Избирательный направленный перенос в сосудистую сеть опухоли с использованием молекул антител

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложено антитело, специфичное к ED-B человека. Указанное антитело представляет собой молекулу в виде либо димеризованного мини-иммуноглобулина, либо IgG1, у которой вариабельная область происходит из антитела L19. В случае мини-иммуноглобулина вариабельная область L19 слита с ε_S2-CH4, тогда как в случае IgG1, вариабельная область L19 слита с константной областью IgG1. Раскрыты конъюгаты антител с радиоизотопом. Описана кодирующая нуклеиновая кислота, несущая ее клетка-хозяин, способная продуцировать антитело, и способ получения антитела из клетки. Раскрыты: способ определения степени связывания антитела, а также композиция на основе антитела. Описано применение антитела для приготовления лекарственного средства для лечения либо повреждения, связанного с ангиогенезом, либо для лечения опухоли. Использование изобретения обеспечивает антитела, которые обладают высокой аккумулирующей способностью в опухоли, улучшенной способностью к присоединению радиоактивной метки и неожиданно сохраняют иммунореактивность в плазме, по сравнению с scFv L19. Указанные антитела могут найти применение для диагностики и лечения опухолей. 8 н. и 14 з.п. ф-лы, 13 ил., 8 табл.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Специфически связывающийся с ED-B человека агент, который представляет собой либо минииммуноглобулин, либо полную молекулу антитела в виде IgG1, где минииммуноглобулин содержит VH домен антитела L19 и VL домен антитела L19, слитый с ε_S2-CH4 и димеризованный, а полная молекула антитела содержит VH и VL из L19, слитый с константной областью IgG1.

2. Специфически связывающийся агент по п.1, содержащий VH домен L19.

3. Специфически связывающийся агент по п.2, содержащий VL домен L19.

4. Специфически связывающийся агент по п.1, представляющий собой минииммуноглобулин, содержащий ε_S2-CH4.

5. Специфически связывающийся агент по п.4, где VH домен антитела и VL домен антитела входят в молекулу scFv-фрагмента антитела, слитую с ε_S2-CH4.

6. Специфически связывающийся агент по п.5, где молекулу scFv-фрагмента антитела сливают с ε_S2-CH4 через пептидный линкер.

7. Специфически связывающийся агент по п.6, где пептидный линкер имеет аминокислотную последовательность GGSG (SEQ ID NO.7).

8. Специфически связывающийся агент по п.1, который представляет собой полную молекулу антитела в виде IgG1.

9. Специфически связывающийся агент по одному из пп.1-8, конъюгированный с радиоизотопом.

10. Специфически связывающийся агент по п.9, в котором радиоизотоп представляет собой радиоизотоп Тc, Re, In, Y или Lu.

11. Специфически связывающийся агент по п.9, в котором радиоизотоп выбирают из ряда, включающего ^94mТс, ^99mTc, ¹⁸⁶Re, ²⁰³Pb, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁴³Sc, ⁴⁷Sc, ^110mIn, ¹¹¹In, ⁹⁷Ru, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu, ⁶⁷Cu, ⁶⁸Cu, ⁸⁶Y, ⁸⁸Y, ⁹⁰Y, ¹²¹Sn, ¹⁶¹Tb, ¹⁵³Sm, ¹⁶⁶Ho, ¹⁰⁵Rh, ¹⁷⁷Lu, ¹⁷²Lu и ¹⁸F.

12. Нуклеиновая кислота, кодирующая специфически связывающийся агент по любому из пп.1-8.

13. Клетка-хозяин, трансформированная нуклеиновой кислотой по п.12 и способная продуцировать специфический связывающийся агент по любому из пп.1-8.

14. Способ получения специфически связывающегося агента, заключающийся в том, что культивируют клетку-хозяин по п.13.

15. Способ по п.14, в котором дополнительно выделяют и/или очищают специфически связывающийся агент.

16. Способ определения степени связывания специфического связывающегося агента с ED-B, заключающийся в том, что связывают специфически связывающийся агент, который связывается с ED-B, по одному из пп.1-8 с ED-B или фрагментом ED-B.

17. Способ по п.16, в котором связывание осуществляют in vitro.

18. Способ по п.16, отличающийся тем, что определяют уровень связывания специфически связывающегося агента с ED-B или фрагментом ED-B.

19. Композиция для применения в способе терапевтического лечения такого состояния человека или животного, которое связано с патологическим ангиогенезом, содержащая терапевтически эффективное количество специфически связывающегося агента по одному из пп.1-8.

20. Композиция по п.19 для применения в способе лечения опухоли.

21. Применение специфически связывающегося агента по одному из пп.1-8 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения повреждения, связанного с патологическим ангиогенезом.

22. Применение специфически связывающегося агента по одному из пп.1-8 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения опухоли.

Приоритет по пунктам:

11.03.2002 - пп.1-22.