Продукт, включающий ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов g в комбинации с другим цитостатическим средством, для терапевтического применения при лечении рака

Изобретение относится к области фармакологии и касается продукта для одновременного, раздельного или распределенного во времени терапевтического применения при лечении рака, включающего ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, выбранный из 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-метилфенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо [1,2а]пиразина, 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо [1,2а]пиразина, и по меньшей мере одно другое цитостатическое средство. Продукты обладают повышенной эффективностью. 5 з.п. ф-лы, 5 табл.

 

Настоящее изобретение относится к продукту, включающему по меньшей мере один ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, отвечающий предпочтительно приводимой далее общей формуле (I), в комбинации по меньшей мере с одним другим цитостатическим средством, предпочтительно выбираемым из группы, состоящей из таксола, аналогов таксола, гемцитабина и ингибиторов пренилтрансфераз, в частности соединениями приводимых далее общих формул (II) и (III), для одновременного, раздельного или распределенного во времени терапевтического применения при лечении рака.

Разработка новых цитостатических терапий проходит отчасти через открытие эффективных сочетаний между различными терапевтическими классами для усиления противоопухолевого эффекта каждого класса.

Комбинация антитела анти-Her-2/ncu и цисплатины или этопозида ингибирует пролиферацию опухолевых клеток молочной железы в более значительной степени, чем простое суммирование эффектов каждого продукта (см. М. Pegram и др., Oncogene, 18, 2241-2251 (1999)). Комбинация этого антитела с таксолом или метотрексатом показывает суммирование эффектов, тогда как его комбинация с 5-фторурацилом свидетельствует об антагонизме продуктов (W.P. McGuire и др., Semin. Oncol., 24 февраля 1997 г. (1-е дополнение): S2-13-S2-16).

Ингибиторы фарнезилтрансфераз действуют синергически со средствами, которые деполимеризуют микротрубочки (таксол, эпотилоны) (см. Moasser и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 1369-1374 (1998)). Комбинации ингибиторов фарнезилтрансфераз с цитотоксическими средствами, такими как доксорубицин, цисплатина или 5-фторурацил, показывают только суммирование эффектов.

Гетеротримерные протеины G в сущности представляют собой структурную комбинацию трех различных субъединиц, называемых α, β и γ, но функционируют как диссоциирующие единицы, образованные, с одной стороны, субъединицами α и, с другой стороны, димерами β/γ. Различные формы субъединиц. α..β и γ описаны.

Протеины G участвуют в передаче сигналов извне в клетку за счет своего взаимодействия с рецепторами, имеющими семь трансмембранных доменов, обращенных к внутренней части, через посредство различных эффекторов, включающих аденилатциклазу, фосфолипазу С или ионные каналы. Фермент аденилатциклаза продуцирует циклический аденозинмонофосфат (цАМФ) (см. Gilman, Biosci. Rep., 15, 65-97 (1995)). Так, известно, что для активации аденилатциклазы необходимо, чтобы протеины G временно находились в гетеротримерной форме, форме, в которой образуемый субъединицей α мономер ассоциирован с димером, образованным субъединицами β и γ. Известно также, что для того, чтобы протеины G находились в их гетеротримерной форме, необходимо, чтобы они были связаны с помощью своих субъединиц γ с мембраной. Только в этом состоянии сигнал извне может активировать субъединицу α протеина G, которая может, после диссоциации, модулировать эффекторы так же, как аденилатциклаза, и модулировать продукцию цАМФ.

Известно также, что димеры β/γ могут непосредственно активировать эффекторы, приводящие к активации киназ, регулируемых внеклеточными сигналами (ERKs), или МАР-киназ. Доказана прямая связь между субъединицами β/γ и киназами src или подобными src (см. Gutkind, J. Biol. Chem., 273, 1839-1842 (1998)).

Также известны пагубные воздействия анормального количества цАМФ, и они имеют место, в частности, на уровне следующих биологических функций или нарушений: обоняние, вкус, световое восприятие, нейротрансмиссия, нейродегенерация, функционирование эндокринных и экзокринных желез, аутокринная и паракринная регуляции, артериальное давление, эмбриогенез, доброкачественная клеточная пролиферация, онкогенез, вирусная инфекция или иммунологические функции, диабет и ожирение.

В заявке на патент РСТ WO-00/02881 заявитель уже описал применение соединений общей формулы (I), такой как приведенная ниже, в качестве ингибиторов протеина G. Некоторые из этих продуктов описаны раньше в заявке на патент РСТ WO-97/30053.

Ингибиторы пренилтрансфераз уже были использованы в области лечения рака (см. Sebti и др., Pharmacol. Ther., 74, 103-114 (1997); Sepp-Lorenzino и др., Cancer Res., 55, 5302-5309 (1997)). Полезность ингибиторов пренилтрансфераз при этом типе лечения проистекает от их действия, которое предотвращает пренилирование на уровне субстрата Ras. Однако пренилирование некоторых форм Ras не изменяется ингибиторами пренилирования (Lerner и др., Oncogene, 15, 1283-1288 (1997)).

В том, что касается цитостатических средств, ингибиторы пренилтрансфераз, в частности, описаны в следующих заявках на патенты: заявки РСТ WO-97/21701, WO-97/16443, WO-98/00409, WO-96/21456, WO-97/24378, WO-97/17321, WO-97/18813, WO-95/00497; в патентах США: 5532359, 5523430, 5510510 и 5627202. Кроме того, соединения общей формулы (II) описаны в заявке на патент WO-00/39130. В том, что касается таксола, он описан, в частности, в Merck Index, 11-е издание, 1989 г., под порядковым номером 9049 и в цитированных ссылках. Аналоги камптотецинов описаны, в частности, в патенте США 4894456 и в заявках на патенты РСТ WO-94/11376, WO-97/00876, WO-98/28304, WO-98/28305, WO-99/11646 и WO-99/33829.

Продукт согласно изобретению обладает тем преимуществом, что позволяет использовать менее высокие дозы выбранных цитостатических средств, главным следствием чего является уменьшение токсичности лечения при полном достижении фармакологического эффекта при минимальном добавляемом количестве.

Объектом изобретения, следовательно, является продукт, включающий по меньшей мере один ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G в комбинации по меньшей мере с одним цитостатическим средством, предпочтительно выбираемым из группы, состоящей из таксола, аналогов таксола, гемцитабина и ингибиторов пренилтрансфераз, для одновременного, раздельного или распределенного во времени терапевтического применения при лечении рака.

Ингибитор пренилтрансфераз, комбинируемый с ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, предпочтительно представляет собой ингибитор фарнезилтрансфераз.

Хотя таксол, аналоги таксола, гемцитабин и ингибиторы пренилтрансфераз являются предпочтительными, согласно изобретению с ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G также могут быть комбинированы многочисленные другие цитостатические средства, как, например: ферментативные ингибиторы, такие как ингибиторы топоизомераз, например камптотецин и аналоги камптотецина (в форме аналогов, включающих шестичленный лактоновый цикл Е, таких как, например, соединения, описанные в заявке на патент РСТ WO-94/11376, в форме аналогов, включающих семичленный лактоновый цикл Е, таких как, например, соединения, описанные в заявке на патент РСТ WO-97/00876, или в форме раскрытых тетрациклических аналогов, таких как, например, соединения, описанные в заявке на патент РСТ WO-99/33829), ингибиторы фосфатаз Cdc25, ингибиторы МАР-киназ или МАР-киназ-киназ, ингибиторы протеинкиназы С, ингибиторы тирозинкиназ, ингибиторы теломераз; индукторы апоптоза; алкилирующие агенты, также как цисплатина; антиметаболические агенты, такие как 5-фторурацил; агенты дифференцировки; клеточные митотические яды; ангибиторы ангиогенеза; антигормоны или антагонисты стероидных рецепторов; антиоксиданты; антисмысловые факторы; агенты против р53 (генная терапия); агенты химиопрофилактики; противовирусные средства; иммунотерапевтические агенты; антитела, такие как герегулин.

Ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G представляет собой предпочтительно соединение общей формулы (I):

соответствующей частным формулам (I_A) или (I_В):

в которых:

Х означает R₁₂; и

Y означает R₈; или

Х и Y достраивают шестичленный цикл, причем совокупность X -Y означает радикал -CH(R₈) -CH(R₉)-;

R₁ означает Н, алкил или алкилтиогруппу;

R₂ и R₃, независимо, означают Н или алкил;

R₄ означает H₂ или О;

R₅ означает Н или алкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероциклил или гетероциклилалкил, причем эти радикалы могут быть, в случае необходимости, замещены радикалами, выбираемыми из группы, состоящей из алкила, -O-R₁₀, -S(O)_mR₁₀ (где m означает 0, 1 или 2), -N(R₁₀)(R₁₁), -N-C(O)-R₁₀, -NH-(SO₂)-R₁₀, -CO₂-R₁₀, -C(O)-N(R₁₀)(R₁₁) и -(SO₂)-N(R₁₀)(R₁₁);

R₆ и R₇, независимо, означают Н, радикал -C(O)-NH-CHR₁₃-CO₂R₁₄ или алкил, арил, аралкил, гетероциклил или гетероциклилалкил, причем эти радикалы, в случае необходимости, могут быть замещены радикалами, выбираемыми из группы, состоящей из ОН, алкила или алкоксила, радикалов N(R₁₀)(R₁₁), СООН, CON(R₁₀)(R₁₁) и атома галогена;

или R₆ и R₇ вместе образуют арил или гетероцикл;

R₈ и R₉, независимо, означают Н или алкил, арил, аралкил, гетероциклил или гетероциклилалкил, причем эти радикалы, в случае необходимости, могут быть замещены радикалами, выбираемыми из группы, состоящей из ОН, алкила или алкоксила, радикалов N(R₁₀)(R₁₁), СООН, CON(R₁₀)(R₁₁) и атома галогена;

или R₈ и R₉ вместе образуют арил или гетероцикл;

R₁₀ и R₁₁, независимо, означают Н, арил или гетероциклил, или алкил, аралкил или гетероциклилалкил;

R₁₂ означает NR₉, S или О;

R₁₃ означает алкил, возможно замещенный радикалом, выбираемым среди алкила, -OR₁₀, -S(O)_mR₁₀ (где m означает 0, 1 или 2) и -N(R₁₀)(R₁₁);

R₁₄ означает Н или алкил;

или фармацевтически приемлемую соль такого соединения.

Под низшим алкилом понимают линейный или разветвленный алкильный радикал с 1-6 атомами углерода и, в частности, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, пентил, неопентил, изопентил, гексил, изогексил. Под гетероциклилом понимают радикал, образованный одним или несколькими циклами и включающий по меньшей мере один гетероатом. Под арилалкилом, гетероциклилалкилом, алкилтиогруппой или низшим алкоксилом понимают радикалы, алкильная часть которых имеет вышеуказанное значение.

Предпочтительно, соединения общей формулы (I) представляют собой такие, в которых:

Х и Y достраивают шестичленный цикл, причем совокупность X-Y означает радикал -CH(R₈)-CH(R₉)-;

R₁ означает низший алкил;

R₂ и R₃ означают Н;

R₄ означает О;

R₅ означает Н или низший алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, низший арилсульфонилалкил, низший аралкоксиалкил, причем эти радикалы, в случае необходимости, могут быть замещены радикалами, выбираемыми из группы, состоящей из низшего алкила или -О-R₁₀;

R₆ и R₇, независимо, означают Н или арил, возможно замещенный радикалами, выбираемыми из группы, состоящей из ОН, низших алкила или алкоксила;

R₈ и R₉ означают Н; и

R₁₀ и R₁₁, независимо, означают Н или низший алкил.

В особенности предпочтительны согласно изобретению следующие соединения общей формулы (I):

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-бутил-2-(2-метоксифенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

-1,1'-бис[7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(2-метоксифенил)-8-(1-метилпропил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо-[1,2а]-пиразин]дисульфид;

-1,1'-бис[7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метоксифенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]-пиразин]дисульфид;

-1,1'-бис[7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(1-нафтил)-8-(2-метилпропил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин-7-ил]дисульфид;

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(2-метоксифенил)-8-(метоксифенил)метил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(2-метоксифенил)-8-(1-метоксифенил)этил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(2-метоксифенил)-8-(феноксиэтил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(2-метоксифенил)-8-(феноксиэтил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин или его димерная форма; и

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-2-(2-метоксифенил)-8-(фенилсульфонилэтил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин;

или фармацевтически приемлемая соль одного из этих соединений.

Предпочтительно, когда цитостатическое средство, комбинируемое с ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, является ингибитором пренилтрансфераз, речь идет об ингибиторе фарнезилтрансфераз.

Более предпочтительно, ингибитор фарнезилтрансферазы выбирают из группы, состоящей из:

соединения общей формулы (II):

в которой:

n1 означает 0 или 1;

Х означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, (CHR¹¹)_n3(СН₂)_n4Z(СН₂)_n5,

где:

Z означает О, N(R¹²), S или связь;

n3 означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, 0 или 1;

каждый из n4 и n5, независимо, означает, в каждом случае, когда они имеются, 0, 1, 2 или 3;

Y означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, СО, CH₂, CS или связь;

R¹ означает один из радикалов:

, , , , ,

, , , или N(R²⁴R²⁵);

где каждый из R², R¹¹ и R¹² означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н или необязательно замещенный радикал, выбираемый из группы, состоящей из (C₁-C₆)-алкила и арила, причем вышеуказанный необязательно замещенный радикал необязательно замещен по меньшей мере одним радикалом, выбираемым среди радикалов R⁸ и R³⁰, и причем каждый заместитель выбирают независимо от других;

R³ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н или необязательно замещенный радикал, выбираемый из группы, состоящей из (C₁-C₆)-алкила, (C₂-C₆)-алкенила, (C₂-C₆)-алкинила, (C₃-C₆)-циклоалкила, (C₃-C₆)-циклоалкил-(C₁-C₆)-алкила, (С₅-С₇)-циклоалкенила, (C₅-C₇)-циклоалкенил-(C₁-C₆)-алкила, арила, арил-(C₁-C₆)-алкила, гетероциклила и гетероциклил-(C₁-C₆)-алкила, причем вышеуказанный необязательно замещенный радикал необязательно замещен по меньшей мере одним радикалом, выбираемым среди радикалов R³⁰, и причем каждый заместитель выбирают независимо от других;

каждый из R⁴ и R⁵ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н или необязательно замещенный радикал, выбираемый из группы, состоящей из (C₁-C₆)-алкила, (C₃-C₆)-циклоалкила, арила и гетероциклила, причем вышеуказанный необязательно замещенный радикал необязательно замещен по меньшей мере одним радикалом, выбираемым среди радикалов R³⁰, и причем каждый заместитель выбирают независимо от других; или R⁴ и R⁵, взятые вместе, образуют с атомами углерода, с которыми они связаны, арильный радикал;

R⁶ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н или необязательно замещенный радикал, выбираемый из группы, состоящей из (C₁-C₆)-алкила, (C₂-C₆)-алкенила, (C₃-C₆)-циклоалкила, (C₃-C₆)-циклоалкил-(C₁-C₆)-алкила, (С₅-С₇)-цикло-алкенила, (С₅-С₇)-циклоалкенил-(C₁-C₆)-алкила, арила, арил-(C₁-С₆)-алкила, гетероциклила и гетероциклил-(C₁-C₆)-алкила, причем вышеуказанный необязательно замещенный радикал необязательно замещен по меньшей мере одним радикалом, выбираемым среди ОН, (C₁-C₆)-алкила, (C₁-C₆)-алкоксила, радикалов -N(R⁸R⁹), -СООН, -CON(R⁸R⁹) и атома галогена, и причем каждый заместитель выбирают независимо от других;

R⁷ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н, =O, =S или необязательно замещенный радикал, выбираемый из группы, состоящей из (C₁-C₆)-алкила, (C₂-C₆)-алкенила, (C₃-C₆)-циклоалкила, (C₃-C₆)-циклоалкил-(C₁-C₆)-алкила, (C₅-C₇)-циклоалкенила, (С₅-С₇)-циклоалкенил-(C₁-C₆)-алкила, арила, арил-(C₁-C₆)-алкила, гетероциклила и гетероциклил-(C₁-C₆)-алкила, причем вышеуказанный необязательно замещенный радикал необязательно замещен по меньшей мере одним радикалом, выбираемым среди ОН, (C₁-C₆)-алкила, (C₁-C₆)-алкоксила, радикалов -N(R⁸R⁹), -COOH, -CON(R⁸R⁹) и атома галогена, и причем каждый заместитель выбирают независимо от других;

причем

каждый из R⁸ и R⁹ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н, (C₁-C₆)-алкил, (C₂-C₆)-алкенил, (C₂-C₆)-алкинил, арил или арил-(C₁-C₆)-алкил;

R¹⁰ означает С;

или же, когда n1=0, R⁶ и R⁷, взятые вместе, могут образовывать с атомами углерода, с которыми они связаны, арильный или циклогексильный радикал;

R²¹ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н или необязательно замещенный радикал, выбираемый из группы, состоящей из (C₁-C₆)-алкила и арил-(C₁-C₆)-алкила, причем вышеуказанный необязательно замещенный радикал необязательно замещен по меньшей мере одним радикалом, выбираемым среди радикалов R⁸ и R³⁰, и причем каждый заместитель выбирают независимо от других;

R²² означает Н, (C₁-C₆)-алкилтиогруппу, (C₃-C₆)-циклоалкилтиогруппу, R⁸-CO- или заместитель формулы:

каждый из R²⁴ и R²⁵ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, Н, (C₁-C₆)-алкил или арил-(C₁-C₆)-алкил;

R³⁰ означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, (C₁-C₆)-алкил, -O-R⁸, -S(O)_n6R⁸, -S(О)_n7N(R⁸R⁹), -N(R⁸R⁹), -CN, -NO₂, -CO₂R⁸, -CON(R⁸R⁹), -NCO-R⁸ или атом галогена;

где

каждый из n6 и n7 означает, независимо, в каждом случае, когда он имеется, 0, 1 или 2;

причем:

вышеуказанным гетероциклильным радикалом является азепинил, бензимидазолил, бензизоксазолил, бензофуразанил, бензопиранил, бензотиопиранил, бензофурил, бензотиазолил, бензотиенил, бензоксазолил, хроманил, циннолинил, дигидробензофурил, дигидробензотиенил, дигидробензотиопиранил, дигидробензотио-пиранилсульфон, фурил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, индолинил, индолил, изохроманил, изоиндолинил, изохинолинил, изотиазолидинил, изотиазолил, изотиазолидинил, морфолинил, нафтиридинил, оксадиазолил, 2-оксоазепинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, пиперидил, пиперазинил, пиридил, пиридил-N-оксид, хиноксалинил, тетрагидрофурил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тиаморфолинил, тиаморфолинилсульфоксид, тиазолил, тиазолинил, тиенофурил, тиенотиенил или тиенил;

вышеуказанным арильным радикалом является фенил или нафтил;

при условии, что:

когда n1=1, R¹⁰ означает С, и R⁶ означает Н, тогда R¹⁰ и R⁷, взятые вместе, могут образовывать радикал:

или

когда n1=1, R¹⁰ означает С, и R⁷ означает =O, -Н или =S, тогда R¹⁰ и R⁶, взятые вместе, могут образовывать радикал:

где каждый из X¹, X² и X³ означает, независимо, Н, атом галогена, NO₂, -NCO-R⁸, -СО₂R⁸, -CN или -CON(R⁸R⁹); и

когда R¹ означает N(R²⁴R²⁵), тогда n3 означает 1, каждый из n4 и n5 означает О, Z означает связь, и R³ и R¹¹, взятые вместе, могут образовывать радикал:

где n2 означает целое число от 1 до 6 и каждый из X⁴ и X⁵ означает, независимо, Н, (C₁-C₆)-алкил или арил, или X⁴ и X⁵, взятые вместе, образуют (C₃-C₆)-циклоалкил;

соединения общей формулы (III):

в которой:

R¹ означает Н или алкил, OR¹⁰, SR¹⁰ или NR¹¹R¹²;

R² означает Н или алкил;

R³, R⁴ и R⁵ означают, независимо, Н, атом галогена или алкил, тригалогенметил, гидроксил, цианогруппу или алкоксил;

R⁶ означает Н или алкил;

R⁷ означает Н, атом галогена или алкил, гидроксиалкил, аминогруппу, гидроксикарбонил;

R⁸ и R⁹ означают, независимо, Н, атом галогена или цианогруппу, алкил, тригалогенметил, алкоксил, алкилтиогруппу или диалкиламиногруппу;

R¹⁰ означает Н или алкил или алкилкарбонил;

R¹¹ означает Н или алкил;

R¹² означает Н или алкил или алкилкарбонил; и

Y означает О или S;

- и фармацевтически приемлемой соли соединения общей формулы (II) или соединения общей формулы (III).

В некоторых случаях соединения, входящие в состав продукта согласно настоящему изобретению, могут включать асимметрические атомы углерода. Следовательно, вышеуказанные соединения имеют две возможные энантиомерные формы, то есть конфигурации "R" и "S". Настоящее изобретение включает обе энантиомерные формы и любые комбинации этих форм, включая рацемические смеси "RS". Ради простоты, когда в структурных формулах не указана никакая специфическая конфигурация, нужно понимать, что представлены обе энантиомерные формы и их смеси.

Под алкилом, когда он более точно не указан, понимают линейный или разветвленный алкильный радикал с 1-6 атомами углерода. Под алкилкарбонилом, алкилтиогруппой, алкоксилом, алкиламиногруппой, диалкиламиногруппой, алкенилом, алкинилом, аралкилом, гетероциклилалкилом понимают, соответственно, алкилкарбонил, алкилтиогруппу, алкоксил, алкиламногруппу, диалкиламиногруппу, алкенил, алкинил, аралкил, гетероциклилалкил, алкильная часть которых имеет вышеуказанное значение.

Под линейным или разветвленным алкилом с 1-6 атомами углерода понимают, в частности, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, пентил, неопентил, изопентил, гексил, изогексил. Наконец, под галогеном понимают атомы фтора, хлора, брома или йода.

Когда химическая структура, такая как используемая здесь, имеет идущую от нее стрелку, стрелка указывает положение присоединения. Например, структура

представляет собой пентил. Когда рядом со стрелкой появляется значение в скобках, это значение указывает, где в соединении может находиться положение присоединения. Например, в общей формуле (II):

такой как определенная выше, когда R¹⁰ и R⁷, взятые вместе, образуют радикал:

в результате образуется следующая структура:

Наконец, под фармацевтически приемлемой солью понимают, в частности, аддитивные соли с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, сульфат, фосфат, дифосфат и нитрат, или с органическими кислотами, такие, как ацетат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, памоат и стеарат. В рамки настоящего изобретения также входят, когда их можно использовать, соли, получаемые исходя из оснований, таких как гидроксид натрия или гидроксид калия. В отношении других примеров фармацевтически приемлемых солей можно сослаться на публикацию "Salt selection for basic drugs". Int. J. Pharm., 33, 201-217 (1986).

В частности, ингибиторы трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G согласно изобретению могут быть комбинированы преимущественно со следующими соединениями:

- ингибиторы пренилтрансфераз, и, в частности, ингибиторы фарнезилтрансфераз, такие как 1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метоксифенил)имидазо[1,2с][1,4]бензодиазепин, 4-(2-бромфенил)-1-(2-(1-((4-циано-3-метокси)фенилметил)имидазо-5-ил)-1-оксоэтил)-1,2-дигидро-8-фторимидазо[1,2а][1,4]бензодиазепин или (±)-4-(3-хлорфенил)-6-[(4-хлорфенил)амино-(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)метил]-1-метил-2(1Н)хинолинон;

- митотические клеточные яды, такие как таксол;

- алкилирующие агенты, такие как цисплатина;

- антиметаболические средства, такие как гемцитабин или 5-фторурацил.

Предпочтительно, используемыми согласно изобретению ингибиторами трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G являются такие, которые соответствуют частной формуле (I_A), такой, как определенная выше, в которой:

R₁ означает Н;

R₂ и R₃ означают, независимо, Н или низший алкил;

R₄ означает О;

R₅ означает Н или низший алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил;

R₆ означает арил, возможно замещенный радикалами, выбираемыми из группы, состоящей из ОН, низших алкила или алкоксила, N(R₁₀)(R₁₁), COOH, CON(R₁₀)(R₁₁) и атома галогена;

причем

R₁₀ и R₁₁ означают, независимо, Н или низший алкил;

или соли этих соединений.

Предпочтительно, когда их используют согласно изобретению, соединениями общей формулы (II) являются такие, в которых находятся, независимо, радикалы, обладающие следующими характеристиками:

- R¹ означает радикал:

где R²¹ означает аралкил, арильная часть которого может быть необязательно замещена радикалом или радикалами, выбираемыми среди атома галогена и цианогруппы, гидроксила, алкоксила, амино-, алкиламино- и диалкиламиногруппы;

- R⁴ означает арил, необязательно замещенный радикалом или радикалами, выбираемыми среди атома галогена и гидроксила, алкоксила, амино-, алкиламино- и диалкиламиногруппы;

- Х означает алкиленовый радикал с 1-6 атомами углерода;

- Y означает СО;

- n1=1, R¹⁰ означает С, R⁶ означает Н, и R¹⁰ и R⁷, взятые вместе, образуют радикал:

причем каждый из X¹, X² и X³ означают, независимо, Н или атом галогена.

Предпочтительно, когда их используют согласно изобретению, соединения общей формулы (III) являются такими, в которых находятся, независимо, радикалы, обладающие следующими характеристиками:

- R¹ означает ОН или NH₂;

- R² означает алкил и предпочтительно метил;

- один из R³, R⁴ и R⁵ означает атом галогена;

- R⁶ означает алкил и предпочтительно метил;

- один из R⁸ и R⁹ означает атом галогена;

- Y означает О.

Согласно особенно предпочтительному варианту изобретения ингибиторы трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G выбирают из группы, состоящей из:

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразина и

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразина

и фармацевтически приемлемых солей этих соединений.

Также, согласно особенно предпочтительному варианту изобретения цитостатические средства, комбинируемые с вышеуказанными ингибиторами трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, выбирают из группы, состоящей из:

-1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метокси-фенил)имидазо[1,2 с][1,4]-бензодиазепина;

-4-(2-бромфенил)-1-(2-(1-((4-циано-3-метокси)фенилметил)-имидазол-5-ил)-1-оксо-этил)-1,2-дигидро-8-фторимидазо[1,2а][1,4]бензодиазепина;

-(±)-4-(3-хлорфенил)-6-[(4-хлорфенил)амино(1-метил-1Н- имидазол-5-ил)метил]-1-метил-2(1Н)хинолинона;

- таксола;

- гемцитабина;

и фармацевтически приемлемых солей этих соединений.

Необязательно, в состав продукта согласно изобретению также может входить дополнительное цитостатическое соединение, отличное от цитостатического средства, комбинируемого с ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G.

Вышеуказанное дополнительное соединение предпочтительно выбирают из группы, состоящей из:

-1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метокси-фенил)имидазо[1,2с][1,4]-бензодиазепина;

-4-(2-бромфенил)-1-(2-(1-((4-циано-3-метокси)фенилметил)-имидазол-5-ил)-1-оксоэтил)-1,2-дигидро-6-фторимидазо[1,2а]-[1,4]бензодиазепина;

-(±)-4-(3-хлорфенил)-6-[(4-хлорфенил)амино(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)метил]-1-метил-2(1Н)хинолинона;

- таксола;

- гемцитабина;

и фармацевтически приемлемых солей этих соединений.

Объектом изобретения также является фармацевтическая композиция, включающая по меньшей мере один из продуктов согласно изобретению.

Фармацевтические композиции, включающие продукт согласно изобретению, могут быть в форме твердых веществ, таких как, например, порошки, гранулы, таблетки, желатиновые капсулы, липосомы или суппозитории. Соответствующими твердыми носителями могут быть, например, фосфат кальция, стеарат магния, тальк, сахара, лактоза, декстрин, крахмал, желатин, целлюлоза, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, поливинилпирролидон и воск.

Фармацевтические композиции, включающие продукт согласно изобретению, могут также находиться в жидкой форме, например, в виде растворов, эмульсии, суспензий и сиропов. Соответствующими жидкими носителями могут быть, например, вода, органические растворители, такие как глицерин или гликоли, а также их смеси в различных соотношениях с водой.

Введение лекарственного средства согласно изобретению можно осуществлять локально, перорально, парентерально, путем инъекции (внутримышечной, подкожной, внутривенной и т.д.) и т.д. Способ введения, разумеется, зависит от типа излечиваемого заболевания.

Для различных соединений, входящих в состав продукта согласно изобретению, могут быть предусмотрены следующие вводимые (суточные, за исключением противоположного указания) дозы:

- соединение общей формулы (I): 50-200 мг/м² интраперитонеально;

- соединение общей формулы (II): 50-500 мг/м² перорально;

- таксол: 1-10 мг/кг (интраперитонеально) или 1-3 мг/кг (внутривенно);

- цисплатина: 50-80 мг/м²;

- 5-фторурацил: 400-800 мг/м² внутривенно, причем введение повторяют 1-4 раза в месяц;

- гемцитабин: 100-500 мг/м² внутривенно (перфузии примерно в течение 6 часов).

Получение некоторых соединений, входящих в состав продуктов согласно изобретению:

I) Соединения общей формулы (I) получают согласно способам, аналогичным, описанным в заявке на патент РСТ WO-97/30053.

Однако, кроме того, в заявке на патент WO-00/02881 описаны следующие соединения:

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин и

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин.

II) Соединения общей формулы (II), в том числе 1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метоксифенил)имидазо[1,2с][1,4]-бензодиазепин и 4-(2-бром-фенил)-1-(2-(1-((4-циано-3-метокси)фенилметил)имидазол-5-ил)-1-оксоэтил)-1,2-дигидро-8-фторимидазо[1,2а][1,4]бензодиазепин, получают согласно методикам, описанным в заявке на патент РСТ WO-00/39130.

III) Соединения общей формулы (III) получают согласно способам, описанным в заявке на патент РСТ WO-97/21701.

Если только они не уточнены другим образом, все технические и научные термины, используемые в настоящем описании, имеют то же самое значение, что и обычно понимаемое обычным специалистом в области, к которой относится настоящее изобретение. Точно так же, все публикации, заявки на патенты, все патенты и все другие ссылки, указанные в настоящем описании, включены в виде ссылки.

Следующие примеры представлены для пояснения вышеуказанных методик и никоим образом не должны рассматриваться как ограничение объема охраны изобретения.

Пример 1.

С целью пояснения полезности изобретения, исследован эффект обработки в случае опухолевой линии человеческих панкреатических клеток Mia-Paca2 с помощью 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразина и 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразина (описанных в заявке РСТ WO-00/02881) в комбинации с различными цитостатическими средствами.

При этом используемые в тестах продукты, ингибирующие трансдукцию сигналов гетеротримерных протеинов G, идентифицированы под буквой А, а другие используемые в тестах цитостатические средства идентифицированы под буквой В.

1) Методики

Материал

В состав тестируемых продуктов входят следующие соединения (получаемые согласно вышеописанным способам):

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин (соединение A₁);

-7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,2а]пиразин (соединение A₂);

-1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метоксифенил)имидазо[1,2с][1,4]бензодиазепин (соединение B₁);

- таксол (соединение B₂);

- гемцитабин (соединение В₃);

-(±)-4-(3-хлорфенил)-6-[(4-хлорфенил)амино(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)метил]-1-метил-2(1Н)хинолинон (соединение В₄);

-4-(2-бромфенил)-1-(2-(1-((4-циано-3-метокси)фенилметил)-имидазол-5-ил)-1-оксоэтил)-1,2-дигидро-8-фторимидазо[1,2а][1,4]бензодиазепин (соединение В₅).

Клеточная линия

Клеточная линия Mia-Paca2 (человеческие раковые клетки поджелудочной железы) была приобретена из Американской коллекции тканевых культур (Роквилл, Мэриленд, США).

Определение клеточной пролиферации in vitro

Клетки Mia-Paca2 (1500 клеток на лунку) культивировали в 96-луночных планшетах, предварительно покрытых полигемой (Сигма), которая позволяет происходить росту клеток только туморогенного фенотипа.

В день 0, производили посев этих клеток в 90 мкл модифицированной по способу Дульбекко среды Игла (Gibco-Brl, Gergy-Pontoise, Франция), дополненной 10% инактивированной путем нагревания зародышевой (Gibco-Brl, Gergy-Pontoise, Франция), 50000 единиц/л пенициллина, 50 мг/л стрептомицина (Gibco-Brl, Gergy-Pontoise, Франция) и 2 ммоль глутамина (Gibco-Brl, Gergy-Pontoise, Франция).

Клетки обрабатывали с помощью возрастающих концентраций двух продуктов, используемых индивидуально или в комбинации матричным способом, то есть: в день 1, первый продукт в течение 96 часов и, в день 2, второй продукт в течение 72 часов. Согласно методу α, ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, с которым комбинируется цитостатический агент, вводили до этого последнего, тогда как согласно методу β его вводили после.

По окончании этого периода, количественную оценку клеточной пролиферации осуществляли путем колориметрического теста, базируясь на расщеплении соли тетразолия WSTl митохондриальными дегидрогеназами в живых клетках, приводящем к образованию формазана (Boehringer Mannheim, Maylan, Франция). Эти тесты осуществляли по 2 раза с 4 определениями для каждого индивидуального продукта и для каждой тестируемой комбинации. Это позволяет определить число живых клеток в конце каждой обработки, то есть наблюдаемое значение. Рассчитанное количество живых клеток для каждой обработки соответствует увеличению в количественном отношении наблюдаемых значений эффектов отдельных продуктов. Эти наблюдаемые и рассчитанные значения сравнивали для каждой комбинации. Когда наблюдаемое количество живых клеток ниже рассчитанного количества живых клеток, это рассматривали как синергизм. Когда наблюдаемое значение равно рассчитанному значению, это рассматривали как аддитивность. Когда наблюдаемое значение выше рассчитанного значения, это рассматривали как антагонизм.

2) Результаты:

Полученные результаты представлены в нижеследующих таблицах.

Представленные в таблицах I, II, III, IV и V результаты показывают, что продукты, включающие соединение A₁ в комбинации с соединением B₁, соединением В₂ или соединением В₃, или продукты, включающие соединение A₂ в комбинации с соединением В₄ или соединением B₅, способны ингибировать пролиферацию in vitro человеческих опухолевых клеток Mia-Paca2. Комбинированный эффект комбинации, оцененный по методу, описанному S. Cote и R.L. Momparler, Anticancer Drugs, 4, 327-333 (1993), позволяет констатировать синергизм для комбинаций:

A₁+B₁; A₁+В₂; A₁+В₃; А₂+В₄ и A₂+В₅.

1. Продукт для одновременного, раздельного или распределенного во времени терапевтического применения при лечении рака, включающий по меньшей мере один ингибитор трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G, выбранный из 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2 а]пиразина, 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил) -8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,2а]пиразина и фармацевтически приемлемых солей этих соединений, в дозе от 50 до 200 мг/м²; и по меньшей мере одно другое цитостатическое средство, выбираемое из группы, состоящей из таксола и его аналогов, гемцитабина и его аналогов или ингибитора пренилтрансфераз, выбранного из 1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метоксифенил)имидазо[1,2с][1,4]бензодиазепина; (±)-4-(3-хлорфенил)-6-[(4-хлорфенил)амино(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)метил]-1-метил-2(1Н)хинолинона, 4-(2-бромфенил)-1-2-(1-((4-циано-3-мето-кси)фенилметил)имидазол-5-ил)-1-оксоэтил)-1,2-дигидро-8-фторимидазо[1,2а]-[1,4]бензодиазепина и фармацевтически приемлемых солей этих соединений в дозе от 50 до 500 мг/м², и цисплатина в дозе от 50 до 80 мг/м².

2. Продукт по п.1, отличающийся тем, что ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G является 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо [1,2а]пиразин, а другим цитостатическим средством является 1-(2-(1-((4-циано)фенилметил)имидазол-4-ил)-1-оксоэтил)-2,5-дигидро-4-(2-метоксифенил)имидазо[1,2с][1,4]бензодиазепин.

3. Продукт по п.1, отличающийся тем, что ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G является 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин, а другим цитостатическим средством является таксол.

4. Продукт по п.1, отличающийся тем, что ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G является 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-(2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроимидазо[1,2а]пиразин, а другим цитостатическим средством является гемцитабин.

5. Продукт по п.1, отличающийся тем, что ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G является 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,2а]пиразин, а другим цитостатическим средством является (±)-4-(3-хлорфенил)-6-[(4-хлорфенил)амино(1-метил-1Н-имидазол-5-ил)метил]-1-метил-2(1Н)хинолинон.

6. Продукт по п.1, отличающийся тем, что ингибитором трансдукции сигналов гетеротримерных протеинов G является 7-(2-амино-1-оксо-3-тиопропил)-8-(циклогексилметил)-2-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,2а]пиразин, а другим цитостатическим средством является 4-(2-бромфенил)-1-2-(1-((4-1-циано-3-мето-кси)фенилметил)имидазол-5-ил)-1-оксоэтил)-1, 2-дигидро-8-фторимидазо[1,2а][1,4]бензодиазепин.