукавах лабиринта, число вхождений в закрытые рукава и в открытые рукава лабиринта, число попыток войти в открытые рукава лабиринта с последующим уклонением от вхождения и эксплорацию краев в открытых рукавах лабиринта. Для каждого животного результаты выражают как: 1) процент прохождений в открытые рукава лабиринта относительно общего числа вхождений в четыре рукава прибора, 2) процент времени, потраченного в открытых рукавах, относительно общей продолжительности теста (4 мин), 3) общее число прерванных попыток, сделанных животным, 4) общее число эксплораций.

Исследуемые продукты вводят внутрибрюшинно или перорально в увеличивающихся дозах. Результаты выражают в виде минимальной эффективной дозы (МЭД), которая вызывает либо значительное увеличение (активность в открытых рукавах), либо значительное уменьшение (попытки) относительно поведения, наблюдаемого у контрольных животных.

В этом опыте значения МЭД наиболее активных соединений лежат между 0,1 и 20 мг/кг при внутрибрюшинном или пероральном введении.

Исследование снотворной активности
Седативную или снотворную активность соединений определяли путем наблюдения их действия на электрокортикограммы крыс по методу, описанному Н. Depoortere в Rev. E.E.G. Neurophysiol., 10, 3, 207-214 (1980) и Н. Depoortere и M. Decobert в J. Pharmacol., (Paris), 14, 2, 195-265 (1983).

Исследуемые продукты вводили внутрибрюшинно в увеличивающихся дозах. Наиболее активные соединения индуцируют состояния сна при дозах в интервале от 0,1 до 30 мг/кг.

Исследование противосудорожной активности
Активность по отношению к клоническим судорогам, вызванным у крыс инъекцией пентетразола
Протокол этого испытания является модификацией протокола, описанного E. A. Swinyard и J.H. Woodhead в Antiepileptic Drugs, Raven Press, New York, 111-126 (1982).

Исследуемые продукты вводят животным внутрибрюшинно за 30 минут до внутривенной инъекции 20 мг/кг пентетразола. Сразу после инъекции в течение 5 минут регистрируют число животных, демонстрирующих клонические судороги.

Результаты выражают в виде АД₅₀, дозы, которая защищает 50% животных, вычисленной по методу J. T. Lichtfield и F. Wilcoxon (J.Pharm.Exp.Ther. (1949), 96, 99-113) на основе 3 или 4 доз, каждой вводимой группе из 8-10 крыс.

Значения АД₅₀ наиболее активных соединений лежат между 0,1 и 10 мг/кг при внутрибрюшинном или пероральном введении.

Исследование противосудорожной активности
Активность по отношению к вызванным изониазидом судорогам у крыс
Характеристическую активность соединений определяют по времени латентного периода начала судорог, индуцированных подкожным введением изониазида (800 мг/кг) одновременно с исследуемым соединением, инъецируемым внутрибрюшинно, в соответствии с протоколом, описанным G. Perrault, E. Morel, D. Sanger и B. Zivkovic в Eur. J. Pharmacol., 156, 189-196 (1988). Результаты выражают в виде АД₅₀, дозы, которая дает 50% максимального эффекта относительно контрольных животных, определяемой на основе 3 или 4 доз, каждой вводимой группе из 8-10 мышей. В этом тесте значения АД₅₀ наиболее активных соединений лежат между 1 и 20 мг/кг при внутрибрюшинном введении, и в зависимости от соединений максимальный эффект может составлять целых 400%.

Результаты испытаний, проведенных на соединениях по изобретению показывают, что in vitro они вытесняют [³H]флумазенил из его сайтов специфического связывания ω₁ в мозжечке и сайтов специфического связывания ω₂ в спинном мозге. Они демонстрируют аффинность к сайтам ω₁ и ω₂, расположенным в макромолекулярном комплексе ГАМК_А - сайты ω - хлор-ионный канал.

In vivo они ведут себя как полные или частичные агонисты по отношению к этим подтипам рецепторов.

Они обладают анксиолитическим, снотворным и противосудорожным свойствами.

Следовательно, их можно использовать для лечения заболеваний, связанных с расстройствами ГАМК-ергической передачи, таких как тревога, расстройства сна, эпилепсия, мышечная спастичность, мышечные контрактуры, расстройства познавательной способности, абстиненция, связанная с алкоголизмом, табаком или лекарственными препаратами и т.п.

Их также можно использовать для лечения болезни Паркинсона и всех типов экстрапирамидальных синдромов. Наконец, их можно использовать для премедикации и в качестве общих анестетиков для индуцирования и/или поддержания анестезии или в качестве местных анестетиков, возможно в комбинации с другими анестетиками, и/или мышечными релаксантами, и/или аналгетиками.

Они могут быть представлены в любой форме композиции, подходящей для энтерального, парентерального или трансдермального введения, такой как таблетки, драже, капсулы, включая твердые желатиновые капсулы, суспензии или растворы для глотания или инъецирования, такие как сиропы, или фиалы, трансдермальные пластыри и т.п., в комбинации с подходящими эксципиентами, содержащей дозу, которая обеспечивает суточное введение от 1 до 1000 мг активного вещества.

В частности, фармацевтические композиции по изобретению могут быть представлены в следующих формах, где активное вещество представляет собой соединение по изобретению.

Раствор для инъекций
Активное вещество - 5 мг
Глюкоза - 250 мг
Вода для инъекций, сколько требуется до - 5 мл
на одну ампулу на 5 мл
Приготовляют по традиционным методикам путем растворения активного вещества и глюкозы в воде для инъекций, фильтрования через микрофильтр и заполнения стерильных ампул на 5 мл.

Желатиновая капсула
Активное вещество - 100 мг
Тальк - 24 мг
Силикагель - 1 мг
на одну капсулу на 125 мг
Приготавливают по традиционным методикам путем смешивания компонентов и заполнения желатиновых капсул полученной смесью.

Таблетка
Активное вещество - 400 мг
Силикагель - 10 мг
Стеариновая кислота - 20 мг
Кукурузный крахмал - 45 мг
на одну таблетку массой 475 мг
Приготавливают по традиционным методикам, путем получения гранулята с последующим его опудриванием и таблетированием.

Сироп
Активное вещество - 5 г
Метиловый эфир 4-гидроксибензойной кислоты - 150 мг
Сахароза - 50 г
Дистиллированная вода, сколько требуется до - 100 мл
на одну бутыль на 100 мл
Приготавливают по традиционным методикам путем растворения компонентов в дистиллированной воде.

Все заявленные соединения обладают низкой токсичностью.

Формула изобретения

1. Производные 4-оксо-3,5-дигидро-4Н-пиридазино[4,5-b] индол-1-ацетамида, соответствующие общей формуле (I)

в которой Х представляет собой атом водорода или галогена или метильную, метокси или фенилметоксигруппу;
Y представляет собой атом водорода, 1 или 2 атома галогена или гидроксильную, метокси, нитро или метильную группу;
R₁ представляет собой атом водорода или (С₁-С₄)алкильную группу;
R₂ и R₃ каждый, независимо друг от друга, представляет собой атом водорода, (С₁-С₄)алкильную группу или фенилметильную группу, или же R₂ и R₃ образуют с атомом азота, который их несет, азетидинильную, пирролидинильную, 3-этоксипирролидинильную, пиперидинильную, морфолинильную, 4-метилпиперазинильную или 1,3-тиазолидинильную группу.

2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что Х находится в положении 8 или 9 и представляет собой атом водорода или галогена, Y представляет собой атом водорода, R₁ представляет собой метильную или этильную группу, R₂ представляет собой атом водорода или метильную группу, а R₃ представляет собой метильную группу, или же R₂ и R₃ образуют с атомом азота, который их несет, азетидинильное или пирролидинильное кольцо.

3. Лекарство для лечения заболеваний, связанных с расстройством ГАМК-ергической передачи, отличающееся тем, что оно состоит из соединения по любому из пп. 1 и 2.

4. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью агонистов бензодиазепиновых рецепторов ω₁ и ω₂, отличающаяся тем, что она содержит соединение по любому из пп. 1 и 2 в комбинации с эксципиентом.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7