Способ оценки степени тяжести повреждающего действия герпес-вирусной инфекции на иммунный статус беременных

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2346278:

Государственное учреждение Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (RU)

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки степени тяжести повреждающего действия герпес-вирусной инфекции на иммунный статус беременных. Сущность способа: в смывах с небных миндалин определяют IgAS на единицу белка. Уровень IgAS 150-170±2,9 нг/мл соответствует тяжелой форме герпесной инфекции в период обострения. Уровень IgAS 210-230±3,1 нг/мл соответствует средней форме герпесной инфекции в период обострения. Через 60 дней после вспышки инфекции уровень IgAS составляет 280-300±4,7 нг/мл. Использование способа позволяет оценить секреторную активность IgAS небными миндалинами у беременных при герпес-вирусной инфекции.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для диагностики характера секреторной активности IgAs местными лимфоэпителиальными органами (небной миндалиной) на различных этапах гестации с целью оценки степени тяжести повреждающего действия герпес-вирусной инфекции на иммунный статус беременной.

Недостатки известных способов оценки секреторной активности местными лимфоэпителиальными органами.

1. Для оценки секреторной активности IgAs местными лимфоидными органами использовался либо смыв секрета слизистой носа (Л.А.Матвеева, 1986; А.В.Чебуркин и др. 1973), либо слюна полости рта (Шварцман Я.С., Хазенсон Л.Б., 1978).

2. Исследования проводились при гриппе (Шварцман Я.С. и др., 1975) либо при пневмонии у детей (Матвеева Л.А., 1986).

3. Оценка секреторной активности местных лимфоидных органов у беременных при вспышке герпес-вирусной инфекции не проводилась.

Недостатком вышеприведенных способов оценки секреторной активности IgAs местными лимфоидными органами является:

1. В слизистой полости носа сконцентрированных лимфоидных образований не бывает.

2. Смывы, как и слюна, из полости рта не дают конкретного представления о месте локализации секретируемого IgAs, что не отражает конкретно работу того или иного местного лимфоэпителиального органа в динамике развития патологического процесса.

Целью изобретения является предложить способ оценки секреторной активности IgAs местными лимфоэпителиальными органами (небные миндалины) у беременных при герпес-вирусной инфекции путем получения смыва с поверхности небных миндалин с последующей оценкой содержания IgAs на 1 белка в полученном смыве. Полученные данные позволяют оценить интенсивность секреторной активности IgAs местными лимфоэпителиальными органами при различной степени тяжести герпес-вирусной инфекции (в зависимости от титра антител к возбудителю).

Предложенный способ осуществляется следующим образом.

Для анализа использовали свежеприготовленные смывы, полученные по стандартной методике, включающей промывание 5 мл физиологического раствора с температурой 37°С поверхности небных миндалин с помощью шприца. После чего образцы собирали в центрифужные пробирки для дальнейшей обработки. На начальном этапе образцы смывов тщательно перемешивали и подвергали центрифугированию при 3000 об/мин в течение 10 минут. Затем супернатант отделяли декантированием, а полученную взвесь разводили в соотношении 1:500 фосфатным буферным раствором с рН 7,6 из набора реагентов для количественного иммуноферментного анализа секреторного иммуноглобулина А. Для этого 0,5 мл рабочего буферного раствора тщательно перемешивали с 10 мкл исследуемого образца в специальных планшетах для разведений.

Подготовленные таким образом пробы использовали для дальнейшего иммуноанализа на наличие секреторного IgAs в смывах с миндалин с помощью набора реагентов ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск. Результаты учитывали фотометрически на микропланшетном иммуноферментном анализаторе «Stat-Fax-2100» (USA) при длине волны 450 нм.

Расчет активности секреторного IgAs в образце проводили на единицу белка, полученного по методу Лоури с использованием стандартного набора ООО «Агат-Мед» (Москва) и спектрофотометра «Stat-Fax-1904+» (USA). Для определения количества белка в смыве с небных миндалин применяли ранее полученный центрифугат. Объем образца, фотометрическое измерение и расчет концентрации общего белка производили согласно предлагаемой стандартной методике при длине волны 540 нм.

Определение IgAs выполнялось у одной и той же беременной как в период обострения инфекции, так и через 60 дней после исчезновения внешних признаков герпес-вирусной инфекции. Степень тяжести заболевания контролировалась определением титра антител к вирусу простого герпеса стандартным иммуноферментным методом с помощью спектрофотометра «Stat-Fax-1904+» (USA).

Предлагаемый способ прошел клиническую апробацию в клинике Государственного учреждения Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН. С помощью предложенного способа было обследовано 52 беременные с герпес-вирусной инфекцией. Результаты проверки заявленного способа показали его эффективность, подтверждая, что по мере нарастания титра антител к вирусу герпеса у беременной снижается выработка IgAs на поверхности небных миндалин.

1. При тяжелой форме герпесной инфекции (титр антител - 1:12800) уровень IgAs в смывах с небных миндалин колебался в пределах 150-170±2,9 нг/мл.

2. При средней степени тяжести инфекции (титр антител - 1:3200) уровень IgAs в смывах с небных миндалин определялся в пределах 210-230±3,1 нг/мл.

3. Через 60 дней после вспышки инфекции (титр антител - 1:800) содержание IgAs в смывах с небных миндалин определялось в пределах 280-300±4,7 нг/мл.

Литература

1. Ботвиньева В.В. Система местного иммунитета и заболевания органов дыхания у детей / В.В.Ботвиньева, М.А.Уланова // - МЖР, разд. V. - 1981. - №7. - С.19-22.

2. Матвеева Л.А. Местный иммунитет при болезнях легких у детей / Л.А.Матвеева. - Томск. 1986. - 189 с.

3. Шварцман Я.С. Иммуноглобулины и антитела в секрете дыхательных путей людей, иммунизированных живой гриппозной вакциной // Докл. АН СССР. - 1972. - №2. - с.470-472.

4. Шварцман Я.С. Местный иммунитет / Я.С.Шварцман, Л.Б.Хазенсон. - Л., 1978. - 222 с.

Способ оценки степени тяжести повреждающего действия герпес-вирусной инфекции на иммунный статус беременных, отличающийся тем, что в смывах с небных миндалин определяют IgAs на единицу белка, уровень IgAs 150-170±2,9 нг/мл соответствует тяжелой форме герпесной инфекции в период обострения, уровень IgAs 210-230±3,1 нг/мл соответствует средней форме герпесной инфекции в период обострения, через 60 дней после вспышки инфекции уровень IgAs составляет 280-300±4,7 нг/мл.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и педиатрии, и может использоваться для прогнозирования результатов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) у пациенток с аутоиммунными заболеваниями.

Способ прогнозирования риска рецидивирования герпесассоциированных заболеваний глаз // 2345366

Изобретение относится к медицине, а именно офтальмологии, и предназначено для прогнозирования риска рецидивирования герпесассоциированных заболеваний глаз. .

Способ дифференциальной диагностики иерсиниоза и диагностический набор для его осуществления // 2345365

Изобретение относится к медицине, а именно к способам диагностики инфекционных заболеваний, и касается иммуноферментной (ИФА) диагностики кишечного иерсиниоза, вызванного различными серовариантами Yersinia enter ocolitica, и наборам для диагностики иерсиниоза.

Способ определения чувствительности больного с анемией хронических заболеваний к терапии анемического синдрома препаратами рекомбинантного человеческого эритропоэтина // 2344830

Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии, онкологии, терапии. .

Способ прогнозирования угрожающих преждевременных родов у женщин с угрозой невынашивания ранних сроков // 2344424

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования развития угрожающих преждевременных родов у женщин с угрозой невынашивания ранних сроков.

Анализы гомоцистеина и цистатионина ферментативным циклическим преобразованием // 2344176

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ оценки количества гомоцистеина и/или цистатионина в растворе ферментативным циклическим преобразованием.

Способ детектирования специфичности активированных лимфоцитов и среда для его осуществления // 2343486

Способ диагностики рака шейки матки // 2343485

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике злокачественных новообразований и клинической биохимии. .

Способ прогнозирования синдрома задержки внутриутробного развития плода у женщин во втором триместре беременности при гриппе а(h3n2) в первом триместре гестации // 2342662

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, и касается способа прогнозирования синдрома задержки внутриутробного развития плода у женщин во втором триместре беременности, перенесших грипп A(H3N2) в первом триместре гестации.

Способ ранней диагностики степени тяжести перинатальных гипоксических поражений цнс у новорожденных // 2342661

Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии, и касается способа ранней диагностики степени тяжести перинатальных гипоксических поражений ЦНС у доношенных новорожденных.

Способ диагностики острого отторжения трансплантата почки // 2346281

Изобретение относится к трансплантологии и клинической лабораторной диагностике, в частности к диагностике острого отторжения трансплантата почки

Способ изготовления панели сывороток различных субтипов и генотипов вируса гепатита в для контроля качества диагностики гепатита в // 2346282

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии и может быть использовано в технологии изготовления стандартных панелей сывороток, содержащих ДНК и антигены вирусов наиболее опасных инфекций, и в производстве тест-систем для определения ДНК HBV и антигенов в качестве контрольных положительных сывороток

Способ оценки результатов фагоиммунотеста // 2347225

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к иммунобиотехнологии, и может быть использовано при цифровой обработке изображений зон лизиса на индикаторном бактериальном газоне, которые образуются при постановке реакции антиген-антитело, основанных на принципе фаговой метки (фагоиммунотест или вироиммунотест)

Способ диагностики иммунологических изменений при пролиферативной витреоретинопатии // 2348381

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, в частности, для диагностики появления и нарастания иммунологического процесса в результате прободного ранения, последствий тяжелой контузии или торпидного интенсивного воспалительного процесса в стекловидной полости глаза, и может быть использовано как метод ранней диагностики развития витреоретинальной пролиферации (ВРП), когда применение клинических методов исследования малоинформативно

Штамм вируса паротита драгун для получения антигена-компонента тест-системы и иммуноферментная тест-система для диагностики антител к вирусу паротита // 2348691

Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии

Способ определения показаний к проведению дифференциальной терапии у часто болеющих детей с патологией лимфоидного глоточного кольца // 2348935

Устройство для иммунологических исследований биологических жидкостей // 2350957

Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано для экспресс-исследования биологических жидкостей с использованием реакции агглютинации иммуноактивных частиц

Способ определения групповой принадлежности синовиальной жидкости // 2350958

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам лабораторного обследования, и касается способа определения групповой принадлежности синовиальной жидкости (СЖ)

Способ иммунофлуоресцентного определения локализации антигенов // 2350959

Изобретение относится к области молекулярной биологии и гистологии и касается способа иммунофлуоресцентного определения локализации антигенов

Способ прогнозирования инфекционных осложнений атопического дерматита // 2350960

Изобретение относится к области медицины, конкретно к аллергологии, и иммунологии, к дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционных осложнений при атопическом дерматите (АтД) у взрослых