Инкапсуляция водорастворимых пептидов

 

Изобретение относится к способу приготовления биологически разрушаемых полимерных микросфер или наносфер с использованием метода "масло в воде". Микросферы или наносферы могут быть использованы для контролируемого высвобождения биологически активных пептидов. Лекарственный пептид для снижения его растворимости в воде используется в виде свободного основания, адсорбированного на биологически разрушаемом неорганическом матриксе, таком как гидроксиапатит или однозамещенный фосфат кальция, или в виде нерастворимой в воде, но растворимой в органическом растворителе соли. Изобретение обеспечивает высокую эффективность инкапсулирования водорастворимых пептидов, превышающую 85%. 12 с. и 36 з.п.ф-лы, 2 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)я

Формула изобретения

1. Способ получения полимерных микросфер, содержащих полимер и пептид, включающий в себя следующие стадии: нейтрализация соли пептида слабым основанием в водной среде, причем упомянутая среда содержит суспензию гидроксиапатита или раствор однозамещенного фосфата кальция, с целью образования осадка; выделение осадка; суспендирование осадка в органическом растворителе, который содержит полимер, растворенный в нем, с целью образования суспензии; диспергирование суспензии в водном растворе поверхностно-активного вещества и выпаривание органического растворителя с выделением полимерных микросфер.

2. Способ по п. 1, включающий в себя дополнительную стадию растворения соли пептида в минимальном количестве воды перед нейтрализацией соли пептида.

3. Способ по п. 2, при котором поверхностно-активное вещество является одним или несколькими из олеата натрия, стеарата натрия, лаурилсульфата натрия, поли(оксиэтилен)сорбитанового сложного эфира жирной кислоты, поливинилпирролидина, поливинилового спирта, карбоксиметилцеллюлозы, лецитина, желатина или гиалуроновой кслоты.

4. Способ по п. 3, при котором поверхностно-активным веществом является поливиниловый спирт, а рН поливинилового спирта составляет 6,5-7,5.

5. Способ по п. 4, при котором рН поливинилового спирта составляет 6,9-7,1.

6. Способ по п. 5, при котором органическим растворителем является дихлорметан, хлороформ или этилацетат.

7. Способ по п. 6, при котором органическим растворителем является дихлорметан, а концентрация полимера в органическом растворителе составляет 0,5-30% по весу.

8. Способ по п. 7, при котором концентрация полимера в дихлорметане составляет 0,5-10% по весу.

9. Способ по п. 8, при котором пептидом является рилизинг-пептид гормона роста, рилизинг-гормон лютеинизирующего гормона, соматостатин, бомбезин, рилизинг-пептид гастрина, кальцитонин, брадикинин, галанин, меланоцит-стимулирующий гормон, рилизинг-фактор гормона роста, амилин, тахикинины, секретин, паратироидный гормон, энкефалин, эндотелин, рилизинг-пептид кальцитонинового гена, нейромедины, родственный паратироидному гормону белок, глюкагон, нейротензин, адрелюкортикотропный гормон, пептид YY, рилизинг-пептид глюкагона, кишечный вазоактивный пептид, пептид-активатор аденилатциклазы вилочковой железы, мотилин, вещество Р, нейропептид Y, или TSH, или их аналог или фрагмент, или их фармацевтически приемлемая соль.

10. Способ по п. 9, при котором пептидом является аналог РГЛГ формулы nnpo-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂.

11. Способ по п. 10, при котором полимером является сополимер лактид/гликолид, поликапролактон или полиангидрид, или их сополимер или смеси.

12. Способ по п. 9, при котором пептид выбирают из группы аналогов соматостатина, состоящей из H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂, и 13. Способ по п. 12, при котором полимером является сополимер лактид/гликолид, поликапролактон или полиангидрид, или их сополимер или смеси.

14. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 1.

15. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 11.

16. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 13.

17. Способ получения полимерных микросфер и наносфер, содержащих полимер и пептид, который включает в себя следующие стадии: растворение в органическом растворителе соли пептида, образующего комплекс с биологически разрушаемым сложным полиэфиром, функционализированным с получением аниона или катиона, с целью образования раствора; диспергирование раствора в водном растворе поверхностно-активного вещества и выпаривание органического растворителя с выделением полимерных микросфер и наносфер.

18. Способ по п. 17, при котором биологически разрушаемый сложный полиэфир, функционализированный с получением аниона, функционализирован анионной составляющей, выбираемой из группы, состоящей из карбоксилата, фосфата и сульфата, а биологически разрушаемый сложный полиэфир, функционализированный с получением катиона, функционализирован катионной составляющей, выбираемой из группы, состоящей из аминогруппы, амидиногруппы, гуанидиногруппы, аммония, циклической аминогруппы и оснований нуклеиновой кислоты.

19. Способ по п. 18, при котором органическим растворителем является дихлорметан, хлороформ или этилацетат.

20. Способ по п. 19, при котором органическим растворителем является дихлорметан, а концентрация полимера в дихлорметане составляет 0,5-30% по весу.

21. Способ по п. 20, при котором концентрация полимера в дихлорметане составляет 0,5-10% по весу.

22. Способ по п. 21, при котором поверхностно-активное вещество является одним или несколькими из олеата натрия, стеарата натрия, лаурилсульфата натрия, поли(оксиэтилен)сорбитанового сложного эфира жирной кислоты, поливинилпирролидина, поливинилового спирта, карбоксиметилцеллюлозы, лецитина, желатина или гиалуроновой кислоты.

23. Способ по п. 22, при котором поверхностно-активным веществом является поливиниловый спирт, а рН поливинилового спирта составляет 6,5-7,5.

24. Способ по п. 23, при котором рН поливинилового спирта составляет 6,9-7,1.

25. Способ по п. 24, при котором пептидом является рилизинг-пептид гормона роста, рилизинг-гормон лютеинизирующего гормона, соматостатин, бомбезин, рилизинг-пептид гастрина, кальцитонин, брадикинин, галанин, меланоцит-стимулирующий гормон, рилизинг-фактор гормона роста, амилин, тахикинины, секретин, паратироидный гормон, энкефалин, эндотелин, рилизинг-пептид кальцитонинового гена, нейромедины, родственный паратироидному гормону белок, глюкагон, нейротензин, адренокортикотропный гормон, пептид YY, рилизинг-пептид глюкагона, кишечный вазоактивный пептид, пептид-активатор аденилатциклазы вилочковой железы, мотилин, вещество Р, нейропептид Y, или TSH, или их аналог или фрагмент, или их фармацевтически приемлемая соль.

26. Способ по п. 25, при котором пептидом является аналог РГЛГ формулы nupo-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂.

27. Способ по п. 26, при котором полимером является сополимер лактид/гликолид, поликапролактон или полиангидрид, или их сополимер или смеси.

28. Способ по п. 25, при котором пептид выбирают из группы аналогов соматостатина, состоящей из H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂, и 29. Способ по п. 28, при котором полимером является сополимер лактид/гликолид, поликапролактон или полиангидрид, или их сополимер или смеси.

30. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 17.

31. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 27.

32. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 29.

33. Способ получения полимерных микросфер и наносфер, содержащих полимер и пептид, который включает в себя следующие стадии: растворение соли пептида, образующего комплекс с анионным противоионом, в органическом растворителе, который выбирают из группы, состоящей из дихлорметана, хлороформа и этилацетата, с целью образования раствора; диспергирование раствора в поверхностно-активном веществе и выпаривание органического растворителя с выделением полимерных микросфер и наносфер.

34. Способ по п. 33, при котором анионным противоионом является диоктилсульфосукцинат, додецилсульфат, таннат, памоат, альгинат, циклодекстринсульфат, циклодекстринфосфат, бифосфонат или инозитолфосфат.

35. Способ по п. 34, при котором органическим растворителем является дихлорметан.

36. Способ по п. 35, при котором концентрация полимера в дихлорметане составляет 0,5-30% по весу.

37. Способ по п. 36, при котором концентрация полимера в дихлорметане составляет 0,5-10% по весу.

38. Способ по п. 37, при котором поверхностно-активное вещество является одним или несколькими из олеата натрия, стеарата натрия, лаурилсульфата натрия, поли(оксиэтилен)сорбитанового сложного эфира жирной кислоты, поливинилпирролидина, поливинилового спирта, карб-юксиметилцеллюлозы, лецитина, желатина или гиалуроновой кислоты.

39. Способ по п. 38, при котором поверхностно-активным веществом является поливиниловый спирт, а рН поливинилового спирта составляет 6,5-7,5.

40. Способ по п. 39, при котором рН поливинилового спирта составляет 6,9-7,1.

41. Способ по п. 40, при котором пептидом является рилизинг-пептид гормона роста, рилизинг-гормон лютеинизирующего гормона, соматостатин, бомбезин, рилизинг-пептид гастрина, кальцитонин, брадикинин, галанин, меланоцит-стимулирующий гормон, рилизинг-фактор гормона роста, амилин, тахикинины, секретин, паратироидный гормон, энкефалин, эндотелии, рилизинг-пептид кальцитонинового гена, нейромедины, родственный паратироидному гормону белок, глюкагон, нейротензин, адренокортикотропный гормон, пептид YY, рилизинг-пептид глюкагона, кишечный вазоактивный пептид, пептид-активатор аденилатциклазы вилочковой железы, мотилин, вещество Р, нейропептид Y, или TSH, или их аналог или фрагмент, или их фармацевтически приемлемая соль.

42. Способ по п. 41, при котором пептидом является аналог РГЛГ формулы пиpo-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂.

43. Способ по п. 42, при котором полимером является сополимер лактид/гликолид, поликапролактон или полиангидрид, или их сополимер или смеси.

44. Способ по п. 41, при котором пептид выбирают из группы аналогов соматостатина, состоящей из H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂,

и

45. Способ по п. 44, при котором полимером является сополимер лактид/гликолид, поликапролактон или полиангидрид, или их сополимер или смеси.

46. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 33.

47. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 43.

48. Полимерная микросфера, изготовленная в соответствии со способом по п. 45.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34

TK4A - Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях "Изобретения (заявки и патенты)" и "Изобретения. Полезные модели"

Страница: 407

Напечатано: 10. и 26. ...nnро-Glu-His-Trp-Ser-...

Следует читать: 10 и 26. ...пиро-Glu-His-Trp-Ser-...

Номер и год публикации бюллетеня: 10-2004

Номер и год публикации бюллетеня: 32-2003

Извещение опубликовано: 10.04.2004        

TK4A - Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях "Изобретения (заявки и патенты)" и "Изобретения. Полезные модели"

Страница: 408

Напечатано: 41. ...энкефалин, эндотелии,..

Следует читать: 41. ...энкефалин, эндотелин,...

Номер и год публикации бюллетеня: 10-2004

Номер и год публикации бюллетеня: 32-2003

Извещение опубликовано: 10.04.2004