Производные альфа-(n-сульфонамидо)ацетамида как ингибиторы бета-амилоида

Изобретение относится к новым α-(N-сульфонамидо)ацетамидам формулы (I) или их оптическим изомерам

где значения для R; R¹; R² и R³ указаны в п.1 формулы. Данные соединения являются ингибиторами продукции β-амилоидного пептида (β-АР) и применимы для ингибирования продукции β-амилоидного пептида. Изобретение также относится к фармацевтической композиции на основе этих соединений и к способу ингибирования продукции β-амилоидного пептида. 3 н. и 19 з.п. ф-лы, 4 табл.

 

ОБЛАСТЬ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Данное изобретение охватывает новые соединения α-(N-сульфонамидо)ацетамида, обладающие лекарственными и биоактивными свойствами, их фармацевтические композиции и способы применения. В частности, изобретение относится к α-(N-арилсульфонамидо)ацетамидам. Эти соединения обладают свойством уникального ингибирования продуцирования β-амилоидного пептида (β-АР), тем самым предупреждают накопление отложений амилоидного пептида в мозге. Более конкретно, настоящее изобретение относится к лечению болезни Альцгеймера (AD).

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Болезнь Альцгеймера является прогрессирующим нейродегенеративным заболеванием, характеризующимся ухудшением памяти и когнитивной дисфункцией. AD характеризуется патологическим накоплением сенильных (нейритных) бляшек, нейрофибриллярных клубков, амилоидных отложений в невральных тканях и сосудах, утратой синаптических контактов и гибелью нейронов. Она представляет собой самую обычную форму деменции и в настоящее время является третьей основной причиной смерти после сердечно-сосудистых заболеваний и рака. Затраты на болезнь Альцгеймера огромны (в США более $100 миллиардов ежегодно). По мере увеличения продолжительности жизни в обществе частота AD заметно повышается. По оценкам, если методы предупреждения и лечения не будут найдены, к 2020 году более 10 миллионов американцев будут страдать AD. В настоящее время считают, что болезнью Альцгеймера (AD) поражено 10% населения в возрасте старше 65 лет и до 50% в возрасте старше 85 лет. В настоящее время нет метода лечения, который бы эффективно предупреждал AD или уменьшал (сводил на нет) клинические симптомы и основную патофизиологию (см. обзор Selkoe, D.J. Ann. Rev. Cell Biol., 1994, 10:373-403).

Существует множество теорий относительно этиологии и патогенеза AD. Эти теории либо основываются на аналогии с другими заболеваниями и состояниями (например, теории медленного вируса и "алюминиевая") или на наблюдениях за патологией (например, холинергическая, амилоидная или клубочковая теории). Генетический анализ, вероятно, поможет сделать выбор между конкурентными теориями. Идентификация мутаций в предшественнике β-амилоидного белка (β-АРР) индивидуумов, предрасположенных к ранним формам AD и родственньм заболеваниям, в значительной степени подтверждает амилоидогенные теории.

Гистопатологическое исследование тканей мозга, полученных при аутопсии или при изучении нейрохирургических проб пораженных болезнью людей, выявляет наличие амилоидных бляшек и нейрофибриллярных клубочков в коре головного мозга таких больных. Аналогичные изменения наблюдаются у больных трисомией 21 (синдром Дауна). Биохимические и иммунологические исследования показывают, что доминантный белковый компонент амилоидной бляшки представляет собой белок размером примерно 4,2 килодальтон, содержащий около 39-43 аминокислот. Этот белок называют Aβ, β-амилоидный пептид и иногда β/А4; в данном описании его называют Аβ. Помимо отложения в амилоидных бляшках Аβ обнаруживают в стенках менингеальных и паренхимных артериол, малых артерий, капилляров и иногда венул. Неопровержимые доказательства, накопленные за последнее десятилетие, показывают, что Аβ является внутренним полипептидом, образованным из типа 1 интегрального мембранного белка, названного белком-предшественником β-амилоидного пептида (β-амилоида) (АРР) (Selkoe, D. Physiol. Rev. 2001, 81, 741-766; Wolfe, M. J. Med. Chem. 2001, 44, 2039-2060). βAPP обычно продуцируется многими клетками как in vivo, так и культивированными клетками различных животных и людей. Некоторые протеолитические фрагменты АРР образуются в присутствии протеиназ, называемых секретазами. Субпопуляция этих протеолитических фрагментов, названная β-амилоидный пептид (Аβ), содержит 39-43 аминокислоты и получается при совместном участии β-секретазы и γ-секретазы. β-Секретаза представляет собой мембраносвязанную аспартил-протеиназу, которая образует N-конец Аβ пептида. С-Конец Аβ пептида образуется с участием γ-секретазы, по-видимому, олигомерным комплексом, который включает пресенилин-1 и/или пресенилин-2. Пресенилин-1 и пресенилин-2 представляют собой политопные заполняющие мембрану (интегрированные в мембрану) белки, которые могут содержать каталитические компоненты γ-секретазы (Seiffert, D., Bradley, J. et al. J. Biol. Chem. 2000, 275, 34086-34091).

Многочисленные данные, взятые вместе, неуклонно наводят на мысль, что снижение уровней Аβ в мозге предупреждает начало и развитие AD. Во-первых, Аβ является основным компонентом бляшек в паренхиме мозга, наблюдаемых у всех больных AD, и амилоидных отложений в сосудах головного мозга, наблюдаемых у 90% больных AD (обзор Selkoe, D. Physiol. Rev. 2001, 81, 741-766; Wolfe, M. J. Med. Chem. 2001, 44, 2039-2060). Эти бляшки образуются в результате агрегации растворимого Аβ, уровень которого в мозге четко коррелирует с тяжестью AD нейродегенерации (McLean, С., Cherny, R. et al. Ann. Neurol. 1999, 46, 860-866). Во-вторых, мутации в трех генах (АРР, PS-1 или PS-2), которые повышают уровень Аβ, вызывают семейную AD (FAD), при которой начало AD ускоряется, по меньшей мере, на десятилетие. В том числе мутации, повышающие уровень Аβ, приводят к трисомии хромосомы 21, что является причиной синдрома Дауна. В-третьих, трансгенные мыши, клетки которых экспрессируют один или более мутантных генов FAD, у которых наблюдается повышенный уровень Aβ, образование бляшек в паренхиме мозга и церебральные васкулярные отложения, содержащие Аβ, проявляют нарушение памяти (Chapman, P., White, G. et al. Nature Neurosci. 1999, 2, 271-276) и, как следствие, нейрофибриллярную дегенерацию у мышей, клетки которых также сверхэкспрессируют мутантный тау протеин (Lewis, J.; Dickson, D. et al. Science 2001, 293, 1487-1491). В-четвертых, Аβ является токсическим для культивированных клеток (Dahlgren, К; Manelli, A. et al. J. Biol. Chem. 2002, 277, 32046-32053), вызывает образование нейрофибриллярных клубочков у мышей с мутантным тау (Gotz, J., Chen, F. et al. Science 2001, 293, 1491-1495) и препятствуют продолжительной потенциации, вероятной составляющей памяти (Walsh, D., Klyubin, I. et al. Nature 2002, 416, 535-539 и приведенные в статье ссылки). Все вместе эти данные приводят специалиста в данной области к заключению, что избыток продукции Аβ и/или пониженный клиренс Аβ вызывает AD. Из этого следует, что снижение уровня Аβ в мозге с помощью ингибирования γ-секретазы предупреждает начало и прогрессирование AD.

Помимо AD, избыточная продукция и/или пониженный клиренс Аβ вызывает церебральную амилоидную ангиопатию (САА) (обзор Thal, D., Gherbremedhin, E. et al., J. Neuropath, exp. Neuro. 2002, 61, 282-293). У этих больных сосудистые амилоидные отложения вызывают дегенерацию стенок сосудов и аневризмы, которые могут быть ответственны за 10-15% случаев кровоизлияния у престарелых больных. Как и при AD, мутации в гене, кодирующем Аβ, ведут к ранней форме САА, называемой внутримозговым кровоизлиянием с амилоидозом голландского типа, а у мышей, экспрессирующих этот мутантный белок, развивается САА, аналогичный человеческому.

Выдвинута гипотеза, что ингибирование продуцирования Аβ предупреждает и уменьшает нейродегенерацию, снижающую нейротоксичность и, как правило, опосредующую патологию, ассоциированную с продуцированием Аβ. Способы лечения могут быть нацелены на образование Аβ при участии ферментов, включенных в протеолитическое процессирование β-амилоидного белка-предшественника. Соединения, которые ингибируют β- или γ-секретазную активность, непосредственно или опосредованно, могут контролировать продуцирование Аβ. Благоприятным является то, что соединения, которые специфично нацелены на γ-секретазы, могут контролировать продуцирование Аβ. Такое ингибирование β- или γ-секретаз может тем самым уменьшить продуцирование Аβ, может уменьшить или предупредить неврологические нарушения, ассоциированные с белком Аβ.

В Международной заявке WO 00/50391, опубликованной 31 августа 2000 года, описан ряд сульфонамидных соединений, которые могут модулировать продуцирование амилоидного β белка, как средство для лечения различных заболеваний, особенно болезни Альцгеймера и других заболеваний, связанных с отложением амилоида. В японском патенте 11343279, опубликованном 14 декабря 1999, описан ряд сульфонамидных производных, которые являются ингибиторами TNF-альфа, применимыми для лечения аутоиммунных заболеваний.

Ничто в этих ссылках нельзя интерпретировать как описывающее или предполагающее новые соединения по данному изобретению и их применение для ингибирования продуцирования β-АР.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Синтезирован ряд производных α-(N-сульфонамидо)ацетамида. Эти соединения специфично ингибируют продуцирование β-амилоидного пептида (β-АР) из белка-предшественника β-амилоидного белка (β-АРР). Фармакологическое действие этих соединений делает их применимыми для лечения состояний, ответственных за ингибирование β-АР у пациентов, например болезни Альцгеймера (AD) и синдрома Дауна. Терапия с применением введения этих соединений больным, страдающим этими заболеваниями или подверженных им, включает уменьшение β-АР в мозге этих пациентов.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение включает соединения Формулы I, их фармацевтические препараты и их применение для ингибирования (подавления) продуцирования β-АР у пациентов, страдающих AD или подверженных AD или другим нарушениям, возникающим в результате накопления β-АР в тканях мозга. Соединения Формулы I, которые включают нетоксические фармацевтически приемлемые соли и/или их гидраты, имеют следующую формулу и нижеследующие обозначения:

где R¹ выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного C_1-6 алкила или С_2-6 алкенила, необязательно имеющего заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, С_3-7 циклоалкила, С_1-4 алкокси, С_1-4 алкилтио и галогена;

(б) С_3-7 циклоалкила, необязательно замещенного гидрокси или галогеном;

R обозначает водород или R¹ и R вместе обозначают C_2-5 алкилен;

R² выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного С_1-6 алкила или С_3-6 алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкокси и NR⁴R⁵;

(б) С_3-7 циклоалкилметила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из амино, (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4алкил)N-, С_1-4алкилС(=O)NH- и С_1-4алкилОС(=O)NH-;

(в) линейного или разветвленного С_1-6алкил-С(=O)-А;

(г) -В-нафтила;

(д)

D и Е, каждый независимо, обозначают простую связь, линейный или разветвленный С_1-6алкил, С_2-6алкенил или С_3-7циклоалкил;

Z выбирают из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, галогена, циано, гидрокси, -OCHF₂, -OCF₃, -CF₃ и -CHF₂;

Х и Y, каждый независимо, выбирают из группы, состоящей из водорода, гидрокси, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, С_1-4 алкилS-, С_1-4 алкилS(O)-, С_1-4 алкилSO₂-, нитро, F₃S- и циано; -OR⁶; -NR⁴R⁵; -NR⁷C(=O)R⁸; -NR⁷C(=O)OR⁸; NHSO₂C_1-4 алкил; -N(SO₂C_1-4 алкил)₂; C(=O)W, где W выбирают из группы, состоящей из гидрокси, C_1-4 алкил, C_1-4 алкокси, фенокси и -NR⁴R⁵; -OC(=O) C_1-4 алкила; фенила, причем указанный фенил, необязательно, может быть замещен циано, галогеном, C_1-4 алкокси, С_1-4 алкилS-, СН₃С(=O), C_1-4 алкилS(O)- или С_1-4 алкилSO₂-, и гетероциклической группы, где указанную гетероциклическую группу выбирают из ряда, состоящего из фуранила, тиофуранила, пирролила, имидазолила, пиразолила, триазолила, тетразолила, пиридинила, пиримидинила, оксадиазолила, оксазолила, изоксазолила, тиадиазолила и тиазолила, причем указанная гетероциклическая группа, необязательно, замещена заместителями, выбранными из группы, состоящей из циано, галогена, C_1-4 алкила, (галоген)С_1-4 алкила и CO₂C_1-4 алкила;

(е) -В-(гетероцикла), где указанный гетероцикл выбирают из группы, состоящей из фуранила, тиофуранила, пирролила, имидазолила, пиразолила, триазолила, тетразолила, пиридинила, пиримидинила, оксадиазолила, оксазолила, изоксазолила, тиадиазолила и тиазолила, причем указанный гетероцикл, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, C_1-4 алкила, CO₂ C_1-4 алкила, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(С_1-6алкил)пиперазин-1-ила;

(ж) -В-(пиперидин-4-ила), где указанный пиперидин-4-ил, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из линейного или разветвленного C_1-6 алкила, СН₂С(=O)фенила, фенила и фенилметила, причем указанный C_1-6 алкил и указанный фенил, необязательно, имеют заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, бензимидазол-2-ила, пиридила и тетрагидрофуран-2-ила, и -C(=O)W', где W' выбирают из группы, состоящей из C_1-4 алкокси, R⁹ и -NR⁴R⁵;

А обозначает гидрокси, C_1-4 алкокси или NR⁴R⁵;

В обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил или С_3-6 алкенил;

R³ обозначает фенил или пиридил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, гидрокси, C_1-4 алкокси, C_1-4 алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-;

R⁴ и R⁵, каждый независимо, обозначают водород, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, С_3-6 алкинил, С_3-7 циклоалкил, С_3-7 циклоалкилметил, C_1-4 алкокси, фенил, бензил, пиридил, пиперидин-4-ил, индан-1-ил, индан-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил или пирролидин-3-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, циано, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, гидроксиметила, бензилоксиметила, фенила, пиридила, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, (галоген)₃С-О-, (галоген)₂СН-O-, C_1-4 алкилтио, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила, 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила, 4-фенилпиперазин-1-ила, 4-бензилпиперазин-1-ила, 4-пиридилпиперазин-1-ила, СО₂Н, СО₂С_1-4 алкила, C(=O)NHC_1-4 алкила и C(=O)N(C_1-4 алкил)₂;

R⁴ и R⁵ вместе могут обозначать морфолин-4-ил, тиоморфолин-4-ил, пирролидин-1-ил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил, декагидрохинолин-1-ил, пиперидин-1-ил, пиперазин-1-ил, [1,4]оксазепан-4-ил, азетидин-1-ил, 2,3-дигидро-1Н-изоиндол-2-ил или 2,3-дигидро-1H-индол-1-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, циано, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, фенила, пиридила, бензила, C_1-6 алкила, С_3-7 циклоалкила, C_1-4 алкокси, C_1-4 алкилтио, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, CO₂H, СО₂С_1-4 алкил, C(=O)NHC_1-4 алкил и C(=O)N(C_1-4 алкил)₂;

R⁶ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил или фенил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, (С_1-4 алкил)(фенил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(С_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

R⁷ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил;

R⁸ обозначает линейный или разветвленный С_1-6 алкил, С_3-7 циклоалкил, фенил, пиридил или фуранил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(С_1-6алкил)пиперазин-1-ила;

R⁹ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил, фенил, оксазолил или пиридил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(С_1-6алкил)пиперазин-1-ила;

или их нетоксические фармацевтически приемлемые соли.

Настоящее изобретение также охватывает способ лечения или смягчения нарушений, ассоциированных с β-амилоидным пептидом, особенно болезни Альцгеймера, который заключается во введении, совместно с обычным адъювантом, носителем или разбавителем, терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его нетоксической фармацевтически приемлемой(го) соли, сольвата или гидрата.

Термин "C_1-6алкил", употребляемый в данном описании и в формуле изобретения (если в тексте не указано иначе), обозначает линейные или разветвленные алкильные группы, такие как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, 3-метилбутил, гексил и т.п. Термин "С_2-6алкенил, обозначает линейные или разветвленные алкенильные группы, такие как этенил (т.е. винил), пропенил, аллил, бутенил, 3-метилбутенил, пентенил, гексенил и т.п. Если не указано иначе, термин "галоген", предполагает бром, хлор, йод и фтор, тогда как термин "галогенид" предполагает анион бромид, хлорид и йодид.

Термин "С_3-7 циклоалкил" обозначает углеродный цикл, такой как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил.

Термин "C_1-4 галогеналкил" обозначает линейную или разветвленную C_1-4алкильную группу, содержащую 1-3 атомов галогена, такую как трифторметил, фторэтил, 1,2-дихлорэтил, трихлорэтил и т.п.

Термин "С_2-5алкилен" обозначает линейную или разветвленную алкиленовую группу, такую как метилен, этилен, пропилен, метилэтилен, бутилен, метилпропилен, пентилен, метилбутилен и этилпропилен.

Так как соединения по данному изобретению содержат асимметрический атом углерода, настоящее изобретение включает рацемат, а также индивидуальные энантиомерные формы соединений Формулы I по данному описанию и в соответствии с формулой изобретения. Предполагается, что однобуквенное обозначение (R) или (S) включает преимущественно один стереоизомер. Смеси изомеров можно делить на индивидуальные изомеры методами, известными сами по себе, например фракционной кристаллизацией, адсорбционной хроматографией или другими подходящими методами деления. Полученные рацематы можно разделять на антиподы обычным способом путем введения подходящих солеобразующих групп, например, получая смесь диастереоизомерных солей с оптически активными солеобразующими агентами, разделяя смесь на отдельные диастереоизомерные соли и превращая разделенные соли в свободные соединения. Возможные энантиомерные формы можно также делить фракционированием на колонках для хиральной жидкостной хроматографией высокого давления.

Термин "нетоксическая фармацевтически приемлемая соль" предполагает нетоксические соли присоединения основания. Соответствующие соли включают соли, образованные из органических и неорганических кислот, таких как, но без ограничения, хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, метансульфоновая кислота, уксусная кислота, винная кислота, молочная кислота, сульфиновая кислота, лимонная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, сорбиновая кислота, аконитовая кислота, салициловая кислота, фталевая кислота и т.п.

В способе по данному изобретению термин "терапевтически эффективное количество" обозначает общее количество каждого активного компонента по данному способу, которого достаточно, чтобы увидеть значительное улучшение состояния пациента, т.е. излечивание острых состояний, характеризующееся подавлением (ингибированием) продукции β-амилоидного пептида. Если индивидууму дают один активный ингредиент, термин относится к одному ингредиенту. Если дают комбинацию, термин относится к общему количеству активных ингредиентов, которое дает терапевтический эффект, вводимых в комбинации, периодически или одновременно. Термины "лечить, лечение, терапия, обработка", применяемые в данном описании и в формуле изобретения, обозначают предупреждение или уменьшение интенсивности заболеваний, обусловленных β-амилоидным пептидом.

Общие схемы реакций

Общие методики синтеза соединений Формулы I описаны в Реакционных схемах 1-23. Предполагается, что обоснованные, разумные вариации описанных методик, очевидные для специалиста в данной области техники, входят в объем настоящего изобретения.

Реакционная схема 1

Исходные (α-амино)ацетамиды Формулы II применяют в виде рацематов или в виде чистых энантиомеров, выпускаемых промышленностью, или их получают по общеизвестным литературньм методикам из товарных (имеющихся в продаже) (α-амино)кислот (общая ссылка для получения амидов: R.C.Larock "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976; см. также на Реакционной схеме 18 превращение кислоты Формулы XLVIII в амид Формулы XLIX). Соединение Формулы II обрабатывают соответствующим основанием и сульфонилирующим агентом, таким как сульфонилхлорид, в апротонном растворителе, таком как СН₂Cl₂, при комнатной температуре, получая (α-сульфонамидо)ацетамид Формулы III. Соответствующие основания включают триэтиламин и пиридин.

По одному методу превращения соединения Формулы III в сульфонамид Формулы I соединение Формулы III обрабатывают соответствующим основанием и алкилирующим агентом в апротонном растворителе при нагревании или без нагревания. Соответствующие основания для этой реакции включают карбонат калия и карбонат цезия. Алкилирующие агенты включают алкилгалогениды (например, хлористый алкил, бромистый алкил или йодистый алкил) и алкилсульфонаты (тозилаты, мезилаты, трифторметансульфонаты). Предпочтительные растворители включают ДМФА и ацетонитрил. Температурный интервал для этой реакции, как правило, составляет 20-100°С.

Альтернативный метод превращения соединения Формулы III в соединение Формулы I включает обработку соединения Формулы III трифенилфосфином, диалкилазодикарбоксилатом и спиртом в инертном растворителе при нагревании или без нагревания.

Реакционная схема 1 на твердом носителе

Соединения Формулы I можно также получать, используя методологию твердофазного синтеза. Например, FMOC-защищенную амидную смолу Ринка обрабатывают пиперидином в ДМФА для удаления FMOC-группы. Затем смола конденсируется с защищенной по амину (α-амино)кислотой в присутствии конденсирующего агента, такого как 1-гидроксибензотриазол и диалкилкарбодиимид в инертном растворителе, таком как ДМФА, при нагревании или в отсутствие нагревания. Депротекцией аминогруппы получают связанный с полимером амид Формулы IV. В случае FMOC-защищенной аминокислоты снятие защиты можно проводить обработкой пиперидином в ДМФА.

Реакцией соединения Формулы IV с соответствующим основанием, таким как пиридин, и сульфонилирующим агентом, таким как сульфонилхлорид, в инертном растворителе получают связанный со смолой сульфонамид Формулы V. Алкилирование соединения Формулы V алкилгалогенидом (например, хлористым алкилом, бромистым алкилом или йодистым алкилом) или алкилсульфонатом (тозилатом, мезилатом, трифторметансульфонатом) проводят в присутствии основания в инертном растворителе при комнатной температуре. Предпочтительным основанием является 2-трет-бутиламино-2-диэтиламино-1,3-диметилпергидро-1,2,3-диазафосфорин. Снятие с полимерной подложки дает сульфонамид Формулы I. В случае амидной смолы Ринка снятие предпочтительно проводят трифторуксусной кислотой в инертном растворителе, таком как CH₂Cl₂.

Реакционная схема 2

Соединения Формулы I можно также получать, как показано на Реакционной схеме 2. Восстановительное алкилирование амина Формулы I с целью получения амина Формулы VI проводят, обрабатывая альдегидом и восстановителем - гидридом - в присутствии кислого катализатора при нагревании или без нагревания. Предпочтительным восстановителем является цианоборогидрид натрия. Предпочтительным кислым катализатором является кислота Льюиса, такая как ZnCl₂. Предпочтительным растворителем в этой реакции является метанол. Затем амин Формулы VI обрабатывают сульфонилирующим агентом, таким как сульфонилхлорид, в присутствии амина, такого как триэтиламин. Эту реакцию проводят в инертном растворителе, таком как CH₂Cl₂, при нагревании или без нагревания, получая продукт Формулы I. Реакцию, как правило, проводят при комнатной температуре.

Реакционная схема 3

где линкер - линейный или разветвленный С_1-6 алкил или С_3-6 алкенил;

LG = уходящая группа.

Получение соединений Формулы VIII выполняют, как показано на Реакционной схеме 3, реакцией соединения Формулы VII с амином в присутствии акцептора кислоты, такого как триэтиламин, в инертном растворителе, таком как CH₂Cl₂, при нагревании или без нагревания. Соединение Формулы VII получают последовательными реакциями (цепь реакций), изображенными на Реакционной схеме 1 или Реакционной схеме 2.

Реакционная схема 4

Соединения Формулы XI и XII получают, как показано на Реакционной схеме 4. Восстановление нитрогруппы в соединении Формулы IX (полученном последовательными реакциями, изображенными на Реакционной схеме 1 или 2) газообразным водородом под давлением в присутствии палладиевого катализатора, кислоты и в растворителе, таком как метанол, дает производное анилина Формулы X. Монометилирование соединения Формулы Х с целью получения соединения Формулы XI проводят реакцией с 1,1 эквивалента метилгалогенида или метилсульфоната, например диметилсульфата, в присутствии основания, такого как триэтиламин, и в инертном растворителе, таком как ДМФА. Реакцию монометилирования, как правило, проводят при температуре 20-40°С. Диметиланилин Формулы XII получают, обрабатывая анилин Формулы Х избытком метилгалогенида, такого как йодистый метил, или метилсульфоната в присутствии основания, например карбоната цезия, в растворителе, таком как ДМФА, при нагревании или в отсутствие нагревания.

Реакционная схема 5

На Реакционной схеме 5 показан синтез сложных эфиров Формулы ХIII, кислот Формулы XIV и амидов Формулы XV. Реакция соединения Формулы III с эфиром галоидалкилкарбоновой кислоты, например с трет-бутиловым эфиром бромуксусной кислоты, в присутствии основания, такого как карбонат калия, и в инертном растворителе, таком как ДМФА, дает сложный эфир Формулы XIV. Депротекцией сложноэфирной группы методами, известными специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.373-442). Например, в случае трет-бутилового эфира отщепление с образованием кислоты Формулы XIV проводят, обрабатывая трифторуксусной кислотой в растворителе, таком как СН₂Cl₂. Превращение кислоты в амид Формулы XV проводят по обычным методикам реакций амидов, хорошо известньм специалистам в данной области техники (ссылка: R.C. Larock "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). По предпочтительному методу кислоту Формулы XIV обрабатывают первичным или вторичным амином в присутствии 1-гидроксибензотриазола и 1,3-дициклогексилкарбодиимида в апротонном растворителе, таком как СН₂Cl₂ или ДМФА.

Реакционная схема 6

.

Получение кислот Формулы XVII и амидов Формулы XVIII показано на Реакционной схеме 6. Превращение сложного эфира Формулы XVI (полученного как показано на Реакционных схемах 1 или 2) в кислоту Формулы XVII выполняют в стандартных условиях расщепления эфиров, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.373-442). В случае метилового эфира Формулы XVI обработкой водным раствором гидроксида натрия в растворителе, таком как метанол или смесь метанол/ТГФ, при 20-40°С получают кислоту Формулы XVII. Превращение кислоты Формулы XVII в амид Формулы XVII проводят обычными методами получения амидов, хорошо известными специалистам в данной области техники (ссылка: R.C. Larock "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). По предпочтительному методу кислоту Формулы XIV обрабатывают первичным или вторичным амином в присутствии 1-гидроксибензотриазола и карбодиимида, например 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида в растворителе, таком как ДМФА или CH₂Cl₂. В качестве акцептора кислоты можно добавлять основание, такое как диизопропилэтиламин.

Реакционная схема 7

Синтез производных пиперидина Формулы XIX, XX, XXI и XXIII показан на Реакционной схеме 7. Реакцией соединения Формулы III с N-защищенным пиперидином с 4-галоидалкильной или 4-сульфонилалкильной группой в качестве заместителя, такого как 4-(толуолсульфонилоксиметил)-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин), в присутствии основания, такого как карбонат цезия, в растворителе, таком как ДМФА, при нагревании или в отсутствие нагревания, получают карбамат Формулы XIX. Отщепление карбаматной группы проводят в стандартных условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.503-550), получая пиперидин Формулы XX. В случае (трет-бутоксикарбонил)пиперидина отщепление проводят в присутствии трифторуксусной кислоты в СН₂Cl₂.

Превращение пиперидина Формулы XX в амид Формулы XXI проводят обычными методами получения амидов, хорошо известными специалистам в данной области техники (ссылка: R.C. Larock "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). По предпочтительному методу пиперидин Формулы XX обрабатывают ацилхлоридом в присутствии амина, такого как триэтиламин, и инертного растворителя, такого как СН₂Cl₂, при нагревании или без нагревания. Или же пиперидин Формулы XX можно конденсировать с кислотой в присутствии конденсирующего агента, такого как гидроксибензотриазол и карбодиимид, получая амид Формулы XXI. Мочевину Формулы XXII получают, обрабатывая амин Формулы XX изоцианатом и основанием, таким как триэтиламин, в растворителе, таком как CH₂Cl₂, при нагревании или без нагревания. Алкилированием пиперидина Формулы XX получают N-замещенные пиперидины Формулы XXIII. Как правило, пиперидин обрабатывают алкилгалогенидом или алкилсульфонатом в присутствии основания, такого как триэтиламин, и растворителя, такого как CH₂Cl₂.

Реакционная схема 8

Спирты Формулы XXV и амины Формулы XXV и амины Формулы XXVI синтезируют как показано на Реакционной схеме 8. Защищенный спирт Формулы XXIV получают по Реакционным схемам 1 или 2. Снятие защиты со спиртовой группы (депротекция) в условиях, соответствующих выбранной защитной группе (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Chapter 2) дает спирт Формулы XXV. Например, если защитной группой является тетрагидропиранильная группа, свободную спиртовую группу получают по реакции соединения Формулы XXIV с п-толуолсульфокислотой в растворителе, таком как метанол. Гидроксильную группу соединения Формулы XXV превращают в уходящую группу (например, галоидную или сульфонатную), а затем обрабатывают первичным или вторичным амином, получая амин Формулы XXVI. Например, спирт можно превратить в мезилат реакцией с метансульфонилхлоридом и основанием, таким как CH₂Cl₂. Последующей реакцией мезилата с первичным или вторичным амином в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как СН₂Cl₂, получают амин Формулы XXVI.

Реакционная схема 9

Амиды Формулы XXVIII получают из аминов Формулы XXVII, как показано на Реакционной схеме 9. Амины Формулы XXVII, где D обозначает простую связь, получают по Реакционной схеме 1 или 4. Амины Формулы XXVII, где D имеет иное значение, нежели простая связь, получают по Реакционной схеме 8. Превращение аминов Формулы XXVII в амиды Формулы XXVIII проводят в условиях получения амидов, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: R.C. Larock "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). Например, реакцией амина Формулы XXVII с хлорангидридом кислоты в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как СН₂Cl₂, получают амид Формулы XXVIII. Превращение аминов Формулы XXVII в карбаматы можно осуществлять в условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.503-550). Сульфонамиды можно также получать из амина Формулы XXVII способами, описанными для превращения интермедиата Формулы II в сульфонамид Формулы III.

Реакционная схема 10

Синтез пиридинов Формулы XXX выполняют, как показано на Реакционной схеме. Хлорпиридин Формулы XXIX получают методами, описанными в Реакционных схемах 1 или 2. Реакцией соединения XXIX с первичным или вторичным амином в растворителе, таком как ТГФ, при температурах 20-100°С в запаянном сосуде под давлением получают аминопиридин Формулы XXX.

Реакционная схема 11

Аминозамещенные эфиры фенолов Формулы XXXII получают из (O-аллил)фенолов, как показано на Реакционной схеме 11. Исходные аллиловые эфиры Формулы XXXI получают, как показано на Реакционных схемах 1 или 2. Реакцией соединения Формулы XXXI с тетраоксидом осмия и триметиламин-N-оксидом в растворителе, таком как ацетон, с последующей обработкой периодатом натрия получают промежуточный альдегид, который, как правило, используют без дополнительной очистки. Реакцией неочищенного альдегида с первичным или вторичным амином и восстановителем, таким как триацетоксиборогидрид натрия, в растворителе, таком как этанол, при нагревании или в отсутствие нагревания, получают амин Формулы XXXII.

Реакционная схема 12

Превращение сложного эфира Формулы XXXIII в третичный спирт Формулы XXXIV проводят, как показано на Реакционной схеме 12. Реакция эфира Формулы XXXIII с избытком метилметаллоорганического реагента, такого как метилмагнийбромид, в растворителе, таком как ТГФ, в интервале температур 0-25°С дает спирт Формулы XXXIV.

Реакционная схема 13

1,3,4-Оксадиазол Формулы XXXVI получают, как показано на Реакционной схеме 13, с применением методов, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: Joule, J.A.; Mills, К; Smith, G.F. Heterocyclic Chemistry, 3^rd ed., Chapman & Hall: London, 1995; 452-456 и цитируемые ссылки). Например, эфир Формулы XXXV обрабатывают гидразином в метаноле при кипячении. Полученный промежуточный ацилгидразид используют без очистки в последующей реакции с алкилацетимидатом в пиридине при кипячении, получая оксадиазол Формулы XXXVI.

Реакционная схема 14

Синтез 1,2,4-оксадиазола Формулы XXXVI проводят, как показано на Реакционной Схеме 14, используя методы, хорошо известные специалистам в данной области техники (ссылка: Joule, J.A.; Mills, К; Smith, G.F. Heterocyclic Chemistry, 3^rd ed., Chapman & Hall: London, 1995; 452-456 и цитируемые ссылки). Например, обработкой кислоты Формулы XVII гидроксибензотриазолом, карбодиимидом и ацетамидоксимом (N-гидроксиэтанимидатом) в присутствии основания, такого как триэтиламин, получают интермедиат, который при нагревании в кипящем пиридине дает оксадиазол Формулы XXXVII.

Реакционная схема 15

1,2,4-Оксадиазол Формулы XXXIX получают из нитрила Формулы XXXVIII (Реакционная схема 15) методами, хорошо известными специалистам в данной области техники (ссылка: Joule, J.A.; Mills, К; Smith, G.F. Heterocyclic Chemistry, 3^rd ed., Chapman & Hall: London, 1995; 452-456 и цитируемые ссылки). Например, реакцией нитрила Формулы XXXVI с гидроксиламином в растворителе, таком как этанол, при температурах вплоть температуры кипения получают промежуточный N-гидроксиамидин, который затем обрабатывают хлористым ацетилом в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как CH₂Cl₂, получая 1,2,4-оксадиазол Формулы XXXIX.

Реакционная схема 16

На Реакционной схеме 16 показано превращение амида Формулы XL в кетон Формулы XLI. Амид Формулы XL, который получают, как показано на Реакционной схеме 6, обрабатывают метильным металлоорганическим реагентом, таким как метилмагнийбромид, в растворителе, таком как ТГФ, получая кетон Формулы XLI. Интервал реакционных температур составляет -20÷25°С.

Реакционная схема 17

β-Аминоамиды Формулы XLIII получают из акриламидов Формулы XLII, как показано на Реакционной схеме 17. Например, акриламид Формулы XLII, который получают, как описано в Реакционной схеме 9, обрабатывают первичным или вторичным амином в растворителе, таком как толуол, получая β-аминоамид Формулы XLIII.

Реакционная схема 18

Промежуточный сульфонамид Формулы XLIX (один энантиомер соединения Формулы III) получают в соответствии с Реакционной схемой 18. Реакция α-аниона интермедиата Формулы XLIV (ссылка: Josien, H.; Martin, A; Chassing, G. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 6547) алкилирующим агентом, таким как алкилгалогенид (например, хлористый алкил, бромистый алкил или йодистый алкил) или алкилсульфонат (например, алкилмезилат, алкилтозилат или алкилтрифторметансульфонат), дает интермедиат Формулы XLV. α-Анион соединения Формулы XLIV образуется при обработке сильным основанием, таким как алкиллитий (например, н-BuLi) или диалкиламид лития (например, диизопропиламид лития), в растворителе, таком как ТГФ, с сорастворителем, таким как НМРА, или без него. Температура реакции, как правило, составляет -78÷25°С. Снятие защитной бензгидрилиденовой группы в соединении Формулы XLV проводят в условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.587-588). Например, соединение Формулы XLV обрабатывают кислотой, такой как HCl в воде, в растворителе, таком как ТГФ, чтобы гидролизовать бензгидрилиденовую защитную группу. Полученный амин Формулы XLVI обрабатывают сульфонилирующим агентом, как описано для Реакционной схемы 1, получают сульфонамид Формулы XLVII. Гидролиз ацилсульфонамида Формулы XLVII с образованием кислоты Формулы XLVIII проводят, обрабатывая его гидроксидным ионом, например, в виде гидроксида лития, в присутствии добавок, таких как бромид лития и тетрабутиламмонийбромид. Кислоту Формулы XLVIII превращают в амид формулы XLIX в условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники (общая ссылка для получения амидов: R.C. Larock "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). Например, реакцию соединения Формулы XLVIII с хлоридом аммония в присутствии 1-гидроксибензотриазола, карбодиимида и основания-амина, такого как диизопропилэтиламин, дает амин Формулы XLIX. Эту реакцию обычно проводят в полярном растворителе, таком как ДМФА, при температуре реакции 0-40°С. Амид Формулы XLIX превращается в соединения Формулы I по методу, описанному в Реакционной схеме 1.

Реакционная схема 19

Реакционная схема 19 иллюстрирует один метод синтеза α-замещенного промежуточного (N-сульфонамидо)ацетамида Формулы III исходя из активированного производного глицина Формулы L. Реакция соединения Формулы L (ссылка: Haufe, G.; Laue, K.W.; Thriller, M.U.; Takeuchi, Y.; Shibata, N. Tetrahedron 1998, p.5929-5938; Kroger, S.; Haufe, G. Ammo Acids 1997, 12, p.363-372) с алкилирующим агентом, таким как алкилгалогенид (алкилхлорид, алкилбромид или алкилйодид) или алкилсульфонатом (например, алкилмезилатом, алкилтозилатом или алкилтрифторметансульфонатом) в присутствии основания, такого как карбонат калия, и добавки, такой как тетрабутиламмонийбромид, и в инертном растворителе, таком как ацетонитрил, при температуре 25-70°С дает соединение Формулы LI. Снятие бензгидрилиденовой защитной группы проводят в условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.587-588). Например, раствор соединения Формулы LI в растворителе, таком как диэтиловый эфир, обрабатывают водным раствором кислоты (например, водной HCl), обычно при температуре 0-30°С, получают аминоэфир Формулы LII. Превращение эфира Формулы LII в амид Формулы II проводят методами, хорошо известными специалистам в данной области техники. Например, если соединение Формулы LII представляет собой этиловый эфир, гидролиз этого сложного эфира проводят, обрабатывая раствор в диэтиловом эфире кислотой, такой как HCl, обычно при нагревании реакционной смеси в кипящем растворителе. Затем полученную промежуточную кислоту превращают в метиловый эфир с переводом в хлорангидрид кислоты в стандартных условиях (например, обработкой тионилхлоридом и метанолом) с последующей реакцией с водным раствором аммиака в растворителе, таком как толуол (ссылка: R.C. Larock. "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). Амин Формулы II превращают в соединение Формулы I, как описано в Реакционной схеме 1.

Реакционная схема 20

Получение соединения Формулы VI показано на Реакционной схеме 20. Алкен LIII получают, как описано на Реакционной схеме 18, из интермедиата Формулы (LIV и 1-бром-2-метил-2-пропена). Реакция алкена Формулы LIII с комплексом HF·пиридин в растворителе, таком как ТГФ, при температуре 0-25°С дает фторалкильное соединение Формулы LIV. Превращение соединения Формулы LIV в амид Формулы LV проводят, как показано на Реакционной схеме 18. Превращение амида Формулы LV в соединение LVI проводят, как показано на Реакционной схеме 1.

Реакционная схема 21

Синтез соединений Формулы LXII и Формулы LXIV показан на Реакционной схеме 21. Этиловый эфир 2-амино-4-метил-4-пентеновой кислоты (полученный по Реакционной схеме 19 из этилового эфира (бензгидрилиденамино)уксусной кислоты и 1-бром-2-метил-2-пропена) обрабатывают сульфонилирующим агентом, таким как сульфонилхлорид, в присутствии основания, такого как триэтиламин, в инертном растворителе, таком как CH₂Cl₂, получая эфир Формулы LVII. Реакция эфира Формулы LVII с комплексом HF·пиридин в растворителе, таком как ТГФ, и при температуре 0-25°С дает смесь фторалкильного производного Формулы LVIII и лактона Формулы LIX. Эти продукты разделяют и по отдельности проводят с ними последующие реакции.

Эфир Формулы LVIII гидролизуют до кислоты Формулы LX методами, хорошо известными специалистам в данной области техники (ссылка: T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, New York, 1999, pp.373-442). Например, обработкой эфира Формулы LVIII водным гидроксидом натрия в растворителе, таком как метанол, получают кислоту LXVI.

Превращение алкена Формулы LXVI в альдегид Формулы LX. Кислоту Формулы LX превращают в амид Формулы LXI по методике, описанной в Реакционной схеме 18 для получения амида Формулы XLIX. Получение амида Формулы LXII из соединения Формулы LXI проводят, как показано на Реакционной схеме 1.

Обработка лактона Формулы LIX водным аммиаком дает амид Формулы LXIII. Эту реакцию обычно проводят при нагревании в запаянной ампуле. Температура реакции составляет 40-80°С. Дальнейшее превращение интермедиата Формулы LXIII в сульфонамид Формулы LXIV проводят, как показано на Реакционной схеме 1.

Реакционная схема 22

Многостадийный синтез дифторалкиламида Формулы LXIX показан на Реакционной схеме 22. Соединение Формулы L обрабатывают 4-бром-1-бутеном в присутствии основания, такого как карбонат калия, в присутствии соли - галогенида тетраалкиламмония, такой как тетрабутиламмонийбромид, в растворителе, таком как СН₃CN, при температуре 20-70°С. Снятие защитной бензгидрилиденовой группы, как описано в Реакционной схеме 19, дает промежуточный амин, который затем обрабатывают сульфонилирующим агентом, таким как сульфонилхлорид, получая сложный эфир Формулы LXV. Алкилирование атома азота в сульфонамиде выполняют по методике, описанной в Реакционной схеме 1, получают соединение Формулы LXVI. Превращение алкена Формулы LXVI в альдегид Формулы LXVII проводят по реакции алкена с тетраоксидом осмия и триметиламин-N-оксидом в растворителе, таком как ацетон, с последующей обработкой периодатом натрия. Температура реакции обычно составляет 20-40°С. Реакция альдегида Формулы LXVII с фторирующим агентом, таким как DAST, в растворителе, таком как CH₂Cl₂, дает дифторалкилпроизводное Формулы LXVIII. Соединение Формулы LXVIII превращается в амид Формулы LXIX гидролизом сложного эфира до кислоты в присутствии основания, такого как гидроксид натрия, в растворителе, таком как метанол. Промежуточную кислоту превращают в амид в условиях, хорошо известных специалистам в данной области техники (ссылка: R.C. Larock. "Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989, pp.972-976). Например, реакция кислоты с хлоридом аммония в присутствии гидроксибензотриазола и карбодиимида и основания-амина, такого как диизопропилэтиламин, дает амид Формулы LXIX. Эту реакцию обычно проводят в полярном растворителе, таком как ДМФА, и при температуре 0-40°С.

Реакционная схема 23

α-Аминоамид Формулы LXXI получают по реакции, изображенной на Реакционной схеме 23. Амид Формулы LXX получают, как описано в Реакционной схеме 9. Обработка соединения Формулы LXX вторичным или третичным амином в растворителе, таком как ТГФ, при температуре 20-40°С дает амин Формулы LXXI.

В предпочтительном варианте настоящее изобретение включает соединения Формулы Ia и его фармацевтически приемлемые соли

где R¹ выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного C_1-6 алкила или С_2-6 алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, С_3-7 циклоалкила, С_1-4 алкокси, С_1-4 алкилтио и галогена;

(б) С_3-7 циклоалкила, замещенного, необязательно, гидрокси или галогеном;

R² выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного C_1-6 алкила или С_3-6 алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкокси и NR⁴R⁵;

(б) С_3-7 циклоалкилметила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из амино, (C_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, С_1-4алкилС(=O)NH- и С_1-4алкилОС(=О)NH-;

(в) линейного или разветвленного C_1-6 алкил-С(=O)-А;

(г) -В-нафтила;

(д)

D и Е, каждый независимо, обозначают простую связь, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, C_2-6 алкенил или С_3-7 циклоалкил;

Z выбирают из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, галогена, циано, гидрокси, -OCHF₂, -OCF₃, -CF₃ и -CHF₂;

Х и Y, каждый независимо, выбирают из группы, состоящей из водорода, гидрокси, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, C_1-4 алкилS-, C_1-4 алкилS(O)-, C_1-4 алкилSO₂-, нитро, F₃S- и циано;

-OR⁶;

-NR⁴R⁵;

-NR⁷C(=O)R⁸;

-NR⁷C(=O)OR⁸;

NHSO₂C_1-4 алкил;

-N(SO₂C_1-4 алкил)₂;

C(=O)W, где W выбирают из группы, состоящей из гидрокси, C_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, фенокси и -NR⁴R⁵;

-ОС(=O)C_1-4 алкила;

фенила, причем указанный фенил, необязательно, замещен циано, галогеном, С_1-4алкокси, С_1-4алкилS-, СН₃С(=O), С_1-4 алкилS(O)- или C_1-4 алкилSO₂-, и

гетероциклической группы, где указанную гетероциклическую группу выбирают из ряда, состоящего из фуранила, тиофуранила, пирролила, имидазолила, пиразолила, триазолила, тетразолила, пиридинила, пиримидинила, оксадиазолила, оксазолила, изоксазолила, тиадиазолила и тиазолила, причем указанная гетероциклическая группа, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, C_1-4 алкила, (галоген)С_1-4 алкила и CO₂C_1-4 алкила;

(е) -В-(гетероцикла), где указанный гетероцикл выбирают из группы, состоящей из фуранила, тиофуранила, пирролила, имидазолила, пиразолила, триазолила, тетразолила, пиридинила, пиримидинила, оксадиазолила, оксазолила, изоксазолила, тиадиазолила и тиазолила, причем указанный гетероцикл, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, C_1-4 алкила, CO₂C_1-4 алкила, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(С_1-6алкил)пиперазин-1-ила;

(ж) -В-(пиперидин-4-ила), где указанный пиперидин-4-ил, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из линейного или разветвленного C_1-6 алкила, СН₂С(=O)фенила, фенила и фенилметила, причем указанный C_1-6 алкил и указанный фенил, необязательно, имеют заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, бензимидазол-2-ила, пиридила и тетрагидрофуран-2-ила; и -C(=O)W', где W' выбирают из группы, состоящей из C_1-4 алкокси, R⁹ и -NR⁴R⁵;

А обозначает гидрокси, C_1-4 алкокси или NR⁴R⁵;

В обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил или С_3-6 алкенил;

R³ обозначает фенил или пиридил, необязательно имеющий заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, гидрокси, C_1-4 алкокси, C_1-4 алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-;

R⁴ и R⁵, каждый независимо, обозначают водород, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, С_3-6 алкинил, С_3-7 циклоалкил, С_3-7 циклоалкилметил, С_1-4 алкокси, фенил, бензил, пиридил, пиперидин-4-ил, индан-1-ил, индан-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил или пирролидин-3-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, циано, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, гидроксиметила, бензилоксиметила, фенила, пиридила, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, (галоген)₃С-О-, (галоген)₂СН-O-, C_1-4 алкилтио, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила, 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила, 4-фенилпиперазин-1-ила, 4-бензилпиперазин-1-ила, 4-пиридилпиперазин-1-ила, CO₂Н, CO₂C_1-4 алкила, C(=O)NHC_1-4 алкила и C(=O)N(C_1-4 алкил)₂;

R⁴ и R⁵ вместе могут обозначать морфолин-4-ил, тиоморфолин-4-ил, пирролидин-1-ил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил, декагидрохинолин-1-ил, пиперидин-1-ил, пиперазин-1-ил, [1,4]оксазепан-4-ил, азетидин-1-ил, 2,3-дигидро-1H-изоиндол-2-ил или 2,3-дигидро-1H-индол-1-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, циано, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, фенила, пиридила, бензила, C_1-6 алкила, С_3-7 циклоалкила, C_1-4 алкокси, C_1-4 алкилтио, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, СО₂Н, CO₂C_1-4 алкила, C(=O)NHC_1-4 алкила и С(=O)N(С_1-4алкил)₂;

R⁶ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил или фенил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, (C_1-4 алкил)(фенил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

R⁷ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил;

R⁸ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-7 циклоалкил, фенил, пиридил или фуранил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(С_1-6алкил)пиперазин-1-ила;

R⁹ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил, фенил, оксазолил или пиридил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

или их нетоксические фармацевтически приемлемые соли.

В другом предпочтительном варианте изобретение охватывает соединения Формулы I или их фармацевтически приемлемую соль, где R³ обозначает фенил, необязательно имеющий заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, гидрокси, С_1-4 алкокси, С_1-4 алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-.

Еще в одном предпочтительном варианте изобретение включает соединения Формулы Ia или их фармацевтически приемлемую соль, где R² обозначает

МЕТОДЫ БИОЛОГИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ

Ожидается, что соединения Формулы (I) обладают способностью ингибировать γ-секретазную активность. Для обнаружения γ-секретазной активности требуются анализы, которые позволяют надежно, точно и удобно практически обнаруживать продукты расщепления с помощью γ-секретазы, в особенности Аβ. Ингибирование γ-секретазной активности соединениями по данному изобретению демонстрируется с помощью анализов на такую активность, например анализов, описанных ниже. Анализами по определению такой активности показано, что соединения, входящие в объем настоящего изобретения, блокируют активность γ-секретазы. Соединения, охватываемые данным изобретением также будут применимы в качестве стандартов и реагентов при определении способности потенциальных фармацевтических соединений ингибировать (блокировать, подавлять) Аβ продукцию. Их следует включать в промышленные наборы, содержащие соединение по данному изобретению.

In vitro анализ связывания для идентификации ингибиторов γ-секретазы.

Для идентификации молекул, которые блокируют связывание меченного радиоактивной меткой ингибитора γ-секретазы и, следовательно, блокируют γ-секретазную активность, можно применять конкурентные анализы связывания. Например, [³H]-соединение А можно использовать для анализов связывания с мембранами ТНР-клеток (Seiffert, D.; Bradley, J. et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 34086-34091). Соединение А представляет собой (2R,3S) N1-[(3S)-гексагидро-1-(3-феноксибензил)-2-оксо-1Н-азепин-3-ил]-2-(2-метилпропил)-3-(пропил)бутандиамин, синтез которого описан в Патенте США 6331408 (12/18/2001); опубликованной Международной заявке РСТ WO 00/28331; опубликованной Международной заявке РСТ WO 00/07995 и в статье Seiffert, D., Bradley, J. et al., J. Biol. Chem. 2000, 275. 34086-34091.

Для этих анализов ТНР-1 клетки выращивают в спин-культурах в среде RPMI 1640, содержащей L-глутамин и 10 мкМ β-меркаптоэтанола, до плотности 5×10⁵ клеток/мл. Клетки собирают центрифугированием, клеточный осадок быстро замораживают в смеси сухой лед/этанол и до использования хранят при -70°С. Осадок, примерно 2×10⁴ ТНР-клеток гомогенизируют в гомогенизаторе Brinkman Polytron в позиции 6 в течение 10 сек. Гомогенат центрифугируют при 48000×g в течение 12 минут и полученный осадок отмывают, повторяя гомогенизацию и центрифугирование. Конечный клеточный осадок снова суспендируют в буфере, получая концентрацию белка около 0,5 мг/мл. Анализы начинают, добавляя 150 мкл мембранной суспензии в 150 мкл буфера для проведения анализа, содержащего 0,064 мкКи радиоактивного лиганда и различные концентрации немеченых соединений. Анализы связывания выполняют в двойном повторе в полипропиленовых 96-луночных планшетах с конечным объемом 0,3 мл, содержащим 50 мМ Hepes, pH 7,0, и 5% диметилсульфоксида. Неспецифическое связывание определяют, используя инкубацию с 300 нМ соединения A (Seiffert, D.; Bradley, J. et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 34086-34091). После инкубации при 23°С в течение 1,3 час связанный лиганд отделяют от свободного меченого лиганда фильтрованием через GFF стеклянные фильтры, предварительно смоченные 0,3% раствором полимера этиленимина. Фильтры трижды промывают ледяным забуференным фосфатом физиологическим раствором, pH 7,0, содержащим 0,1% Triton Х-100. Связанную с фильтром радиоактивность измеряют сцинтилляционным счетчиком. Затем определяют значения IC₅₀ и используют их для вычисления значений K_i, используя поправку Ченга-Прусофта (Cheng-Prusoft) для значений IC₅₀. Соединения оценивают как активные ингибиторы γ-секретазы, если значения K_i меньше 10 мкМ.

Примеры результатов, полученных при анализе соединений по изобретению вышеописанным способом, даны в таблице 1. В таблице ингибирующая концентрация (IC₅₀) ниже или равная 50 нМ обозначается +++; ингибирующая концентрация 50-500 нМ обозначается ++; ингибирующая концентрация 500-10000 нМ обозначается +.

ТАБЛИЦА 1. Примеры активности в in vitro анализе связывания
ПРИМЕР	ОЦЕНКА АКТИВНОСТИa
96	+++
123	+++
159	+++
315	++
341	++
357	++
362	+++
365	+++
366	+++
367	+
376	++
379	+++
385	+++
389	+++
394	+++
403	++
405	+++
408	+
409	++
437	+++
441	+++
443	++
445	+++
447	+++
450	++
451	+
452	++
457	++
464	+
474	+++
476	+++
479	++
486	+++
а Активность на основе значений IC50: +++=<50 нМ ++=50-500 нМ +=>500 нМ и <10000 нМ

In vitro идентификация ингибитора γ-секретазы. основанная на образовании Аβ из мембранных препаратов

Выделенная мембранная фракция, которая содержит функционально активную γ-секретазу и β-АРР субстраты, может генерировать продукты расщепления с помощью γ-секретазы, включая Аβ (Roberts, S.B.; Hendrick, J. P.; Vinitsky, A.; Lewis, М.; Smith, D.W.; Pak, R. Опубликованная Международная заявка РСТ WO 01/0175435; Fechteler, K.; Kostka, М.; Fuchs, М. Патентная заявка ФРГ 99-19941039; Shearman, M.; Beher, D. et al., Biochemistry, 2000, 39, 8698-8704; Zhang, L.; Song, L. et al., Biochemistry 2001, 40, 5049-5055). Выделенную мембранную фракцию можно получать из человеческой клеточной линии, такой как HeLa или Н4, которые трансфицируют при использовании β-АРР дикого типа или мутантных форм β-АРР, или химерной конструкции человеческая щелочная фосфатаза-β-АРР и которые стабильно экспрессируют высокие уровни субстратов γ-секретазы. Эндогенная γ-секретаза, присутствующая в выделенных мембранах, приготовленных при 0-4°С, расщепляет β-АРР субстраты, когда температура мембран поднимается от 0-4°С до 37°С. Обнаружение продуктов расщепления, включая Аβ можно контролировать стандартными методами, такими как иммунопреципитация (Citron, M.; Diehl, T.S. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1996, 93, 13170-13175), Вестерн-блоттинг (Klafki, H.-W.; Ambramowski, D. et al., J. Biol. Chem., 1996, 271, 28655-28659), твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA ), как показано Seubert, P.; Vigo- Pelfrey, С. et al., Nature, 1992, 359, 325-327, или предпочтительным методом, используя времяразрешающий флуоресцентный анализ гомогенного образца, содержащего мембраны и Aβ (Roberts, S.B.; Hendrick, J.P.; Vinitsky, A.; Lewis, M.; Smith, D.W.; Pak, R. Опубликованная Международная заявка PCT WO 01/0175435; Shearman, M.; Beher, D. et al., Biochemistry, 2000, 39, 8698-8704). Аβ в гомогенном образце, содержащем мембраны, можно обнаружить времяразрешающим флуоресцентным анализом с двумя антителами, которые распознают различные эпитопы Аβ. Одно из антител распознает эпитоп, который присутствует в Аβ, но отсутствует во фрагментах предшественника; предпочтительно антитело связывает карбоксильный конец Aβ, образующийся при расщеплении γ-секретазой. Второе антитело связывается с любым другим эпитопом, присутствующим в Аβ. Например, известны антитела, которые связываются с N-концевой областью (например, 26D6-B2-B3 ^® SIBIA Neurosciences, La Jolla, CA) или связывается с С-концом Аβ пептида. Антитела метят парой флуоресцентных аддуктов, которые переносят флуоресцентную энергию, когда аддукты оказываются в тесной близости в результате связывания N- и С- концов или концевых областей Аβ. Отсутствие флуоресценции является показателем отсутствия продуктов расщепления в результате ингибирования γ-секретазы. Анализ выделенной мембраны можно использовать для идентификации агентов-кандидатов, которые ингибируют активность расщепления γ-секретазой и продукцию Аβ.

Для анализа мембран обычно требуется 45 мкг мембранного белка на лунку в 96- или 384-луночном формате. Мембраны в нейтральном буфере объединяют с испытуемым соединением и от 0-4°С доводят до 37°С. Агенты для испытания могут, как правило, состоять из синтетических соединений, вторичных метаболитов из экстрактов, полученных при бактериальной или грибковой ферментации, или из экстрактов образцов наземных и морских растений. Все синтетические агенты сначала подвергают скринингу при дозах 10-100 мкМ или, в случае экстрактов, при достаточном разведении, чтобы свести к минимуму цитотоксичность. Инкубация мембран с тестируемым агентом продолжается примерно 90 минут, после этого флуоресцентно меченые антитела добавляют в каждую лунку для количественного определения Аβ. Обнаружение и расчет Аβ с помощью времяразрешающего флуоресцентного анализа описаны в других источниках (Roberts, S.B.; Hendrick, J.P.; Vinitsky, A.; Lewis, M.; Smith, D.W.; Pak, R. Опубликованная Международная заявка PCT WO 01/0175435; Shearman, M.; Beher, D. et al. Biochemistry, 2000, 39, 8698-8704). Результаты получены анализом планшета на микропланшетном ридере флуоресценции и сравнением с модельными мембранами и образцами, в которые добавлены известные количества Аβ для построения стандартной кривой концентраций. Позитивно действующим соединением является такое, которое ингибирует Аβ относительно контрольного образца, по меньшей мере, на 50% при начальной исследуемой концентрации. Если обнаружено, что соединение является активным, тогда проводят эксперимент по изучению эффекта дозы с целью определить самую низкую дозу соединения, необходимую для выявления ингибирования продукции Аβ. Соединения оценивают как активные ингибиторы γ-секретазы, если значения К_i ниже 10 мкМ.

Примеры результатов, полученных при анализе соединений по изобретению вышеописанным способом, даны в таблице 2. В таблице ингибирующая концентрация (IC₅₀), ниже или равная 50 нМ, обозначается +++; ингибирующая концентрация 50-500 нМ обозначается ++; ингибирующая концентрация 500-10000 нМ обозначается +.

ТАБЛИЦА 2. Примеры активности в in vitro анализе, основанном на ингибировании образования Аβ в культивированных клетках
ПРИМЕР	ОЦЕНКА АКТИВНОСТИa
1	+++
2	+++
3	+++
4	+++
5	+++
6	+++
7	+++
8	+++
9	+++
10	+++
11	+++
12	+++
13	+++
14	+++
15	+++
16	+++
17	+++
18	++
19	++
20	++
21	+++
22	+++
23	+++
24	+++
25	+++
26	+++
27	++
28	++
29	+++
30	++
31	++
32	+++
33	+++
34	+++
35	++
36	++
37	+++
38	+++
39	+++
40	+++
41	+++
42	+++
43	+++
44	+++
45	+++
46	+++
47	+++
48	+++
49	++
50	+++
51	+++
52	+++
59	++
61	+++
83	+
85	+
87	+++
89	+++
95	+++
103	+++
113	++
122	+
133	+++
153	++
а Активность на основе значений IC50: +++=<50 нМ ++=50-500 нМ +=>500 нМ и <10000 нМ

In vitro идентификация ингибитора γ-секретазы на основании ингибирования образования Аβ в культивированных клетках

Культивированные человеческие клеточные линии, такие как клетки НЕК293 и Н4, которые экспрессируют АРР и γ-секретазную активность, или трансфицированные клеточные линии, сверхэкспрессирующие АРР дикого типа, мутантный АРР или химерные белки АРР, секретируют в культуральную среду Аβ пептиды, которые можно количественно определить, как описано в предыдущей технике (Dovey, H., John, V. et al., J. Neurochem. 2001, 76, 173-181). Инкубация этих культивированных клеток с ингибиторами γ-секретазы понижает продукцию Аβ пептидов. Например, клетки Н4, стабильно трансфицированные с целью сверхэкспрессии химерного (слитого) белка HPLAP-APP, описанного выше, выращивают, как указано ранее, выделяют и доводят до уровня 2×10⁵ клеток/мл. Затем 100 мкл полученной суспензии добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета. Через 4 часа среду удаляют и заменяют на 100 мкл бессывороточной среды, содержащей тестируемое соединение в различных разведениях. Затем планшеты инкубируют в течение 18 час при 37°С и отбирают аликвоту 100 мкл супернатанта тканевой культуры для определения уровней Аβ методом времяразрешающего флуоресцентного анализа гомогенного образца, как описано выше. Или же можно применять другие описанные выше методы определения Аβ. Степень (величину) ингибирования Аβ используют для расчета величины IC₅₀ для испытуемого соединения.

Соединения по данному изобретению считаются активными, если при тестировании вышеуказанным методом анализа величина IC₅₀ меньше 50 мкМ.

Примеры результатов, полученных при анализе соединений по изобретению вышеописанным способом, даны в таблице 3. В таблице ингибирующая концентрация (IC₅₀), ниже или равная 50 нМ, обозначается +++; ингибирующая концентрация 50-500 нМ обозначается ++; ингибирующая концентрация 500-10000 нМ обозначается +.

ТАБЛИЦА 3. Примеры активности в in vitro анализе, основанном на ингибировании образования Аβ в культивированных клетках
ПРИМЕР	ОЦЕНКА АКТИВНОСТИa
1	+++
5	+++
19	++
26	+++
38	+++
41	+++
51	+++
55	+++
61	+++
72	+++
80	+++
89	+++
96	+++
101	+++
123	+++
127	++
143	+++
147	++
158	+++
171	++
193	+++
203	+++
205	++
207	+++
245	+++
246	+++
249	++
254	+++
256	+++
260	+++
272	+++
280	++
282	+++
288	++
301	++
302	+++
321	++
322	+++
329	+++
330	++
331	+
340	+++
341	++
342	+++
349	+++
352	++
358	++
359	+++
366	+++
367	+
378	+++
383	+++
394	+++
403	++
416	+++
418	+++
424	+++
433	+++
434	+++
439	+++
442	+++
472	+++
481	+
492	++
495	+++
497	+++
а Активность на основе значений IC50: +++=<50 нМ ++=50-500 нМ +=>500 нМ и <10000 нМ

Показано, что значение IC₅₀ соединений по данному изобретению составляет менее 10 мкМ в одном или во всех вышеописанных анализах. Следовательно, соединения Формулы I или их фармацевтические композиции пригодны для лечения, смягчения или устранения заболеваний или других нарушений, ассоциированных с ингибированием β-амилоидного пептида.

Помимо расщепления АРР, γ-секретаза расщепляет другие субстраты, включая семейство трансмембранных рецепторов Notch (обзор в: Selkoe, D. Physiol. Rev. 2001, 81, 741-766; Wolfe, M. J. Med. Chem. 2001, 44, 2039-2060); белок, родственный ЛПНП (LDL) рецептору (May, P, Reddy, Y.K, Herz, J. J. Biol. Chem. 2002, 277, 18736-18743); ErbB-4 (Ni. C.Y, Murphy, M.P., Golde, Т.Е., Carpenter, G. Science 2001, 294, 2179-2181); Е-кадхерин (Marambaud, P., Shioi, J. et al., EMBO J. 2002, 21, 1948-1956) и CD44 (Okamoto, I., Kawano, Y. et al., J. Cell Biol. 2001, 155, 755-762). Если ингибирование расщепления не-АРР субстратов оказывает нежелательное действие на людей, тогда заданные ингибиторы γ-секретазы преимущественно ингибируют расщепление АРР, связанное с нежелательньми субстратами. Расщепление трансмембранных рецепторов семейства Notch можно контролировать непосредственно, измеряя количество продукта расщепления, или опосредованно, определяя действие продукта расщепления на транскрипцию (Mizutani, Т., Tanigutchi, Y. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2001, 98, 9026-9031).

In vivo определение уменьшения уровня Аβ с помощью ингибиторов γ-секретазы.

In vivo анализы применимы для демонстрации ингибирования γ-секретазной активности. В этих анализах для демонстрации пригодности ингибиторов γ-секретазы можно использовать животных, таких как мыши, которые экспрессируют нормальные уровни АРР и, следовательно, Aβ (Dovey, H., John, V. et al., J. Neurochem. 2001, 76, 173-181). В этих анализах ингибиторы γ-секретазы вводят животным и выше описанными методами осуществляют мониторинг уровней Аβ во многих отделах, таких как плазма, спинно-мозговая жидкость (ликвор) и экстракты мозга. Например, мышам Tg2576, сверхэкспрессирующим человеческий АРР, через желудочный зонд перорально вводят инибиторы γ-секретазы в дозах, которые вызывают поддающееся измерению снижение уровня Аβ, обычно менее 100 мг/кг. Через три часа после введения дозы собирают образцы плазмы, мозга и CSF (ликвор), замораживают в жидком азоте и хранят при -80°С до момента проведения анализа. Для обнаружения Аβ плазму разводят 15-кратно в PBS с 0,1% Chaps с ингибиторами протеаз (5 мкг/мл лейпептина, 10 мкг/мл апротинина, 1 мМ фенилметилсульфонилфторида, 1 мкМ пепстатина). Ткани мозга гомогенизируют в 1% Chaps с ингибиторами протеаз, используя 24 мл раствора/г ткани мозга. Затем гомогенаты центрифугируют при 100000×g в течение 1 час при 4°С. Затем в 10 раз разбавляют полученные супернатанты в 1% Chaps с ингибиторами протеаз. Уровни Аβ в плазме, CSF и лизате мозга измеряют с помощью времяразрешающего флуоресцентного анализа гомогенного образца или одним из других вышеописанных методов.

Инибитор γ-секретазы считается активньм в одном из описанных выше in vivo анализов, если введение его в дозе 100 мг/кг снижает уровень Аβ, по меньшей мере, на 50%.

Следовательно, соединения Формулы I или их фармацевтические композиции применимы для лечения, смягчения или устранения расстройств или других нарушений, ассоциированных ингибированием β-амилоидного пептида.

В другом варианте данное изобретение охватывает фармацевтические композиции, содержащие, по меньшей мере, одно соединение Формулы I в комбинации с фармацевтическим адъювантом, носителем или разбавителем.

Еще в одном варианте данное изобретение относится к способу ингибирования β-амилоидного пептида в организме нуждающегося в этом млекопитающего, заключающемуся во введении указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I или его нетоксической(ого) фармацевтически приемлемой(ого) соли, сольвата или гидрата.

Еще в одном варианте настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Альцгеймера и синдрома Дауна у нуждающегося в этом млекопитающего, который заключается во введении указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I или его нетоксической(ого) фармацевтически приемлемой(ого) соли, сольвата или гидрата.

Для терапевтического применения фармакологически активные соединения Формулы I обычно вводят в виде фармацевтической композиции, содержащей в качестве одного основного активного ингредиента (или одного из основных активных ингредиентов), по меньшей мере, одно такое соединение в сочетании с твердым или жидким фармацевтически приемлемым носителем и необязательно с фармацевтически приемлемыми адъювантами и эксципиентами, используя стандартные и удобные методы.

Фармацевтические композиции включают подходящие лекарственные формы для перорального, парентерального (включая подкожный, внутримышечный, интрадермальный и внутривенный), бронхиальный или назальный способы применения. Так, если используют твердый носитель, препарат может быть в виде таблетки, может быть помещен в твердую желатиновую капсулу в виде порошка или гранулы, или в виде пастилки или лепешки. Твердый носитель может содержать соответствующие эксципиенты, такие как связующие, наполнители, смазки для таблетирования, вещества, способствующие измельчению, увлажняющее средство и т.п. Таблетку, при желании, можно обычными методами покрыть оболочкой. Если применяют жидкий носитель, препарат может быть в виде сиропа, эмульсии, мягкой желатиновой капсулы, препарата со стерильным носителем для инъекций, водной или неводной суспензии в жидкости, или может быть в виде твердого продукта, который разводят в воде или другом подходящем носителе перед применением. Жидкие препараты могут содержать обычные добавки, такие как суспендирующие агенты, эмульгаторы, увлажняющие агенты, неводный носитель (включая пищевые масла), консерванты, а также вещества, придающие вкус и запах, и/или красители. Для парентерального введения носитель обычно содержит стерильную воду, по меньшей мере, в основном, хотя можно применять физиологические растворы, растворы глюкозы и т.п. Можно применять инъецируемые суспензии, в этом случае можно использовать обычные суспендирующие агенты. В лекарственные формы для парентерального введения можно также добавлять стандартные консерванты, буферизующие агенты и т.п. Фармацевтические композиции получают обычными методами, подходящими для требуемого препарата, содержащего соответствующие количества активного ингредиента, то-есть соединения Формулы I по изобретению. См., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 17^th edition, 1985.

Дозировка соединений Формулы I для достижения терапевтического эффекта зависит не только от таких факторов как возраст, вес и пол пациента и способ применения, но также от нужной степени β-АР ингибирования и эффективности конкретного соединения, применяемого для конкретного нарушения при рассматриваемом заболевании. Также принимается во внимание, что можно проводить лечение, используя дозировку конкретного соединения путем введения разовой дозы, и что разовую дозу может корректировать специалист в данной области техники, учитывая относительный уровень активности. Решение о том, какую конкретную дозу применять (и сколько раз в день), находится в компетенции лечащего врача, и эти значения можно менять, подбирая дозу к конкретным условиям настоящего изобретения, чтобы добиться нужного терапевтического эффекта.

Подходящая доза соединения Формулы I или его фармацевтической композиции для млекопитающего, включая человека, страдающего или предположительно страдающего любым нарушением, связанным с продукцией β-АР по данному описанию, как правило, составляет: ежедневная доза около 0,05-10 мг/кг и предпочтительно около 0,1-2 мг/кг при парентеральном введении. При пероральном приеме интервал доз составляет около 1-75 мг/кг и предпочтительно 0,1-10 мг/кг веса тела. Активный ингредиент предпочтительно вводят в виде одинаковых доз от одного до четырех раз в день. Однако обычно принимают малую дозу и дозу постепенно увеличивают, пока не определят оптимальную для проходящего лечение хозяина дозу. В соответствии с устоявшейся клинической практикой предпочтительным является вводить рассматриваемые соединения в такой концентрации, которая оказывает эффективное антиамилоидное действие, не вызывая каких-либо вредных или неблагоприятных побочных эффектов. Понятно однако, что действительное количество вводимого соединения определяется врачом в свете релевантных обстоятельств, включая подлежащее лечению состояние, выбранное для введения соединение, выбранный способ применения, возраст, вес и индивидуальную реакцию пациента и тяжесть симптомов у пациента.

Нижеприведенные примеры даны в качестве иллюстрации, но никоим образом не претендуют на ограничение изобретения, поскольку возможны многие варианты изобретения, не отходящие от его сущности.

ОПИСАНИЕ КОНКРЕТНЫХ ВАРИАНТОВ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В приведенных ниже примерах все температуры даны в градусах по Цельсию. Температуры плавления определяют в капилляре на приборе Thomas Scientific Unimelt и не корректируют. Спектры ядерного магнитного резонанса (¹Н ЯМР) регистрируют на спектрометрах Bruker Avance 300, Bruker Avance 400 или Bruker Avance 500. Все спектры сняты в указанных растворителях и химические сдвиги даны в единицах в шкале δ в более слабом поле относительно внутреннего стандарта тетраметилсилана (ТМС, TMS), а константа спин-спинового взаимодействия дана в герцах (Гц).

Мультиплетность и характер сигналов обозначают следующим образом: с (s), синглет; д (d), дублет; т (t), триплет; kв (q), квартет; м (m), мультиплет; уш (br), уширенный сигнал; дд (dd), дублет дублетов; уш. д (br d), уширенный дублет; дт (dt), дублет триплетов; уш. с (br s), уширенный синглет; дкв (dq), дублет квартетов. Инфракрасные (ИК) спектры в пленке (между пластинами) из бромистого калия (КВг) или хлористого натрия в области от 4000 до 400 см^-1 снимают на спектрометре Jasco FT/IR-410 или Perkin Elmer 2000 FT-IR, калиброванном по полосе поглощения пленки из полистирола при 1601 см^-1, и выражают в обратных сантиметрах (см^-1). Оптическое вращение [α]_D определяют на поляриметре Rudolph Scientific Autopol IV в указанных растворителях; концентрации указаны в мг/мл. Масс-спектры низкого разрешения (MS) и среднюю молекулярную массу (MH⁺) или (М-Н)⁺ регистрируют на приборе Finnegan SSQ7000. Масс-спектры высокого разрешения регистрируют на приборе Finnegan MAT900. Хроматомасс-спектрометрию (жидкостная хроматография (LC)/масс-спектр) осуществляют на жидкостном хроматографе Shimadzu LC, подсоединенном к масс-спектрометру Water Micromass ZQ.

Используются следующие сокращения: ДМФА (DMF) (диметилформамид); ТГФ (тетрагидрофуран); ДМСО (диметилсульфоксид), Leu (лейцин); ТФК (TFA) (трифторуксусная кислота); DAST [(диэтиламино)сульфур трифторид], ЖХВД (жидкостная хроматография высокого давления); rt (комнатная температура); водн. (aq.) (водный).

Примеры получения соединений по Реакционной схеме 1

Амид (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты:

К раствору (D)-лейцинамида гидрохлорида (0.25 г, 1.5 ммоль) и Et₃N (0.43 мл, 3.0 ммоль) в СН₂Cl₂ (150 мл) добавляют 4-хлорбензолсульфонилхлорид (380 мг, 1.8 ммоль). Полученный раствор перемешивают при rt в течение 18 час. Затем реакционную смесь разбавляют СН₂Cl₂ (200 мл) и промывают Н₂О, 0.5 N HCl, рассолом и сушат MgSO₄, получают титульное соединение (410 мг) в виде белого твердого вещества с выходом 90%. MS (ESI, ионизация электрораспылением), (М+Н)⁺ 305.2; ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) δ 7.77 (д, 2Н, J=8.7), 7.62 (д, 2Н, J=8.7), 6.90 (уш. с, 1Н), 3.67 (м, 1Н), 1.54 (м, 1Н), 1.31 (м, 2Н), 0.81 (д, 3Н, J=7.0), 0.71 (д, 3Н, J=7.0).

Метод А превращения III в I

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-метоксибензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 1)

Амид (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты (300 мг, 1 ммоль), К₂СО₃ (170 мг, 1.2 ммоль) и 4-метоксибензилхлорид (170 мг, 1,1 ммоль) в ДМФА (25 мл) нагревают при 60°С в течение 18 час. Затем в реакционную смесь добавляют EtOAc (150 мл) и промывают Н₂O, рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают, получают сырой продукт в виде белого воска. Дополнительная очистка флеш-хроматографией (SiO₂, 25% EtOAc/смесь гексанов) дает титульное соединение (297 мг) в виде белого твердого соединения с выходом 70%. [α]_D=+44.2 (с 1.00, МеОН); MS (ESI), (М-Н)^- 422.9; ¹H ЯМР(CDCl₃) δ 7.63 (д, 2Н, J=7.0), 7.42 (д, 2Н, J=7.0), 7.25 (д, 2Н, J=8.0), 6.79 (д, 2Н, J=8.0), 6.25 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.36 (dd, 2H, J=50,15), 4.26 (т, 1Н, J=7.2), 3.78 (с, 3Н), 1.83 (с, 1Н), 1.18-1.34 (м, 2Н), 0.75 (д, 3Н, J=7.0), 0.67 (д, 3Н, J=7.0); IR (KBr) 3480, 2959, 1693, 1674, 1514, 1333, 1158 см^-1.

Метод В превращения III в I

Метиловый эфир 6-диметиламиноникотиновой кислоты

Раствор метилового эфира 6-хлорникотиновой кислоты (4.0 г, 23 ммоль) в растворе диметиламин/МеОН (2 М, 80 мл, 160 ммоль) в сосуде под давлением перемешивают при 95°С в течение 2 час, охлаждают до rt и упаривают. Остаток растворяют в EtOAc (250 мл), промывают водой (2×150 мл), сушат Na₂SO₄ и упаривают, получают титульное соединение в виде твердого вещества желтовато-коричневого цвета (4.1 г, 98%). MS (ESI), (М+H)⁺ 181.24; ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 8.79 (с, 1Н), 7.99 (д, 1Н. J=9.2), 6.45 (д, 1Н, J=9.2), 3.85 (с, 3Н), 3.15 (с, 6Н).

2-Диметиламино-5-гидроксиметилпиридин

Раствор метилового эфира 6-диметиламиноникотиновой кислоты (4.14 г, 23.0 ммоль) в сухом эфире (80 мл) при 0°С обрабатывают литийалюмогидридом (1 М в эфире, 20 мл, 20 ммоль). Смесь перемешивают при rt в течение 0.5 час, снова охлаждают до 0°С и медленно добавляют нас. водн. NaHCO₃ (10 мл). Полученную смесь перемешивают при rt в течение 0.5 час, фильтруют и промывают эфиром. Объединенные фильтраты сушат над Na₂SO₄ и упаривают, получая титульное соединение в виде воскообразного вещества бежевого цвета (3.5 г, 100%). MS (ESI), (М+H)⁺ 153.4; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8.06 (д, 1Н, J=2.4), 7.47 (дд, 1Н, J=2.4, 8.8), 6.45 (д, 1Н, J=8.8), 4.50 (с, 2Н), 3.06 (с, 6Н), 1.98 (уш. с, 1Н).

Соль ТФК (TFA) и амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(2-диметиламинопиридин-5-ил)амино]-4-фтор-4-метилпентановой кислоты (Пример 459)

К мутному раствору амида (2R)-2-[(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты (полученного по Реакционной схеме 20 или из метилового эфира γ-фтор-D-Leu-OH, Papageorgiou et. al., Bioorg. & Med. Chem. Lett. 1994, Vol.4, p.p.267-272; 0.060 u, 0.18 ммоль), 2-диметиламино-5-гидроксиметилпиридина (71 мг, 0.46 ммоль), трифенилфосфина (122 мг, 0.464 ммоль) в CH₂Cl₂ (9.5 мл) при rt по каплям прибавляют диизопропиловый эфир азодикарбоновой кислоты (75 мкл, 0.46 ммоль). Образующийся бледно-желтый раствор перемешивают при rt в течение 2 час и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в метаноле и очищают обращенно-фазовой препаративной ЖХВД (YMC S5, ODS, МеОН-вода-ТФК), получают титульное соединение в виде белой пены (90 мг, 85%). MS (ESI), (M+H)⁺ 457.2; ¹Н ЯМР (CDCL₃) δ 8.11 (с, 1Н), 7.95 (д, 1Н, J=9.6), 7.77 (д, 2Н, J=6.8), 7.51 (д, 2Н, J=6.8), 6.76 (д, 2Н, J=9.6), 6.34 (с, 1Н), 6.02 (с, 1Н), 4.58 (уш. д, 1Н, J=8.4), 4.46 (д, 1Н, J=16.0), 4.06 (д, 1Н, J=16), 3.29 (с, 6Н), 2.50 (м, 1Н), 1.39 (м, 1Н), 1.25 (д, 3Н, J=22.0), 1.17 (д, 3Н, J=22.0).

Примеры применения Реакционной схемы 1 на твердом носителе

Связанный с полимером (иммобилизованный на полимере) D-Leu-NH₂

FMOC защищенную амидную смолу Ринка (30 г, 0.61 ммоль/г, 18 ммоль) обрабатывают раствором пиперидин/ДМФА (250 мл). Смесь встряхивают при rt в течение 24 час, сливают жидкость, промывают ДМФА (5×200 мл), СН₂Cl₂ (5×200 мл) и сушат в вакууме. Затем смолу обрабатывают FMOC-D-Leu-OH (22 г, 62 ммоль), 1-гидроксибензотриазола гидратом (2.5 г, 18 ммоль), 1,3-диизопропилкарбодиимидом (9.8 мл, 62 ммоль) и ДМФА (250 мл). Смесь встряхивают в течение 20 часов, жидкость декантируют, промывают ДМФА (4×200 мл), смесью ДМФА-вода (1:1, 3×200 мл), ДМФА (3×200 мл), МеОН (3×200 мл), CH₂Cl₂ (3×200 мл) и сушат. Завершение реакции и нанесения (нагрузки) связанного со смолой FMOC-D-Leu-NH₂ (0.56 ммоль/г) определяют, обрабатывая 52 мг смолы 10 об.% ТФК/СН₂Cl₂ (2 мл), получают 11 мг FMOC-D-Leu-NH₂. Связанный со смолой FMOC-D-Leu-NH₂ депротекционируют 20 об.% раствором пиперидин/ДМФА (250 мл), получают связанный с полимером (иммобилизованный на полимере) D-Leu-NH₂ (20 г).

Связанный с полимером амид (R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты

Полученный выше связанный с полимером (иммобилизованный на полимере) D-Leu-NH₂ (20 г) обрабатывают СН₂Cl₂ (150 мл), пиридином (100 мл) и 4-хлорфенилсульфонилхлоридом (20.0 г, 94.8 ммоль). Смесь встряхивают в течение 24 час, декантируют, промывают ДМФА (4×200 мл), CH₂Cl₂ (4×200 мл) и упаривают, получая связанный с полимером амид (R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты в виде желтого полимера (22 г). Завершение реакции и нагрузки смолы (0.57 ммоль/г) определяют, обрабатывая 50 мг смолы 10 об.% ТФК/СН₂Cl₂ (2 мл), получают 8.7 мг амида (R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты.

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфониламино)-N-(4-метилбензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 60)

К смеси иммобилизованного на полимерной смоле амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфониламино)амино]-4-метилпентановой кислоты (0.45 ммоль/г, 50.0 мг, 0.0225 ммоль), 4-метилбензилбромида (44 мг, 0.24 ммоль) и ДМФА (1.5 мл) прибавляют 2-трет-бутиламино-2-диэтиламино-1,3-диметилпергидро-1,2,3-диазафосфорин (0.10 мл, 0.34 ммоль). Образующуюся смесь встряхивают при rt в течение 2 дней, затем декантируют и промывают ДМФА (4×2 мл), МеОН (4×2 мл) и СН₂Cl₂ (4×2 мл).

Затем смолу обрабатывают 10 об.% раствором ТФК/СН₂Cl₂. Смесь встряхивают 1 час, фильтруют и промывают CH₂Cl₂ (2×0.5 мл). Объединенные фильтраты упаривают в вакууме и получают титульное соединение в виде твердого вещества бежевого цвета (7.7 мг, 100%, ЖХВД чистота >95%). HRMS (масс-спектрометрия высокого разрешения) (ESI), (М-Н)^- для C₂₀H₂₄SClN₂O₃, вычислено 407.1206, найдено 407.1201; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.64 (д, 2Н, J=8.0), 7.44 (д, 2Н, J=8.0), 7.22 (д, 2Н, J=8.0), 7.08 (д, 2Н, J=8.0), 6.29 (уш. с, 1Н), 5.34 (уш. с, 1Н), 4.53 (д, 1Н, J=15.2), 4.34 (д, 1Н, J=15.2), 4,27 (т, 1Н, J=7.2), 2.32 (с, 3Н), 1.84 (м, 1Н), 1.30 (м, 1Н), 1.21 (м, 1Н), 0.75 (д, 3Н, J=6.8), 0.67 (д, 3Н, J=6.8); IR (KBr) 3467, 3367, 2956, 2869, 1694; 1670, 1340, 1160 см^-1.

Примеры применения Реакционной схемы 2

Амид (2R)-2-(4-метоксибензиламино)-4-метилпентановой кислоты

Раствор D-лейцинамида гидрохлорида (2.8 г, 16.8 ммоль) и п-анизальдегида (2.29 г, 16.8 ммоль) в метаноле (150 мл) обрабатывают безводным ZnCl₂ (538 мг, 5 ммоль). Затем образующуюся суспензию обрабатывают NaCNBH₃ (1.05 г, 16.8 ммоль), прибавляя его частями, и кипятят в течение 3 час. Реакционную смесь охлаждают до rt, прибавляют насыщенный раствор NaHCO₃ (3 мл), добавляют EtOAc (500 мл) и промывают рассолом. Упариванием получают сырой бензиламин в виде воска, который далее используют без дополнительной очистки (3.57 г, 84%). MS (ESI), (M+H)⁺ 251.4; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.20 (д, 2Н, J=6.6), 7.10 (уш. с, 2Н), 6.88 (д, 2Н, J=8.4), 5.30 (уш. с, 1Н), 3.80 (с, 3Н), 3.63 (дд, 2Н, J=4.5, 12), 1.44-1.65 (м, 3Н), 0.95 (д, 3H, J=6.3), 0.80 (д, 3Н, J=6.3).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4--метоксибензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 1)

Амид (2R)-2-[N-(4-метоксибензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (3.57 г, 14.3 ммоль) растворяют в CH₂Cl₂ (100 мл) и обрабатывают Et₃N (4.2 мл, 29 ммоль) и 4-хлорбензолсульфонилхлоридом (3.6 г, 17 ммоль) при rt в течение 18 час. Растворители отгоняют и остаток растворяют в EtOAc (500 мл). Органический раствор промывают H₂O, рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают. Затем остаток дополнительно очищают флеш-хроматографией (SiO₂, 1% MeOH/CH₂Cl₂), получая заглавное соединение (2.4 г) в виде слабо окрашенного твердого вещества с выходом 40%. MS (ESI), (M-H)^- 422.9; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.63 (д, 2Н, J=7.0), 7.42 (д, 2Н, J=7.0), 7.25 (д, 2Н, J=8.0), 6.79 (д, m, J=8.0), 6.25 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.36 (дд, 2Н, J=5.0, 15), 4.26 (т, 1Н, J=7.2), 3.78 (с, 3Н), 1.83 (м, 1Н), 1.18-1.34 (м, 2Н), 0.75 (д, 3Н, J=7.0), 0.67 (д, 3Н, J=7.0). IR (KBr) 3480, 2959, 1693, 1674, 1514, 1333, 1158 см^-1.

Пример применения Реакционной схемы 3

Амид (2R)-2-[N-(4-морфолиногексил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 25)

Раствор амида (2R)-2-[N-(4-бромгексил)-N-(4-хлорбензилсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 24; полученный, как описано на Схеме 1; 0.20 г, 0.44 ммоль), Et₃N (0.25 мл, 1.7 ммоль) и морфолина (150 мг, 1.7 ммоль) в СН₂С₂ (2 мл) перемешивают при rt в течение 18 час. Затем реакционную смесь упаривают, получают сырой белый воск (смолу), который очищают флеш-хроматографией (SiO₂, 85% EtOAc/5% смесь гексанов/10% МеОН), получая титульное соединение (112 мг) в виде белого твердого вещества с выходом 54%. MS (ESI), (М+Н)⁺ 474.4; ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) δ 7.82 (1, 2Н J=8.0), 7.64 (д, 2Н, J=8.0), 7.42 (уш. с, 1Н), 6.99 (с, 1Н), 4.25 (м, 1Н), 3.51-3.60 (уш с, 4Н), 3.18-3.41 (м, 2Н), 2.25-2.35 (уш с, 4Н), 2.27 (м, 2Н), 1.15-1.62 (м, 9Н), 0.80 (д, 6Н, J=6.0).

Пример применения Реакционной схемы 4

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-аминобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 48)

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-нитробензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Соединение из Примера 24; получено, как описано на Реакционной схеме 1; 2.8 г, 6.6 ммоль) суспендируют с 10% Pd/C (1 г) и конц. HCl (1 мл) в МеОН (100 мл) и помещают в атмосферу водорода при давлении 27.79 кПа (40 psi) на 1 час. Суспензию фильтруют через целит, а затем упаривают, получая титульное соединение в виде желто-коричневого твердого вещества (2.4 г, выход 88%). MS (ESI), (M+H)⁺ 410.1; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7 80 (д, 2Н, J=8.5), 7.63 (д, 2Н, J=8.5), 7.52 (уш. с, 1Н), 7.46 (д, 1Н, J=8.0), 7.26 (д, 1Н, J=8.0), 7.02 (уш. с, 1Н), 4.70 (дд, 2Н, J=50, 18), 4.30-4.41 (м, 1Н), 3.67 (уш. с, 2Н), 1.28-1.33 (м, 3Н), 0.86 (д, 3Н, J=7.0), 0.57 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-метиламинобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 51)

Раствор амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-аминобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 48, 400 мг, 1 ммоль), Et₃N (0.16 мл, 1.1 ммоль), диметилсульфат (139 мг, 1.1 ммоль) в 25 мл толуола перемешивают при rt в течение 18 час. Реакционную смесь упаривают, затем растворяют в EtOAc и промывают Н₂О, рассолом, сушат К₂СО₃ и упаривают, получая сырую смесь исходного и продукта. Смесь далее очищают флеш-хроматографией (SiO₂, 35% EtOAc/смесь гексанов), получая титульное соединение, 195 мг, выход 46%. MS (ESI), (М+Н)⁺ 424.1; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.65 (д, 2Н, J=8.0), 7.58 (д, 2Н, J=8.2), 7.47 (д, 2Н, J=8.0), 7.31 (д, 2Н, J=8.5), 6.24 (уш. с, 1Н), 5.16 (уш. с, 1Н), 4.50 (дд, 2Н, J=50, 17), 4.27 (т, 1H, J=10), 2.44 (м, 3Н), 1.74-1.83 (м, 1Н), 1.25-1.33 (м, 1Н), 0.93-1.01 (м, 1Н), 0.74 (д, 3Н, J=7.0), 0.63 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-диметиламинобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 65)

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-аминобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 48, 0.10 г, 0.22 ммоль) растворяют в ДМФА (5 мл). К этому раствору прибавляют йодметан (62 мг, 0.44 ммоль) и карбонат цезия (220 мг, 0.66 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 40°С в течение 18 час. Реакционную смесь выливают в EtOAc и воду. Органические вытяжки объединяют, сушат MgSO₄ и упаривают, получая остаток в виде масла. Остаток дополнительно очищают (Biotage 40S, нанесение в CH₂Cl₂, элюция 25% EtOAc/смесь гексанов), получают желтый порошок (15 мг, 16%). MS (ESI), (М+Н)⁺ 438.1; ¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 500 МГц) δ 7.74 (дд, 2Н, J=1.9, 6.7), 7.54 (дд, 2Н, J=1.9, 6.8), 7.43 (с, 1Н), 7.16 (д, 2Н, J=8.6), 7.01 (с, 1Н), 6.61 (д, 2Н, J=8.8), 4.59 (кв, 2Н, J=16, 25), 4.34 (дд, 1Н, J=5.0, 9.3), 2.85 (с, 6Н), 1.27-1.47 (м, 3Н), 0.80 (д, 3Н, J=5.9), 0.52 (д, 3H, J=6.1).

Примеры применения Реакционной схемы 5

трет-Бутиловый эфир {N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино}уксусной кислоты (Пример 46)

Амид (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты (3.00 г, 9.87 ммоль) растворяют в ДМФА (50 мл). К раствору прибавляют карбонат калия (6.0 г, 39 ммоль) и трет-бутиловый эфир бромуксусной кислоты (6.0 мл, 39 ммоль). Раствор нагревают при 70°С в течение 3 час. К раствору прибавляют EtOAc и насыщенный раствор NaHCO₃. Органические вытяжки промывают рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают. Сырой продукт в виде масла очищают далее на системе Biotage 40М (нагрузка в CH₂Cl₂, элюция в 30% EtOAc/смесь гексанов), получают белый порошок (1.2 г, 35%). MS (ESI), (M+H)⁺ 446.3; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.76 (д, 2Н, J=8.0), 7.52 (д, 2Н, J=8.0), 6.61 (уш. с, 1Н), 5.45 (с, 1Н), 4.15-4.18 (м, 1Н), 3.09-3.24 (м, 2Н), 2.50-2.58 (м, 4Н), 2.31-2.39 (м, 2Н), 1.92-1.99 (м, 1Н), 1.15-1.59 (м, 8Н), 1.00-1.04 (м, 7Н), 0.71-0.74 (м, 6Н).

{N-[(1R)-1-Карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино}уксусная кислота (Пример 59)

Трифторуксусную кислоту (15 мл) прибавляют к раствору трет-бутилового эфира {N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино}уксусной кислоты (0.50 г, 1.2 ммоль) в CH₂Cl₂ (15 мл.). Реакционную смесь перемешивают при rt в течение 4 час. Затем реакционную смесь упаривают, получают твердое вещество белого цвета (0.40 г, 92%), которое используют без дополнительной очистки. MS (ESI), (M+H)⁺ 363.1; ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 500 МГц) δ 7.90 (дд, 2Н, J=2.0, 6.8), 7.65 (дд, 2Н, J=2.0, 6.8), 7.60 (с, 1Н), 7.06 (с, 1Н), 4.32 (д, 1Н, J=18), 4.12 (т, 1Н, J=8.0), 4.02 (д, 1Н, J=18), 1.55-1.65 (м, 1Н), 1.35-1.45 (м, 2Н), 0.78 (д, 3Н, J=6.1), 0.73 (д, 3Н, J=6.1).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(циклопропилкарбамоилметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 88)

К раствору {N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино}уксусной кислоты (Пример 59, 175 мг, 0.480 ммоль), циклопропиламина (41 мл, 0.58 ммоль) в СН₂С₂ (3 мл) прибавляют 1-гидроксибензотриазол (47 мг, 0.72 ммоль) и 1,3-дициклогексилкарбодиимид (144 мг, 0.720 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 18 час при rt, а затем выливают в смесь EtOAc/вода. Органический слой отделяют, сушат MgSO₄ и упаривают, получая остаток в виде прозрачного масла. Остаток дополнительно очищают на колонке Biotage 40S (элюируют смесью 40% EtOAc в смеси гексанов), получая твердое вещество белого цвета (54 мг, 29%). MS (ESI), (M+H)⁺ 402.2; ¹H ЯМР (CDCl₃, 500 МГц) δ 7.85 (дд, 2Н, J=1.9, 8.9), 7.50 (дд, 2Н, J=2.0, 8.7), 7.40 (уш. с, 1Н), 6.55 (уш. с, 1Н), 6.30 (уш. с, 1Н), 4.23 (дд, 1Н, J=2.9, 8.9), 3.92 (д, 1Н, J=17), 3.83 (д, 1Н, J=17), 2.68-2.73 (м, 1Н), 1.75-1.83 (м, 1Н), 1.50-1.57 (м, 1Н), 1.40-1.49 (м, 1Н), 0.88 (д, 3Н, J=6.4), 0.87 (д, 3Н, J=6.7), 0.80 (д, 2Н, J=7.0), 0.51 (т, 2Н, J=4.0).

Примеры применения Реакционной схемы 6

4-{[N-[(1R)-1-Карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензойная кислота (Пример 89)

Соединение из Примера 61 [метиловый эфир [4-{[N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензойной кислоты, 354 мг, 0.782 ммоль] растворяют в метаноле (4 мл). Прибавляют 5 N раствор NaOH (1 мл), а затем ТГФ, достаточное количество для того, чтобы раствор был гомогенньм (1 мл). Через 1 час прибавляют дополнительную аликвоту 5 N NaOH (1 мл) и продолжают перемешивание еще в течение 2.5 час. Раствор подкисляют до рН 2, добавляя 1 N HCl, и экстрагируют CHCl₃ (2х). Объединенные органические вытяжки сушат (Na₂SO₄) и упаривают, получая твердое вещество белого цвета (343 мг, 100%). MS (ESI), (M+H)⁺ 439.17; ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.91 (д, 2Н, J=8.2), 7.81-7.84 (м, 3Н), 7.56 (д, 2Н, J=8.6), 7.49 (д, 2Н, J=8.2), 6.55 (уш. с, 1Н), 5.10 (д, 1Н, J=15.4), 4.23 (дд, 1Н, J=4.6, 9.7), 4.05 (д, 1H,J=15.4), 2.04-2.14 (м, 1Н), 1.20-1.31 (м, 1Н), 0.80-0.89 (м, 1Н), 0.74 (д, 3Н, J=6.6), 0.68 (д, 3Н, J=6.6).

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(морфолин-4-карбонил)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 101)

К раствору 4-{[N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензойной кислоты (50.0 мг, 0.114 ммоль) в ДМФА (0.3 мл) прибавляют морфолин (12.9 мг, 0.148 ммоль), а затем 1-гидроксибензотриазол (18.5 мг, 0.137 ммоль), 1-(3-диэтиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (26.2 мг, 0.137 ммоль) и iPr₂NEt (26 мкл, 0.15 ммоль). Через 2 час температуру раствора доводят до rt. Через 4 час раствор выливают в 10% водн. лимонную кислоту и экстрагируют EtOAc (2x). Объединенные органические вытяжки промывают последовательно нас. водн. NaHCO₃, затем сушат (MgSO₄) и упаривают. Колоночной флеш-хроматографией (SiO₂, 40-100% EtOAc/смесь гексанов) получают титульное соединение в виде твердого вещества белого цвета (46.0 мг, 79%). MS (ESI), (M+H)⁺ 508.22; ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.68 (д, 2Н, J=8.6), 7.29-7.47 (м, 6Н), 6.38 (уш. с, 1Н), 5.75 (уш. с, 1Н), 4.65 (д, 1Н, J=16.0), 4.42 (д, 1Н, J=16.0), 4.32 (т, 1Н, J=7.5), 3.30-3.85 (уш. м, 8Н), 1.69-1.78 (м, 1Н), 1.28-1.37 (м, 1Н), 1.08-1.14 (м, 1Н), 0.76 (д, 3Н, J=6.5), 0.63 (д, 3Н, J=6.6).

Примеры применения Реакционной схемы 7

трет-Бутиловый эфир 4-{[N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}пиперидин-1-карбоновой кислоты (Пример 92)

К раствору амида (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты (4.2 г, 14 ммоль) в ДМФА (50 мл) прибавляют карбонат цезия (13.6 г, 417 ммоль). К этой реакционной смеси прибавляют трет-бутиловый эфир 4-(толуол-4-сульфонилоксиметил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (ссылка: Gilissen, С.; Bormans, G.; De Groot, Т.; Verbruggen, A.J.Labeled Cmpd. Radiopharm. 1999, 42, 1289;. 10.4 г, 282 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 70°С в течение 18 час. Затем реакционную смесь разбавляют нас. водн. NaHCO₃ и экстрагируют EtOAc. Органические вытяжки объединяют, промывают рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают, получая прозрачное масло. Затем масло очищают на Biotage 40S (элюент 30% EtOAc в смеси гексанов), получают твердое вещество белого цвета (3.0 г, 44%). MS (ESI), (M+H)⁺ 502.1; ¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 500 МГц) δ 7.86 (дд, 2Н, J=2.0, 6.8), 7.65 (дд, 2Н, J=2.0, 6.8), 7.37 (уш. с, 1Н), 7.07 (уш. с, 1Н), 4.19 (т, 1Н, J=7.6), 3.92 (уш. с, 2Н), 3.35 (дд, 1H, J=15, 6.8), 3.05 (дд, 1Н, J=15, 8.1), 1.85 (уш. с, 1Н), 1.50-1.70 (м, 4Н), 1.38 (с, 9Н), 1.10-1.20 (м, 1Н), 0.80-1.00 (м, 3Н), 0.82 (д, 6Н, J=7.6).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(пиперидин-4-илметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 126)

К раствору трет-бутилового эфира 4-{[N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}пиперидин-1-карбоновой кислоты (Пример 92, 2.6 г, 5.2 ммоль) в СН₂Cl₂ (25 мл) прибавляют трифторуксусную кислоту (10 мл). Реакционную смесь перемешивают 1 час, а затем упаривают, получая твердое вещество белого цвета (1.6 г, 84%). MS (ESI), (М+H)⁺ 402.15; ¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 500 МГц) δ 7.87 (д, 2Н, J=8.5), 7.66 (д, 2Н, J=8.6), 7.41 (с, 1Н), 7.04 (с, 1Н), 4.17 (т, 1Н, J=7.3), 3.40-3.50 (м, 1Н), 3.20-3.25 (м, 1Н), 3.03-3.10 (м, 1Н), 2.65-2.80 (м, 2Н), 1.85-2.00 (м, 1Н), 1.20-1.85 (м, 2Н), 1.45-1.60 (м, 1Н), 1.30-1.40 (м, 1Н), 1.10-1.30 (м, 4Н), 0.75-0.90 (м, 1Н), 0.82 (д, 3Н, J=7.3), 0.80 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[1-(пиридин-4-карбонил)пиперидин-4-илметил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 278)

К раствору амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(пиперидин-4-илметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 126, 0.10 г, 0.22 ммоль) и Et₃N (0.06 мл, 0.5 ммоль) в СН₂Cl₂ (3 мл) прибавляют хлорангидрида изоникотиновой кислоты гидрохлорид (56 мг, 0.32 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при rt в течение 18 час, а затем выливают в смесь EtOAc и нас. водн. NaHCO₃. Органический слой отделяют и промывают рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают, получая остаток в виде масла. Остаток очищают на Biotage 10М (элюция 80% EtOAc/смесь гексанов), получают твердое вещество белого цвета (36 мг, 30%). MS (ESI), (М+Н)⁺ 509.20; ¹H ЯМР (CDCl₃, 500 МГц) δ 8.66 (уш. с, 2Н), 7.80 (д, 1Н, J=8.6), 7.73 (д, 2Н, J=8.5), 7.51 (д, 2Н, J=7.6), 7.41 (уш. с, 1Н), 6.64 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.70 (уш. с, 1Н), 4.10 (уш. с, 1Н), 3.71 (уш. с, 1Н), 3.33 (уш. с, 1Н), 3.02 (дд, 2Н, J=4.8, 16), 2.70-2.85 (уш. с, 1Н), 1.50-2.09 (м, 5Н), 1.18-1.33 (м, 4Н), 0.73 (д, 3Н, J=6.7), 0.68 (д, 3Н, J=6.5).

Фенетиламид 4-{[N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}пиперидин-1-карбоновой кислоты (Пример 256)

К раствору амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(пиперидин-4-илметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 126, 0.10 г, 0.22 ммоль) и Et₃N (32 мкл, 0.25 ммоль) в CH₂Cl₂ (3 мл) прибавляют (2-изоцианатоэтил)бензол (0.040 мл, 0.30 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при rt в течение 18 час, а затем выливают в насыщ. водн. NaHCO₃ и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают, получая остаток в виде масла. Остаток очищают на системе Biotage (элюция 75% EtOAc/смесь гексанов), получают целевой продукт в виде твердого вещества белого цвета (67 мг, 52%). MS (ESI), (M+H)⁺ 549.00; ¹H ЯМР (CDCl₃, 500 МГц) δ 7.71 (д, 2Н, J=8.6), 7.71 (д, 2Н, J=8.9), 7.15-7.35 (м, 5Н), 6.64 (с, 1Н), 5.86 (с, 1Н), 4.15 (дд, 1Н, J=5.2, 9.5), 3.88 (д, 1Н, J=13), 3.76 (д, 1Н, J=13), 3.46 (т, 2Н, J=6.7), 3.21-3.29 (м, 1Н), 2.97 (дд, 1Н, J=4.6, 14), 2.65-2.85 (м, 4Н), 1.75-1.95 (м, 3Н), 1.00-1.30 (м, 5Н), 0.75-0.80 (м, 1Н), 0.72 (д, 3Н, J=6.7), 0.67 (д, 3Н, J=6.7).

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-{[2-(4-цианофенил)-2-оксоэтил]пиперидин-4-илметил}амино)-4-метилпентановой кислоты (Пример 286)

К раствору амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(пиперидин-4-илметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 126, 0.050 г, 0.12 ммоль) и Et₃N (0.040 мл, 0.30 ммоль) в CH₂Cl₂ (2 мл) прибавляют 4-(2-хлорацетил)бензонитрил (55 мг, 0.30 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при rt в течение 18 час, а затем упаривают. Остаток очищают на системе Biotage (элюция 80% EtOAc/смесь гексанов), получают 29 мг (48%) целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета. MS (ESI), (М+H)⁺ 545.16; ¹Н ЯМР (CDCl₃, 500 МГц) δ 7.72 (д, 2Н, J=8.5), 7.50-7.65 (м, 2Н), 7.50 (д, 2Н, J=7.0), 7.35-7.45 (м, 2Н), 6.67 (с, 1Н), 5.32 (с, 1Н), 4.14 (дд, 1Н, J=5.0, 9.0), 3.52 (уш. с, 1Н), 3.28 (т, 1Н, J=14), 2.97 (дд, 1Н, J=3.5, 14), 2.82 (уш. с, 1Н), 1.00-2.00 (м, 10Н), 0.71 (д, 3Н, J=6.5), 0.66 (д, 3Н, J=6.5).

Примеры применения Реакционной схемы 8

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(тетрагидропиран-2-илоксиметил)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты

Амид (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты (6.35 г, 196 ммоль), CsCO₃ (5.62 г, 196 ммоль) и 2-[(4-бромметил)бензил]окси)тетрагидропирана (5.62 г, 196 ммоль) в ацетонитриле (200 мл) кипятят 1 час. Реакционную смесь фильтруют в вакууме через целит. Фильтрат упаривают в вакууме, получая белую пену (9.5 г, 96%). Пену используют без очистки в последующей реакции. MS (ESI), (М+Н)⁺ 510.9; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.83 (д, 2Н, J=8.0), 7.75 (д, 2Н, J=8.0), 7.39 (д, 2Н, J=8.0), 7.24 (д, 2Н, J=8.0), 6.25 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.82 (д, 1Н, J_ab=12), 4.65 (м, 1Н), 4.52 (д, 1Н, J_ab=12), 4.30 (д, 1Н, J_ab=16), 4.20 (д, 1Н, J_ab=16), 3.74 (м, 2Н), 3.46 (м, 1Н), 1.89 (м, 1Н), 1.66 (м, 6Н), 0.97 (д, 3Н, J=7.0), 0.94 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-гидроксиметил)бензиламино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 95)

К раствору амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(тетрагидропиран-2-илоксиметил)бензиламино]-4-метилпентановой кислоты (9.5 г, 186 ммоль) в метаноле (200 мл) прибавляют каталитическое количество п-толуолсульфокислоты. Смесь перемешивают в течение ночи при rt. Растворитель удаляют в вакууме. Полученную пену растворяют в СН₂Cl₂ (100 мл), промывают 1 N NaOH, Н₂О и сушат MgSO₄. Фильтрат упаривают в вакууме. Полученную пену кристаллизуют из горячего гексана, получают продукт в виде твердого вещества белого цвета (7.7 г) с выходом 92%. MS (ESI), (M+H)⁺ 425.17; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.68 (д, 2Н, J=7.0), 7.46 (д, 2Н, 7=7.0), 7.33 (д, 2Н, J=8.0), 7.28 (д, 2Н, J=8.0), 6.26 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.67 (уш. с, 2Н), 4.59 (д, 1Н, J_ab=16), 4.37 (д, 1Н, J_ab=16), 4.26 (т, 1Н, J=7.0), 1.86-1.80 (м, 2Н), 1.34-1.28 (м, 1Н), 1.16-1.10 (м, 1Н), 0.96 (д, 3Н, J=7.0), 0.93 (д, 3Н, J=7.0).

4-{[N-[(1R)-1-Карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензиловый эфир метансульфокислоты

К охлажденному до 0°С раствору амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-гидроксиметилбензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (1.5 г, 3.5 ммоль) в СН₂Cl₂ (15 мл) при перемешивании прибавляют Et₃N (0.74 мл, 5.3 ммоль). По каплям прибавляют раствор метансульфонилхлорида (0.29 мл, 3.5 ммоль) в 5 мл СН₂Cl₂ и реакционную смесь перемешивают 1 час при 0°С. К реакционной смеси прибавляют 25 мл СН₂Cl₂, быстро промывают 1 N HCl, рассолом и сушат, пропуская органическую фазу через хлопковый фильтр. Растворитель отгоняют в вакууме, получая титульное соединение с количественным выходом. Полученную пену используют без очистки в последующих реакциях. MS (ESI), (M-95)⁺ 409.15; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.70 (д, 2Н, J=8.0), 7.48 (д, 2Н, J=8.0), 7.41 (д, 2Н, J=8.0), 7.38 (д, 2Н, J=8.0), 6.27 (уш. с, 1Н), 5.32 (уш. с, 1Н), 5.24 (с, 2Н), 4.64 (д, 1Н, J_ab=16), 4.43 (д, 1Н, J_ab=16), 4.33 (т, 1Н, J=6), 2.90 (с, 3Н), 1.90 (м, 1Н), 1.60 (м, 2Н), 0.96 (д, 3Н, J=7.0), 0.91 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-диметиламинометилбензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 110)

К раствору 4-{[N-((1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензилового эфира метансульфокислоты (150 мг, 0.298 ммоль) в СН₂Cl₂ (3 мл) при 0°С при перемешивании прибавляют 1 эквивалент Et₃N, a затем диметиламин (0.3 мл, 2 М в ТГФ). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К смеси прибавляют СН₂Cl₂, промывают водой, рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают, получают стеклообразный продукт янтарного цвета. Очистка флеш-хроматографией (SiO₂, 10% MeOH/CH₂Cl₂) дает титульное соединение (95 мг) с выходом 71%. MS (ESI), (M+H)⁺ 452.23; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.94 (д, 2Н, J=8.0), 7.74 (д, 2Н, J=8.0), 7.63 (д, 2Н, J=8.0), 7.38 (д, 2Н, J=8.0), 6.23 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.22 (д, 1Н, J_ab=16), 4.14 (д, 1Н, J_ab=16), 3.28-3.23 (м, 3Н), 2.17 (уш. с, 6Н), 1.95 (м, 1Н), 1.55 (м, 2Н), 0.96 (д, 3Н, J=7.0), 0.93 (д, 3Н, J=7.0).

Примеры применения Реакционной схемы 9

Амид (2R)-2-[N-(4-ацетиламинобензил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 163)

К раствору соединения из Примера 48 [амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-аминобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (250 мг, 0.60 ммоль) и Et₃N (120 мг, 1.2 ммоль) в CH₂Cl₂ (20 мл) прибавляют хлористый ацетил (56 мг, 0.72 ммоль). Перемешивают в течение 18 час, реакционную смесь упаривают, хроматографируют (флеш-хроматография на силикагеле, 1% метанол/СН₂Cl₂) получают титульное соединение (110 мг, 41%). MS (ESI), (M-H)^- 422.9; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.67 (д, 2Н, J=8.0), 7.28-7.46 (м, 6Н), 7.12 (уш. с, 1Н), 6.24 (уш. с, 1Н), 5.19 (уш. с, 1Н), 4.48 (дд, 2Н, J=50, 15), 4.27 (т, 1Н, J=7.0), 2.18 (с, 3Н), 1.80-2.01 (м, 1Н), 1.12-1.32 (м, 2Н), 0.75 (д, 3Н, J=7.0), 0.67 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-{[(2-диметиламиноацетил)метиламино]метил}бензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 272)

Амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-метиламинометилбензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (75 мг, 0.17 ммоль), (α-диметиламино)уксусной кислоты (18 мг, 0.17 ммоль), 1-гидроксибензотриазол (24 мг, 0.17 ммоль) и 1-[3-диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (33 мг, 0.17 ммоль) смешивают в CH₂Cl₂ (3 мл) и перемешивают в течение ночи. К реакционной смеси добавляют 5 мл СН₂Cl₂ и промывают 1 N NaOH и рассолом. Органический слой сушат, фильтруя через хлопковый фильтр, и растворитель удаляют в вакууме. Очищают препаративной ЖХВД, получают титульное соединение (61 мг) с выходом 68%. MS (ESI), 523.4 (М+Н)⁺; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 8.02 (д, 2Н, J=8.0), 7.71 (д, 2Н, J=8.0), 7.37 (д, 2Н, J=8.0), 7.28 (д, 2Н, J=8.0), 6.23 (уш. с, 1Н), 5.51 (уш. с, 1Н), 4.46 (с, 2Н), 4.70 (д, 1Н, J_ab=16), 4.33 (д, 1Н, J_ab=16), 3.25 (т, 1Н, J=6.0), 2.69 (с, 3Н), 2.63 (с, 2Н), 2.20 (с, 6Н), 1.95 (м, 1Н), 1.60 (м, 2Н), 0.98 (д, 3Н, J=7.0), 0.94 (д, 3Н, J=7.0).

Пример применения Реакционной схемы 10

Соль ТФК (TFA) и амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(2-диметиламинопиридин-5-илметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 254)

Раствор амида (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(2-хлорпиридин-5-илметил)амино]-4-метилпентановой кислоты (полученного по Реакционной схеме 1, 18 мг, 41 ммоль) в растворе диметиламин/ТГФ (2 М, 20 мл, 40 ммоль) перемешивают при 95°С в течение 30 час в сосуде под давлением. 5 мл реакционной смеси (25% от общего объема) очищают обращенно-фазовой препаративной ЖХВД (YMC S5, ODS, МеОН-вода-ТФК), получают заглавное соединение в виде белой пены (17 мг, выход 30%). HRMS (ESI), (М-Н)^- для C₂₀H₂₆SCIN₄O₃, вычислено 437.1426, найдено 437.1420; ¹Н ЯМР (CDCl₃): δ 8.04 (с, 1Н), 8.03 (д, 1Н, J=9.8), 7.76 (д, 2Н, J=7.6), 7.54 (д, 2Н, J=7.6), 6.83 (д, 1Н, J=9.8), 6.62 (уш. с, 1Н), 6.40 (уш. с, 1Н), 4.64 (д, 1Н, J=15.9), 4.29 (м, 1Н), 4.18 (д, 1Н, J=15.9), 3.30 (с, 6Н), 1.84 (м, 1Н), 1.29 (м, 1Н), 0.93 (м, 1Н), 0.77 (д, 3Н, J=6.5), 0.72 (д, 3Н, J=6.5).

Примеры применения Реакционной схемы 11

Амид (2R)-2-[N-(4-аллилокси-3-фторбензил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты

К раствору амида (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метилпентановой кислоты (1.00 г, 3.29 ммоль) и CsCO₃ (1.29 г, 3.95 ммоль) в ДМФА (25 мл) прибавляют 1-аллилокси-4-бромметил-2-фторбензол (ссылка: Graham, Samuel L; Европейская патентная заявка (1992): ЕР 487270; 0.88 г, 3.67 ммоль). Образовавшийся раствор перемешивают при rt в течение 18 час. Затем к реакционной смеси прибавляют EtOAc/смесь гексанов (9:1, 350 мл) и промывают Н₂О (4×200 мл), рассолом и сушат Na₂SO₄, получают титульное соединение (393 мг) в виде твердого вещества белого цвета с выходом 26%. MS (ESI), (M+H)⁺ 469.1; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.66 (д, 2Н, J=8.1), 7.45 (д, 2Н, J=8.1), 7.11 (д, 1Н, J=12.0), 6.98 (м, 1Н), 6.84 (т, 1Н, J=8.0), 6.22 (уш. с, 1Н), 6.04 (м, 2Н), 5.42 (м, 1Н), 5.16 (уш. с, 1Н), 4.59 (м, 2Н), 4.40 (м, 3Н), 1.83 (м, 1Н), 1.32 (м, 1Н), 1.14 (м, 1Н), 0.76 (д, 3Н, J=7.0), 0.68 (д, 3Н, J=7.0).

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[3-фтор-4-(2-морфолин--4-илэтокси)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 427)

Смесь промежуточного аллилоксисоединения (0.39 г, 0.84 ммоль), полученного выше, тетраоксид осмия (0.01, 0.04 ммоль) и триметиламин-N-оксида (0.140 г, 1.81 ммоль) растворяют в ацетоне (10 мл) и перемешивают в течение 4 час при комнатной температуре (rt). Раствор упаривают в вакууме и снова растворяют в смеси диоксан : H₂O (1.5:1, 15 мл). Прибавляют периодат натрия (0.22 г, 1.0 ммоль) и раствор перемешивают при rt в течение 18 час. Затем в реакционную смесь прибавляют EtOAc (200 мл) и промывают H₂O, рассолом, сушат Na₂SO₄ и упаривают, получая (2R)-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[3-фтор-4-(2-оксоэтокси)бензил]амино}-4-метилпентановую кислоту. Этот сырой материал используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[3-фтор-4-(2-оксоэтокси)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (0.16 г, 0.34 ммоль) и морфолин (0.090, 1.0 ммоль) растворяют в EtOH (5 мл) и нагревают при 80°С примерно в течение 15 мин. Отставляют масляную баню, прибавляют натрия триацетоксиборогидрид (0.290 г, 1.36 ммоль) и перемешивают суспензию при rt в течение 16 час. Раствор упаривают досуха, прибавляют рассол, экстрагируют EtOAc (2×100 мл), сушат Na₂SO₄ и упаривают в вакууме, получают сырой продукт в виде оранжевого осадка. Дальнейшая очистка препаративной ЖХВД (колонка YMC S5 ODS С-18, 20×100 мм, 25 мл/мин, 0-100% МеОН/H₂О 0.1% ТФК, 15 мин) дает титульное соединение (69.5 мг) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета с выходом 31%. [α]_D +23 (с 6.4, СН₂Cl₂); LCMS (M+H)⁺ 542.25; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.71 (д, 2Н, J=8.0), 7.50 (д, 2Н, J=8.0), 7.16 (д, 1Н, J=12.0), 7.05 (д, 1Н, J=8.0), 6.87 (т, 1Н, J=8.0), 6.38 (уш. с, 1Н), 5.91 (уш. с, 1Н), 4.41 (АВкв, 2Н, J=16, J_ab=176), 4.45 (м; 2Н), 4.27 (т, 1Н, J=8.0), 4.03 (м, 4Н), 3.70 (м, 2Н), 3.51 (м, 2Н), 3.10 (м, 2Н), 1.83 (м, 1Н), 1.29 (м, 1Н), 1.05 (м, 1Н), 0.75 (д, 3Н, J=8.0), 0.68 (д, 3Н, J=8.0).

Пример применения Реакционной схемы 12

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 287)

Раствор соединения из Примера 61 [метилового эфира [4-{N-[(1R)-1-карбамоил-3-метилбутил]-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензойной кислоты, 101 мг, 0.221 ммоль] охлаждают до 0°С в ТГФ (2 мл). Прибавляют по каплям раствор метилмагнийбромида (1.4 М в смеси толуол/ТГФ, 0.50 мл, 0.71 ммоль). Темно-желтый раствор перемешивают при 0°С и через 30 мин прибавляют дополнительное количество метилмагнийбромида. Через 1 час раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры. Через 3.5 час реакцию прекращают, добавляя нас. водн. NH₄Cl, и смесь экстрагируют EtOAc (2x). Объединенные органические вытяжки сушат (Na₂SO₄) и упаривают. Флеш-хроматография на колонке (SiO₂, 20-100% EtOAc/смесь гексанов) дает титульное соединение в виде белой пены (62 мг, 62%). MS (ESI), (М+Н)⁺ 453.16; ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.61 (д, 2Н, J=8.7), 7.40 (д, 2Н, J=8.7), 7.37 (д, 2Н, J=8.4), 7.26 (д, 2Н, J=8.4), 6.28 (уш. с, 1Н), 5.25 (уш. с, 1Н), 4.49 (д, 1Н, J=15.9), 4.41(д, 1H, J=15.9), 4.33 (т, 1Н, J=6.6), 1.73-1.80 (м, 1Н), 1.55 (с, 6Н), 1.28-1.35 (м, 1Н), 1.20-1.25 (м, 1Н), 0.77 (д, 3Н, J=6.5), 0.66 (д, 3H, J=6.6).

Пример применения Реакционной схемы 13

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(5-метил[1,3,4]оксадиазол-2-ил)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 436)

Стадия 1. К соединению из Примера 61 [метиловый эфир [4-{[N-((1R)-1-карбамоил-3-метилбутил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензойной кислоты, 0.500 мг, 1.10 ммол] прибавляют метанол (10 мл), а затем гидразин (2 мл). Исходное медленно растворяется через 5 минут. Через 30 мин раствор нагревают до кипения. Через 22 час раствор охлаждают до rt. Прибавляют воду, образуется белый осадок. Смесь экстрагируют EtOAc (2x). Объединенные органические вытяжки промывают рассолом, сушат (Na₂SO₄) и упаривают, получают соответствующий ацилгидразид в виде белой пены, который непосредственно вводят в стадию циклизации без дополнительной очистки.

Стадия 2. Сырой (неочищенный) ацилгиразид (0.150 г, 0.331 ммоль) растворяют в пиридине (2.2 мл) и прибавляют ацетимидата гидрохлорид (60.0 мг, 0.364 ммоль). Смесь кипятят 1.25 час. Раствор охлаждают до rt и упаривают с целью отгонки пиридина. Остаток растворяют в EtOAc и промывают последовательно водой, 1 N HCl (2x), нас. водн. NaHCO₃ и рассолом. Раствор сушат (MgSO₄) и упаривают. После флеш-хроматографии на колонке ((SiO₂, 50-100% EtOAc/смесь гексанов) получают указанное соединение в виде твердого вещества белого цвета (138 мг, 88% на 2 стадии). [α]_D +11.1 (с 7.0 мг/мл, CHCl₃); MS (ESI), (M+H)⁺ 477.22; ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.94 (дд, 2Н, J=1.8, 8.4), 7.69 (дд, 2Н, J=1.8, 8.7), 7.45-7.50 (м, 4Н), 6.23 (уш. с, 1Н), 5.19 (уш. с, 1Н), 4.65 (д, 1Н, J=15.9), 4.46 (д, 1Н, J=15.9), 4.31 (дд, 1Н, J=6.6, 7.8), 2.61 (с, 3Н), 1.75-1.85 (м, 1Н), 1.28-1.35 (м, 1Н), 1.08-1.15 (м, 1Н), 0.76 (д, 3Н, J=6.6), 0.64 (д, 3Н, J=6.6).

Пример применения Реакционной схемы 14

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 437)

Стадия 1. К раствору соединения из Примера 89 [[4-{[N-((1R)-1-карбамоил-3-метилбутил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}бензойная кислота, 520 мг, 1.2 ммоль) в ДМФА (2.4 мл) и СН₂Cl₂ (7.1 мл) прибавляют 1-гидроксибензотриазол (192 мг, 1.42 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (272 мг, 1.42 ммоль) и iPr₂NEt (0.31 мл, 1.8 ммоль). Также прибавляют N-гидроксиацетамид (105 мг, 1.42 ммоль). Через 21 час исходное еще присутствует, поэтому периодически добавляют дополнительные порции всех реагентов, чтобы довести реакцию до конца (сдвинуть вправо). Через 3 дня смесь упаривают и распределяют между нас. водн. NaHCO₃ и EtOAc (2х). Объединенные органические вытяжки промывают рассолом, сушат (MgSO₄) и упаривают, получая желтое масло, которое вводят в следующую стадию без дополнительной очистки.

Стадия 2. Сырой ацетамидоксим растворяют в толуоле (10 мл) и раствор нагревают до кипения. Через 1 час прибавляют пиридин (2 мл) и продолжают нагревание еще в течение 15 час. Смесь упаривают и растворяют в EtOAc. Органическую фазу последовательно промывают водой, 1 N HCl (2х), нас. водн. NaHCO₃ и рассолом, затем сушат (MgSO₄) и упаривают. После флеш-хроматографии на колонке (SiO₂, 10-40% EtOAc/смесь гексанов) получают титульное соединение в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (238 мг, 42% на две стадии). [α]²³ _D +9.30 (с 5.93 мг/мл, CHCl₃); MS (ESI), (М+H)⁺ 477.18; ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 8.04 (д, 2Н, J=8.4), 7.70 (дд, 2Н, J=1.8, 8.4), 7.45-7.52 (м, 4Н), 6.23 (уш. с, 1Н), 5.19 (уш. с, 1Н). 4.67 (д, 1Н, J=16.2), 4.47 (д, 1Н, J=15.9), 4.31 (т, 1Н, J=7.2), 2.47 (с, 3Н), 1.75-1.85 (м, 1Н), 1.28-1.35 (м, 1Н), 1.08-1.15 (м, 1Н), 0.76 (д, 3Н, J=6.6), 0.64 (д, 3Н, J=6.6).

Пример применения Реакционной схемы 15

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(5-метил[1,2,4]оксадиазол-3-ил)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 465)

К раствору соединения из Примера 6 [амид (2R)-2-[N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-(4-цианобензил)амино]-4-метилпентановой кислоты (0.20 г, 0.47 ммоль] в этаноле (6 мл) прибавляют гидроксиламин (50% раствор в воде, 0.050 мл, 0.71 ммоль). Реакционную смесь греют при 80°С в течение 18 час. Реакционную смесь упаривают, остаток перекристаллизовывают из смеси EtOAc/смесь гексанов, получая твердое вещество белого цвета (136 мг, 51%). Затем это твердое вещество (0.18 ммоль) растворяют в хлороформе и прибавляют Et₃N (0.030 мл, 0.24 ммоль) и ацетилхлорид (0.020 мл, 0.18 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при rt в течение 2 час, а затем выливают в EtOAc и рассол. Органический слой отделяют, сушат MgSO₄ и упаривают. Остаток растворяют в толуоле и кипятят в течение 24 час. Реакционную смесь упаривают и очищают на системе Biotage (элюция EtOAc/смесь гексанов, 1:1), получают заданный продукт в виде твердого вещества белого цвета (выход 35 мг, 39%). MS (ESI), (M+H)⁺ 477.13; ¹H ЯМР (CDCl₃, 500 МГц) δ 7.98 (д, 2Н, J=8.2), 7.68 (д, 2Н, J=8.9), 7.45 (д, 4Н, J=8.5), 6.21 (с, 1Н), 5.19 (с, 1Н). 4.62 (д, 1Н, J=15), 4.48 (д, 1Н, J=16), 4.31 (т, 1Н, J=7.0), 2.65 (с, 3Н), 1.75-1.85 (м, 1Н), 1.20-1.35 (м, 4Н), 1.10-1.17 (м, 1Н), 0.85-0.90 (м, 1Н), 0.75 (д, 3Н, J=6.7), 0.64 (д, 3Н, J=6,4).

Пример применения Реакционной схемы 16

Амид (2R)-2-[N-(4-ацетилбензил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты (Пример 273)

Раствор соединения из Примера 251 [4-{[N-((1S)-1-карбамоил-3-метилбутил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}-N-метокси-N-метилбензамид, 0.100 г, 0.207 ммоль] в ТГФ (2.1 мл) охлаждают до 0°С. По каплям прибавляют раствор метилмагнийбромида (1.4 М в смеси толуол/ТГФ, 0.178 мл, 0.249 ммоль). Образующийся раствор перемешивают 3 часа при 0°С, прибавляют дополнительное количество раствора метилмагнийбромида (0.178 мл, 0.249 ммоль). Еще через 30 мин прибавляют последнюю порцию раствора MeMgBr (0.3 мл). Через 15 мин к реакционной смеси прибавляют нас. водн. NH₄Cl и 1 N HCl и смесь экстрагируют EtOAc (2х). Объединенные органические вытяжки промывают нас. водн. NaHCO₃ и рассолом, сушат (Na₂SO₄). Флеш-хроматографией на колонке (SiO₂, 20-60% EtOAc/смесь гексанов) получают заданное соединение в виде желтовато-белой пены (79 мг, 87%). [α]²³ _D +20.4 (с 7.57, CHCl₃); MS (ESI), (М+Н)⁺ 437.13; ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.87 (д, 2Н, J=8.4), 7.67 (дд, 2Н, J=1.8, 8.7), 7.42-7.46 (м, 4Н), 6.21 (уш. с, 1Н), 5.28 (уш. с, 1Н), 4.64 (д, 1Н, J=15.9), 4.45 (д, 1Н, J=15.9), 4.31 (т, 1Н, J=6.6), 2.58 (с, 3Н), 1.73-1.80 (м, 1Н), 1.25-1.35 (м, 1Н), 1.05-1.14 (м, 1Н), 0.74 (д, 3Н, J=6.5), 0.65 (д, 3Н, J=6.6).

Пример применения Реакционной схемы 17

Амид (2R)-2-{N-(4-хлорбензолсульфонил)-N-[4-(3-пиперидин-1-илпропиониламино)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 274)

К раствору N-(4-{[N-((1S)-1-карбамоил-3-метилбутил)-N-(4-хлорбензолсульфонил)амино]метил}фенил)акриламида (0.10 г, 0.22 ммоль) в толуоле (5 мл) прибавляют пиперидин (20 мг, 0.24 ммоль). Смесь нагревают при слабом кипении в течение 1 часа, а затем растворитель удаляют в вакууме. Очистка флеш-хроматографией (SiO₂, 10% МеОН/СН₂Cl₂) дает титульное соединение с выходом 86% (105 мг). MS (ESI), (M+H)⁺ 449.16; ¹H ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7.69 (д, 2Н, J=8.0), 7.63 (д, 2Н, J=8.0), 7.38 (д, 2Н, J=8.0), 7.23 (д, 2Н, J=8.0), 6.25 (уш. с, 1Н), 5.35 (уш. с, 1Н), 4.75 (д, 1Н, J=16), 4.38 (д, 1Н, J=16), 3.25 (т, 1Н, J=6.0), 2.65 (т, 2Н, J=6.0), 2.56-2.44 (м, 6Н), 1.95 (м, 1Н), 1.68-1.45 (м, 8Н), 0.98 (д, 3Н, J=7.0), 0.94 (д, 3Н, J=7.0).

Примеры применения Реакционной схемы 18

(2R)-2-(Бензгидрилиденамино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0.^1,5]дец-4'-ил}-4-фторбутан-1-он

К раствору N-2-(бензгидрилиденамино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0.^1,5]дец-4'-ил}этанона (ссылка: Josien, H.; Martin, A.; Chassing, G. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 6547; 30.0 г, 68 ммоль) в НМРА (60 мл) и ТГФ (300 мл) при -78°С по каплям прибавляют н-BuLi (1.6 М в гексане, 42.4 мл, 68 ммоль), поддерживая температуру ниже -65°С. Температуру реакционной смеси доводят до комнатной, по каплям при rt прибавляют раствор 1-бром-3-фторэтана (17.4 г, 137 ммоль) в ТГФ (30 мл). Через 18 час реакционную смесь выливают в Н₂О/НОАс (200 мл/2 мл), добавляют EtOAc и органические вытяжки промывают насыщенным раствором NH₄Cl, рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают. Полученное оранжевое масло затем очищают хроматографией на силикагеле (25% EtOAc/смесь гексанов), получают твердое вещество белого цвета, которое перекристаллизовывают из 15% EtOAc/смесь гексанов, получают заданное вещество (24.4 г, 70%). MS (ESI), (М+Н)⁺ 483.27; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.66 (д, 2Н, J=7.2), 7.13-7.44 (м, 8Н), 4.82-4.83 (м, 2Н), 4.39-4.81 (м, 2Н), 3.84-3.87 (м, 1Н), 3.28 (АВкв, 2Н, J=18, 10) 2.33-2.41 (м, 2Н), 2.02-2.04 (м, 2Н), 1.84-1.87 (м, 2Н), 1.32-1.39 (м, 2Н), 1.10 (с, 3Н), 0.91 (s, 3Н).

(2R)-2-Амино-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-4-фторбутан-1-он

К раствору (2R)-2-(бензгидрилиденамино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-фторбутан-1-она (20.0 г, 41 ммоль) в ТГФ (400 мл) прибавляют 1 N HCl (200 мл). Через 3 час к реакционной смеси добавляют воду и экстрагируют Et₂O. Водную фазу затем нейтрализуют, добавляя 0.5 N NaOH. Основной раствор экстрагируют CH₂Cl₂, сушат MgSO₄ и упаривают, получая твердое вещество белого цвета (11.9 г, 90%). ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 4.56-4.71 (м, 2Н), 4.23-4.31 (м, 1Н), 3.40-3.49 (м, 3Н), 3.11 (д, 2Н, J=4.4), 1.17-2.23 (м, 8Н), 1.13 (с, 3Н), 0.93-1.12 (м, 3Н).

(2R)-2-(4-Хлорбензолсульфониламино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-4-фторбутан-1-он

К раствору (2R)-2-амин-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-4-фторбутан-1-она (12 г, 36 ммоль) и Et₃N (10.4 мл, 72.0 ммоль) в СН₂Cl₂ (350 мл) сразу прибавляют все количество 4-хлорбензолсульфонилхлорида (9.1 г, 43 ммоль). Через 18 час реакционную смесь упаривают, полученный осадок растворяют в EtOAc и промывают Н₂О, рассолом, сушат MgSO₄ и упаривают. Далее продукт очищают хроматографией на силикагеле (SiO₂, 30% EtOAc/смесь гексанов), получают титульное соединение (16.0 г, 92%) в виде белого воска. ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.79 (д, 2Н, J=8.0), 7.43 (д, 2Н, J=8.0), 5.69 (уш. д, J=8.0), 4.42-4.77 (м, 4Н), 3.71-3.72 (м, 1Н), 3.10 (АВкв, 2Н, J=9, 4.4) 2.11-2.29 (м, 2Н), 1.33-1.99 (м, 6Н), 1.04 (с, 3Н), 0.91 (с, 3Н).

(2R)-2-(4-Хлорбензолсульфониламино)-4-фторбутановая кислота

К раствору (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-4-фторбутан-1-она (16 г, 32 ммоль) в ацетонитриле (200 мл) при интенсивном перемешивании прибавляют LiBr (13.9 г, 16 ммоль), тетрабутиламмонийбромид (4.13 г, 12.8 ммоль) и LiOH (5.45 г, 0.130 моль). Через 4.5 час реакционную смесь упаривают до половины объема, добавляют H₂О и экстрагируют СН₂Cl₂. Водную фазу подкисляют 1 N HCl и экстрагируют EtOAc. EtOAc вытяжки объединяют, сушат MgSO₄ и упаривают, получают твердое вещество белого цвета, 9.4 г из этого количества непосредственно вводят в следующую стадию. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆) δ 8.39 (д, 1Н, J=9.0), 7.76 (д, 2Н, J=6.8), 7.64 (д, 2Н, J=6.8), 7.00 (уш. с, 1Н), 4.29-4.48 (м, 2Н), 3.80-3.88 (м, 1Н), 1.66-1.96 (м, 2Н).

Амид (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фторбутановой кислоты

К раствору (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фторбутановой кислоты (9.0 г, 31 ммоль) в ДМФА (250 мл) в атмосфере N₂ прибавляют последовательно 1-гидроксибензотриазола гидрат (6.2 г, 46 ммоль), N,N-диизопропилэтиламин (23 мл, 124 ммоль), хлористый аммоний (3.34 г, 62 ммоль) и 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (8.8 г, 46 ммоль). Полученный раствор перемешивают при rt в течение 18 час. Раствор выливают в воду со льдом (500 мл), твердый осадок отфильтровывают и сушат. Затем продукт осаждают из 10% EtOAc/смесь гексанов, получают чистое твердое вещество белого цвета (4.5 г) с выходом 50%. [α]_D=-21 (с 1.00, ДМФА); MS (ESI) (М-Н)^- 293.01; ¹H ЯМР (ДМСО-d₆) δ 8.12 (д, 1Н, J=8.8), 7.77 (д, 2Н, J=7.0), 7.62 (д, 2Н, J=7.0), 7.38 (уш. с, 1Н), 7.03 (уш. с, 1Н), 4.22-4.47 (м, 2Н), 3.71-3.85 (м, 1Н), 1.65-1.92 (м, 2Н).

(2R)-2-(4-Хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-4-фторбутирамид (Пример 360)

(2R)-2-(4-Хлорбензолсульфониламино)-4-фторбутирамид (20 мг, 0.7 ммоль) превращают в титульное соединение по Реакционной схеме 1, метод А. Получают 208 мг (73%) титульного соединения. MS (ESI), (М-Н)^- 407.99; [α]_D = +39.13 (с 1.00, МеОН); ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.72 (д, 2Н, J=8.4), 7.58 (д, 2Н, J=8.4), 7.50 (д, 2Н, J=8.4), 7.45 (д, 2Н, J=8.4), 6.29 (уш. с, 1Н), 5.21 (уш. с, 1Н), 4.19-4.67 (м, 5Н), 2.17-2.28 (м, 1Н), 1.49-1.61 (м, 1Н).

Примеры применения Реакционной схемы 19

Амид 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-6-фторгексановой кислоты (III)

Смесь этилового эфира (бензгидрилиденамино)уксусной кислоты (8.6 г, 32 ммоль), 4-бром-1-фторбутана (10.0 г, 64.5 ммоль), К₂СО₃ (13.4 г, 96.9 ммоль), тетрабутиламмонийбромида (2.1 г, 6.5 ммоль) и ацетонитрила (300 мл) кипятят в течение 72 час. Реакционную смесь охлаждают до rt и фильтруют через стеклянный фильтр. Фильтрат упаривают в вакууме. Остаток растворяют в диэтиловом эфире (250 мл), выпадает белый осадок. Осадок отфильтровывают в вакууме. К фильтрату, содержащему сырой продукт - этиловый эфир (2-(бензгидрилиденамино)-6-фторгексановой кислоты, прибавляют 1 N раствор HCl (100 мл). Образующуюся двухфазную смесь энергично перемешивают в течение 3 час. Смесь переносят в делительную воронку. Отделяют водный слой. Органический слой экстрагируют 1 N HCl (30 мл). Объединенные водные фазы промывают 200 мл диэтилового эфира. К водной фазе прибавляют концентрированную HCl (10.8 мл) и полученный раствор кипятят в течение 6 час. Реакционную смесь охлаждают до rt и упаривают в вакууме. К остатку прибавляют толуол и смесь снова упаривают в вакууме, получают гидрохлорид 2-амино-6-фторгексановой кислоты в виде твердого вещества белого цвета. Сырой продукт - соль аминокислоты - используют без очистки и без определения характеристик. Гидрохлорид 2-амино-6-фторгексановой кислоты (32.3 ммоль, теоретически) суспендируют в сухом метаноле (300 мл) и охлаждают до 0°С. Медленно в течение 5 мин прибавляют хлористый тионил (10.3 мл, 129 ммоль). Полученный раствор доводят до rt и перемешивают в течение 18 час. Реакционную смесь упаривают в вакууме, получают гидрохлорид 2-амино-6-фторгексановой кислоты. К сырому аминоэфиру прибавляют толуол (100 мл) и 28% раствор аммиака в воде (75 мл). Образующуюся двухфазную смесь энергично перемешивают при rt в течение 24 час. Реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток в виде твердого вещества суспендируют в толуоле (200 мл) и снова упаривают в вакууме, получают амид 6-фторгексановой кислоты (II) в виде твердого вещества белого цвета. Сырой амид аминокислоты растворяют в сухом ДМФА (50 мл) и СН₂Cl₂ (350 мл) и проводят его реакцию с 4-хлорбензолсульфонилхлоридом (82 г, 32.3 ммоль) и Et₃N (13.5 мл, 96.9 ммоль). Через 2 час прибавляют вторую порцию 4-хлорбензолсульфонилхлорида (1.70 г, 8.1 ммоль). Еще через 18 час образовавшуюся смесь выливают в 1 N HCl (500 мл). Органический слой отделяют и промывают водой (2×500 мл). К органической фазе прибавляют гексан (600 мл). Образуется белый осадок. Осадок отфильтровывают в вакууме, промывают холодным этанолом (50 мл) и сушат в вакууме. Получают 4.95 г (выход 48% на 6 стадий) амида 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фторгексановой кислоты (III). LCMS (M+Na)⁺ 345.2; ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7.99 (д, 1Н, J=8.8), 7.77 (д, 2Н, J=8.8), 7.62 (д, 2Н, J=8.8), 7.29 (с, 1Н), 6.95 (с, 1Н), 4.34 (дт, 2Н, J_д=47.5, J_т=6.1), 3.65 (дт, 1Н, J_д=5.6, J_т=8.6), 1.60-1.39 (м, 4Н), 1.36-1.15 (м, 2Н). Элементный анализ: вычислено для C₁₂H₁₆ClFN₂O₃S: С 44.65; Н 4.99; N 8.67. Найдено: С 44.61; Н 5.08; N 8.75.

Амид 2-(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино)-6-фторгексановой кислоты (Пример 333)

Амид 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-6-фторгексановой кислоты (0.500 г, 1.55 ммоль) превращают в титульное соединение (360 мг, выход 59%), как описано в Реакционной схеме 1, метод A. LCMS (M+Na)⁺ 459.9; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7.82 (д, 2Н, J=8.8), 7.79 (д, 2Н, J=8.5), 7.63 (д, 2Н, J=8.8), 7.58 (д, 2Н, J=8.3), 7.52 (с, 1Н), 7.09 (с, 1Н), 4.82 (АВкв, 2Н, Δν=37.2, J_ab=17.6), 4.34 (дд, 1Н, J=8.0, 6.6), 4.25 (дт, 2Н, J_д=47.2, J_т=5.7), 1.58 (м, 1Н), 1.49-1.12 (м, 5Н). Элементный анализ: вычислено для С₂₀Н₂₁ClFN₃О₃S: С 54.85; Н 4.83; N 9.59. Найдено: С 54.92; Н 4.76; N 9.54.

Примеры применения Реакционной схемы 20

(2R)-2-(4-Хлорбензолсульфониламино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-4-фтор-4-метилпентан-1-он

К раствору (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}метилпентан-1-она [500 мг, 1 ммоль, получен по Реакционной схеме 18 из N-2-(бензгидрилиденамино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}этанона (ссылка: Josien, Н.; Martin, A.; Chassing, G. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 6547) и 1-бром-2-метил-2-пропена] в ТГФ (5 мл) при 0°С прибавляют HF·пиридин (10 мл). Реакционную смесь доводят до rt и перемешивают в течение 18 час.

Содержимое реакционной колбы осторожно прибавляют к водному раствору NaHCO₃ (300 мл). Экстрагируют EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические вытяжки последовательно промывают 1 N HCl (200 мл) и рассолом (100 мл). Органическую фазу сушат MgSO₄, фильтруют и упаривают в вакууме, получают 490 мг (94%) титульного соединения в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7.83 (д, 2Н, J=8.8), 7.45 (д, 2Н, J=8.8), 5.37 (д, 1Н, J=8.1), 4.65 (м, 1Н), 3.64 (т, 1Н, J=6.4), 3.43 (АВкв, 2Н, Δν=5.4, J_ab=13.7), 2.19-1.83 (м, 7Н), 1.41-1.31 (м, 8Н), 1.04 (с, 3Н), 094 (с, 3Н).

Амид (2R)-2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты

(2R)-2-(4-Хлорбензолсульфониламино)-1-{(1'S),(5'S)-10',10'-диметил-3',3'-диоксо-3'λ⁶-тиа-4'-азатрицикло[5.2.1.0^1,5]дец-4'-ил}-4-фтор-4-метилпентан-1-он превращают в заглавное соединение в две стадии по Реакционной схеме 18 (165 мг, выход 55%); LCMS (M+Na)⁺ 345.1; ¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d₆) δ 8.10 (д, 1Н, J=9.2), 7.77 (д, 2Н, J=8.5), 7.62 (д, 2Н, J=8.9), 7.34 (с, 1Н), 6.92 (с, 1Н), 3.85 (м, 1Н), 1.89 (м, 1H), 1.74 (м, 1Н), 1.31 (д, 3Н, J=21.7), 1.29 (д, 3H, J=21.9).

Примеры применения Реакционной схемы 21

Этиловый эфир 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метил-4-пентановой кислоты

Раствор этилового эфира 2-амино-4-метил-4-пентановой кислоты (2.84 г, 18.1 ммоль, получен по Реакционной схеме 19 из этилового эфира (бензгидрилиденамино)уксусной кислоты и 1-бром-2-метил-2-пропена) в СН₂Cl₂ (250 мл) реагирует с 4-хлорбензолсульфонилхлоридом (4.20 г, 19.9 ммоль) и Ee₃N (3.78 мл, 27.2 ммоль). Через 4 часа образовавшуюся смесь выливают в 1 N водный раствор HCl (500 мл) и экстрагируют EtOAc (3×150). Органические вытяжки промывают рассолом (50 мл), сушат (MgSO₄), фильтруют и упаривают в вакууме. Сырой концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (градиент от 10:1 до 5:1, смесь гексанов/EtOAc), получают 3.04 г (выход на 3 стадии 25%) этилового эфира 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метил-4-пентановой кислоты. LCMS (M+Na)⁺ 354.2; ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7 77 (д, 2Н, J=9.1), 7.46 (д, 2Н, J=8.8), 5.07 (д, 1Н, J=9.0), 4.84 (c, 1H), 4.73 (с, 1Н), 4.05 (м, 1Н), 3.95 (кв, 2Н, J=7.1), 2.40 (м, 2Н), 1.66 (с, 3Н), 1.13 (т, 3Н, J=7.1).

Этиловый эфир 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты и 4-хлор-N-(5,5-диметил-2-оксотетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид

Фторводород·пиридин (10 мл) при 0°С прибавляют к раствору этилового эфира 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-метил-4-пентановой кислоты (1.0 г, 3.0 ммоль) в ТГФ (15 мл). Реакционную смесь доводят до rt. Через 5 час прибавляют новую порцию фторводород·пиридина (10 мл). Смесь перемешивают в течение 24 час, затем прибавляют третью порцию фторводород·пиридина (10 мл). Общее время перемешивания составляет 53 час. Затем реакцию "гасят", добавляя колотый лед (20 мл). Сырую смесь выливают в воду со льдом (500 мл) и экстрагируют CH₂Cl₂ (2×200 мл). Объединенные органические вытяжки промывают нас. водн. NaHCO₃ (100 мл) и упаривают в вакууме. Сырой концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (градиент от 10:1 до 5:1, смесь гексанов/EtOAc), получают 0.395 г (выход 37%) этилового эфира 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты и 0.425 г (выход 46%) 4-хлор-N-(5,5-диметил-2-оксотетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамида. Характеристики этилового эфира 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты. LCMS (М+Na)⁺ 374.1; ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 7.78 (д, 2Н, J=8.9), 7.47 (д, 2Н, J=8.5), 5.19 (д, 1Н, J=7.9), 4.08 (м, 1Н), 3.93 (м, 2Н), 2.09-1.94 (м, 2Н), 1.42 (д, 3H, J=21.6), 1.37 (д, 3Н, J=21.6), 1.12 (т, 3Н, J=7.0). Характеристики 4-хлор-N-(5,5-диметил-2-оксотетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид. LCMS (M+Na)⁺ 326.0; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8.41 (д, 1Н, J=9.1), 7.86 (д, 2Н, J=8.6), 7.67 (д, 2Н, J=8.8), 4.57 (м, 1Н), 2.22 (дд, 1Н, J=12.4, 9.0), 1.72 (т, 1Н, J=12.0), 1.33 (с, 3Н), 1.31 (с, 3Н).

Амид 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты

Раствор этилового эфира 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты (457 мг, 1.30 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывают 10 N раствором NaOH (780 мкл, 7.8 ммоль) при rt в течение 18 час. Сырую реакционную смесь упаривают в вакууме. К остатку прибавляют воду (50 мл) и 1 N HCl (20 мл). Водный раствор экстрагируют EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические вытяжки промывают рассолом (50 мл), сушат MgSO₄, фильтруют и упаривают в вакууме, получают твердое вещество белого цвета, содержащее 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановую кислоту. Смесь сырого твердого продукта, 1-гидроксибензотриазола (263 мг, 1.95 ммоль), диизопропиламина (670 мг, 5.2 ммоль), хлористого аммония (140 мг, 2.6 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (373 мг, 1.95 ммоль) и ДМФА (20 мл) перемешивают при rt в течение 24 час. Сырую реакционную смесь выливают в воду (500 мл). Водный раствор экстрагируют смесью EtOAc/смесь гексанов (90:10, 3×150 мл). Объединенные органические вытяжки промывают рассолом (50 мл), сушат MgSO₄, фильтруют и упаривают в вакууме. Сырой концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (хлороформ/МеОН, 95:5), получают 0.426 г (выход 100%) титульного соединения. LCMS (M+Na)⁺ 345.3; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8.10 (д, 1Н, J=9.2), 7.77 (д, 2Н, J=8.5), 7.62 (д, 2Н, J=8.9), 7.34 (с, 1Н), 6.92 (с, 1Н), 3.85 (м, 1Н), 1.89 (м, 1Н), 1.74 (м,1Н), 1.31 (д, 3Н, J=21.7), 1.29 (д, 3Н, J=21.9).

Амид 2-(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-4-фтор-4-метилпентановой кислоты (Пример 357)

Амид 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-фтор-4-метилпентановой кислоты превращают в титульное соединение по Реакционной схеме 1, метод A. LCMS (M+Na)⁺ 460.2; ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7.83 (д, 2Н, J=8.5), 7.75 (д, 2Н, J=8.3), 7.68 (с, 1Н), 7.64 (д, 2Н, J=8.6), 7.49 (д, 2Н, J=8.1), 7.20 (с, 1Н), 4.67 (АВкв, 2Н, Δν=28.3, J_ab=17.3), 4.54 (дд, 1H, J=9.3, 3.2), 2.23 (м, 1Н), 1.42 (м, 1Н), 1.25 (д, 3Н, J=21.6), 1.21 (д, 3Н, J=21.7).

Амид 2-(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-4-гидрокси-4-метилпентановой кислоты (Пример 443)

Запаянную ампулу, содержащую смесь 4-хлор-N-(5,5-диметил-2-оксотетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамида (0.20 г, 0.66 ммоль) и 28% раствор аммиака в воде (3 мл), нагревают в микроволновом реакторе при 80°С в течение 40 мин. Реакционную смесь охлаждают до rt и упаривают досуха в вакууме, получают твердое вещество белого цвета, содержащее амид 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-4-гидрокси-4-метилпентановой кислоты. Неочищенный твердый продукт превращают в титульное соединение (98 мг, 34%) по Реакционной схеме 1, метод А. LCMS (M+Na)⁺ 458.2; ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7.84 (д, 2Н, J=8.6), 7.76 (д, 2Н, J=8.3), 7.62 (д, 2Н, J=8.8), 7.51 (д, 2Н, J=8.3), 7.40 (с, 1Н), 7.11 (с, 1Н), 4.63 (АВкв, 2Н, Δν=5.9, J_ab=17.6), 4.56 (дд, 1Н, J=8.3, 2.5), 4.54 (с, 1Н), 1.95 (дд, 1Н, J=13.7, 8.6), 1.26 (дд, 1Н, J=13.6, 2.4), 1.04 (с, 3Н), 0.99 (с, 3Н). Элементный анализ: вычислено для С₂₀Н₂₂ClN₃O₄S: С 55.10; Н 5.08; N 9.64. Найдено: С 54.96; Н 5.14; N 9.58.

Примеры применения Реакционной схемы 22

Этиловый эфир 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-5-гексеновой кислоты

Смесь этилового эфира (бензгидрилиденамино)уксусной кислоты (20 г, 74.8 ммоль), 4-бром-1-бутена (10,1 г, 74.8 ммоль), К₂СО₃ (31.0 г, 224 ммоль), тетрабутиламмонийбромида (2.41 г, 7.48 ммоль) и ацетонитрила (150 мл) кипятят в течение 6 час. Реакционную смесь охлаждают до rt и фильтруют через воронку со стеклянным фильтром. Фильтрат упаривают в вакууме. Остаток растворяют в диэтиловом эфире (250 мл), выпадает белый осадок. Осадок отфильтровывают в вакууме. К фильтрату, содержащему сырой продукт (этиловый эфир 2-(бензгидрилиденамино)-гекс-5-еновой кислоты), прибавляют 1 N раствор HCl (150 мл). Образующуюся двухфазную смесь энергично перемешивают в течение 18 час. Смесь переносят в делительную воронку. Водную фазу объединяют и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в толуоле (2×200 мл) и снова упаривают. Сырой аминоэфир растворяют в CH₂Cl₂ и проводят его реакцию с 4-хлорбензолсульфонилхлоридом (15.8 г, 74.8 ммоль) и Et₃N (31.2 мл, 224 ммоль). Через 18 час образовавшуюся смесь выливают в 1 N раствор HCl (500 мл). Органический слой отделяют и последовательно промывают 1 N HCl (500 мл) и рассолом (50 мл). Органический слой сушат MgSO₄, фильтруют и упаривают в вакууме. Сырой концентрат очищают колоночной хроматографией на силикагеле (5:1, смесь гексанов/EtOAc), получают 5.57 г (выход на 3 стадии 23%) титульного соединения. LCMS (M+Na)⁺ 454.0; ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8.47 (д, 1Н, J=8.8), 7.76 (д, 2Н, J=8.8), 7.66 (д, 2Н, J=8.8), 5.69 (м, 1Н), 4.95-4.88 (м, 2Н), 3.86 (кв, 2Н, J=7.1), 3.76 (м, 1Н), 1.98 (м, 2Н), 1.71-1.54 (м, 2Н), 1.03 (т, 3H, J=7.1).

Этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-пианобензил)амино]-гекс-5-еновой кислоты

Этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-гекс-5-еновой кислоты получают аналогично Реакционной схеме 1, в качестве исходного берут этиловый эфир 2-(4-хлорбензолсульфониламино)-гекс-5-еновой кислоты. Этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-гекс-5-еновой кислоты выделяют в виде неочищенного твердого вещества желтого цвета (1.14 г) и используют на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.71 (д, 2Н, J=8.0), 7.61 (д, 2Н, J=8.0), 7.53 (д, 2Н, J=8.0), 7.46 (д, 2Н, J=8.0), 5.54 (м, 2Н), 4.90 (м, 2Н), 4.74 (д, 1H, J=16.0), 4.48 (м, 2Н), 3.90 (м, 1Н), 1.95 (м, 2Н), 1.81 (м, 1Н), 1.48 (м, 1Н), 1.11 (т, 3H, J=8.0).

Этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5-оксопентановой кислоты

Смесь этилового эфира 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-гекс-5-еновой кислоты (1.14 г, 2.56 ммоль), тетраоксида осмия (0.030 г, 0.13 ммоль) и триметиламин-N-оксида (0.41 г, 5.5 ммоль) растворяют в ацетоне (50 мл) и перемешивают в течение 4 час при rt. По завершении реакции раствор упаривают в вакууме и снова растворяют в смеси диоксан : H₂O (1.5:1, 50 мл). К этому раствору прибавляют периодат натрия (0.66 г, 3.07 ммоль) и перемешивают 18 час при rt. Затем в реакционную смесь добавляют EtOAc (500 мл) и промывают Н₂О, рассолом, сушат Na₂SO₄ и упаривают. Получают неочищенное бесцветное масло. Дальнейшей очисткой с помощью флеш-хроматографии (SiO₂, 5-75% EtOAc/смесь гексанов) получают этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5-оксопентановой кислоты (выход 0.26 г, 23%) в виде бесцветного масла. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ 9.57 (с, 1Н), 7.69 (д, 2Н, J=8.0), 7.51 (м, 6Н), 5.99 (АВкв, 2Н, Δν=16, J_ab=168), 4.47 (м, 1Н), 3.89 (м, 2Н), 2.53 (м, 1Н), 2.32 (м, 1Н), 2.11 (м, 1Н), 1.61 (м, 1Н), 1.06 (т, 3Н, J=8.0).

Этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5,5-дифторпентановой кислоты

Этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5-оксопентановой кислоты (0.05 г, 0.11 ммоль) медленно прибавляют к раствору DAST (0.020 мл, 0.11 ммоль) в CH₂Cl₂ (2 мл) при rt и перемешивают в течение 16 час. К реакционной смеси прибавляют СН₂Cl₂ и экстрагируют водой (2×25 мл). Объединенные органические вытяжки промывают водой, рассолом, сушат Na₂SO₄ и упаривают, получая этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5,5-дифторпентановой кислоты в виде неочищенного желтого остатка. Этот неочищенный остаток используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Амид 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5,5-дифторпентановой кислоты (Пример 377)

Неочищенный этиловый эфир 2-[(4-хлорбензолсульфонил)-(4-цианобензил)амино]-5,5-дифторпентановой кислоты (0.061 г, 0.13 ммоль) растворяют в МеОН (2 мл). К этой смеси прибавляют 10 N NaOH (0.052 мл, 0.52 ммоль) и образующийся раствор перемешивают при rt в течение 16 час. Реакционную смесь разбавляют водой (25 мл), подкисляют 1 N HCl и экстрагируют CH₂Cl₂ (4×100 мл). Объединенные органические вытяжки сушат Na₂SO₄ и упаривают в вакууме, получают карбоновую кислоту в виде неочищенного бесцветного масла. Затем промежуточную карбоновую кислоту растворяют в ДМФА (10 мл) и смешивают 1-гидроксибензотриазолом (0.030 г, 0.20 ммоль), iPrNEt (0.090 мл, 0.52 ммоль), NH₄Cl (0.01 г, 0.26 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом (0.04 г, 0.20 ммоль) и перемешивают при rt в течение 72 час. К реакционной смеси прибавляют EtOAc (150 мл) и промывают водой (4×50 мл). Органические вытяжки сушат Na₂SO₄ и упаривают в вакууме, получая неочищенное желтовато-белое твердое вещество. Дальнейшая очистка флеш-хроматографией (SiO₂, 5-85 EtOAc/смесь гексанов) дает титульное соединение (выход 10.7 мг, 19%) в виде твердого вещества белого цвета. LCMS (M+Na)⁺ 464.01; ¹H ЯМР (CDCl₃) δ 7.69 (д, 2Н, J=8.3), 7.60 (д, 2Н, J=8.3), 7.49 (м, 4Н), 6.18 (уш. с, 1Н), 5.67 (тт, 1Н, J=56, 4.0), 5.22 (уш. с, 1Н), 4.52 (АВкв, 2Н, Δν=16, J_ab=100), 4.34 (м, 1Н), 2.03 (м, 1Н), 1.68 (м, 1Н), 1.38 (м, 1Н), 0.86 (м, 1Н).

Примеры применения Реакционной схемы 23

Амид (2R)-2-[[4-(2-бромацетиламино)бензил]-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты

К раствору амида (2R)-2-[(4-амино)бензил)-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты (248 мг, 0.56 ммоль) и Et₃N (176 мг, 1.74 ммоль) в CH₂Cl₂ (3 мл) прибавляют бромацетилхлорид (105 мг, 0.67 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при rt. К реакционной смеси прибавляют СН₂Cl₂ (5 мл), промывают 1 N HCl, рассолом и сушат, пропуская через хлопковый фильтр. Растворитель отгоняют в вакууме. Очистка флеш-хроматографией (SiO₂, 10% ацетон/СН₂Cl₂) дает 124 мг (42%) титульного соединения. MS (ESI), (М+Н)⁺ 531.86; ¹H ЯМР(CDCl₃, 400 МГц) δ 78 (уш. с, NH), 7.95 (д, 2Н, J=8.0), 7.82 (д, 2Н, J=8.0), 7.42 (д, 2Н, J=8.0), 7.33 (д, 2Н, J=8.0), 6.20 (уш. с, 1Н), 5.20 (уш. с, 1Н), 4.30 (с, 2Н), 4.22 (д, 1Н, J_ab=16), 4.14 (д, 1Н, J_ab=16), 3.25 (т, 1Н, J=6.0), 1.95 (м, 1Н), 1.60 (м, 2Н), 0.98 (д, 3Н, J=7.0), 0.94 (д, 3Н, J=7.0)

Амид (2R)-2-{(4--хлорбензолсульфонил)-[4-(2-диметиламиноацетиламино)бензил]амино}-4-метилпентановой кислоты (Пример 308)

К раствору амида (2R)-2-[[4-(2-бромацетиламино)бензил]-(4-хлорбензолсульфонил)амино]-4-метилпентановой кислоты (41 мг, 0.77 ммоль) в СН₂Cl₂ (2 мл) прибавляют избыток 2.0 М раствора диметиламина в ТГФ. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Растворитель отгоняют в вакууме. Очистка флеш-хроматографией (SiO₂, 10% МеОН/СН₂Cl₂) дает 24 мг (63%) титульного соединения. MS (ESI), (М+Н)⁺ 495.14; ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 8.85 (с, 1Н), 8.02 (д, 2Н, J=8.0), 7.75 (д, 2Н, J=8.0), 7.38 (д, 2Н, J=8.0), 7.29 (д, 2Н, J=8.0), 6.23 (уш. с, 1Н), 5.39 (уш. с, 1Н), 4.62 (м, 4Н), 3.25 (т, 1Н, J=6.0), 2.95 (с, 6Н), 1.95 (м, 1Н), 1.60 (м, 2Н), 0.98 (д, 3Н, J=7.0), 0.94 (д, 3Н, J=7.0).

Исходные вещества

Нижеприведенные α-аминокислоты имеются в продаже или их получают стандартными методами:

Амид 5,5,5-трифтор-2-аминопентановой кислоты и 6,6,6-трифтор-2-аминогексановую кислоту получают по Ojima, I.; Kato, К.; Nakahashi, К. J. Org. Chem. 1989, 54, 4511.

Бензилбромид, применяемый в синтезе соединений из Примеров 100 и 155, получают по Ishihara, Y.; Fujisawa, Y.; Furuyama, N. Международная заявка РСТ WO 9846590; Senanayake, C.H.; Fang, O.K.; Wilkinson, S.H. Международная заявка РСТ WO 9833789.

Альдегиды для синтеза соединений из Примеров 91, 248, 249, 289, 290 и 300 (см. Реакционную схему 2) получают, как показано на примере получения 4-(пиперидин-1-ил)бензальдегида. Суспензию 4-фторбензальдегида (0.48 мл, 4 ммоль), К₂СО₃ (522 мг, 4 ммоль), пиперидина (340 мг, 4 ммоль) в ДМСО (5 мл) нагревают в запаянной ампуле при 150°С в течение 18 час, после чего реакционную смесь упаривают и очищают хроматографией на силикагеле (СН₂Cl₂, затем 2% МеОН/СН₂Cl₂), получают 4-(пиперидин-1-ил)бензальдегид, 748 мг, выход 98%.

Альдегиды, применяемые в синтезе соединений из Примеров 317, 318 и 320, получают, как показано на примере 4-(пиперидин-1-ил)-3-фторбензальдегида. Суспензию 4,3-дифторбензальдегида (500 мг, 3.5 ммоль), К₂СО₃ (483 мг, 3.5 ммоль), пиперидина (298 мг, 3.5 ммоль) в ДМСО (5 мл) нагревают в запаянной ампуле при 130°С в течение 18 час. Реакционную смесь охлаждают до rt, упаривают и очищают хроматографией на силикагеле (СН₂Cl₂, затем 2% MeOH/CH₂Cl₂), получают 4-(пиперидин-1-ил)-3-фторбензальдегид, 740 мг, выход 99%.

Бензилхлорид, применяемый для получения соединений из Примеров 433, 474, 480 и 500, получают по следующей методике. К раствору 2-[(4-хлорметил)фенил]пропан-2-ола (769 мг, 4.16 ммоль) (ссылка: Сгеагу, X.; Mehrsheikh-Mohammadi, M.E.; McDonald, S. J. Org. Chem. 1987, 52, 3254) в CH₂Cl₂ (14 мл) при -78°С прибавляют DAST (0.72 мл, 5.4 ммоль). Через 1.5 час к раствору прибавляют воду и доводят температуру до комнатной. Смесь экстрагируют CH₂Cl₂ (3х). Объединенные органические вытяжки сушат (Na₂SO₄) и упаривают. Флеш-хроматография на колонке (SiO₂, 0-5% EtOAc/смесь гексанов) дает хлорид в виде бледно-желтой жидкости (512 мг, 66%). ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7.30-7.48 (м, 4Н), 4.58 (с, 2Н), 1.70 (с, 3Н), 1.63 (с, 3Н).

Получение 2-триметилсиланилэтилового эфира 4-бромметилбензойной кислоты, применяемого в синтезе соединения из Примера 470, описано Graffner-Nordberg, M.; Sjoedin, Л.; Tunek, A.; Hallberg, A. Chem. Pharm. Bull. 1998, 46, 591.

Условия хроматографического разделения энантиомерных смесей

Условие 1. Вещество из Примера 345 делят следующим методом. Колонка Chiracel OJ, 4.6 X 250 мм, 10 мкМ, 1.0 мл/мин, 85% гексан/EtOH 0.1% DEA, за 20 мин.

Условие 2. Соединение из Примера 346 разделяют следующим методом. Колонка Chiralpak AD, 4.6 x 250 мм, 10 мкМ, 1.0 мл/мин, 80% гексан/EtOH 0.15% DEA, за 20 мин.

Условие 3. Соединение из Примера 347 разделяют следующим методом. Колонка Chiralpak AD, 4.6 x 250 мм, 10 мкМ, 1.0 мл/мин, 65% гексан/IPA 0.1% DEA, за 18 мин.

Условие 4. Соединения из Примеров 365 и 366 разделяют следующим методом. Колонка Chiralpak AD, 4.6 x 250 мм, 10 мкМ, 1.0 мл/мин, 75% гексан/EtOH 0.15% DEA, за 25 мин.

Условие 5. Соединения из Примеров 408 и 409 разделяют следующим методом. Колонка Chiracel OD, 4.6 x 250 мм, 10 мкМ, 1.0 мл/мин, 90% гексан/EtOH 0.15% DEA, за 36 мин.

1. Соединение формулы I или его оптический изомер

где R¹ выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного C_1-6 алкила или С_2-6 алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, С_3-7 циклоалкила, С_1-4 алкокси, С_1-4 алкилтио и галогена;

(б) С_3-7 циклоалкила, замещенного, необязательно, гидрокси или галогеном;

R обозначает водород

R² выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного C_1-6 алкила или С_3-6 алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкокси и NR⁴R⁵;

(б) С_3-7 циклоалкилметила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из амино, (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4алкил)N-;

(в) линейного или разветвленного C_1-6 алкил-С(=O)-А;

(г) -В-нафтила;

(д)

D и Е каждый независимо обозначает простую (ординарную) связь, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_2-6 алкенил;

Z выбирают из группы, состоящей из водорода, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, галогена, циано, гидрокси, -OCHF₂, -OCF₃, -CF₃ и -CHF₂;

X и Y каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, гидрокси, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, С_1-4 алкилS-, C_1-4 алкилSO₂-, нитро, F₃S- и циано;

-OR⁶;

-NR⁴R⁵;

-NR⁷C(=O)R⁸;

-C(=O)W, где W выбирают из группы, состоящей из гидрокси, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, фенокси и -NR⁴R⁵;

-ОС(=O) C_1-4 алкила;

фенила, причем указанный фенил, необязательно, имеет в качестве заместителя циано; и

гетероциклической группы, где указанную гетероциклическую группу выбирают из ряда, состоящего из пирролила, пиразолила, триазолила, тетразолила, оксадиазолила, тиадиазолила, причем указанная гетероциклическая группа, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, (галоген)С_1-4 алкила и CO₂C_1-4 алкила;

(е) -В-(гетероцикла), где указанный гетероцикл выбирают из группы, состоящей из фуранила, тиофуранила, имидазолила, пиридинила, оксазолила, изоксазолила и тиазолила, причем указанный гетероцикл, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, CO₂C_1-4 алкила, амино, (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила;

(ж) -В-(пиперидин-4-ила), где указанный пиперидин-4-ил, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из линейного или разветвленного C_1-6 алкила, СН₂С(=O) фенила, фенилметила, которые, необязательно, имеют заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, бензимидазол-2-ила, пиридила и тетрагидрофуран-2-ила; и -C(=O)W', где W' выбирают из группы, состоящей из C_1-4 алкокси, R⁹ и -NR⁴R⁵;

А обозначает гидрокси, C_1-4 алкокси или NR⁴R⁵;

В обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил или С_3-6 алкенил;

R³ обозначает фенил или пиридил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-;

R⁴ и R⁵ каждый независимо обозначает водород, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, С_3-6 алкинил, С_3-7 циклоалкил, С_3-7 циклоалкилметил, C_1-4 алкокси, фенил, бензил, пиперидин-4-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, циано, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, гидроксиметила, фенила, пиридила, С_1-4алкила, C_1-4 алкокси, (галоген)₃С-О-, (галоген)₂СН-O-, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, пиперидин-1-ила, CO₂Н, CO₂C_1-4 алкила;

R⁴ и R⁵ вместе могут обозначать морфолин-4-ил, тиоморфолин-4-ил, пирролидин-1-ил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил, декагидрохинолин-1-ил, пиперидин-1-ил, пиперазин-1-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, пиридила, бензила, C_1-6 алкила, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, CO₂Н, CO₂С_1-4 алкил;

R⁶ обозначает линейный или разветвленный C_1-6алкил, С_3-6алкенил, бензил или фенил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, (C_1-4 алкил)(фенил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

R⁷ обозначает водород, линейный или разветвленный C_1-6 алкил;

R⁸ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, пиридил или фуранил;

где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

R⁹ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил, фенил, оксазолил или пиридил; где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, С_1-4 алкокси, амино, (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

или его нетоксичная фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, имеющее формулу

где R¹ выбирают из группы, состоящей из

линейного или разветвленного С_1-6 алкила или С_2-6 алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, С_3-7 циклоалкила, C_1-4 алкокси, C_1-4 алкилтио и галогена;

R² выбирают из группы, состоящей из

(а) линейного или разветвленного C_1-6алкила или С_3-6алкенила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкокси и NR⁴R⁵;

(б) С_3-7циклоалкилметила, имеющего, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из амино, (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4алкил)N;

(в) линейного или разветвленного С_1-6 алкил-С(=O)-А;

(г) -В-нафтила;

(д)

D и Е каждый независимо обозначает простую (ординарную) связь, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_2-6 алкенил;

Z выбирают из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, галогена, циано, гидрокси, -OCHF₂, -OCF₃, -CF₃ и -CHF₂;

Х и Y каждый независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, гидрокси, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, C_1-4 алкилS-, C_1-4 алкилSO₂-, нитро, F₃CS- и циано;

-OR⁶;

-NR⁴R⁵;

-NR⁷C(=O)R⁸;

-C(=O)W, где W выбирают из группы, состоящей из гидрокси, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, фенокси и -NR⁴R⁵;

-ОС(=O) C_1-4 алкила;

фенила, причем указанный фенил, необязательно, имеет в качестве заместителя циано; и

гетероциклической группы, где указанную гетероциклическую группу выбирают из ряда, состоящего из пирролила, пиразолила, триазолила, тетразолила, оксадиазолила, тиадиазолила, причем указанная гетероциклическая группа, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, (галоген)С_1-4 алкила и CO₂C_1-4 алкила;

(е) -В-(гетероцикла), где указанный гетероцикл выбирают из группы, состоящей из фуранила, тиофуранила, имидазолила, пиридинила, оксазолила, изоксазолила и тиазолила, причем указанный гетероцикл, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, CO₂C_1-4 алкила, амино, (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила;

(ж) -В-(пиперидин-4-ила), где указанный пиперидин-4-ил, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из линейного или разветвленного C_1-6 алкила, СН₂(=O) фенила, фенилметила, которые, необязательно, имеют заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, бензимидазол-2-ила, пиридила и тетрагидрофуран-2-ила; и -C(=O)W, где W выбирают из группы, состоящей из C_1-4 алкокси, R⁹ и -NR⁴R⁵;

А обозначает гидрокси, C_1-4 алкокси или NR⁴R⁵;

В обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил или С_3-6 алкенил;

R³ обозначает фенил или пиридил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-;

R⁴ и R⁵ каждый независимо обозначает водород, линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, С_3-6 алкинил, С_3-7 циклоалкил, С_3-7 циклоалкилметил, C_1-4 алкокси, фенил, бензил, пиперидин-4-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, циано, галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, гидроксиметила, фенила, пиридила, С_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, (галоген)₃С-О-, (галоген)₂СН-O-, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, пиперидин-1-ила, CO₂Н, СО₂С_1-4 алкила;

R⁴ и R⁵ вместе могут обозначать морфолин-4-ил, тиоморфолин-4-ил, пирролидин-1-ил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил, декагидрохинолин-1-ил, пиперидин-1-ил, пиперазин-1-ил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из гидрокси, пиридила, бензила, C_1-6 алкила, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, CO₂Н, CO₂C_1-4 алкил;

R⁶ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил или фенил, где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, амино, (С_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, (C_1-4 алкил)(фенил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

R⁷ обозначает водород, линейный или разветвленный C_1-6 алкил;

R⁸ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, пиридил или фуранил; где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из (С_1-4алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила;

R⁹ обозначает линейный или разветвленный C_1-6 алкил, С_3-6 алкенил, бензил, фенил, оксазолил или пиридил; где каждый, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН-, галогенСН₂-, С_1-4 алкокси, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4 алкил)N-, морфолин-4-ила, тиоморфолин-4-ила, пиперидин-1-ила, пиперазин-1-ила и 4-(C_1-6 алкил)пиперазин-1-ила,

или его нетоксичная фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.2, в котором R¹ обозначает линейный или разветвленный C_1-6алкил, имеющий, необязательно, в качестве заместителя С_3-7циклоалкил.

4. Соединение по п.2, в котором R¹ обозначает линейный или разветвленный С_1-6алкил, имеющий, необязательно, в качестве заместителя галоген.

5. Соединение по п.2, в котором R³ обозначает фенил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4 алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-.

6. Соединение по п.2, в котором R³ обозначает пиридил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4алкила, (галоген)₃С-, (галоген)₂СН- и галогенСН₂-.

7. Соединение по п.5, в котором R³ обозначает фенил, необязательно замещенный галогеном.

8. Соединение по п.2, в котором R² обозначает линейный или разветвленный C_1-6алкил или С_3-6алкенил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, С_1-4алкокси и NR⁴R⁵.

9. Соединение по п.2, в котором R² обозначает С_3-7циклоалкилметил, имеющий, необязательно, заместители, выбранные из группы, состоящей из амино, (C_1-4алкил)NH- и ди(С_1-4алкил)N-.

10. Соединение по п.2, в котором R² обозначает линейный или разветвленный С_1-6алкил-С(=O)-А.

11. Соединение по п.2, в котором R² обозначает -В-нафтил.

12. Соединение по п.2, в котором R² обозначает

13. Соединение по п.2, в котором R² обозначает -В-(гетероцикл), где указанный гетероцикл выбирают из группы, состоящей из фуранила, тиофуранила, имидазолила, пиридинила, оксазолила, изоксазолила и тиазолила, причем указанный гетероцикл, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из галогена, C_1-4 алкила, СО₂С_1-4 алкила, амино, (C_1-4 алкил)NH-, ди(С_1-4алкил)N-, морфолин-4-ила, пирролидин-1-ила, пиперидин-1-ила.

14. Соединение по п.2, в котором R² обозначает -В-(пиперидин-4-ил), где указанный пиперидин-4-ил, необязательно, имеет заместители, выбранные из группы, состоящей из линейного или разветвленного С_1-6 алкила, СН₂С(=O) фенила и фенилметила, которые, необязательно, имеют заместители, выбранные из группы, состоящей из циано, галогена, бензимидазол-2-ила, пиридила и тетрагидрофуран-2-ила; и -C(=O)W', где W' выбирают из группы, состоящей из C_1-4 алкокси, R⁹ и -NR⁴R⁵.

15. Соединение по п.12, в котором В обозначает линейный или разветвленный С_1-4алкил или С_3-6алкенил.

16. Соединение по п.15, в котором Z обозначает водород.

17. Соединение по п.15, в котором Х обозначает -C(=O)W, E обозначает простую (ординарную) связь и Y обозначает водород.

18. Соединение по п.15, в котором Х обозначает -NR⁴R⁵, E обозначает ординарную связь и Y обозначает водород.

19. Соединение по п.15, в котором Х обозначает -OR⁶, E обозначает ординарную связь и Y обозначает водород.

20. Соединение по п.15, в котором Х обозначает -NR⁷C(=O)R⁸, Е обозначает ординарную связь и Y обозначает водород.

21. Фармацевтическая композиция, ингибирующая продукцию β-амилоидного пептида, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п.1 в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.

22. Способ ингибирования продукции β-амилоидного пептида, который заключается во введении указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по п.1