Способ дифференциальной диагностики доброкачественной и прогрессирующей форм хронического лимфолейкоза

Авторы патента:

G01N33/534 - с радиоактивными метками

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии и онкологии. Сущность способа: в сыворотке крови больного с помощью радиоиммунологического метода с I¹²⁵ определяют уровень ₂-микроглобулина, и при уровне ₂-микроглобулина в сыворотке крови <5 мг/л при нормальном значении креатинина определяют доброкачественную форму хронического лимфолейкоза, при уровне ₂-микроглобулина >5 мг/л - прогрессирующую форму ХЛЛ. Способ позволяет осуществлять дифференциальную диагностику в дебюте заболевания, что дает возможность своевременно определить тактику лечения. 1 табл.

Предлагаемая разработка относится к области медицины, в частности к гематологии, онкологии.

Известен способ диагностики хронического лимфолейкоза (ХЛЛ), включающий клинические данные (лимфоаденопатия, спленомегалия, гепатомегалия), общий анализ крови, исследование миелограммы пунктата грудины, биоптата подвздошной кости и лимфатического узла, а также иммуно-фенотипирование [1].

Недостатком его является невозможность дифференциальной диагностики доброкачественной и прогрессирующей форм хронического лимфолейкоза при установлении диагноза в дебюте заболевания, на ранних стадиях опухолевого процесса.

По классификации ВОЗ с рекомендациями академика А.И. Воробьева выделяют доброкачественную и прогрессирующую формы хронического лимфолейкоза [2]. При установлении диагноза на ранних стадиях заболевания клиническая картина у больных доброкачественной и прогрессирующей форм ХЛЛ в большинстве случаев одинакова. Поэтому разработка новых прогностических факторов у больных со сходной клинической картиной в дебюте заболевания является насущной проблемой терапии ХЛЛ. Выделенные к настоящему времени формы и прогностические группы неудовлетворительно отражают гетерогенность хронического лимфолейкоза и часто не позволяют предсказать течение болезни и ответ на терапию. В последнее время изменилась тактика ведения больных с включением интенсивной полихимиотерапии, разработаны режимы кондиционирования, позволяющие проводить трансплантацию костного мозга при ХЛЛ с приемлемой токсичностью, приводящие к длительным полным ремиссиям. Если ранее тактика лечения ХЛЛ состояла в паллиативной первично-сдерживающей терапии, то сегодня задача лечения состоит в получении полной ремиссии, особенно у молодых больных. Такой подход диктуют новые требования. Если раньше "опоздать" с лечением этой болезни было сложно, то сегодня раннее назначение интенсивной полихимиотерапии приобретает принципиальное значение. Как и любая опухоль, хронический лимфолейкоз характеризуется опухолевой прогрессией, которая состоит в приобретении новых генетических дефектов и постоянном появлении новых субклонов, озлокачествляющих течение опухоли. Чем меньше остается у опухоли времени на приобретение дополнительных субклонов, тем лучшего ответа можно ожидать от терапии. В связи с этим необходимость в новых надежных прогностических факторах очевидна, особенно на ранних стадиях болезни. Доброкачественная форма ХЛЛ отличается стабильным течением и обычно не требует терапии. Главный диагностический критерий этой формы ХЛЛ - отсутствие какой бы то ни было прогрессии в течение 2-х лет, - требует длительного периода наблюдения. Если несколько лет назад уточнение форм ХЛЛ не имело большого значения, то с появлением специфических и достаточно агрессивных терапевтических вмешательств положение изменилось. Ранняя диагностика доброкачественной формы ХЛЛ позволит избежать неоправданной агрессивной химиотерапии. Ранняя диагностика прогрессирующей формы ХЛЛ позволит избежать неоправданного применения неэффективных стандартных программ терапии, которые только снижают возможности последующего интенсивного лечения.

Известен способ диагностики первично-резистентной агрессивной множественной миеломы с помощью определения уровня ₂-микроглобулина в сыворотке крови больных [3]. Данный параметр в момент постановки диагноза позволяет определить форму множественной миеломы и прогноз течения заболевания. Высокий уровень ₂-микроглобулина указывает на плохой прогноз течения множественной миеломы и короткую продолжительность жизни.

Недостатком его является узкий спектр применения, в частности он не применяется для дифференциальной диагностики доброкачественной и прогрессирующей форм хронического лимфолейкоза.

В качестве прототипа может быть использован “Способ диагностики прогрессирующей формы хронического лимфолейкоза”, описанный в SU 1762895, опубл. 23.09.1992 [4]. Способ основан на проведении реакции бласттрансформации лимфоцитов периферической крови в присутствии простагландинов группы Е (E₁ и E₂), которые вводят каждый в концентрации 10^-6 моль. При отсутствии иммуносупрессии диагностируют прогрессирующую форму хронического лимфолейкоза.

Заявителем и авторами предлагается новая разработка, направленная на дифференциальную диагностику доброкачественной и прогрессирующей форм хронического лимфолейкоза. По результатам патентной и отраслевой литературы авторами не обнаружено идентичных способов диагностики.

Исследования по изучению диагностической значимости биохимического опухолевого маркера ₂-микроглобулина у больных ХЛЛ проводились в гематологической клинике Кировского НИИ гематологии и переливания крови в течение 8 лет. Авторами проведено изучение уровня ₂-микроглобулина в сыворотке крови у 35 больных доброкачественной формой ХЛЛ и у 60 больных прогрессирующей формой ХЛЛ в дебюте заболевания, на ранних стадиях опухолевого процесса. По результатам исследования получены данные (при р=0,0001), которые приведены в таблице.

Из таблицы видно, что при уровне ₂-микроглобулина в сыворотке крови (при нормальном креатинине) <5 мг/л - в 100% случаев наблюдалась доброкачественная форма ХЛЛ, а при уровне ₂-микроглобулина (при нормальном креатинине) >5 мг/л - в 100% случаев отмечалась прогрессирующая форма заболевания.

Количественное определение ₂-микроглобулина ( ₂-мг) в сыворотке крови проводили радиоиммунологическим методом (РИА), в основе своей являющимся конкурентным методом анализа. Для определения использовали стандартные тест-наборы " ₂-MICROGLOBULIN RIA KIT" фирмы "IMMUNOTECH", Чехия. Наборы сертифицированы по европейскому стандарту, гос. регистр № 2000/327. Для измерения радиоактивности применяли гамма-счетчик "Гамма-НТ", производства АО ВНИИМП-Вита, г. Москва, гос. регистр. № 89/413-50.

Анализ проводили согласно инструкции к тест-набору.

В аналитические пробирки, покрытые антителами к ₂-мг, вносили по 50 мкл исследуемого образца сыворотки крови больного (параллельно с калибровочными пробами), добавляли по 500 мкл ₂-мг, меченного йод-125, и инкубировали смесь при комнатной температуре в течение 90 минут при постоянном встряхивании (не менее 350 осц./мин). По окончании инкубации содержимое пробирки (не связанный с антителами ₂-мг) удаляли водоструйным насосом.

Количество связанного с антителами меченного йод-125 ₂-мг находилось в обратной зависимости от концентрации эндогенного ₂-мг в исследуемой сыворотке крови.

Пробирки со связанным с антителами, меченным ₂-мг, помещали в гамма-счетчик и измеряли их активность по йод-125 в течение 1 минуты. Концентрацию ₂-мг (нмоль/л) определяли автоматически в координатах logit-log по калибровочной кривой зависимости В/Т (%) от концентрации ₂-мг.

У всех больных с доброкачественной формой ХЛЛ отсутствовало прогрессирование заболевания в течение не менее 3-х лет без лечения. У больных с прогрессирующей формой заболевания прогрессирование отмечалось в ближайшие 2 года от момента постановки диагноза. Срок наблюдения составил 8 лет. На момент оценки результатов исследования все больные с доброкачественной формой ХЛЛ живы. Диагностирование прогрессирующей формы ХЛЛ в дебюте заболевания, на ранних стадиях опухолевого процесса позволило назначить больным раннюю интенсивную полихимиотерапию (n=30), в результате которой удалось получить клинически значимый лечебный общий эффект у 94% больных, из них у 60% - полную ремиссию, у 34% - частичную ремиссию. Медиана выживаемости у больных с прогрессирующей формой ХЛЛ, не получавших интенсивную полихимиотерапию (n=30), составила 3,4 года. У больных с прогрессирующей формой ХЛЛ, получивших раннюю интенсивную полихимиотерапию (n=30), медиана выживаемости не достигнута (больные наблюдаются по настоящее время). Таким образом важность дифференциальной диагностики доброкачественной и прогрессирующей форм ХЛЛ в дебюте заболевания, на ранних стадиях опухолевого процесса, заключается в возможности прогнозирования дальнейшего течения болезни и в различной тактике ведения больных, что позволит увеличить количество пациентов с достигнутой ремиссией и продлить продолжительность их жизни.

Источники информации

1. Руководство по гематологии под ред. А.И. Воробьева. М.: Медицина, 1985, - 448 с.

2. Воробьев А.И., Кременецкая А.М., Харазишвили Д.В. Опухоли лимфатической системы. Гематология и трансфузиология, 2000; 45(3): 3-14.

3. Клиническая онкогематология под ред. А.М. Волковой. М.: Медицина, 2001, с.437.

4. SU 1762895 А1, опубл. 23.09.1992.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики доброкачественной и прогрессирующей форм хронического лимфолейкоза (ХЛЛ) на ранних стадиях опухолевого процесса, включающий исследование крови больного, отличающийся тем, что в сыворотке крови больного с помощью радиоиммунологического метода с I¹²⁵ определяют уровень ₂-микроглобулина, и при уровне ₂-микроглобулина в сыворотке крови < 5 мг/л при нормальном значении креатинина определяют доброкачественную форму хронического лимфолейкоза, при уровне ₂-микроглобулина > 5 мг/л - прогрессирующую форму ХЛЛ.

Изобретение относится к медицине, в частности к ортопедии, и может быть использовано для лечения больных хроническим остеомиелитом Способ включает анализ результатов биохимических, радионуклидных и рентгенологических исследований, при этом при биохимическом исследовании определяют фосфатазный индекс, системный индекс электролитов и системный индекс гликолиза, сопоставляют их с показателем степени накопления в костной ткани радиофармпрепарата и данными рентгенологических исследований и при значениях на момент завершения курса лечения: фосфатазного индекса более 13, системного индекса электролитов от 160 до 200, системного индекса гликолиза менее 50, степени накопления радиофармпрепарата от 160 до 180%, отсутствии у больного остаточных костных полостей, явлений остеосклероза и/или остеопороза судят о стойком купировании остеомиелитического процесса, при значениях: фосфатазного индекса менее 8, системного индекса электролитов более 200, системного индекса гликолиза более 70, степени накопления радиофармпрепарата от 180 до 200% на фоне явлений остеопороза и/или остеосклероза делают вывод о необходимости проведения дополнительного курса консервативного лечения, а при значениях: фосфатазного индекса от 8 до 13, системного индекса электролитов менее 160, системного индекса гликолиза от 50 до 70, степени накопления радиофармпрепарата более 220% на фоне остаточных костных полостей в сочетании с явлениями остеопороза и/или остеосклероза делают вывод о неудовлетворительном результате

Способ оценки восстановления слуховой функции в остром периоде сенсоневральной тугоухости // 2224256

Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии

Высокоафинные мутеины интерлейкина-4 // 2202364

Изобретение относится к области медицины

Способ радиоиммунохимического анализа // 2154831

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам количественного анализа биологически (физиологически) активных веществ в пробах различной природы, а именно к способам радиоиммунохимического анализа с использованием тритиевой метки

Способ радиоиммунохимического анализа // 2149405

Изобретение относится к способам количественного анализа биологически активных веществ в пробах различной природы ,а именно к способам радиоиммунохимического анализа с использованием метки йод-125

Радиоактивный иммунореагент направленного действия, композиция для получения изображения злокачественного новообразования в организме, способ получения изображения и комплексообразующий агент // 2122431

Изобретение относится к радиоактивному иммунореагенту направленного действия, который представляет собой конъюгат комплексообразующего агента и иммунореактивной группы, меченый ионом радиоактивного металла

Модифицирующая удельный вес маркерная частица и способ анализа биологической жидкости // 2116068

Изобретение относится к медицине и касается модифицирующей удельный вес маркерной частицы и способа анализа биологической жидкости

Способ подготовки крови к радиоиммунологическому анализу // 2080602

Изобретение относится к области медицины, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для иммунохимического анализа, в частности радиоиммунологического, малых количеств периферической крови

Способ определения маркеров вирусных инфекций // 2080601

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики вирусных инфекций

Способ дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей гортани у лиц мужского пола // 2024022

Изобретение относится к области медицины, в частности к оториноларингологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики злокачественных и доброкачественных опухолей гортани у лиц мужского пола

Набор для радиоактивного мечения и анализ связывания // 2251110

Изобретение относится к области радиационной биохимии

Способ получения полусинтетического инсулина человека // 2252225

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в биохимических, иммунологических и биологических исследованиях, а также при производстве препаратов инсулинов для терапевтических целей

Способ определения индекса стимуляции лимфоцитов для оценки иммунного статуса норок // 2263317

Изобретение относится к ветеринарии

Способ прогнозирования рецидива серозного рака яичников // 2290078

Изобретение относится к области медицины, в частности онкологии, и предназначено для диагностики до клинической манифестации рецидива серозного рака яичников после проведенного радикального лечения

Способ получения и регистрации меченых бактериофагов на модели холерных вибрионов // 2422520

Способ определения направленности патологического процесса при раке легкого // 2440037

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для определения времени прогрессии рака легкого

Способ диагностики школьной дезадаптации у младших школьников // 2605619

Изобретение относится к психологии. Диагностику школьной дезадаптации у младших школьников осуществляют путем определения методом РИА уровня АКТГ в сыворотке крови ребенка. При значении уровня АКТГ от 16,90 пкг/мл до 19,30 пкг/мл диагностируют школьную дезадаптацию, а при уровне от 11,1 пкг/мл до 16,5 пкг/мл констатируют школьную адаптацию. Способ диагностики обеспечивает своевременное и рациональное проведение комплекса психологических мероприятий за счет простоты, высокой специфичности и быстроты диагностики дезадаптации. 1 пр., 1 табл.

Антитела и иммуноконъюгаты, визуализируемые при помощи иммуно-позитрон-эмиссионной томографии, и способы их применения // 2613886

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения присутствия белка STEAP-1 в биологическом образце, полученном от индивида, имеющего подозрение на метастатический рак предстательной железы. Для этого биологический образец подвергают воздействию меченного 89цирконием антитела против STEAP-1 и измеряют связывание меченного 89цирконием антитела против STEAP-1 с белком в биологическом образце. При этом связывание меченного 89цирконием антитела против STEAP-1 с белком является показателем присутствия белка STEAP-1 в образце. Меченное 89цирконием антитело против STEAP-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую гипервариабельную область CDR-H1, содержащую GYSITSDYAWN, CDR-H2, содержащую GYISNSGSTSYNPSLKS, и CDR-H3, содержащую ERNYDYDDYYYAMDY; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR-L1, содержащую KSSQSLLYRSNQKNYLA, CDR-L2, содержащую WASTRES, и CDR-L3, содержащую QQYYNYPRT, и меченное 89цирконием антитело против STEAP-1 представляет собой 89цирконий-десферриоксамид (Df) антитело против STEAP-1. Изобретение позволяет определять присутствия белка STEAP-1 в биологическом образце, полученном от индивида, с метастатическим раком предстательной железы. 5 з.п. ф-лы, 2 табл., 30 ил., 10 пр.

Способ прогнозирования степени вероятности возможности выполнения оптимальной циторедуктивной операции у больных с диссеминированными формами рака яичников // 2637399

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования степени вероятности выполнения циторедуктивной операции в оптимальном объеме у больных диссеминированным раком яичников. Для этого определяют клинические параметры: стадию заболевания, объем асцитической жидкости, уровень сывороточных маркеров СА 125 и НЕ4, уровень инсулиноподобного фактора II типа (IGF-II) и металлопротеиназы РАРР-А в асцитической жидкости до лечения. Рассчитывают дискриминантные функции Y1, Y2. При значениях Y1>Y2 прогнозируют высокую, а при Y1<Y2 - низкую степень вероятности выполнения циторедуктивной операции в оптимальном объеме. Изобретение позволяет определить этапность хирургического и химиотерапевтического лечения у больных с диссеминированным раком яичников. 1 табл., 2 пр.