Рекомбинантная плазмидная днк pul83hcmv, обеспечивающая экспрессию в клетках бактерии escherichia coli рекомбинантного белка, содержащего иммунодоминантную часть фосфопротеина pp65 hcmv и фрагмент -галактозидазы

 

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и представляет собой сконструированную in vitro рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую фрагмент гена UL83 цитомегаловируса человека (HCMV), кодирующий иммунодоминантную часть фосфопротеина рр65 HCMV с 231 по 551 а. к. Конструкция обеспечивает в клетках бактерий Е.соli биосинтез рекомбинантного белка, содержащего фрагмент рр65 HCMV и фрагмент -галактозидазы Е.соli с полигиотидиновым (6 His) трактом для аффинной очистки, обладающего антигенными свойствами цитомегаловируса человека. Этот очищенный рекомбинантный белок может быть использован в качестве HCMV-антигена для серологического тестирования HCMV в клинической практике. Использование этого антигена для выявления специфичных к вирусу иммуноглобулинов М (IgM-HCMV) показывает 98-99% чувствительности и специфичности в иммуноферментном анализе. 6 ил.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).

Формула изобретения

Рекомбинантная плазмидная ДНК pUL83HCMV размером 3700 п.о. и молекулярной массой 2,5 мегадальтон, обеспечивающая экспрессию в клетках бактерии Escherichia coli рекомбинантного белка размером 67 килодальтон, содержащего иммунодоминантную часть фосфопротеина рр65 HCMV штамма AD-169 с 6 молекулами гистидина на N-конце и фрагмент -галактозидазы, включающая HindIII/Hpal - фрагмент ДНК векторной плазмиды pUR290; фрагмент гена UL83 цитомегаловируса человека размером 974 п.о., кодирующий иммунодоминантную часть фосфопротеина рр65 HCMV с 231 по 551 аминокислоту с 6 молекулами гистидина на N-конце; фрагмент гена -галактозидазы, кодирующий фрагмент -галактозидазы с 1 по 147 аминокислоту, содержит в качестве генетического маркера ген bla -лактамазы, определяющий устойчивость трансформированных плазмидой pUL83HCMV клеток Escherichia coli к ампициллину; уникальные сайты узнавания рестрикционными эндонуклеазами, имеющие следующие координаты: EcoRI (EcoRI)-1507 и 1689; Sal I (Sal I)-1627; Sma I (Sma I)-905 и 1617; EcoRV (EcoRV) -1029; Pst I (Pst I)-1046; HindIII (HindIII)-1105; Nco I (Bspl9I)-1247 и 1466; Cla I (Bsa 291)-1665; PvuII(PvuII)-55 и 323.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к генной инженерии, биотехнологии и фармации и может быть использовано для создания лекарственных препаратов человеческого гамма-интерферона

Изобретение относится к области медицины и биотехнологии и касается иммуногенной композиции, содержащей химерный полипептид ВИЧ, способа индукции иммунного ответа к ВИЧ1 и ВИЧ1/2, химерного полипептида ВИЧ1 и ВИЧ1/2, молекулы ДНК, кодирующей химерный полипептид, плазмидного вектора для экспрессии химерного полипептида, поликлональных антител к ВИЧ1 или к ВИЧ1/2 и диагностической тест-системы для обнаружения антител к ВИЧ1 и ВИЧ2

Изобретение относится к области биотехнологии и генетической инженерии и может быть использовано в диагностике заболеваний свиней

Изобретение относится к биотехнологии, касается порционной ферментации с подпиткой с особой системой вектор-хозяин E.coli для эффективного образования рекомбинантных протеинов, в особенности рекомбинантных молекул антител, предпочтительно фрагментов антител, таких как миниантитела

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии

Изобретение относится к иммуннобиологии и может быть использовано в медицине

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и представляет собой сконструированную in vitro рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую фрагмент гена U11 герпесвируса человека 6 типа (ННV-6), кодирующий иммунодоминантную часть (3 антигенных эпитопа) белка тегумента р100 с 494 по 842 а.к

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и представляет собой сконструированную in vitro рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую фрагмент гена US6 вируса простого герпеса типа 1 (HSV-1), который кодирует иммунодоминантную часть гликопротеина D (gD) вируса HSV-1 с 269 по 392 а

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и может быть использовано для диагностической цели идентификации вируса простого герпеса 1 типа (ВПГ), а также для решения научно-исследовательских задач по изучению этой группы вирусов

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и может быть использовано для диагностических целей выявления цитомегаловируса (ЦМВ), а также для решения научно-исследовательских задач по изучению цитомегаловирусной инфекции

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложены условно дефектный по репликации цитомегаловирус (CMV) и композиции его содержащие для применения в качестве вакцины, способ получения и применение указанного CMV при получении лекарственного средства и в медицине и применение указаной композиции для индукции иммунного ответа против CMV у пациента. Предложенный условно дефектный по репликации CMV содержит пентамерный gH-комплекс, включающий UL128, UL130, UL131, gH и gL, и нуклеиновую кислоту, кодирующую два слитых белка. Первый слитый белок состоит из IE1/2 и дестабилизирующего белка, второй слитый белок – из UL51 и дестабилизирующего белка. Дестабилизирующий белок является FK506-связывающим белком (FKBP) или его производным с аминокислотными заменами F36V и L106P. В предложенном CMV восстановлена экспрессия gH-комплекса исправлением мутации UL131 и отсутствуют IE1/2 и UL51 дикого типа. Предложенный CMV может быть использован в медицине в качестве компонента вакцин на основе аттенуированных штаммов CMV, генерирующих при этом нейтрализующие антитела и вызывающих Т-клеточные иммунные ответы. 7 н. и 12 з.п. ф-лы, 39 ил., 2 табл., 7 пр.
Наверх