6-алкоксипиридопиримидины и фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибиторов киназы мар р38

Изобретение относится к соединениям формулы I

или его фармацевтически приемлемой соли или гидрату, где Z означает N; X1 означает О или S; R1 означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода; R2 означает водород или алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода, и R3 означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода, замещенный группой -ORa, где Ra означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода; насыщенный неароматический циклический радикал, содержащий от 3 до 8 атомов в цикле, где один атом в цикле является гетероатомом, выбранным из N или О, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода, причем один или два атома углерода необязательно замещены по атому азота группами -С(O)(С16алкокси) или -SO216алкил. Соединения обладают ингибирующей активностью в отношении киназы MAP р-38. Изобретение также относится к фармацевтической композиции. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Настоящее изобретение относится к пиридопиримидинам и их производным. Прежде всего настоящее изобретение относится к 2,6-дизамещенным 7-оксопиридо[2,3-d]пиримидинам, их содержащим фармацевтическим композициям и способам их применения.

Митоген-активированные протеинкиназы (MAP) относятся к семейству пролин-зависимых серин/треонинкиназ, которые активируют свои субстраты с помощью двойного фосфорилирования. Киназы активируются множеством сигналов, включая (алиментарный) питательный и осмотический стресс, УФ-облучение, ростовые факторы, эндотоксин и воспалительные цитокины. Одна группа киназ MAP включает группу киназ р38, содержащую множество изоформ (например, р38α, р38β, р38γ и р38δ). Киназы р38 ответственны за фосфорилирование и активацию факторов транскрипции, также как и другие киназы, и активируются при физическом и химическом стрессе, под действием провоспалительных цитокинов и бактериального липополисахарида.

Было установлено, что наиболее важное действие киназ заключается в том, что продукты фосфорилирования киназой р38 опосредуют образование воспалительных цитокинов, включая ФНО и ИЛ-1, а также циклооксигеназы-2. Каждый из указанных цитокинов включен в процесс ряда патологических процессов и состояний. Например, цитокин ФНО-α в первую очередь продуцируется активированными моноцитами и макрофагами. Такое избыточное или неконтролируемое его продуцирование играет основную причинную роль в патогенезе ревматоидного артрита. Недавно было установлено, что ингибирование продуцирования ФНО находит широкое применение при лечении воспалительных процессов, воспаления кишечника, рассеянного склероза и астмы.

ФНО принимает также участие в вирусных инфекциях, таких как ВИЧ, вирус гриппа и вирус герпеса, включая, наряду с прочими, простой герпес тип-1 (ПВГ-1), простой герпес тип-2 (ПВГ-2), цитомегаловирус (ЦМВ), вирус ветряной оспы (ВВО), вирус Эпштейна-Барра, вирус герпеса-6 человека (ВГЧ-6), вирус герпеса-7 человека (ВГЧ-7), вирус герпеса-8 человека (ВГЧ-8), вирус Ауески и вирус инфекционного ринотрахеита.

Аналогичным образом, ИЛ-2 продуцируется активированными моноцитами и макрофагами и играет роль во многих патофизиологических ответных реакциях, включая ревматоидный артрит, лихорадку и снижение резорбции кости.

Кроме того, р38 принимает участие в процессах инсульта, болезни Альцгеймера, остеоартрита, повреждения легких, септического шока, ангиогенеза, дерматита, псориаза и атопического дерматита (J. Exp. Opin. Ther. Patents, Vol.10(1) (2000)).

Ингибирование таких цитокинов с помощью ингибирования киназы р38 можно использовать для контроля, снижения интенсивности или облегчения симптомов многих заболеваний.

В заявке WO 96/34867 описаны некоторые 6-арилпиридо[2,3-d]пиримидин-7-оны, -7-имины и -7-тионы в качестве ингибиторов пролиферации клеток, опосредованной протеин/тирозин киназой. В заявке WO 96/15128 описаны другие 6-арилпиридо[2,3-d]пиримидины и нафтиридины в качестве ингибиторов тирозинкиназы. В заявке WO 98/33798 описаны 6-алкилпиридо[2,3-d]пиримидин-7-оны в качестве ингибиторов циклин-зависимых киназ. В ЕР 0278686 описаны некоторые 4-аминопиридопиримидины в качестве ингибиторов дигидрофолатредуктазы. В патентах и заявках US Pat. No.6316464, US Pat. No.6451804, US Pat. No.6506749, US Pat. No.6518276B2, US No.09/693364 (WO 01/29042) и US No.10/073845 (WO 02/64594) описаны соединения-ингибиторы киназы р38.

Один объект настоящего изобретения (I) относится к соединениям формулы

и к их фармацевтически приемлемым солям, гидратам или пролекарствам,

где Z означает N или СН;

X1 означает О, S, С(=O) или NR4 (где R4 означает водород или алкил);

R1 означает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил или -СН2-алкенил;

R2 означает водород, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, аралкил, галогеналкил, гетероалкил, цианоалкил, алкилен-С(O)-R21 (где R21 означает водород, алкил, гидрокси, алкокси, амино, моноалкиламино или диалкиламино), амино, моноалкиламино, диалкиламино, ацил или NR22-Y-R23 (где Y означает -С(O), -С(O)O-, -C(O)NR24, S(O)2 или S(O)2NR25; R22, R24 и R25 независимо означают водород или алкил, а R23 означает водород, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероалкил или необязательно замещенный фенил);

R3 означает алкил, галогеналкил, арил, аралкил, гетероарил, гетероаралкил, циклоалкил, циклоалкилакил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетероалкил, цианоалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил или гетероциклоамино-SO2-R12 (где R12 означает галогеналкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил).

Более подробно настоящее изобретение относится к следующим соединениям:

(II) соединения формулы I, как определено в п.(1), но за исключением R1, который вместо -СН2-алкенила означает алкенилен, и R3 дополнительно означает водород, или их фармацевтически приемлемые соль, гидрат или пролекарство, или

(III) соединения (I) или (II), где Z означает N, X1 означает О, R1 означает алкил, R2 означает Н или алкил, а R3 означает гетероалкил или гетероциклил;

(IV) соединения (III), где гетероалкил означает алкоксиалкил, а гетероциклил означает насыщенный неароматический циклический радикал, содержащий в цикле 6 атомов и в котором один циклический атом означает не углерод, а кислород или азот, необязательно замещенный по атому азота группами -алкил-SO2- или алкоксикарбонил, или

(V) соединения (I) или (II), где X1 означает -О-, или

(VI) соединения (I), (II) или (V), где R1 означает алкил или циклоалкил, или

(VII) соединения (I), (II), (V) или (VI), где R3 означает циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетероалкил, гетероциклил или гетероциклилалкил, или

(VIII) соединения (I), (II), (V) или (VI-VII), где R3 означает циклоалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетероалкил или гетероциклил, или

(IX) соединения (I), (II), (V) или (VI-VIII), где R3 означает необязательно замещенный гетероциклил, или

(X) соединения (I), (II), (V) или (VI-IX), где R3 означает гидроксиалкил или алкоксиалкил, или

(XI) соединения (I), (II), (V) или (VI-X), где R2 означает водород, алкил, арил, циклоалкил или гетероалкил, или

(XII) соединения (I), (II), (V) или (VI-XI), где R2 означает алкил или гидроксиалкил, или

(XIII) соединения (I) или (II) формулы (I")

где

R1 означает алкил;

R2 выбрано из группы, включающей водород, алкил, арил, циклоалкил и гетероарил, и

R3 означает гетероалкил или гетероциклил или их фармацевтически приемлемые соли или

(XIV) соединения (XIII), где R3 выбирают из ряда: (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил, 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и морфолинил, или

(XV) соединения (XIV), где

R1 означает этил,

R2 означает метил и

R3 выбирают из ряда: (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил, 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и морфолинил, или (XVI) соединения (XIII) формулы

где X означает -О-, -C(=O)-, -N(R12a)- или -CH(R12b)-;

R12a выбирают из ряда: водород, С1-4алкил, -C(=O)R15, -С(O)2R15 и -S(O)2(C1-4алкил);

R12b выбирают из ряда водород, С1-4алкил, -OR15, -C(=O)R15, -С(O)2R15 и -S(O)21-4алкил);

R14 выбирают из ряда: С1-4алкил, оксо (=O), -OR15, -C(=O)R15, -C(O)2R15 и -S(O)21-4алкил), и R15 в каждом случае независимо выбирают из каждого другого R15, который выбирают из ряда водород и С1-4алкил;

q равно 0 или 1 и

r равно 0, 1 или 2, или

(XVII) соединения (XVI), где X означает -N(R12a)-, a R12a означает -S(O)2(C1-4алкил).

Другой объект настоящего изобретения относится к фармацевтическому составу, включающему соединение формулы I и фармацевтически приемлемые носитель, разбавитель или эксципиент.

Соединения формулы I и их упомянутые выше соли являются ингибиторами протеинкиназ и проявляют высокую активность в отношении киназы р38 in vivo. Эти соединения проявляют также селективность в отношении киназы р38 по сравнению с циклин-зависимыми киназами и тирозинкиназами. Следовательно, соединения по настоящему изобретению можно использовать для лечения заболеваний, опосредованных провоспалительными цитокинами, такими как ФНО и ИЛ-1. Таким образом, другим объектом настоящего изобретения является способ лечения опосредованных киназой р38 заболеваний или состояний, который заключается во введении терапевтически эффективного количества соединения формулы I пациенту, нуждающемуся в таком лечении.

Если не указано иное, следующие термины, использованные в данном контексте, имеют следующие значения.

Термин «ацил» означает радикал -(C(O)R, где R означает водород, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, фенил или фенилалкил, причем алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил и фенилалкил определены в данном контексте. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, формил, ацетил, циклогексилкарбонил, циклогексилметилкарбонил, бензоил, бензилкарбонил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «ациламино» означает радикал -NR'C(O)R, где R' означает водород или алкил, а R означает водород, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, фенил или фенилалкил, причем значения групп алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил и фенилалкил определены выше. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, формиламино, ацетиламино, циклогексилкарбониламино, циклогексилметилкарбониламино, бензоиламино, бензилкарбониламино и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «алкенил» означает линейный, одновалентный, углеводородный радикал, содержащий от двух до шести атомов углерода, или разветвленный, одновалентный, углеводородный радикал, содержащий от трех до шести атомов углерода и содержащий по крайней мере одну двойную связь, например этенил, пропенил и т.п., или указано конкретное значение термина.

Таким образом, если упомянута группа -CH2-R, то R означает алкенильный радикал, определенный выше, и эта группа включает, без ограничения перечисленным, такие группы, как (-СН2-СН=СН2), (-СН2-СН=СН-СН3) и т.п., или указано конкретное значение термина.

Термин «алкокси» означает радикал -OR, где R означает алкил, определенный в данном контексте, например метокси, этокси, пропокси, бутокси и т.п., или указано конкретное значение термина.

Термин «алкил» означает линейный, насыщенный, одновалентный, углеводородный радикал, содержащий от одного до восьми атомов углерода, или разветвленный, насыщенный, одновалентный, углеводородный радикал, содержащий от трех до восьми атомов углерода, например метил, этил, пропил, 2-пропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, пентил и т.п., или указано иное значение термина. Алкил предпочтительно означает линейную алкильную группу, содержащую от одного до шести атомов углерода, или разветвленную алкильную группу, содержащую от трех до шести атомов углерода, более предпочтительно линейную алкильную группу, содержащую от одного до четырех атомов углерода или разветвленную алкильную группу, содержащую от трех до четырех атомов углерода.

Термин «алкилен» означает линейный, насыщенный, двухвалентный, углеводородный радикал, содержащий от одного до шести атомов углерода, или разветвленный, насыщенный, двухвалентный, углеводородный радикал, содержащий от трех до шести атомов углерода, например метилен, этилен, 2,2-диметилэтилен, пропилен, 2-метилпропилен, бутилен, пентилен и т.п., или указано конкретное значение термина.

Термин «алкилтио» означает радикал -SR, где R означает определенный выше алкил, например метилтио, этилтио, пропилтио, бутилтио и т.п., или указано конкретное значение термина.

Термин «арил» означает одновалентный, моноциклический или бициклический, ароматический, углеводородный радикал, который необязательно и независимо замещен одним или более заместителями, предпочтительно, одним, двумя или тремя заместителями, которые предпочтительно выбирают из группы, включающей алкил, гидрокси, алкокси, галогеналкил, галогеналкокси, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, - SO2NR'R" (где R' и R" независимо означают водород или алкил), Y-C(O)-R (где Y отсутствует или означает алкиленовую группу, а R означает водород, алкил, галогеналкил, галогеналкокси, гидрокси, алкокси, амино, моноалкиламино или диалкиламино), гетероалкил, гетероалкилокси, гетероалкиламино, галоген, нитро, циано, амино, моноалкиламино, диалкиламино, алкилсульфониламино, гетероалкилсульфониламино, сульфонамидо, метилендиокси, этилендиокси, гетероциклил и/или гетероциклилалкил. Более подробно термин «арил» включает, без ограничения перечисленным, фенил, хлорфенил, метоксифенил, 2-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 1-нафтил, 2-нафтил и их производные или указано конкретное значение термина.

Термин «арилокси» означает радикал -OR, где R означает определенный выше арил, например фенокси, или указано конкретное значение термина.

Термин «арилоксикарбонил» означает радикал R-C(O=)-, где R означает арилокси, например феноксикарбонил, или указано конкретное значение термина.

Термин «циклоалкил» означает насыщенный, одновалентный, циклический, углеводородный радикал, содержащий от трех до семи атомов углерода, например циклопропил, циклобутил, циклогексил, 4-метилциклогексил и т.п., или указано конкретное значение термина.

Термин «циклоалкилалкил» означает радикал -RaRb, где Ra означает алкилен, a Rb означает циклоалкил, определенные выше, например циклогексилметил и т.п., или указано конкретное значение термина.

Термин «замещенный циклоалкил» означает циклоалкильный радикал, определенный выше и содержащий один, два или три (предпочтительно один) атома в цикле, в которых атом водорода независимо заменен на группу циано или -Y-C(O)R (где Y отсутствует или означает алкилен, а R означает водород, алкил, галогеналкил, гидрокси, алкокси, амино, моноалкиламино, диалкиламино или необязательно замещенный фенил) или указано иное значение термина.

Термин «диалкиламино» означает радикал -NRR', где R и R' независимо означают алкил, гидроксиалкил, циклоалкил или циклоалкилаклил, как определено выше. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, диметиламино, метилэтиламино, ди(1-метилэтил)амино, (метил)(гидроксиметил)амино, (циклогексил)(метил)амино, (циклогексил)(этил)амино, (циклогексил)(пропил)амино, (циклогексилметил)(метил)амино, (циклогексилметил)(этил)амино и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «галоген» означает фтор, хлор, бром или иод, предпочтительно фтор и хлор.

Термин «галогеналкил» означает алкил, замещенный одним или более одинаковыми или различными атомами галогена, например -СН2Cl, -CF3, -СН2CF3, -СН2CCl3, и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероалкил» означает алкильный радикал, как определено выше, в котором один, два или три атома водорода заменены на заместитель, который независимо выбирают из группы, включающей -ORa, -N(O)mRbRc (где m равно 0 или 1) и -S(O)nRd (где n равно целому числу от 0 до 2), причем очевидно, что гетероалкильный радикал присоединен через атом углерода, а Ra означает водород, ацил, алкоксикарбонил, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил; Rb и Rc независимо друг от друга означают водород, ацил, алкоксикарбонил, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилсульфонил, аминосульфонил, моно- или диалкиламиносульфонил, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил, гидроксиалкилсульфонил или алкоксиалкилсульфонил, но при условии, что если m равно 1, то Rb и Rc оба независимо выбирают из группы, включающей алкил, циклоалкил и циклоалкилалкил, и если n равно 0, то Rd означает водород, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил или необязательно замещенный фенил, и если n равно 1 или 2, то Rd означает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, необязательно замещенный фенил, амино, ациламино, моноалкиламино или диалкиламино. Гетероалкил предпочтительно означает алкил, определенный выше и замещенный группой -ORa, причем Ra означает алкил. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, 2-гидроксиэтил, 3-гидроксипропил, 2-гидрокси-1-гидроксиметилэтил, 2,3-дигидроксипропил, 1-гидроксиметилэтил, 3-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-гидрокси-1-метилпропил, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 2-метилсульфонилэтил, аминосульфонилметил, аминосульфонилэтил, аминосульфонилпропил, метиламиносульфонилметил, метиламиносульфонилэтил, метиламиносульфонилпропил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероалкилкарбонил» означает группу Ra-C(=O)-, где Ra означает гетероалкильную группу. Типичные примеры включают ацетилоксиметилкарбонил, аминометилкарбонил, 4-ацетилокси-2,2-диметилбутан-2-оил, 2-амино-4-метилпентан-2-оил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероалкилокси» означает группу Ra-O-, где Ra означает гетероалкильную группу. Типичные примеры включают (Ме-С(=O)-O-СН2-O- и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероалкилоксикарбонил» означает группу Ra-C(=O), где Ra означает гетероалкилоксигруппу. Типичные примеры включают 1-ацетилоксиметоксикарбонил (Ме-С(=O)-O-СН2-O-С(=O)-) и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероарил» означает одновалентный, моноциклический или бициклический радикал, содержащий от 5 до 12 атомов в цикле, и по крайней мере одно ароматическое кольцо, содержащее один, два или три гетероатома в цикле, выбранных из N, О или S, причем остальные атомы являются атомами углерода, и очевидно, что гетероарильный радикал присоединен через ароматическое кольцо. Гетероарильное кольцо необязательно и независимо замещено одним или более заместителями, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из ряда алкил, галогеналкил, гетероалкил, гидрокси, алкокси, галоген, нитро или циано. Более подробно, термин гетероарил включает, без ограничения перечисленным, пиридил, фуранил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, имидазолил, изоксазолил, пирролил, пиразолил, пиримидинил, бензофуранил, тетрагидробензофуранил, изобензофуранил, бензотиазолил, бензоизотиазолил, бензотриазолил, индолил, изоиндолил, бензоксазолил, хинолил, тетрагидрохинолинил, изохинолил, бензимидазолил, бензизоксазолил или бензотиенил, имидазо[1,2-а]пиридинил, имидазо[2,1-b]тиазолил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероаралкил» означает радикал -RaRb, где Ra означает алкилен, a Rb означает гетероарил, как определено выше, например пиридин-3-илметил, имидазолилэтил, пиридинилэтил, 3-(бензофуран-2-ил)пропил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероалкилзамещенный циклоалкил» означает циклоалкильный радикал, как определено выше, причем один, два или три атома водорода в циклоалкильном радикале заменены на гетероалкильную группу, при этом очевидно, что гетероалкильный радикал присоединен к циклоалкильному радикалу через углерод-углеродную связь. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, 1-гидроксиметилциклопентил, 2-гидроксиметилциклогексил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гетерозамещенный циклоалкил» означает циклоалкильный радикал, как определено выше, причем один, два или три атома водорода в циклоалкильном радикале заменены на заместитель, независимо выбранный из группы, включающей гидрокси, алкокси, амино, ациламино, моноалкиламино, диалкиламино, оксо (С=O), имино, гидроксиимино (=NOH), NR'SO2Rd (где R' означает водород или алкил, а Rd означает алкил, циклоалкил, гидроксиалкил, амино, моноалкиламино или диалкиламино), -X-Y-C(O)R (где X означает О или NR', Y означает алкилен или отсутствует, R означает водород, алкил, галогеналкил, алкокси, амино, моноалкиламино, диалкиламино или необязательно замещенный фенил, R' означает Н или алкил), или -S(O)nR (где n равно целому числу от 0 до 2), например, если n равно 0, то R означает водород, алкил, циклоалкил, необязательно замещенный фенил или тиенил, а если n равно 1 или 2, то R означает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, необязательно замещенный фенил, тиенил, амино, ациламино, моноалкиламино или диалкиламино. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, 2-, 3- или 4-гидроксициклогексил, 2-, 3- или 4-аминоциклогексил, 2-, 3- или 4-метансульфонамидоциклогексил и т.п., предпочтительно 4-гидроксициклогексил, 3,5-дигидроксициклогексил, 2-аминоциклогексил или 4-метансульфонамидоциклогексил или указано конкретное значение термина.

Термин «гетерозамещенный циклоалкилалкил» означает радикал RaRb-, где Ra означает гетерозамещенный циклоалкильный радикал, а Rb означает алкиленовый радикал или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероциклоамино» означает насыщенную, одновалентную, циклическую группу, содержащую от 4 до 8 атомов в цикле, причем в цикле содержится один атом N, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода. Типичные примеры включают пиперидин и пирролидин или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероциклил» означает насыщенный или ненасыщенный, неароматический, циклический радикал, содержащий от 3 до 8 атомов в цикле, предпочтительно 6 атомов в цикле, причем один или два, предпочтительно один атом в цикле является гетероатомом, выбранным из N, О или S(O)n (где n равно целому числу от 0 до 2), предпочтительно N или О, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода, причем один или два атома углерода необязательно заменены на карбонильную группу. Гетероциклильное кольцо необязательно и независимо замещено одним, двумя или тремя, предпочтительно одним заместителем, выбранным из ряда алкил, галогеналкил, гетероалкил, галоген, нитро, циано, цианоалкил, гидрокси, алкокси, амино, моноалкиламино, диалкиламино, аралкил, -(X)n-C(O)R (где X означает О или NR', n равно 0 или 1, R означает водород, алкил, галогеналкил, гидрокси (если n равно 0), алкокси, амино, моноалкиламино, диалкиламино или необязательно замещенный фенил, а R' означает водород или алкил), -алкилен-С(O)Ra (где Ra означает алкил, OR или NR'R", и R означает водород, алкил или галогеналкил, а R' и R" независимо означают водород или алкил), или -S(O)nR (где n равно целому числу от 0 до 2), например, если n равно 0, то R означает водород, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил, а если n равно 1 или 2, то R означает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, амино, ациламино, моноалкиламино, диалкиламино или гетероалкил, предпочтительно алкилсульфокси или алкоксикарбонил. Более предпочтительно термин «гетероциклил» включает, без ограничения пересчисленным, тетрагидропиранил, пиперидино, N-метилпиперидин-3-ил, 2-оксопиперидинил, пиперазино, N-метилпирролидин-3-ил, 3-пирролидино, морфолино, тиоморфолино, тиоморфолино-1-оксид, тиоморфолино-1,1-диоксид, 4-(1,1-диоксотетрагидро-2Н-тиопиранил), пирролинил, имидазолинил, N-метансульфонилпиперидин-4-ил и их производные, или указано конкретное значение термина.

Термин «гетероциклилалкил» означает радикал -RaRb, где Ra означает алкиленовую группу, a Rb означает гетероциклильную группу, как определено выше, например тетрагидропиран-2-илметил, 2- или 3-пиперидинилметил, 1,3-(4-метилпиперизин-1-ил)пропил и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «гидроксиалкил» означает алкильный радикал, как определено выше, замещенный одним или более, предпочтительно одним, двумя или тремя гидроксигруппами, при условии, что один и тот же атом углерода содержит не более одной гидроксигруппы. Типичные примеры включают, без ограничения перечисленным, гидроксиметил, 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 3-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 3-гидроксибутил, 4-гидроксибутил, 2,3-дигидроксипропил, 2-гидрокси-1-гидроксиметилэтил, 2,3-дигидроксибутил, 3,4-дигидроксибутил, 1,5-дигидроксипент-3-ил и 2-(гидроксиметил-3-гидроксипропил, предпочтительно 2-гидроксиэтил, 2,3-дигидроксипропил и 1-(гидрометил)-2-гидроксиэтил. В связи с этим термин «гидроксиалкил» использован в данном контексте для определения семейства гетероалкильных групп или указано конкретное значение термина.

Термин «уходящая группа» имеет обычное значение, известное в области органического синтеза, то есть означает атом или группу, которые замещаются нуклеофилом и включает галоген (такой как хлор, бром или иод), алкансульфонилокси, аренсульфонилокси, алкилкарбонилокси (например, ацетокси), арилкарбонилокси, мезилокси, тозилокси, трифторметансульфонилокси, арилокси (например, 2,4-динитрофенокси), метокси, N,O-диметилгидроксиамино и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «моноалкиламино» означает радикал -NHR, где R означает алкил, гидроксиалкил, циклоалкил или циклоалкилалкил, как определено выше, например, метиламино, (1-метилэтил)амино, гидроксиметиламино, циклогексиламино, циклогексилметиламино, циклогексилэтиламино и т.п. или указано конкретное значение термина.

Термин «необязательно замещенный фенил» означает фенильное кольцо, которое необязательно и независимо замещено одним или более заместителями, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из группы, включающей алкил, гидрокси, алкокси, галогеналкил, галогеналкокси, гетероалкил, галоген, нитро, циано, амино, метилендиокси, этилендиокси и ацил или указано конкретное значение термина.

Термин «фармацевтически приемлемый экципиент» означает эксципиент, который используют для получения фармацевтической композиции и который в основном является безопасным, нетоксичным и не оказывает отрицательного действия в биологическом или ином отношении. Такой эксципиент включает приемлемые эксципиенты для применения в ветеринарии и в фармацевтике. «Фармацевтически приемлемый эксципиент», используемый в данном контексте и пунктах формулы изобретения, включает как один, так более одного таких эксципиентов.

Термин «фармацевтически приемлемая соль» соединения означает соль, которая является фармацевтически приемлемой и обладает требуемой фармакологической активностью исходного соединения. Такие соли включают (1) кислотно-аддитивные соли неорганических кислот, таких как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., или органических кислот, таких как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил) бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4-хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 4-толуолсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глютаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п., или (2) соли, полученные при замене кислотного протона, содержащегося в исходном соединении, на ион металла, например ион щелочного металла, ион щелочноземельного металла или ион алюминия, или при образовании координационных связей с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и т.п. Термин «пролекарство», используемый в данном контексте, относится к любому соединению, из которого in vivo высвобождается активное исходное лекарственное средство формулы I, при введении такого пролекарства млекопитающему. Пролекарства соединения формулы I получают модификацией одной или более функциональных групп, присутствующих в соединении формулы I, при этом модифицированная (модифицированные) группа (группы) расщеплялются in vivo с высвобождением исходного соединения. Пролекарства включают соединения формулы I, в которых группы гидрокси, амино, сульфгидрилкарбокси или карбонил (в составе соединения формулы I) связаны с любой группой, которая отщепляется in vivo с образованием свободной гидрокси, амино или сульфгидрилгруппы соответственно. Примеры пролекарств включают, без ограничения перечисленным, сложные эфиры (например, производные ацетата, диалкиламиноацетатов, формиатов, фосфатов, сульфатов и бензоатов) и карбаматы (например, N,N-диметиламинокарбонил) гидроксильных функциональных групп, сложноэфирные группы (этиловые эфиры, морфолиноэтанольные эфиры) карбоксильных функциональных групп, N-ацилпроизводные (например, N-ацетил) N-оснований Манниха, оснований Шиффа и енаминоны аминофункциональных групп, оксимы, ацетали, кетали и енольные эфиры кетонных и альдегидных функциональных групп в соединениях формулы I и т.п., см. статью Bundegaard H. "Design of Prodrugs" cc 1-92, Elesevier, New York-Oxford (1985).

Термин «защитная группа» относится к группе атомов, которую присоединяют к реакционноспособной группе и таким образом маскируют, снижают ее реакционную способность или блокируют ее. Примеры защитных групп описаны в книгах T.W.Green and P.G.Futs, Protective Groups in Organic Chemistry, (Wiley, 2nd ed. 1991) и Harrison and Harrison и др., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8 (John Wiley and Sons, 1971-1996). Типичные примеры защитных групп включают формил, ацетил, трифторацетил, бензил, бензилоксикарбонил (CBZ), трет-бутоксикарбонил (Boc), триметилсилил (TMS), 2-триметилсилилэтансульфонил (SES), тритил и замещенные тритильные группы, аллилоксикарбонил, 9-флуоренилметилоксикарбонил (FMOC), нитровератрилоксикарбонил (NVOC) и т.п. Типичные примеры защитных групп для гидроксильной группы включают производные, в которых гидроксильная группа ацилирована или алкилирована с образованием, например, бензиловых и тритиловых простых эфиров, а также алкиловых эфиров, тетрагидропиранильных эфиров, триалкилсилильных эфиров и аллильных эфиров.

Термин «лечение» заболевания включает (1) профилактику заболевания, то есть предотвращение развития клинических симптомов заболевания у млекопитающего, которое подвергается заболеванию или предрасположено к нему, но симптомы заболевания еще не наблюдаются или не проявляются; (2) подавление заболевания, то есть приостановка или снижение развития заболевания или его клинических симптомов; (3) снижение интенсивности заболевания, то есть наблюдается регрессия заболевания или его клинических симптомов.

«Терапевтически эффективное количество» означает количество соединения, которое при его введении млекопитающему с целью его лечения, является достаточным для достижения лечебного действия. Терапевтически эффективное количество изменяется в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести, а также от возраста, массы тела и т.п. млекопитающего, нуждающегося в лечении.

Объектом настоящего изобретения является соединение формулы I

где R1, R2, Z и Х1 имеют значения, указанные выше.

Z предпочтительно означает N.

Х1 предпочтительно означает О, S или С=O, более предпочтительно О.

R1 предпочтительно означает алкил, более предпочтительно R1 означает этил.

R2 предпочтительно означает алкил, арил, циклоалкил или гетероалкил, более предпочтительно метил или гидроксиалкил.

R3 предпочтительно означает циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетероалкил, гетероциклил или гетероциклилалкил.

R3 более предпочтительно означает циклоалкил, гетероалкилзамещенный циклоалкил, гетерозамещенный циклоалкил, гетероалкил или гетероциклил. Если R3 означает гетероалкил, прежде всего предпочтительные примеры включают гидроксиалкил и/или алкоксиалкил, например (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил и 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил. Прежде всего предпочтительные примеры (R3 означает гетероциклил) включают тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и морфолинил. Другой объект настоящего изобретения предпочтительно включает описанные выше соединения формулы (I) по настоящему изобретению, в которых R3 выбирают из ряда: 4-гидроксициклогексил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, циклопентил, (S)-(2-гидрокси-1,2-диметил)пропил, 2,2-диэтоксиэтил, 2,2-диметоксиэтил, 3-гидроксипиридин-2-ил, (S)-(1-гидроксиметил-2-метил)пропил, 4-(2-(N,N-диэтиламино)этокси)фенил, бензил, фенил, бутил, додецил, 2-гидроксиэтил, 3-метилбутил, 2-метилпропил, (2-гидрокси-1,1-диметил)этил, 2,3-дигидроксипропил, 3-гидроксипропил, гексил, пиридин-2-ил, 2-морфолиноэтил, 2-(пиперидин-1-ил)этил, циклогексилметил, 1-(гидроксиметил)бутил, 4-фторфенил, циклопропилметил, 2-метоксиэтил, 3-(N,N-диметиламино)пропил, изопропил, метил, 3-фурилметил, 1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил, 1,1 -диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил, 1-фенилпропил, фенетил, 4-(2-гидроксиэтил)фенил, 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропил, 4-гидроксибутил, 3-морфолинопропил, 3-(2-пирролидинон-1 -ил)пропил, 2-ацетамидоэтил, 2-(пиридин-2-ил)этил, пентил, 2-(N,N-диметиламино)этил, 2-(пирролидин-1-ил)этил, 3-(пирролидин-1-ил)пропил, этил, 5-метилпиридин-2-ил, пропил, метил, циклопропил, (1-гидроксиметил-3-метилтио)пропил, (1-гидроксиметил)циклопентил, 1,1-диметилпропил, 3-этокси-3-оксопропил, 3-метоксипропил, циклобутил, 1-(оксоэтоксиметил)пиперидин-4-ил, 4-метоксициклогексил, 3,5-дигидроксициклогексил, 2-циклогексилэтил, (2-метилтиазол-5-ил)метил, имидазо[2,1-b]тиазол-6-илметил, 4-фенилбутил, 2-(4-аминофенил)этил, пиридин-3-ил, тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и (1-гидроксиметил)бутил.

Другая группа предпочтительных соединений включает соединения формулы (I")

где R1 означает алкил, более предпочтительно этил; R2 выбирают из ряда: водород, алкил, арил, циклоалкил и гетероалкил (более предпочтительно метил или гидроксиалкил), и R3 означает гетероалкил или гетероциклил. Еще более предпочтительны соединения формулы (I"), значения которых определены выше, где R1 и R2 выбирают из группы заместителей, определенных выше, а R3 выбирают из ряда: (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил, 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и морфолинил. Наиболее предпочтительны соединения, в которых R1 означает этил, R2 означает метил и R3 означает (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил, 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тирпиран-4-ил и морфолинил.

Еще одна группа предпочтительных соединений включает соединения формулы

где R1 и R2 имеют значения, определенные выше,

X означает -О-, -С(=O)-, -N(R12a)- или -CH(R12b)-;

R12a выбирают из ряда: водород, С1-4алкил, -C(=O)R15, -C(O)2R15 и -S(O)21-4алкил);

R12b выбирают из ряда: водород, С1-4алкил, -OR15, -C(=O)R15, -С(O)2R15 и -S(O)21-4алкил);

R14 выбирают из ряда: С1-4алкил, оксо (=O), -OR15, -C(=O)R15, -C(O)2R15 и -S(O)21-4алкил);

R15 в каждом случае независимо друг от друга выбирают из ряда: водород и C1-4алкил;

q равно 0 или 1, r равно 0, 1 или 2.

В указанной группе предпочтительных соединений наиболее предпочтительны соединения, в которых

X означает -N(R12a)- и

R12a означает -S(O)21-4алкил).

Соединения по настоящему изобретению могут существовать как в несольватированной, так и в сольватированной формах, включая гидратированные формы. В общем случае сольватированные формы, включая гидратированные формы, эквивалентны несольватированным формам и предполагается, что они включены в объем настоящего изобретения. Наряду с соединениями, описанными выше, соединения по настоящему изобретению включают все таутомерные формы. Кроме того, настоящее изобретение также включает все фармацевтически приемлемые соли этих соединений, включая пролекарственные формы соединений и все стереоизомеры, в виде оптически чистых соединений, смеси рацематов или смеси иного состава.

Кроме того, соединения формулы I могут образовывать фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Все эти формы включены в объем настоящего изобретения.

Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли соединений формулы I включают соли как неорганических кислот, таких как соляная, азотная, фосфорная, серная, бромистоводородная, иодистоводородная, фосфористая кислота и т.п., а также органических кислот, таких как алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные алкановые кислоты, гидроксиалкановые кислоты, алкандиовые кислоты, ароматические кислоты, алифатические и ароматические сульфоновые кислоты и т.п. Кислотно-аддитивные соли соответственно включают сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, бисульфиты, нитраты, фосфаты, гидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, хлориды, бромиды, иодиды, ацетаты, пропионаты, каприлаты, изобутираты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себацинаты, фумараты, малеаты, манделаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, фталаты, бензолсульфонаты, толуолсульфонаты, фенилацетаты, цитраты, лактаты, малеаты, тартраты, метансульфонаты и т.п. В объем изобретения также включены соли аминокислот, например аргинаты и т.п., глюконаты и галактуронаты (см., например, Berge S.М., и др., "Pharmaceutical Salts," J. of Pharmaceutical Science, 66, 1-19, (1977)).

Кислотно-аддитивные соли основных соединений можно получить известными методами при взаимодействии соединений в форме свободных оснований с достаточным количеством требуемой кислоты. Соединения в форме свободных оснований можно получать известными методами при взаимодействии соответствующей соли с основанием с последующим выделением свободного основания. Соединения в форме свободных оснований отличаются от их соответствующих солей некоторыми физическими свойствами, например растворимостью в полярных растворителях, но с другой стороны соли по настоящему изобретению эквивалентны соответствующим формам свободного основания.

Следует полагать, что наряду с предпочтительными вариантами осуществления изобретения, указанными в описании заявки, возможны и другие варианты изобретения. В настоящем описании описаны не все возможные эквивалентные варианты или другие модификации настоящего изобретения. Предполагается, что термины, используемые в описании заявки, используются главным образом для иллюстрации изобретения и не ограничивают его объем, а их возможные варианты не ограничивают сущность и объем настоящего изобретения.

В описании методов, методик и примеров используются следующие сокращения:

EtOH означает этанол;

МеОН означает метанол;

ДХЭ означает дихлорэтан;

ДХМ означает дихлорметан;

EtOAc означает этилацетат;

ТГФ означает тетрагидрофуран;

tпл означает температуру плавления.

Соединения по настоящему изобретению получают различными способами. В первом объекте по настоящему изобретению на схемах 1 и 4 и ниже представлен способ получения соединений формулы I', где Z означает N. Способ получения соединений формулы I, где R2 означает аминогруппу, представлен на схеме 2. Способы получения соединений формулы I", где Z означает CH, представлены на схемах 3 и 3А.

Следует понимать, что, хотя на схемах представлены последовательности реакций для получения конкретных соединений, методики, представленные в настоящем изобретении, можно использовать для получения других соединений, аналогичных соединениям формулы I, которые получают с использованием стандартных способов защиты реакционноспособных групп и удаления защитных групп, известных в области органической химии. Например, для предотвращения протекания нежелательных побочных реакций по гидроксильной группе в процессе модификации различных фрагментов молекулы, соединения с гидроксильной группой предварительно превращают в простые или сложные эфиры. После удаления защитной группы снова получают соединение со свободной гидроксильной группой. Аналогичным образом можно получить производные по аминогруппам и карбоксильным группам с целью исключить нежелательные побочные реакции. Типичные защитные группы и способы их введения и удаления подробно описаны в вышеуказанных монографиях T.W.Greene и P.G.M.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999), and Harrison and Harrison и др., Compendium of Synthetic Organic Methods, тт.1-8 (John Wiley and Sons, 1971-1996).

Схема 1

Соединение формулы Ia обрабатывают первичным амином (R2-NH2), при этом получают соединение формулы Ib. Реакцию проводят в растворителе, инертном в условиях реакции, предпочтительно используют галогенированный углеводород алифатического ряда, особенно ДХМ, необязательно галогенированный ароматический углеводород, ациклический или циклический эфир, например ТГФ, формамид или низкомолекулярный алканол. Реакцию проводят при температуре от приблизительно -20°С до приблизительно 120°С.

Спирт формулы Ic получают восстановлением соединения формулы Ib. Реакцию восстановления проводят по стандартной методике, известной специалисту в данной области, используя литийалюминийгидрид (например, в инертном в условиях реакции восстановления растворителе, предпочтительно в ациклическом или циклическом эфире, наиболее предпочтительно используют ТГФ, реакцию проводили при температуре от приблизительно -20°С до приблизительно 70°С, предпочтительно при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно комнатной температуры).

Карбоксальдегид формулы Id получают окислением спирта формулы Ic. Реакцию окисления проводят по стандартной методике, используя диоксид марганца, однако можно использовать и другие многочисленные методы (например, как описано в Advanced Organic Chemistry, 4th ed., March, John Wiley & Sons, New York (1992)). В зависимости от природы используемого окислителя реакцию проводят в растворителе, инертном в определенных условиях окисления, предпочтительно используют галогенированные алифатические углеводороды, прежде всего ДХМ или необязательно галогенированные ароматические углеводороды. Реакцию окисления проводят при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 60°С.

При взаимодействии карбоксальдегида формулы Id с эфиром R1-X1СН2-СО2R' (где R' означает алкильную группу, а R1 и Х1 имеют значения, указанные выше), в присутствии основания получают соединение формулы Ie. Можно использовать любое относительно не нуклеофильное основание, включая карбонаты, например карбонат калия, карбонат лития и карбонат натрия; бикарбонаты, такие как бикарбонат калия, бикарбонат лития и бикарбонат натрия; трет-бутоксид калия, гексаметилдисилазан натрия, гексаметилдисилазан калия, гексаметилдисилазан лития, LDA, гидрид натрия или амины, например вторичные и третичные амины, и аминосодержащие смолы, например 1,3,4,6,7,8-гексагидро-2Н-пиримидо[1,2-а]пиримидин. Реакцию проводят в относительно полярном растворителе, инертном в условиях реакции, предпочтительно используют амид, такой как диметилформамид, N-замещенный пирролидинон, наиболее предпочтительно используют 1-метил-2-пирролидинон, при температуре от приблизительно 25°С до приблизительно 150°С.

При окислении соединений формулы Ie окислителем, например перкислотой, такой как 3-хлорпербензойная кислота (МСРВА) или реактив Oxone®, получают сульфон (If), который превращают в различные конечные соединения. Окисление соединений формулы Ie проводят в растворителе, инертном в конкретных условиях реакции окисления. Например, при использовании в качестве окислителя МСРВА реакцию предпочтительно проводят в галогенированном алифатическом углеводороде, наиболее предпочтительно в хлороформе. Если в качестве окислителя используют реактив Oxone®, то в качестве растворителя предпочтительно используют МеОН, водный раствор этанола или водный раствор ТГФ. Температура реакции зависит от используемого растворителя. В случае использования органического растворителя реакцию в основном проводят при температуре от приблизительно -20°С до приблизительно 50°С, предпочтительно при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно комнатной температуры. Если в качестве растворителя используют воду, то реакцию проводят в основном при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 50°С, предпочтительно при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно комнатной температуры. В другом варианте окисление проводят в присутствии катализатора в системе рений/реагент на основе перекиси (например, как описано в "Oxidation of Sulfoxides by Hydrogen Peroxide, Catalyzed by Methyltrioxorhenium (VII)", Lahti David W., Espenson James H, Inorg. Chem. 39(10), c. 2164-2167 (2000); "Rhenium oxo complexes in catalytic oxidations, Catal. Today 55(4), c. 317-363 (2000) and «A Simple and Efficient Method for the Preparation of Pyridine N-Oxides", Coperet Christophe, Adolfsson Hans, Khuong Tinh-Alfredo V., Yudin Andrei K., Sharpless K. Barry, J. Org. Chem. 63(5), c. 1740-1741 (1998)).

Соединение формулы If обрабатывают амином (R3-NH2), при этом получают соединения формулы I'. Реакцию проводят в присутствии или в отсутствие растворителя при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 200°С, наиболее предпочтительно от приблизительно комнатной температуры до приблизительно 150°С. В некоторых случаях соединения формулы I' предпочтительно получают по реакции амина (R3-NH2) непосредственно с сульфидом формулы Ie или соответствующим сульфоксидом, а не по реакции с сульфоном формулы If.

Таким образом, в настоящем изобретении предлагается способ получения соединений формулы I по последовательности реакций, включающей взаимодействие соединения основной формулы Ie, If или соответствующего сульфоксида с амином (R3-NH2) и необязательно реакцию полученного продукта с соединением формулы R2-L, где R2 означает алкил, a L означает уходящую группу.

Схема 2

Соединения формулы I, где R2 означает амино, моноалкиламино, диалкиламино или NR22-Y-R23 получают по последовательности реакций, представленных на схеме 2, при аминировании соответствующего 2-алкилтио-8-амино[2,3-d]пиридопиримидин-7(8Н)-она (IV, Z означает N) или 7-алкилтио-1-амино-1,6-нафтиридин-2-она (IV, Z означает СН) в присутствии орто-дифенилфосфинилгидроксиламина (методика получения, например, описана в статье Colvin E.W., Kirby G.W., Wilson A.C., Tetrahedron Lett. 23, 3835 (1982) и Klottzer W., Stadlwieser J., Raneburger J., Org. Synth. 64, c. 96-103 (1986)). Затем в полученные аминогруппы вводят заместители различными методами. Моно- и диалкилированные производные получают последовательным восстановительным алкилированием аминов с использованием замещенных альдегидов. В другом варианте амин ацелируют галогенацилами, галогенформиатами или галогенкарбоновыми кислотами. Амины так же сульфонилируют с использованием сульфонилгалоидов. В результате при замене сульфида (или соответствующего сульфоксида или сульфона) на амин R3-NH2, как описано ранее, для соединения формулы Ie (схема 1), получают соединения формулы I (соединения формулы I, где Z означает СН, a R2 означает NA).

Схема 3

Этиловый эфир 2,4-дихлорпиридин-5-карбоновой кислоты обрабатывают амином R2-NH2, при этом получают сложный эфир формулы 3g. Реакцию проводят в растворителе, инертном в условиях реакции, предпочтительно в ацетонитриле или необязательно в галогенированном ароматическом углеводороде, ациклическом или циклическом эфире, например в ТГФ, формамиде или в низкомолекулярном алканоле. Реакцию проводят при температуре от приблизительно -20°С до приблизительно 120°С.

При восстановлении соединения формулы 3g получают соответствующий спирт. Реакцию восстановления проводят с использованием литийалюминийгидрида по стандартной методике, известной специалисту в данной области (например, в растворителе, инертном в условиях реакции восстановления, предпочтительно в ациклическом или циклическом эфире, наиболее предпочтительно в ТГФ. Реакцию проводят при температуре от приблизительно -20°С до приблизительно 70°С, предпочтительно при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно комнатной температуры).

При окислении полученного спирта получают карбоксальдегид формулы 3h. Реакцию окисления проводят по стандартной методике, используя диоксид марганца, однако можно использовать и другие многочисленные методы (например, как описано в Advanced Organic Chemistry, 4th ed., March, John Wiley & Sons, New York (1992)). В зависимости от природы используемого окислителя, реакцию проводят в растворителе, инертном в определенных условиях окисления, предпочтительно используют галогенированный алифатический углеводород, прежде всего ДХМ или необязательно галогенированный ароматический углеводород. Соответственно реакцию окисления проводят при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 60°С.

При взаимодействии карбоксальдегида формулы 3h с эфиром R1-X1 СН2-CO2R' (где R' означает алкильную группу, а R1 и Х1 имеют значения, указанные выше) в присутствии основания, получают соединение формулы 3i. Можно использовать любое относительно не нуклеофильное основание, включая карбонаты, например карбонат калия, карбонат лития и карбонат натрия; бикарбонаты, такие как бикарбонат калия, бикарбонат лития и бикарбонат натрия; трет-бутоксид калия, гексаметилдисилазан натрия, гексаметилдисилазан калия, гексаметилдисилазан лития, LDA, гидрид натрия или амины, например вторичные и третичные амины, и смолы, содержащие аминогруппы, например, 1,3,4,6,7,8-гексагидро-2Н-пиримидо[1,2-а]пиримидин. Соответственно, реакцию проводят в относительно полярном растворителе, инертном в условиях реакции, предпочтительно используют амиды, такие как диметилформамид, N-замещенный пирролидинон, наиболее предпочтительно используют 1-метил-2-пирролидинон, при температуре от приблизительно 25°С до приблизительно 150°С.

При замене хлорида на амин R3-NH2, как описано ранее (схема 1), для соединения формулы Ie (предпочтительно при температуре от 150 до 160°С), получают соединения формулы I" (соединения формулы I, где Z означает СН).

Схема 3А

4-Амино-3,6-дибромпиридин (получен, как описано в статье Den Hertog и др., Rec. Trav. Chim. Pays-Bas, 64. 85-100 (1945)) обрабатывают метилтиолатом натрия, при этом получают 4-амино-3-бром-6-метилтиопиридин (например, см. в статье Windscheif P, Voegtle F., Synthesis. 87092 (1994), стадия а). Соединение формулы 3b получают присоединением метилтиопиридина по реакции конденсации Хека к виниловому эфиру формулы За в присутствии палладиевого катализатора (например, ацетата палладия) и основания (например, ацетата калия или трибутиламина) (например, как описано в статье Dong Y., Busacca С.А., J. Org. Chem., 62, 6464-65 (1997)). При циклизации в щелочной среде получают 1,6-нафтиридон формулы 3с. При алкилировании соединения формулы 3с галоидалкилом (или любым другим алкилирующим агентом формулы R3-X, где X означает уходящую группу) получают 1-алкилпроизводное нафтиридона формулы 3d. После окисления соединения формулы 3d и замены сульфона на амин R3-NH2, как описано ранее, для соединения формулы Ie (схема 1) получают соединения формулы I" (соединения формулы I, где Z означает СН). Другая последовательность реакций представлена на схеме 3А.

Схема 4

Соединения формулы (4d) взаимодействуют с этилэтоксиацетатом в соответствующем растворителе, таком как толуол, в присутствии трет-бутоксида калия, при этом получают соединения формулы (4h). Соединения (4h) превращают в соответствующие сульфонилпроизводные (4i) при взаимодействии с окислителем или перкислотой, такой как хлорпербензойная кислота, в растворителе, таком как ДХМ. Соединения (4i) превращают в соединения формулы (I") при взаимодействии с требуемым амином R3-NH2 в растворителе, таком как ДХЭ.

Специалисту в данной области техники представляется очевидным, что возможны некоторые модификации описанных выше схем не выходя за пределы объема настоящего изобретения. Например, на некоторых стадиях можно использовать защитные группы для функциональных групп, которые проявляют реакционноспособность в конкретных условиях реакции.

Такие способы также включены в объем настоящего изобретения.

Соединения формулы I и фармацевтически приемлемые соли основных соединений формулы I и кислот можно использовать в качестве лекарственных средств, например, в форме фармацевтических препаратов. Фармацевтические препараты вводят энтеральным способом, например, перорально в форме таблеток, таблеток с покрытием, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий, назальным способом, например, в форме назальных спреев, или ректальным способом, например, в форме суппозиториев. Однако указанные лекарственные средства можно вводить парентеральным способом, например, в форме инъекционных растворов.

Соединения формулы I и их упомянутые выше фармацевтически приемлемые соли можно перерабатывать в смеси с фармацевтически инертными, органическими или неорганическими носителями для получения фармацевтических препаратов. В качестве таких носителей для получения таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул можно использовать, например, лактозу, кукурузный крахмал или их производные, тальк, стеариновую кислоту или ее соли и т.п. Пригодными носителями для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.п.; однако, в зависимости от природы активного ингредиента в случае мягких желатиновых капсул обычно носители не требуются. В качестве пригодных носителей для получения растворов и сиропов используют, например, воду, полиолы, сахарозу, инвертированный сахар, глюкозу и т.п. В качестве пригодных носителей для суппозиториев используют, например, природные или отвержденные масла, воски, жиры, полужидкие или жидкие полиолы и т.п.

Фармацевтические препараты могут также содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подсластители, красители, ароматизаторы, соли для изменения осмотического давления, буферные вещества, маскирующие агенты или антиоксиданты. Они могут также содержать терапевтически ценные вещества, отличающиеся от соединения формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли, указанные выше.

Целью настоящего изобретения также являются лекарственные средства, содержащие соединение формулы I или фармацевтически приемлемую соль основного соединения формулы I и кислоты в смеси с совместимым фармацевтическим носителем, и способ получения таких лекарственных средств, который включает переработку одного или более таких соединений или солей и при необходимости в смеси с одним или более терапевтически ценных соединений в смеси с совместимым фармацевтическим носителем в галеновую лекарственную форму.

Как указано выше, соединения формулы I и их указанные выше фармацевтически приемлемые соли можно использовать согласно изобретению в качестве терапевтически активных веществ, прежде всего в качестве противовоспалительных агентов или для профилактики отторжения трансплантатов после операции по пересадке органа. Величины дозировок изменяются в широком диапазоне в зависимости от конкретных условий в каждом конкретном случае. В основном при введении взрослым пациентам стандартная суточная доза составляет от приблизительно 0,1 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг, предпочтительно от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 5 мг/кг. Суточную дозу вводят в виде однократной дозы или разделенных доз и, кроме того, верхний предел можно превысить в случае особых показаний.

И наконец, задача изобретения заключалась в применении соединений формулы I и их упомянутых выше фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственных средств, прежде всего для лечения или профилактики воспалительных, иммунологических, онкологических, бронхолегочных, дерматологических или сердечно-сосудистых нарушений, для лечения астмы, нарушений ЦНС или осложнений при диабете или для профилактики отторжения трансплантатов после хирургической пересадки органа.

Соединения формулы I можно использовать, без ограничения перечисленным, для лечения любого нарушения или заболевания у человека или другого млекопитающего, у которых наблюдается осложнение заболевания или заболевание вызвано избыточным или неконтролируемым продуцированием ТНФ или киназы р38. В связи с этим в настоящем изобретении предлагается способ лечения заболевания, опосредованного цитокинами, включающий введение эффективного количества соединения формулы I, достаточного для подавления продуцирования цитокина, или его фармацевтически приемлемой соли или таутомера.

Соединения формулы I можно применять, без ограничения перечисленным, для лечения воспаления у субъекта и использовать в качестве жаропонижающего средства при лечении лихорадки. Соединения по настоящему изобретению можно использовать для лечения, без ограничения перечисленным, следующих заболеваний: ревматоидный артрит, спондилоартропатии (например, анкилозирующий спондилит), подагрический артрит, псориатический артрит, остеоартрит, системная красная волчанка, ювенильный артрит и другие артритные состояния. Такие соединения можно использовать для лечения легочных заболеваний или воспаления легких, включая респираторный дистресс-синдром взрослых, саркоидоз легких, астма, силикоз и хроническое воспаление легких. Соединения можно также использовать для лечения вирусных и бактериальных инфекций, включая сепсис, септический шок, грамнегативный сепсис, малярию, менингит, вторичную общую атрофию, вызванную инфекцией или опухолевым заболеванием, вторичную атрофию, вызванную синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД), СПИД, СПИД-ассоциированный комплекс (ARC), пневмонию и вирус герпеса. Соединения можно также использовать для лечения заболеваний, связанных с резорбцией кости, таких как остеопороз, эндотоксический шок, синдром токсического шока, повреждения при реперфузии, аутоиммунное заболевание, включая реакцию отторжения трансплантата и аллотрансплантата в организме хозяина, сердечно-сосудистые заболевания, включая атеросклероз, тромбоз, застойную сердечную недостаточность и повреждения после сердечной реперфузии, повреждения после почечной реперфузии, заболевания печени и нефрит, а также миалгии, вызванные инфекцией.

Соединения по настоящему изобретению можно также использовать для лечения болезни Альцгеймера, вируса гриппа, рассеянного склероза, онкологических заболеваний, диабета, системной красной волчанки, кожных заболеваний, таких как псориаз, экзема, ожоги, дерматит, образование келоидных швов и образование шрамов. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно использовать для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта, таких как воспаление кишечника, болезнь Крона, гастрит, синдром раздраженного кишечника и язвенный колит. Соединения можно также использовать для лечения офтальмологических заболеваний, таких как ретинит, ретинопатия, увеит, окулярная пузырчатка и острое повреждение глазной ткани. Соединения можно также использовать для лечения ангиогенеза, включая неоплазию, матастазирования, офтальмологических состояний, таких как отторжение при пересадке ткани роговицы, реваскуляризация в глазных тканях, реваскуляризация в ткани почек, включая реваскуляризацию после повреждения ткани или инфекции, диабетическая ретинопатия, ретролентальная фиброплазия и реваскулярная глаукома; язвенные заболевания, такие как язва желудка; патологические, но незлокачественные состояния, такие как гемангиома, включая детскую гемангиому, ангиофиброму носоглотки и аваскулярный некроз костной ткани; диабетическая нефопатия и кардиомиопатия, а также заболевания репродуктивной системы у женщин, такие как эндометриоз. Соединения, кроме того, можно использовать для предотвращения продуцирования циклооксигеназы-2.

Соединения по настоящему изобретению предпочтительно используют для лечения ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилита, псориатического артрита, болезни Крона, синдрома раздраженного кишечника, воспаления кишечника, псориаза, респираторного дистресс-синдрома взрослых, астмы или хронического обструктивного заболевания легких или болезни Альцгеймера или онкологических заболеваний.

Кроме использования указанных соединений для лечения человека, их можно использовать в ветеринарии для лечения домашних животных, экзотических животных и сельскохозяйственных животных, включая млекопитающих, грызунов и т.п. К наиболее предпочтительным животным относятся лошади, собаки и кошки.

Соединения по настоящему изобретению можно также использовать для комбинированной терапии, частично или полностью заменяя ими другие известные противовоспалительные средства, например, совместно со стероидами, ингибиторами циклооксигеназы-2, нестероидными противовоспалительными лекарственными средствами, DMARDS, иммунодепрессантами, ингибиторами 5-липоксигеназы, антиагонистами LTB4, и ингибиторами гидролазы LTA4.

Термин «опосредованное ФНО нарушение», использованный в данном контексте, относится к любому и ко всем нарушениям или патологическим состояниям, в которых ФНО проявляет функцию при контроле высвобождения самого ФНО или при опосредованном ФНО высвобождении другого монокина, например, без ограничения перечисленным, ИЛ-1, ИЛ-6 или ИЛ-8. Следовательно, опосредованное ФНО нарушение означает, например, такое заболевание, при котором ИЛ-1 является основным компонентом и продуцирование или действие которого усиливается или наблюдается его секреция в ответ на действие ФНО.

Термин «опосредованное р38 нарушение»», использованный в данном контексте, относится к любому и ко всем нарушениям или патологическим состояниям, в которых р38 проявляет функцию при контроле высвобождения самого р38 или при опосредованном р38 высвобождении другого монокина, например, без ограничения перечисленным, ИЛ-1, ИЛ-6 или ИЛ-8. Следовательно, опосредованное р38 нарушение означает, например, такое заболевание, при котором ИЛ-1 является основным компонентом и продуцирование или действие которого усиливается или наблюдается его секреция в ответ на действие р38.

Так как ФНО-β является ближайшим структурным гомологом ТНФ-α (известного также как кахектин), оба фактора индуцируют аналогичную биологическую ответную реакцию и связываются с одним и тем же клеточным рецептором, то синтез обоих ФНО-α и ФНО-β ингибируется соединениями по настоящему изобретению и в данном контексте оба фактора объединены под общим названием «ФНО», если не указано иное.

Примеры

Если не указано иное, все величины температуры, включая температуры плавления (tпл) указаны в градусах Цельсия (°С).

Препарат 1

4-Метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегид

Стадия А: получение этилового эфира 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты

К раствору этилового эфира 4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты (фирмы Aldrich, 20 г, 86 ммолей) в 250 мл ДХМ при температуре 0°С медленно добавляли раствор метиламина в EtOH (33%, 35 мл, 281 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин добавляли воду (150 мл), затем полученные фазы разделяли, органическую фазу сушили (MgSO4) и фильтровали. Фильтрат упаривали при пониженном давлении, при этом получали 19 г этилового эфира 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты в виде твердого вещества белого цвета.

Стадия Б: получение 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола

Литийалюминийгидрид (8,2 г, 215 ммолей) перемешивали в безводном ТГФ (300 мл) при температуре 5°С, затем по каплям добавляли раствор этилового эфира 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты (46 г, 215 ммолей) в безводном ТГФ (450 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин, затем осторожно по каплям добавляли воду (18 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, затем по каплям добавляли водный раствор гидроксида натрия (15%, 8,5 мл) с последующим добавлением воды (25,5 мл). Полученную суспензию перемешивали в течение 17 ч при комнатной температуре и фильтровали. Остаток на фильтре промывали ТГФ (2 раза по 100 мл), затем объединенный фильтрат и экстракты упаривали при пониженном давлении. Остаток суспендировали в смеси EtOAc/гексан (1:2, 200 мл), твердое вещество отделяли фильтрованием и высушивали, при этом получали 32,7 г 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола в виде твердого вещества желтого цвета.

Стадия В: получение 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида

4-Метиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанол (20 г, 108 ммолей) растворяли при перемешивании в 1 л ДХМ, затем добавляли диоксид марганца (87 г, 1 моль). Полученную суспензию перемешивали в течение 24 ч, затем фильтровали через слой целита. Остаток на фильтре промывали ДХМ (100 мл), объединенный фильтрат и экстракты упаривали при пониженном давлении, при этом получали 15,8 г 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксиальдегида в виде твердого вещества белого цвета.

Препарат 2

4-(Циклопропиламино)-2-(метилтио)пиримидин-5-карбоксальдегид

4-Циклопропиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегид получали из этилового эфира 4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты (Aldrich Chemical Co.) и циклопропиламина (Aldrich Chemical Co.) по последовательности реакций, как описано в примере 1 (стадии А-В).

Препарат 3

4-[(4-Фторфенил)амино]-2-(метилтио)пиримидин-5-карбоксальдегид

4-[(4-Фторфенил)амино]-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегид получали из этилового эфира 4-хлор-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты (Aldrich Chemical Co.) и 4-фторанилина (Aldrich Chemical Co.) по последовательности реакций, как описано в примере 1 (стадии А-В).

Препарат 4

4-(Этиламино)-2-(метилтио)пиримидин-5-карбоксальдегид

Стадия А: получение этилового эфира 4-этиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоновой кислоты

К раствору 25 г (107 ммолей) этилового эфира 4-хлор-2-метилтио-5-пиримидинкарбоновой кислоты в 250 мл ТГФ добавляли 47 мл (337 ммолей) триэтиламина и 43 мл 70% раствора этиламина (668 ммолей). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и упаривали досуха. Остаток растворяли в смеси EtOAc/вода, дважды промывали 10% раствором NaHCO3, сушили (MgSO4) и упаривали досуха, при этом получали указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества. Выход продукта составил 24,1 г.

Стадия Б: получение 4-этиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола

Раствор этилового эфира 4-этиламино-2-метилтиопиримидинкарбоновой кислоты (24,1 г, 100 ммолей) в ТГФ (250 мл) охлаждали до температуры 0°С на ледяной бане, затем в течение 1 ч осторожно небольшими порциями добавляли литийалюминийгидрид (4,3 г, 113 ммолей). Через 1 ч медленно добавляли воду (4,3 мл), затем добавляли раствор NaOH (4,3 мл, 15%) и еще порцию воды (13 мл), затем смесь перемешивали в течение 1 ч. Полученную суспензию фильтровали, остаток на фильтре дважды промывали 100 мл ТГФ, фильтрат упаривали при пониженном давлении, остаток перемешивали в 150 мл Et2O, фильтровали и сушили. Выход продукта составил 19,1 г.

Стадия В: получение 4-этиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида

К раствору 4-этиламино-2-метилтиопиримидин-5-метанола (19,1 г, 96 ммолей) в 1000 мл ДХМ добавляли 87 г диоксида марганца. Полученную суспензию перемешивали в течение 20 ч и фильтровали через слой целита. Остаток промывали ДХМ (2 раза по 100 мл), объединенный фильтрат и экстракты упаривали при пониженном давлении, при этом получали продукт в виде твердого вещества. Выход продукта составил 12,8 г.

Препарат 5

4-Амино-2-метилтиопиримидин-5-карбальдегид

Стадия А: получение калийной соли 3,3-диэтокси-2-формилпропионитрила (Р-5А))

К смеси 3,3-диэтоксипропаннитрила (283,80 г, 1,98 моля) и метилового эфира муравьиной кислоты (148,80 г, 2,48 моля) в безводном ТГФ (1,1 л) при температуре 10°С при перемешивании добавляли в течение 45 мин 1,0 М раствор трет-бутилата калия в ТГФ (2,2 л, 2,2 моля), температуру смеси поддерживали в интервале от 10 до 15°С. Полученную суспензию перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем добавляли гексан (400 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Суспензию фильтровали, осадок на фильтре промывали смесью гексан/ТГФ (1:1) и сушили в течение ночи в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60°С, при этом получали 302,5 г (73,0%) соединения Р-5А в виде порошка бледно-желто-коричневого цвета. Структуру полученного соединения подтверждали 1H-ЯМР (CD3OD).

Стадия Б: получение 4-амино-2-сульфанилпиримидин-5-карбальдегида (Р-5В))

Суспензию тиомочевины (92,8 г, 1,22 моля) в EtOH (90 мл) кипятили с обратным холодильником при интенсивном перемешивании, затем в течение 10 мин пятью порциями добавляли суспензию калийной соли 3,3-диэтокси-2-формилпропионитрила (Р-5А) (222,20 г, 1,06 моля) в 25% растворе метилата натрия в МеОН (85,5 мл, 0,37 моля) и EtOH (285 мл) при кипячении с обратным холодильником (в другом варианте, добавляли гомогенный раствор, полученный нагреванием до температуры 50°С описанной выше суспензии). Для облегчения перемешивания вводили дополнительную порцию EtOH (150 мл). После кипячения с обратным холодильником в течение еще одного часа, вязкая суспензия приобретала ярко-желтый цвет. Затем смесь охлаждали и упаривали практически досуха на роторном испарителе. Остаток растворяли в воде (940 мл). Неочищенный продукт осаждали добавлением 30% уксусной кислоты (280 мл) и отделяли фильтрованием на воронке со стеклянным фильтром средней пористости. Осадок на фильтре промывали водой (800 мл). Продукт очищали растиранием в горячей воде (1 л) в течение 30 мин. После охлаждения остаток отделяли фильтрованием, сушили в течение ночи в вакуум-сушильном шкафу при 60°С, при этом получали 118,9 г (72,3%) продукта в виде твердого вещества ярко-желтого цвета (при последующей оптимизации настоящей методики было установлено, что стадию растирания можно исключить). По данным ЖХВР чистота продукта составляла 98,67%. Структуру полученного соединения (Р-5В) подтверждали 1H-ЯМР (ДМСО-d6).

Стадия В: получение 4-амино-2-метилтиопиримидин-5-карбальдегида

К раствору 4-амино-2-сульфанилпиримидин-5-карбальдегида (Р-5В) (100,00 г, 644,4 ммоля) и карбоната калия (325 меш, 178,10 г, 1,29 моля) в ацетоне (1,5 л) добавляли по каплям иодметан (128,10 г, 902,2 ммоля) в течение 20 мин при умеренном охлаждении. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 сут. По данным ТСХ реакционная смесь содержала продукт (Р-5В), полученный на стадии Б. Затем добавляли еще одну порцию иодметана (8 мл) и смесь перемешивали в течение ночи. По данным ТСХ реакционная смесь все еще содержала продукт (Р-5В), полученный на стадии Б. Затем еще раз добавляли порцию иодметана (8 мл) и смесь перемешивали в течение 24 ч. По данным ЖХВР смесь содержала 95,9% S-алкилированного продукта и 3,7% соединения (Р-5В). Реакционную смесь сушили на роторном испарителе почти досуха. К остатку добавляли воду (1 л), продукт отделяли фильтрованием и промывали водой (200 мл). Продукт сушили в вакуум-сушильном шкафу в течение ночи при температуре 60°С. Выход продукта составил 103,37 г (94,8%). По данным ЖХВР продукт содержал 95,8% препарата 5 и 4,2% соединения (Р-5В).

Препарат 6

4-Амино-2-н-бутилтиопиримидин-5-карбальдегид

4-Амино-2-(н-бутилтио)пиримидин-5-карбальдегид получали по методике, описанной для получения препарата 5 (стадии А-В), но вместо иодметана (Aldrich Chemical Co.) на стадии В использовали иодбутан (Aldrich Chemical Co.).

Пример 1

6-Этокси-2-[3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропиламино]-8,8а-дигидро-4аН-пиридо[2.3-d]пиримидин-7-он

Стадия А: 2-бутилсульфанил-6-этокси-8,8а-дигидро-4аН-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-он

4-Амино-2-бутилсульфанил-4,5-дигидропиримидин-5-карбальдегид (3 г, 14,2 ммоля, получен в ходе препаративного синтеза) и этиловый эфир этоксиуксусной кислоты (2,34 г, 2,4 мл, 17,75 ммоля) перемешивали в 80 мл толуола в атмосфере азота при температуре 0-5°С. Затем постепенно добавляли трет-бутилат калия (1,75 г, 15,6 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре, а затем при температуре 65°С в течение 48 ч. Затем добавляли дополнительную порцию толуола (20 мл) и этилового эфира этоксиуксусной кислоты (2,4 мл), полученную смесь выдерживали при температуре 65°С в течение 2 сут. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и растирали с EtOAc, при этом удаляли непрореагировавший исходный альдегид. Для удаления примесей остаток твердого вещества растирали с хлороформом, при этом получали 3,66 г 2-бутилсульфанил-6-этокси-8,8а-дигидро-4аН-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-она (1А), по данным МС/ЖХВР и ЯМР чистота продукта составила 80%.

Стадия Б: 2-(бутан-1-сульфонил)-6-этокси-8Н-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-он

Раствор соединения (1А) (3 г, 10,7 ммоля) суспендировали в 40 мл ДХМ, охлаждали до температуры 0-5°С на ледяной бане и постепенно добавляли мета-хлорпербензойную кислоту (5,5 г, 32,3 ммоля). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали в вакууме. Остаток растирали с EtOAc, продукт очищали хроматографией на колонке (элюент: СН2Cl2/МеОН/ацетон, 96:2:2), при этом получали 1 г 2-(бутан-1-сульфонил)-6-этокси-8Н-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-она (3В).

Стадия В: 6-этокси-2-[3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропиламино]-8,8а-дигидро-4аН-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-он

Раствор соединения 3В (50 мг, 0,16 ммоля) и 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропиламина (140 мг, 0,96 ммоля) в 1 мл ДХЭ нагревали при температуре 85°С в течение 72 ч. Реакционную смесь непосредственно разделяли хроматографией на колонке Supelco™ (силикагель, 2 г/12 мл, элюент: градиент от CH2Cl2 до СН2Cl2/МеОН/ацетон, 94:3:3). Продукт дважды очищали хроматографией, при этом получали 24 мг 6-этокси-2-[3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропиламино]-8,8а-дигидро-4аН-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-она (пример 1), по данным МС/ЖХВР чистота продукта составила 86%. МС: 337 (М+1).

Пример 2

6-Метокси-8-метил-2-(тетрагидропиран-4-иламино)-8Н-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-он

Стадия А

4-Метиламино-2-метилтио-5-пиримидинкарбоксальдегид (2 г, 10,9 ммоля), метиловый эфир метоксиуксусной кислоты (1,6 мл, 16,4 ммоля), карбонат калия (2,26 г, 16,4 ммоля) и NMP (40 мл) перемешивали при температуре 120°С в течение 66 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем выливали в воду (300 мл), продукт экстрагировали EtOAc (3 раза по 100 мл). Органический слой промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Остаток очищали экспресс-хроматографией (элюент: градиент 20-50% ацетон/гексан), при этом получали 502 мг соединения (2А).

Стадия Б

Смесь соединения (2А) (450 мг, 1,90 ммоля), 72% mCPBA (1,36 г, 5,69 ммоля) и хлористого метилена (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. К реакционной смеси добавляли водный раствор бисульфита натрия (10%, 100 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, продукт экстрагировали EtOAc (200 мл). Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Остаток очищали экспресс-хроматографией (элюент: градиент 0-3% МеОН/ДХМ), при этом получали 235 мг указанного выше соединения (2В).

Стадия В

Смесь соединения (2В) (50 мг, 0,186 ммоля), 4-аминотетрагидропирана (38 мг, 0,371 ммоля) и NMP (1 мл) перемешивали при температуре 80°С в течение 66 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, продукт очищали экспресс-хроматографией (элюент: градиент 1-5% МеОН/ДХМ), при этом получали 47 мг соединения (4а). Свободное основание растворяли в МеОН, обрабатывали 1 экв. 1 н. HCl в Et2O, смесь концентрировали в вакууме, при этом получали указанное выше соединение (пример 2) в виде гидрохлорида (44 мг).

Пример 3

6-Этокси-8-метил-2-(тетрагидропиран-4-иламино)-8Н-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-он

Стадия А

4-Метиламино-2-метилтио-5-пиримидинкарбоксальдегид (3 г, 16,4 ммоля), этиловый эфир этоксиуксусной кислоты (3,3 мл, 24,6 ммоля), карбонат калия (3,4 г, 24,6 ммоля) и NMP (50 мл) перемешивали при температуре 120°С в течение 18 ч. Затем реакционную смесь выдерживали при температуре 80°С в течение 66 ч, добавляли дополнительные порции этилового эфира этоксиуксусной кислоты и карбоната калия в количестве, указанном выше, и смесь нагревали при температуре 120°С в течение 18 ч. Реакционную смесь выливали в воду (300 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отделяли фильтрованием, промывали водой и гексаном, затем сушили в вакууме, при этом получали 2,14 г соединения (3А).

Стадия Б

Смесь соединения (3А) (2 г, 7,96 ммоля), 72% mCPBA (5,7 г, 23,9 ммоля) и хлористого метилена (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Водный раствор бисульфита натрия (10%, 100 мл) добавляли к реакционной смеси и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, продукт экстрагировали EtOAc (200 мл). Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме, при этом получали 1,45 г соединения (3В).

Стадия В

Смесь соединения (3В) (100 мг, 0,353 ммоля), этилового эфира 4-амино-1-пиперидинкарбоновой кислоты (0,12 мл, 0,706 ммоля) и NMP (3 мл) перемешивали при температуре 120°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водой и EtOAc. Органический слой промывали водой и солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в МеОН и ДХМ, обрабатывали 1 н. HCl в Et2O (0,35 мл) и концентрировали в вакууме. Полученное твердое вещество промывали диэтиловым эфиром и сушили в вакууме, при этом получали 56 мг продукта (пример 3) в виде гидрохлорида.

Пример 4

6-Этокси-8-метил-2-(пиперидин-4-иламино)-8Н-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-

Стадия А: получение 6-(2,6-дифторфенокси)-8-метил-2-(метилтио)пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8Н)-она

К смеси 4-метиламино-2-метилтиопиримидин-5-карбоксальдегида (препарат 1) (4,8 г, 26,2 ммоля) и метилового эфира 2,6-дифторфеноксиуксусной кислоты (получен по методике, описанной для получения препарата 4, при использовании 2,6-дифторфенола, 5,9 г, 32 ммоля) в 50 мл 1-метил-2-пирролидинона добавляли карбонат калия (6,0 г, 43,5 ммоля). Реакционную смесь нагревали при температуре 120°С в течение 12 ч, затем добавляли феноксиацетат (2 раза по 2,0 г, 10,8 ммоля) и карбонат калия (2,0 г, 15 ммолей). Смесь перемешивали в течение б ч при температуре 120°С, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (70 мл). Раствор перемешивали в течение 30 мин и фильтровали. Полученное твердое вещество промывали водой (2 раза), EtOAc и эфиром. Затем твердое вещество сушили, при этом получали 7,0 г указанного выше сульфида (МС: 336 (М+1), tпл 247-250,7°С).

Стадия Б: получение 6-(2,6-дифторфенокси)-8-метил-2-(метилсульфонил)пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8Н)-она

Соединение 4А (7,0 г, 20,8 ммоля) растворяли в 50 мл хлористого метилена, затем добавляли 3-хлорпербензойную кислоту (77%, 11,5 г, 51,5 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, фильтровали, остаток промывали водным раствором сульфита натрия (2 раза по 75 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 раза по 75 мл). Затем полученный органический раствор промывали солевым раствором и сушили над сухим Na2SO4, упаривали. Полученное твердое вещество перемешивали в эфире в течение 1 ч и отделяли фильтрованием, при этом получали 5,5 г указанного выше сульфона 4В (МС: 368 (М+1), tпл215,2-216,4°С).

Стадия В: получение этилового эфира 4-{[6-(2,6-дифторфенокси)-8-метил-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-d]пиримидин-2-ил]амино}пиперидин-1-карбоновой кислоты

Смесь соединения 4В (1,0 г, 2,7 ммоля) и этилового эфира 4-амино-1-пиперидинкарбоновой кислоты (0,93 мл, 5,4 ммоля) в 5 мл 1-метил-2-пирролидинона перемешивали при температуре 100°С в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную суспензию добавляли к 20 мл дистиллированной воды, осадок желтого цвета отделяли фильтрованием в вакууме, затем сушили в вакууме, при этом получали 1,28 г соединения 4C. Приблизительно 80 мг полученного соединения растворяли в МеОН (1-2 мл), раствор обрабатывали 1 М раствором соляной кислоты в эфире, затем органический растворитель выпаривали, добавляли эфир (1-2 мл), продукт в виде твердого вещества отделяли фильтрованием и сушили, при этом получали 66 мг соединения 4C в виде гидрохлорида (tпл197-204°С).

Стадия Г: 6-этокси-8-метил-2-{[(1-метансульфонил)пиперидин-4-ил]амино}пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8Н)он

Смесь этилового эфира 4-{[6-(2,6-дифторфенокси)-8-метил-7-оксо-7,8-дигидропиридо[2,3-d]пиримидин-2-ил]амино}пиперидин-1-карбоновой кислоты, полученного на стадии В (1,2 г, 2,52 ммоля), и гидроксида калия (2,83 г, 50,4 ммоля) в 20 мл EtOH кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч, затем реакционную смесь упаривали в вакууме. Остаток переносили в 100 мл воды и перед подкислением при добавлении по каплям конц. HCl охлаждали на ледяной бане. Затем кислотный водный раствор обрабатывали ДХМ (2 раза). Водный раствор охлаждали на ледяной бане и еще раз подщелачивали добавлением гидроксида натрия. Затем из щелочного раствора продукт экстрагировали ДХМ (2 раза). Органические экстракты, полученные из щелочного водного раствора, объединяли, сушили над сульфатом магния, концентрировали и сушили в вакууме, при этом получали 92 мг неочищенного продукта.

В другом варианте соединение, указанное в заголовке примера 4, получали из смеси свободного основания (пример 3, получен, как описано выше, 358 мг, 0,954 ммоля), гидроксида калия (1,07 г, 19,1 ммоля) и EtOH (10 мл) при кипячении с обратным холодильником в течение 5 сут. Затем реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в воде и подкисляли добавлением 2 н. HCl, затем продукт экстрагировали ДХМ. Водный слой подщелачивали добавлением насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и продукт повторно экстрагировали ДХМ (2 раза по 100 мл). Органические экстракты, полученные из щелочного раствора, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме, при этом получали 24 мг соединения, указанного в заголовке примера 4. Часть полученного соединения (3 мг) растворяли в МеОН, обрабатывали 1 экв. 1 н. HCl в Et2O и концентрировали в вакууме, при этом получали 4 мг соединения, указанного в заголовке примера 4 в виде гидрохлорида.

Пример 5

6-Этокси-8-метил-2-{[(1-метансульфонил)пиперидин-4-ил]амино)пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8Н)-он

Неочищенный пиперидин (пример 4, 0,92 г, 0,237 ммоля) переносили в смесь 5 мл ДХМ, карбоната натрия (0,050 г, 0,475 ммоля) и метансульфонилхлорида (0,022 мл, 0,285 ммоля), перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Затем добавляли порцию метансульфонилхлорида (0,040 мл) и карбоната натрия (50 мг), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Затем добавляли последнюю порцию метансульфонилхлорида (0,080 мл) и карбоната натрия (150 мг), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч (при этом наблюдалось полное потребление исходного пиперидина). Затем органический слой промывали водой, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме, при этом получали масло. Продукт очищали хроматографией на колонке (SiO2, элюент: градиент СН2Cl2/МеОН, от 0,5:99,5 до 3:97). Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 25 мг требуемого продукта. Продукт растворяли в EtOAc (1-2 мл), затем обрабатывали соляной кислотой в эфире (1 М, 1 экв.). После промывки эфиром твердое вещество отделяли фильтрованием и сушили в вакууме, при этом получали продукт (19 мг, пример 5) в виде гидрохлорида (tпл 219,56-221,2°С).

В другом варианте смесь соединения (21 мг, 0,069 ммоля, полученного, как описано в примере 4), карбоната натрия (15 мг, 0,138 ммоля), метансульфонилхлорида (0,06 мл) и ДХМ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), продукт экстрагировали ДХМ (2 раза по 100 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Сухой остаток растворяли в МеОН, обрабатывали 1 н. HCl в Et2O и концентрировали в вакууме. Полученное твердое вещество промывали Et2O и сушили в вакууме, при этом получали 15 мг продукта (пример 5) в виде гидрохлорида.

Пример 6

В примере описан метод анализа активности соединений по настоящему изобретению in vitro по ингибированию киназы р38 (MAP).

Ингибирующую активность соединений по настоящему изобретению в отношении к киназы р38 MAP оценивали in vitro по реакции переноса γ-фосфатной группы из γ-33Р-АТФ на миелинсодержащий белок (МВР), катализируемой киназой р38 с использованием модифицированного метода, описанного в статье Ahn и др., J.Biol.Chem., 266, 4220-4227 (1991).

Фосфорилированную форму рекомбинантной киназы р38 MAP экспрессировали совместно с клетками SEK-1 и МЕКК в Е. Coli (например, как описано в статье Khokhlatchev и др., J. Biol. Chem. 272:11057-11062 (1997)), затем очищали металл-хелатной хроматографией на никелевой колонке.

Фосфорилированную киназу р38 MAP растворяли в буферном растворе для определения киназной активности (20 мМ 3-(N-морфолино)пропансульфокислота, рН 7,2, 25 мМ -глицинфосфат, 5 мМ этиленгликоль-бис-(бета-аминоэтиловый эфир)-N,N,N',N'-тетрауксусная кислота, 1 мМ ортованадат натрия, 1 мМ дитиотреит, 40 мМ хлорид магния), затем добавляли раствор исследуемого соединения в ДМСО или только ДМСО (контроль), и образцы инкубировали в течение 10 мин при температуре 30°С. Реакцию фосфорилирования, катализируемую киназой, инициировали добавлением смеси субстратов, содержащей МВР и Затем реакционную смесь инкубировали в течение 20 мин при температуре 30°С, реакцию останавливали добавлением 0,75% фосфорной кислоты. Затем фосфорилированный МВР отделяли от непрореагировавшего фильтрованием через фосфоцеллюлозную мембрану (фирмы Millipore, Bedfrod, МА), и радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике радиоактивности (Packard, Meri den, CT).

Значения IC50 определяли как концентрацию исследуемого соединения, соответствующую половине максимального снижения оптической плотности при 450 нм.

Типичные соединения формулы I
Соединение №Структурная формулаtплIC50 (мкМ)Пример
1-1˜7,71
1-2˜1,62
1-3>104
1-4219,5-221,2˜0,0585

Пример 7

В примере описан метод анализа in vitro, использованный для оценки ингибирования продуцирования ФНО-α, индуцированного липополисахаридом в клетках ТНР1.

Способность соединений по настоящему изобретению ингибировать высвобождение ФНО-α определяли модифицированным методом, как описано в статье Blifeld et al. Transplantation, 51:498-503 (1991).

(а) Индукция биосинтеза ФНО

Клетки ТНР-1 суспендировали в культуральной среде RPMI (фирмы Gibco-BRL, Gailthersburg, MD), содержащей 15% фетальной сыворотки теленка, 0,02 мМ 2-меркаптоэтанола, при концентрации 2,5×106 клеток/мл, затем культивировали в 96-луночных планшетах (по 0,2 мл в каждой лунке). Исследуемые соединения растворяли в ДМСО и разбавляли в культуральной среде до конечной концентрации ДМСО 5%. В каждую лунку добавляли 25 мкл раствора исследуемого соединения или только раствор ДМСО в среде (контроль). Клетки инкубировали в течение 30 мин при 37°С. В лунки добавляли липополисахарид LPS (фирмы Sigma, St.Louis, МО) в конечной концентрации 0,5 мкг/мл и клетки инкубировали в течение еще 2 ч. При завершении периода инкубирования супернатанты клеток собирали и количество содержащегося ФНО-α определяли методом анализа ИФА, как описано ниже.

(б) Метод анализа ИФА

Количество содержащегося ФНО-α человека определяли с помощью специфического анализа ИФА с использованием двух антител к ФНО-α (2TNF-Н12 и 2TNF-H34), как описано в статье Reimund J.М. и др. GUT. Vol.39(5), 684-689 (1996).

В каждую лунку полистирольного 96-луночного планшета добавляли по 50 мкл антител 2TNF-H12 а фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБ) (10 мкг/мл) и инкубировали во влажной камере при 4°С в течение ночи. Затем планшеты промывали ФСБ и блокировали 5% обезжиренным сухим молоком в ФСБ в течение 1 ч при комнатной температуре, затем промывали 0,1% БСА (бычий сывороточный альбумин) в ФСБ.

Стандартные образцы ФНО получали из концентрированного раствора рекомбинантного ФНО-α человека (фирмы R & D Systems, Minneapolis, MN). Затем готовили серийные разбавления стандартных образцов с начальной концентрацией 10 нг/мл по полулогарифмической шкале (6 разбавлений).

25 мкл указанных выше супернатантов клеток или стандартных образцов ФНО или только среды (контроль) смешивали с 25 мкл биотинилированных моноклональных антител 2TNF-H34 (2 мкг/мл в ФСБ, содержащем 0,1% БСА) и затем добавляли в каждую лунку. Образцы инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре при осторожном встряхивании и затем промывали 3 раза 0,1% БСА в ФСБ. В каждую лунку добавляли по 50 мкл раствора стрептавидин-пероксидазы (фирмы Zymed, S. San Francisco, CA), содержащего 0,416 мкг/мл стрептавидин-пероксидазы и 0,1% БСА в ФСБ. Образцы инкубировали в течение еще 1 ч при комнатной температуре и затем промывали 4 раза 0,1% БСА в ФСБ. В каждую лунку добавляли по 50 мкл раствора орто-фенилендиамина (1 мкг/мл орто-фенилендиамина и 0,03% пероксида водорода в 0,2 М цитратном буферном растворе при рН 4,5) и образцы инкубировали в темноте в течение 30 мин при комнатной температуре. Оптическую плотность образцов и контроля регистрировали при 450 нм и 650 нм соответственно. Уровень ФНО-α определяли по графику зависимости оптической плотности при 450 нм от исследованных концентраций.

Величины IC50 определяли как концентрацию исследуемого соединения, при которой наблюдается снижение оптической плотности при 450 нм на половину максимальной величины.

Пример 8

В этом примере описан метод анализа in vivo для определения ингибирования индуцированного LPS продуцирования ФНО-α у мышей (или у крыс).

Способность соединений по настоящему изобретению ингибировать высвобождение ФНО-α in vivo определяли по модифицированной методике, как описано в статьях Zanetti и др., J.Immunol., 148:1890 (1992), Sekut и др., J.Lab. Clin. Med., 124:813 (1994).

Самки мышей BALB/c массой 18-21 г (фирмы Charles River, Hollister, CA) проходили акклиматизацию в течение 1 недели. Каждой группе мышей, включающей 8 особей, вводили перорально исследуемые соединения, суспендированные или растворенные в водном наполнителе, содержащем 0,9% хлорида натрия, 0,5% натрийкарбоксиметилцеллюлозы, 0,4% полисорбата 80, 0,9% бензилового спирта (растворитель для КМЦ) или один наполнитель (контрольная группа). Через 30 мин мышам вводили внутрибрюшинно 20 мкг LPS (Sigma, St. Louis, МО). Через 1,5 ч мышей забивали ингаляцией СО2 и кровь отбирали пункцией сердца. Кровь осветляли центрифугированием при 15600×g в течение 5 мин, сыворотку переносили в чистые пробирки, замораживали при -20°С и образцы хранили до анализа на содержание ФНО-α методом ИФА (фирмы Biosource Intrenational, Camarillo, CA) no рекомендациям фирмы-производителя.

1. Соединение формулы I

или его фармацевтически приемлемая соль или гидрат,

где Z означает N;

X1 означает О или S,

R1 означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода;

R2 означает водород или алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода; и

R3 означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода, замещенный группой -ORa, где Ra означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода;

насыщенный неароматический циклический радикал, содержащий от 3 до 8 атомов в цикле, где один атом в цикле является гетероатомом, выбранным из N или О, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода, причем один или два атома углерода необязательно замещены по атому азота группами -С(O)(С16алкокси) или -SO216алкил.

2. Соединение по п.1, где Z означает N, X1 означает О, R1 означает алкил, R2 означает Н или алкил, а R3 означает насыщенный неароматический циклический радикал, содержащий от 3 до 8 атомов в цикле, где один атом в цикле является гетероатомом, выбранным из N или О, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода, причем один или два атома углерода необязательно замещены по атому азота группами -С(O)(С16алкокси) или -SO216алкил.

3. Соединение п.2, где R3 означает алкоксиалкил или насыщенный, неароматический циклический радикал, содержащий 6 атомов в цикле, в котором один атом не означает углерод, а является кислородом или азотом, необязательно замещенный по атому азота группами -С(O)(С16алкокси) или -SO216алкил.

4. Соединение по п.1, где X1 означает -О-.

5. Соединение п.1, где R3 означает насыщенный неароматический, циклический радикал, содержащий от 3 до 8 атомов в цикле, где один атом в цикле является гетероатомом, выбранным из N или О, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода, причем один или два атома углерода необязательно замещены по атому азота группами -С(O)(С16алкокси) или -SO216алкил.

6. Соединение по п.1, где R2 означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода.

7. Соединение по п.1 формулы (I")

где R1 означает алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода;

R2 означает водород или алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода; и

R3 означает насыщенный неароматический циклический радикал, содержащий от 3 до 8 атомов в цикле, где один атом в цикле является гетероатомом, выбранным из N или О, а остальные атомы в цикле являются атомами углерода, причем один или два атома углерода необязательно замещены по атому азота группами -С(O)(С16алкокси) или -SO216алкил; или его фармацевтически приемлемая соль.

8. Соединение по п.7, где R3 выбирают из ряда: (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил, 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и морфолинил.

9. Соединение по п.8,

где R1 означает этил,

R2 означает метил и

R3 выбирают из ряда (1-гидрокси-2-метил)проп-2-ил, 1-гидроксипентан-2-ил, (S)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (R)-2-гидрокси-1,2-диметилпропил, (S)-2-гидрокси-1-метилэтил, 1-гидроксиметилциклопентан-1-ил, 2-гидрокси-2-метилпропил, 3-метокси-1-(2-метоксиэтил)пропил, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил, 1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил, (1-карбоксиэтил)пиперидин-4-ил, 1,1-диоксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил и морфолинил.

10. Соединение по п.7 формулы

где Х означает -О-, -С(=O)-, -N(R12a)-;

R12a выбирают из ряда водород, -C(=O)R15 и -S(O)21-4алкил);

R14 выбирают из ряда С1-4алкил, -OR15, -C(=O)R15 и

-S(O)21-4алкил); и R15 в каждом случае независимо выбирают из ряда водород и С1-4алкил;

q равно 0 или 1 и

r равно 0, 1 или 2.

11. Соединение по п.10, или его изомер, или фармацевтически приемлемая соль, где Х означает -N(R12a)-, a R12a означает -S(O)21-4алкил).

12. Соединения по любому из пп.1-11, обладающие ингибирующей активностью в отношении киназы MAP p38.

13. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении киназы MAP p38, включающая фармацевтически приемлемый эксципиент и терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-11.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новому способу получения соединения формулы IX и IXa, включающему стадию взаимодействия, в растворителе, соединения формулы Va, с соединением формулы VII или формулы VIIa, в присутствии палладиевого катализатора и фосфинового лиганда, в присутствии аминного основания, с получением соединения формулы VIII или формулы VIIIa, a также стадию взаимодействия, в растворителе, соединения формулы VIII или VIIIa с циклопропиламином, необязательно в присутствии катализатора, также изобретение относится к способу очистка соединения формулы IX и IXa.

Изобретение относится к новым соединениям формулы I или его фармацевтически приемлемой соли или же сольвату, где пунктирная линия означает возможную дополнительную связь, а означает числа от 0 до 2, b означает числа от 0 до 2, n означает 2, р означает 2, r означает 1, М1 означает атом азота, М2 означает C(R 3), X означает связь или алкиленовую группу с числом атомов углерода от одного до шести, Y означает группу -С(O)-, Z означает связь, алкиленовую группу с числом атомов углерода от одного до шести, алкениленовую группу с числом атомов углерода от одного до шести, группу -С(O)-, -CH(CN)-, -SO2 - или CH2C(O)NR4-, R1 означает группы R2 означает шестичленное гетероарильное кольцо с одним или двумя гетероатомами, выбираемыми независимо друг от друга из атома азота или группы N-O, при этом остающиеся атомы в цикле представлены атомами углерода, пятичленное гетероарильное кольцо с одним, двумя, тремя или четырьмя гетероатомами, выбираемыми независимо друг от друга из атома азота, кислорода или серы, при этом остающиеся атомы в цикле представлены атомами углерода, R32-замещенную хинолинильную группу, R32-замещенную арильную группу, гетероциклоалкильную группу, циклоалкильную группу с числом атомов углерода от трех до шести, алкильную группу с числом атомов углерода от одного до шести, группу где названное шестичленное гетероарильное кольцо или названное пятичленное гетероарильное кольцо может нести заместитель R6, R12 независимо от других выбирают из группы, состоящей из алкильной группы с числом атомов углерода от одного до шести, гидроксильной группы или атома фтора, при этом в случае, когда R12 означает гидроксильную группу или атом фтора, остаток R 12 не может быть связан с атомом углерода, соединенным с атомом азота, или два заместителя R12 образуют алкильный мостик с числом атомов углерода от одного до двух, направленный от одного атома углерода в кольце к другому, не соседствующему с ним атому углерода в кольце, R 13 независимо от других выбирают из группы, состоящей из алкильной группы с числом атомов углерода от одного до шести, гидроксильной группы, алкоксигруппы с числом атомов углерода от одного до шести или атома фтора, при этом в случае, когда R13 означает гидроксильную группу или атом фтора, остаток R13 не может быть связан с атомом углерода, соединенным с атомом азота, или два заместителя R13 образуют алкильный мостик с числом атомов углерода от одного до двух, направленный от одного атома углерода в кольце к другому, не соседствующему с ним атому углерода в кольце, а значение остальных переменных структурных элементов приведено в описании.

Изобретение относится к соединениям формулы I, которые являются антагонистами рецептора CRF, где Ar означает необязательно замещенный фенил или моноциклический 6-членный гетероарил, содержащий один гетероатом, выбранный из атомов азота, кислорода или серы, R 1-R4 имеют значения, указанные в формуле изобретения, или их фармацевтически приемлемым солям.

Изобретение относится к способу лечения расстройств или состояний, опосредованных ферментом - катепсином S, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, способ включает введение данному субъекту терапевтически эффективного количества любого соединения или любой фармацевтической композиции, которые описаны выше.

Изобретение относится к изетионатной соли 6-ацетил-8-циклопентил-5-метил-2-(5-пиперазин-1-илпиридин-2-иламино)-8Н-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-она и ее кристаллическим формам, которые обладают свойствами селективного ингибитора циклинзависимой киназы 4 (CDK4) и могут найти применение при лечении, например, воспалительных и клеточных пролиферативных заболеваний.

Изобретение относится к новым полициклическим соединениям формулы (I), где R1, R2 , R3, R4, R 5, R6, R7, цикл А, цикл В, X, Y и Z имеют значения, указанные в пунктах формулы изобретения и в описании заявки, а также их фармацевтически приемлемым солям.

Изобретение относится к связывающему амилоид соединению или его водорастворимой нетоксичной соли, где Y представлено NR 1R2; Z означает S; R 1 выбран из группы, состоящей из Н, метила, пропила, (CH 2)nOR' (где n=1, 2 или 3 и R' представлен Н или группой низшего алкила), CF 3, CH2-CH2X, CH2-CH2-CH 2X (где X=F, Cl, Br или I); где R2 выбран из группы, состоящей из группы низшего алкила, (CH 2)nOR' (где n=1, 2 или 3 и R' представлен Н или группой низшего алкила), CF 3, CH2-CH2X, СН2-СН2-СН 2Х (где X=F, Cl, Br или I); R3-R 10 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, I, группы низшего алкила, (CH2) nOR' (где n=1, 2 или 3) или OR', a R' означает Н или группу низшего алкила); при условии, что соединение не является одним из следующих соединений: метил-[4-(6-метил-бензотиазол-2-ил)фенил]амин, диметил-[4-(6-метил-бензотиазол-2-ил)фенил]амин, и где по меньшей мере один из заместителей R1-R 10 содержит радиоактивную метку, выбранную из группы, состоящей из 11С, 123I, 125I или 127I, и указанные соединения не содержат четвертичные атомы азота.

Изобретение относится к кристаллическому гидрату 3-(2-цианофенил)-5-(2-пиридил)-1-фенил-1,2-дигидропиридин-2-она примера В1, к способу его получения, а также к безводным кристаллическим формам 3-(2-цианофенил)-5-(2-пиридил)-1-фенил-1,2-дигидропиридин-2-она примеров D1, C1, E1, и к фармацевтической композиции.

Изобретение относится к новым производным тиоксантина формулы Ia или Ib и их фармацевтически приемлемым солям, а также к их применению для изготовления лекарственного средства и фармацевтической композиции на их основе.

Изобретение относится к новым производным пирролидона формулы I где: Q означает =N, =C(R24 )-; X-Y означает -СН2-СН 2-, -СН=СН-, -СН2-О-; R 1, R1.1 и R1.2 независимо друг от друга выбраны из группы, включающей Н, галоид, галоид(C1-C6)алкил, CN, (C1-C6)алкоксигруппу; R21, R22 и R 23 независимо друг от друга выбраны из группы, включающей Н, галоид; R24 означает Н; R 3 означает -NHR6; R 4 означает Н; R6 означает -С(O)Н, -С(O)-(C1-C3)алкил, С(O)-галоид(C1-C3 )алкил, -С(O)O(C1-C3 )алкил, -C(O)NH2, -SO2 -(C1-C3)алкил; а также его индивидуальные изомеры, рацемические и нерацемические смеси.

Изобретение относится к новым 2,3-дигидроизиндолам формулы I или II где: Х означает -СН=; R1 означает -(CH2)n -CO-NR5R6, -(CH 2)n-NR5R 6, -(CH2)n-COOR 7; -(CH2)n-CN; -(СН2)n-изоиндол-1,3-дионил, -(СН2)р-OR 8; R2 означает H, C 1-С6алкил, ОН; R3 означает Н, C1-С6 алкил; R4 означает галоген, галоген-(С 1-С6)алкил, C1 -С6алкокси-, галоген-(С 1-С6)алкоксигруппу; R 5 и R6 независимо друг от друга означают Н, C1-С3алкил; R 7 означает C1-С6 алкил; R8 означает Н, C 1-С6алкил; m означает 1, 2 или 3; n означает 0, 1 или 2; р означает 1 или 2; а также их фармацевтически приемлемым солям.

Изобретение относится к медицине, в частности к неврологии и психиатрии, и может быть использовано в качестве средства, нормализующего физиологическую и функциональную активность центральной нервной системы (ЦНС), интеллектуально-мнестические функции головного мозга.
Изобретение относится к медицине, а именно к способам лечения пограничных нервно-психических расстройств поведения и адаптации, включая лиц с гиперактивностью (в том числе с дефицитом внимания), неврозоподобными, аутистическими и аффективными нарушениями, и может быть использовано в неврологии и психиатрии.

Изобретение относится к новым соединениям формулы I где R1 выбирают из группы, состоящей из Н, галогена и O, R2 выбирают из группы, состоящей из Н, галогена и N=N; R3 выбирают из группы, состоящей из Н и галогена; R 4 выбирают из группы, состоящей из Н, галогена, амино и N=N; R5 выбирают из группы, состоящей из Н, галогена, метокси, метила и О, или R1 и R2 или R4 и R 5 соединены с образованием углеродного ненасыщенного кольца; R6 выбирают из группы, состоящей из Н, C1-С6 алкила, С 2-С6 алкенила, 3-фенил-2-пропин-1-ила, бензила, бензила, замещенного галогеном, фенилом или метокси; СН2-циклоалкила, СН2 -2-фурана, (CH2)2 SCH3 и (CH2) 2NHBOC; R7 выбирают из группы, состоящей из Н, C1-С6 алкила и циклоалкила; R8 выбирают из группы, состоящей из бензила и бензила, замещенного ОСН2-фенилом; Т представляет R9 и R10 представляют Н или R9 представляет Н и R10 выбирают из группы, состоящей из C 1-С6 алкила, С2 -С6 алкенила, метилзамещенного С 2-С6 алкенила, С2 -С6 алкинила, циклоалкила, фенила, замещенного C1-С6 алкилом, галогеном, метокси, SCH3 или N(СН3 )2; 1-нафтила и СН2 СН2-1,3-диоксолана, или R 9 и R10 независимо выбирают из группы, состоящей из C1-С6 алкила, С2-С6 алкенила, фенила, фенила, замещенного в четвертом положении галогеном, метокси, SCH3 или N(СН3 )2; и 1-нафтила, или его фармацевтически приемлемой соли, гидрату или его пролекарству в форме карбамата или сложного эфира.

Изобретение относится к новым соединеним формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям. .
Наверх