Способ получения популяции гомозиготных стволовых клеток с предварительно отобранным иммунотипом и/или генотипом, клетки, подходящие для получения из них трансплантата, и материалы и способы их получения

Изобретение относится к области медицины и касается способа получения гомозиготных стволовых клеток с предварительно отобранным иммунотипом, банка этих клеток и способа получения банка этих клеток. Способ включает определение целевого HLA иммунотипа, митотическую активацию неоплодотворенных диплоидных ооцитов после мейоза 1 при помощи кальциевого ионофора для развития бластоцистоподобных масс, каждая из которых содержит внутреннюю клеточную массу (ICM), гомозиготную по целевому HLA иммунотипу, выделение гомозиготных стволовых клеток из ICM, культивирование этих клеток для получения линий клеток и отбор клеток, гомозиготных по целевому HLA иммунотипу. Описывается также способ получение банка этих клеток, полученных от многих доноров. Преимущество изобретения заключается в возможности получение большого количества гистосовместимых клеток для трансплантации. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 11 ил.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Способ получения гомозиготных стволовых (HS) клеток с целевым HLA иммунотипом из неоплодотворенных диплоидных ооцитов после мейоза I, включающий

(a) определение целевого HLA иммунотипа;

(b) митотическую активацию неоплодотворенных диплоидных ооцитов после мейоза I при помощи кальциевого ионофора для развития бластоцистоподобных масс, каждая из которых содержит внутреннюю клеточную массу (ICM), гомозиготную по целевому HLA иммунотипу;

(c) выделение HS-клеток из ICM;

(d) культивирование выделенных HS-клеток для получения линий HS-клеток;

(e) определение HLA иммунотипа каждой линии HS-клеток; и

(f) отбор клеток, гомозиготных по целевому HLA иммунотипу.

2. Способ по п.1, где целевой HLA иммунотип не содержит генетической мутации, связанной с определенным заболеванием или расстройством.

3. Способ по п.1, где целевой HLA иммунотип содержит генетическую мутацию, связанную с определенным заболеванием или расстройством.

4. Способ по п.1, где неоплодотворенные диплоидные ооциты после мейоза I получают от гетерозиготного донора, несущего мутантный аллель, связанный с определенным заболеванием или расстройством, и соответствующий аллель дикого типа.

5. Способ по п.1, где неоплодотворенные диплоидные ооциты после мейоза I поставляются донором, и полученные HS-клетки предназначаются для реципиента, нуждающегося в этом.

6. Способ по п.5, где донор и реципиент являются одним и тем же индивидуумом, где донор и реципиент являются родственниками или где донор и реципиент родственниками не являются.

7. Банк, содержащий множество популяций линий HS-клеток, типированных по HLA, где каждую линию HS-клеток получают от разных доноров, и она является гомозиготной по уникальному гаплотипу HLA.

8. Банк клеток по п.7, где линии HS-клеток получают от доноров разной этнической принадлежности.

9. Банк клеток по п.7 или 8, где содержимое банка внесено в каталог.

10. Способ получения банка HS-клеток из иммунотипированных по HLA гомозиготных стволовых HS-клеток от многих доноров, включающий:

a) отбор доноров;

b) определение HLA иммунотипа каждого донора;

c) митотическую активацию неоплодотворенных диплоидных ооцитов после мейоза I, полученных от каждого донора, при помощи кальциевого ионофора для развития многих бластоцистоподобных масс, каждая из которых содержит внутреннюю клеточную массу (ICM), гомозиготную по определенному HLA иммунотипу;

(d) выделение HS-клеток из ICM, полученной от каждого донора;

(e) культивирование выделенных HS-клеток для получения линий HS-клеток;

(f) определение HLA иммунотипа каждой линии HS-клеток; и

(g) составление каталога HLA иммунотипа каждой линии HS-клеток, полученной в (е).