Трансмембранный полипептид, вовлеченный в регуляцию активации лимфоцитов (варианты), днк (варианты), вектор, штамм e. coli, полипептидный фрагмент, гомодимерная молекула (варианты), фармацевтическая композиция для лечения или профилактики заболевания, вызванного активацией лимфоцитов (варианты), слитый полипептид, моноклональное антитело, гибридома (варианты)

 

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к молекуле клеточной поверхности млекопитающего. Трансмембранный полипептид участвует в регуляции активации лимфоцитов и продуцируется трансформантами, содержащими вектор экспрессии, в который включена ДНК, кодирующая полипептид. Создано также антитело, которое специфично связывается с полипептидом и продуцируется гибридомой. Полипептид входит в состав фармкомпозиции, которая используется для лечения или профилактики заболевания, вызванного активацией лимфоцитов. 16 с. и 13 з.п.ф-лы, 22 ил.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть). Т Т Т-

Формула изобретения

1. Трансмембранный полипептид, вовлеченный в регуляцию активации лимфоцитов, таких, как Т-клетки, выбранный из группы, состоящей из (а) человеческого трансмембранного полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2; (б) крысиного трансмембранного полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, соответствующей нуклеотидным остаткам 35-634 SEQ ID NO:4, который гомологичен человеческому трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в (а) ; в) мышиного трансмембранного полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, соответствующей нуклеотидным остаткам 1-600 SEQ ID NO:5, который гомологичен человеческому трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в (а); г) крысиного трансмембранного полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, соответствующей нуклеотидным остаткам 35-682 SEQ ID NO:6, который гомологичен человеческому трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в (а), и является вариантом крысиного трансмембранного полипептида, охарактеризованного в (б).

2. Трансмембранный полипептид млекопитающего, включающий аминокислотную последовательность, обладающую 60%-ной или большей гомологией с аминокислотной последовательностью человеческого трансмембранного полипептида, определяемого SEQ ID NO:2, где указанный трансмембранный полипептид млекопитающего обладает, по существу, теми же биологическими свойствами, что и указанный человеческий трансмембранный полипептид.

3. Трансмембранный полипептид млекопитающего по п.2, где указанный трансмембранный полипептид млекопитающего представляет собой человеческий трансмембранный полипептид.

4. ДНК, выбранная из группы, состоящей из а) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 1-600 SEQ ID NO:1, кодирующей человеческий трансмембранный полипептид; б) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 35-637 SEQ ID NO:4, кодирующей крысиный трансмембранный полипептид, который гомологичен человеческому трансмембранному полипептиду, упомянутому в (а); в) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 1-603 SEQ ID NO:5, кодирующей мышиный трансмембранный полипептид, который гомологичен человеческому трансмембранному полипептиду, упомянутому в (а); г) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 35-685 SEQ ID NO:6, кодирующей крысиный трансмембранный полипептид, который гомологичен человеческому трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в (а), и является вариантом крысиного трансмембранного полипептида, охарактеризованного в (б); и д) их генетически вырожденных вариантов.

5. ДНК по п.4, где указанная ДНК представляет собой кДНК.

6. Вектор, содержащий ДНК, охарактеризованную в п.4, предназначенный для экспрессии полипептида, охарактеризованного в п.1.

7. Вектор по п.6, применимый для трансформации штамма клеток мыши, таких, как СОР, L, C127, Sp2/0, NS-1 и NIH3T3; штамма клеток крысы; штамма клеток хомяка, таких, как ВНК, СНО-К1 и СНО; штамма клеток обезьяны, таких, как COS1, COS3, СОS5, COS7 и Velo; и штамма клеток человека, таких, как НЕК293, Hela, диплоидные фибробласты, миеломные клетки и Namalwa.

8. Штамм Е.coli, депонированный под международным номером FERM ВР-5725, трансформированный вектором, охарактеризованным в п.6, и продуцирующий полипептид, охарактеризованный в п.1.

9. Полипептидный фрагмент трансмембранного полипептида, охарактеризованного в п.1, содержащий внеклеточную область указанного трансмембранного полипептида, где указанная внеклеточная область содержит аминокислотную последовательность FDPPPF, приведенную на фиг.12.

10. Полипептидный фрагмент по п.9, где указанный фрагмент представляет собой фрагмент, содержащий внеклеточную область человеческого трансмембранного полипептида, обладающего аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:2, где указанная внеклеточная область содержит аминокислотную последовательность FDPPPF, приведенную на фиг.12.

11. ДНК, кодирующая полипептидный фрагмент, охарактеризованный в п.9, выбранная из группы, состоящей из (а) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 1-420 SEQ ID NO:1; (б) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 35-457 SEQ ID NO:4; (в) ДНК, содержащей нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидным остаткам 1-423 SEQ ID NO:5, и (г) их генетически вырожденных вариантов.

12. Гомодимерная молекула, содержащая два полипептидных фрагмента, охарактеризованных в п.9, причем указанные два полипептидных фрагмента связаны друг с другом посредством дисульфидных связей.

13. Гомодимерная молекула, содержащая два полипептидных фрагмента, охарактеризованных в п.10, причем указанные два полипептидных фрагмента связаны друг с другом посредством дисульфидных связей.

14. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики заболевания, вызванного активацией лимфоцитов, таких, как Т-клетки, или аномалией регуляции функции активированных лимфоцитов, которая содержит либо полипептидный фрагмент, охарактеризованный в п.10, либо гомодимерную молекулу, охарактеризованную в п.13, либо и то, и другое и фармацевтически приемлемый носитель.

15. Слитый полипептид, содержащий внеклеточную область трансмембранного полипептида, охарактеризованного в п.1, и константную область тяжелой цепи человеческого иммуноглобулина (Ig) или часть константной области, где указанная внеклеточная область содержит аминокислотную последовательность FDPPPF, приведенную на фиг.12.

16. Слитый полипептид по п.15, где указанный трансмембранный полипептид представляет собой человеческий трансмембранный полипептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2.

17. Слитый полипептид по п.15 или 16, где указанная часть константной области содержит шарнирную область, домен С2 и домен С3 IgG.

18. Гомодимерная молекула, содержащая два слитых полипептида, охарактеризованных в любом из пп.15-17, причем указанные два полипептида связаны друг с другом посредством дисульфидных связей.

19. Гомодимерная молекула по п.18, где указанный слитый полипептид представляет собой полипептид, охарактеризованный в п.16.

20. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики заболевания, вызванного активацией лимфоцитов, таких, как Т-клетки, или аномалией регуляции функции активированных лимфоцитов, которая содержит либо слитый полипептид, охарактеризованный в п.16, либо гомодимерную молекулу, охарактеризованную в п.19, либо и то, и другое и фармацевтически приемлемый носитель.

21. Фармацевтическая композиция по п.20, где указанная фармацевтическая композиция используется для лечения аутоиммунных заболеваний или аллергических заболеваний или для профилактики симптомов указанных заболеваний.

22. Моноклональное антитело, включающее по крайней мере одну тяжелую цепь иммуноглобулина и по крайней мере одну легкую цепь иммуноглобулина или их часть, реактивную по отношению к трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в любом из пп.1-3, полипептидному фрагменту, охарактеризованному в п.9 или 10, гомодимерной молекуле, охарактеризованной в п.12 или 13, или молекуле клеточной поверхности, содержащей указанный полипептид, где указанное антитело принадлежит к классу иммуноглобулинов IgG.

23. Моноклональное антитело по п.22, где указанный трансмембранный полипептид представляет собой полипептид, охарактеризованный в п.3, где указанный полипептидный фрагмент представляет собой фрагмент, охарактеризованный в п.10, или где указанная гомодимерная молекула представляет собой молекулу, охарактеризованную в п.13.

24. Моноклональное антитело по п.22 или 23 или его часть, обладающие свойством регулировать пролиферацию лимфоцитов периферической крови.

25. Моноклональное антитело по п.22 или его часть, продуцируемое гибридомой, депонированной под международным номером FERM ВР-5707 или международным номером FERM ВР-5708.

26. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики заболевания, вызванного активацией лимфоцитов, таких, как Т-клетки, или аномалией регуляции функции активированных лимфоцитов, которая содержит моноклональное антитело, охарактеризованное в п.23, или его часть и фармацевтически приемлемый носитель.

27. Фармацевтическая композиция по п.26, где указанная фармацевтическая композиция используется для лечения аутоиммунных заболеваний или аллергических заболеваний или для профилактики симптомов указанных заболеваний.

28. Гибридома, депонированная под международным номером FERM ВР-5707, продуцирующая моноклональное антитело, реактивное по отношению к трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в п.1.

29. Гибридома, депонированная под международным номером FERM ВР-5708, продуцирующая моноклональное антитело, реактивное по отношению к трансмембранному полипептиду, охарактеризованному в п.1.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73, Рисунок 74, Рисунок 75, Рисунок 76, Рисунок 77, Рисунок 78, Рисунок 79, Рисунок 80, Рисунок 81, Рисунок 82, Рисунок 83, Рисунок 84, Рисунок 85, Рисунок 86, Рисунок 87, Рисунок 88, Рисунок 89, Рисунок 90, Рисунок 91, Рисунок 92, Рисунок 93, Рисунок 94, Рисунок 95, Рисунок 96, Рисунок 97, Рисунок 98, Рисунок 99, Рисунок 100, Рисунок 101, Рисунок 102, Рисунок 103, Рисунок 104, Рисунок 105, Рисунок 106, Рисунок 107, Рисунок 108, Рисунок 109, Рисунок 110, Рисунок 111, Рисунок 112, Рисунок 113, Рисунок 114, Рисунок 115, Рисунок 116, Рисунок 117, Рисунок 118, Рисунок 119, Рисунок 120, Рисунок 121, Рисунок 122, Рисунок 123, Рисунок 124, Рисунок 125, Рисунок 126, Рисунок 127, Рисунок 128, Рисунок 129, Рисунок 130, Рисунок 131, Рисунок 132, Рисунок 133, Рисунок 134, Рисунок 135, Рисунок 136, Рисунок 137, Рисунок 138, Рисунок 139, Рисунок 140, Рисунок 141, Рисунок 142, Рисунок 143, Рисунок 144, Рисунок 145, Рисунок 146, Рисунок 147, Рисунок 148, Рисунок 149, Рисунок 150, Рисунок 151, Рисунок 152, Рисунок 153, Рисунок 154, Рисунок 155, Рисунок 156, Рисунок 157, Рисунок 158, Рисунок 159, Рисунок 160, Рисунок 161, Рисунок 162, Рисунок 163, Рисунок 164, Рисунок 165, Рисунок 166, Рисунок 167, Рисунок 168, Рисунок 169, Рисунок 170, Рисунок 171, Рисунок 172, Рисунок 173, Рисунок 174, Рисунок 175, Рисунок 176, Рисунок 177, Рисунок 178, Рисунок 179, Рисунок 180