Лекарственное средство

Изобретение относится к области медицины и фармацевтической промышленности, а именно к созданию таблетированной лекарственной формы, обладающей профилактическим действием для купирования первичной реакции на облучение и ранней преходящей недееспособности. Средство содержит ондансетрон, метацин и кофеин в массовом соотношении ондансетрон: метацин: кофеин 4:1:20-300. Технический результат заключается в снижении побочных реакций, а именно рвоты, диареи и снижения физической, в том числе двигательной активности. 4 з.п. ф-лы, 11 табл.

 

Предлагаемое изобретение относится к новому комбинированному лекарственному средству, которое может найти применение в качестве средства защиты человека от ионизирующей радиации, в частности для профилактики первичной реакции на облучение и ранней преходящей недееспособности, особенно, в военной медицине для купирования первичной реакции на облучение.

Известно применение 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1H-имидазол-1-ил)метил]-4H-карбазол-4-она или его гидратов, или его солей (I) в качестве средства, купирующего рвотную реакцию, вызванную применением цитостатиков или других средств химиотерапии и/или рентгенорадиотерапии опухолей, или облучением. Наиболее часто с этой целью используют хлоргидрат дигидрат 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1H-имидазол-1-ил)метил]-4H-карбазол-4-она (ондансетрон, латран (Патенты Великобритании №2153821, 2290963; Европейские патенты №191562, 219929; патенты России №1528319, 2041876, 2159614 и др. Приказ начальника ГВМУ МО РФ №224 от 01.06.1996 "О принятии на снабжение медицинской службы Вооруженных сил Российской Федерации таблеток латрана 0,004, покрытых оболочкой").

Известно применение для профилактики первичной реакции на облучение и ранней преходящей недееспособности ряда композиций физиологически активных веществ на основе ондансетрона.

Одно из таких лекарственных средств представляет собой комбинацию ондансетрона и бензамида или его производных (Патент РФ №2229882). Недостатком этого средства является слабая эффективность при защите от диареи.

Известна фармацевтическая композиция, содержащая ондансетрон и метацин (иод-метилат 2-диметиламиноэтилового эфира бензиловой кислоты) (Патент РФ №2185825), которая обладает улучшенными антиэметическими свойствами и существенным уменьшением диарейного синдрома (наиболее близкий аналог).

Описана фармацевтическая композиция, содержащая ондансетрон, метацин и бензамид (Патент РФ №2234315), обладающая улучшенной антиэметической активностью, особенно при высоких дозах ионизирующего излучения.

Недостатками последних композиций является то, что при действии облучения, наряду с рвотой и диареей, происходит резкое снижение физической, в том числе двигательной активности. Об этом конкретно указано в описании к патенту РФ №2234315 (стр.8) «Нежелательные эффекты больших доз ондансетрона и метацина проявляются, как правило, снижением двигательной активности, тахикардией …».

Задачей изобретения является создание лекарственного средства для защиты человека от ранней преходящей недееспособности и для профилактики первичной реакции на облучение в виде таблетированной лекарственной формы (как наиболее удобной в военных условиях), лишенной указанных недостатков. Поставленная задача диктуется современными методами ведения войны, особенно возможностью использования в боевых условиях так называемого тактического ядерного оружия. В этих условиях военнослужащие должны сохранять боеспособность в течение некоторого времени, в течение которого должно подойти подкрепление. Снижение работоспособности в этих условиях недопустимо. В условиях ведения военных действий и, в частности, при применении ядерного (включая нейтронное) оружия, особенно важным является использования такого средства в виде одной таблетки, поскольку в этих условиях резко снижены критические возможности людей и возможна паника, могущая привести к неконтролируемым последствиям.

Поставленная задача решается созданием комбинированного лекарственного средства, состоящего из 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1H-имидазол-1-ил)метил]-4H-карбазол-4-она или его гидратов, или его солей (I) и метацина (II); в которое дополнительно введен кофеин (III) при соотношении ингредиентов 4:1:20÷300.

Согласно изобретению предлагается лекарственное средство состава I:II:III=4:1:20÷300 (весовые соотношения), предпочтительно состава II:III=1:50-100.

Наиболее удобно для решения поставленной задачи использовать в порядке само- и взаимопомощи таблетированную лекарственную форму, в которую кроме активных ингредиентов следует ввести необходимые фармацевтические добавки и компоненты. Были проверены на искусственных смесях различные соотношения кофеина без изменения выбранного заранее соотношения ондансетрон: метацин. При использовании количества кофеина меньше 20 влияние на двигательную активность незначительно, а при количестве кофеина более 500 размер таблетки становится неудобным для приема. Необходимая лекарственная форма получена в результате изучения совместимости различных вспомогательных веществ с активно действующими началами и между собой.

Таблетки могут быть изготовлены обычными способами, можно с использованием одного или нескольких вспомогательных компонентов. Таблетки могут быть изготовлены с помощью соответствующего оборудования прессованием, в котором действующие вещества используют в легко подвижном виде, например в виде порошка или гранул, возможно смешанных со связующим компонентом, скользящей добавкой, инертным разбавителем, поверхностно-активным веществом или диспергирующим агентом. Прессованные таблетки можно покрывать оболочкой, состоящей из сахара или специальной пленки.

Наиболее удобно использовать таблетированную лекарственную форму, покрытую желудочно-растворимым покрытием. Необходимая лекарственная форма получена в результате изучения совместимости различных вспомогательных веществ с активно действующими началами и между собой. В качестве стабилизатора может быть использован тиосульфат натрия.

В качестве вспомогательных веществ использованы кальция карбонат, каолин, желатин, крахмал, магния карбонат, микрокристаллическая целлюлоза, сахар молочный, аэросил и др. Использование в качестве наполнителей микрокристаллической целлюлозы, аэросила и крахмала; смеси аэросила, крахмала и стеарата магния в качестве скользящих и водного раствора крахмала в качестве связующего дало возможность получить ядро таблетки с необходимыми для покрытия свойствами по прочности. На основе гидроксипропилцеллюлозы разработано покрытие таблеток и подобраны условия его нанесения.

На основании доклинических исследований оптимальным является состав ядра таблетки:

1. Ондансетрон гидрохлорид дигидрат	0,010 г (0,008 г основания)
2. Метацин	0,002 г
3. Кофеин основание	0,100 г

Преимуществом данного состава является использование известных лекарственных средств в их обычно рекомендованных дозах. Установлено, что при меньшем содержании кофеина физическая работоспособность не восстанавливается, большее содержание кофеина приводит к ряду побочных явлений и трудности создания таблетированной лекарственной формы. Микрокристаллическая целлюлоза, аэросил, магния стеарат, тиосульфат натрия, поливинилпирролидон достаточное количество для получения ядра таблетки массой 0,2 г.

Для покрытия был использован бесцветный пленкообразующий состав: гидроксипропилцеллюлоза (гипролоза), масло касторовое, твин-80, тропеолин О достаточное количество для получения однородной пленки в псевдоожиженном слое.

После покрытия таблеток оболочкой полученные таблетки имеют распадаемость 10±2 мин и высвобождают действующие вещества до 96±2%. Полученное лекарственное средство получило при исследовании название Лакоцин. Экспериментальные примеры иллюстрируют, но не ограничивают притязания заявителя.

Результаты доклинических исследований препарата

Острая токсичность таблетированной лекарственной формы Лакоцина

Опыты произведены на 44 самцах и на 35 самках крыс Вистар. Взвесь таблеток Лакоцина в 1% крахмальном геле вводили в желудок в дозах 330, 385,440 и 495 мг/ кг.

У самцов дозы 330 и 385 мг/кг вызывали снижение двигательной активности, повышенную возбудимость, угнетение, небольшую одышку, цианоз. Большинство крыс через 3-4 часа достаточно активны. Однако у некоторых продолжается гиподинамия, одышка, цианоз. Эти животные погибают в течение первых двух суток. (Соответственно 1 и 2 крысы от доз 330 и 385 мг/кг).

При дозе 440 мг/кг явления интоксикации развиваются через 30-60 минут - животные сидят или лежат на брюхе с закрытыми глазами, возбудимость повышена, постепенно нарастает одышка и цианоз, наблюдается тремор. У одного животного через 1,5 часа после введения препарата развились клонико-тонические судороги и наступила гибель от остановки сердца. Еще две крысы погибли в течение первых суток.

С увеличением дозы до 495 мг/кг угнетение, одышка и цианоз наступают несколько быстрее. Типично появление тремора головы. Гибель животных (6/9) отмечалась через 2 часа и в течение 1-2 суток. (По всей вероятности от нарушения сердечной деятельности).

При введении Лакоцина самкам явления интоксикации были аналогичны описанным выше. Гибель животных наступала в течение первых суток.

Все выжившие крысы как самцы, так и самки, через 2 дня внешне не отличались от контрольных животных. В дальнейшем в течение двухнедельного наблюдения у крыс не выявлено признаков отсроченной интоксикации, нарушения поведенческих реакций (Таблица 2), изменений весовых коэффициентов внутренних органов (Таблица 3), появления гибели. У самок также не обнаружено существенных изменений прироста массы тела, в то время как у самцов всех опытных групп имело место статистически значимое снижение динамики массы тела в сравнении с контролем (Таблица 1).

Количественные показатели летальности при внутрижелудочном введении крысам лекарственной формы (таблетки) Лакоцина представлены в таблице 4.

Как видно из таблицы, самцы оказались менее чувствительными к Лакоцину, чем самки. Показатели ЛД50 для них составляют, соответственно, 475 мг/кг и 316 мг/кг.

Таблица 1
Динамика массы тела крыс Вистар самцов и самок в течение 2-х недель после однократного введения в желудок Лакоцина
Доза, Мг/кг	n	Исходная масса, г	n1	Прирост(%) массы через 1 неделю	Прирост (%) массы через 2 недели
САМЦЫ
Контроль	5	208,6±11,2	5	17,5±1,5	33,3±3,8
330	10	197,4±6,8	9	7,5±1,7*	18,3±2,7*
385	10	196,4±6,6	8	10,6±1,6*	24,5±1,5
440	10	205,3±8,0	7	10,5±1,4*	23,2±2,4*
САМКИ
Контроль	5	203,8±10,9	5	8,7±1,8	15,4±1,02
330	10	198,9±5,1	6	9,0±0,8	14,6±1,2
385	10	193,6±5,7	2	5,4±0,9	13,4±0,7
40	10	201,2±6,2	2	5,4±1,85	15,2±1,6
* - достоверность различий с контролем - Р≤0,05

Таблица 2
Показатели теста "Открытое поле" у крыс Вистар самцов и самок через 2 недели после однократного введения в желудок Лакоцина
Дозы, мг/кг	n	Время выхода из центра (сек)	Вертикальные стойки	Колич. актов груминга	Колич. посищен. центра	Колич. посещен. периферии	Σ	Колич. посещен. углов
САМЦЫ
Конт.	5	9,4±1,3	6,2±0,7	5,6±0,5	5,0±1,9	38,6±7,3	43,6±9,1	10,6±2,1
330	9	4,0±0,6	11,9±2,6	11,9±2,3	3,8±0,8	48,1±9,9	51,9±10,5	12,9±2,5
385	8	8,4±1,4	9,9±2,0	7,2±0,8	6,0±1,7	58,0±8,0	65,6±8,2	15,5±2,2
440	7	7,0±2,4	10,4±1,6	6,3±1,1	3,7±1,4	35,6±8,0	39,3±9,2	9,7±2,0

САМКИ
Контроль	5	8,0±2,4	19,6±2,7	6,2±1,5	14,6±1,9	99,4±10,9	114±12,5	25,4±2,2
330	6	4,7±0,9	17,5±1,9	3,2±0,7	7,2±2,7	77,2±8,2	84,3±10,8	19,3±1,6
385	2	18,0±7,0	19,0±1,0	5,0±2,0	8,0±2,0	78,5±10,5	86,5±12,5	21,5±3,5
440	2	12,5±1,5	15,0±1,0	2,5±1,5	3,5±0,5	74,5±11,5	78,0±12,0	19,0±3,0

Таблица 3
Весовые коэффициенты органов крыс Вистар самцов и самок через 2 недели после однократного введения в желудок Лакоцина
Дозы, мг/кг	n	Надпочечн., мг %	Тимус, %	Сердце	Селезенка	Почки	Гонады	Печень
САМЦЫ
Контроль	5	20,5±1,4	0,218±0,02	0,337±0,01	0,785±0,06	0,686±0,03	1,038±0,05	4,1±0,05
330	9	18,8±0,8	0,153±0,01	0,339±0,01	0,633±0,03	0,752±0,02	1,119±0,1	4,1±0,19
385	8	18,69±0,7	0,172±0,01	0,330±0,01	0,686±0,04	0,663±0,02	1,125±0,02	4,2±0,08
440	7	18,2±1,2	0,176±0,02	0,326±0,01	0,695±0,06	0,625±0,01	1,093±0,03	4,3±0,14
САМКИ
Контроль		30,8±1,7	0,200±0,02	0,308±0,03	0,544±0,05	0,649±0,03		4,4±0,19
330		30,6±1,0	0,199±0,02	0,341±0,01	0,636±0,06	0,661±0,03		4,4±0,12
385		30,9±2,4	0,250±0,02	0,330±0,01	0,704±0,01	0,766±0,12		4,6±0,15
440		28,6±30	0,272±0,01	0,316±0,04	0,614±0,1	0,660±0,03		4,8±0,12

Таблица 4
Показатели острой токсичности комбинированного лекарственного средства Лакоцин у крыс Вистар
Группы	ЛД16, мг/кг	ЛД50, мг/кг
Самцы	362 (315÷416)	475 (402÷560)
Самки	253 (214÷298)	316 (282÷363)

По классификации Заугольникова Лакоцин относится к препаратам умеренной токсичности.

Общая фармакологическая активность Лакоцина

Фармакологическая активность комбинированного средства Лакоцина исследована на мышах и крысах. При этом, как правило, использовали 1 и 5 терапевтических доз, пересчитанных по поверхности тела животных. Одна терапевтическая доза для мышей и крыс составляла соответственно 18,86 и 9,43 мг/кг.

Влияние на общую возбудимость и некоторые медиаторные системы ЦНС

Для исследования влияния препаратов на функцию ЦНС используется метод фармакологических анализаторов, основанный на фундаментальном принципе физиологии, согласно которому физиологическая реакция зависит не только от силы воздействия (в данном случае дозы фармакологического агента), но, в значительной мере, от исходного функционального состояния ЦНС.

Ниже приведены материалы исследования влияния Лакоцина на основные нейро-медиаторные системы головного мозга животных (холин-, дофамин- и ГАМК-ергическую) и чувствительность ЦНС животных к действию судорожных агентов (стрихнин, коразол) и наркотических веществ (гексенал).

Влияние на чувствительность к наркотическим и судорожным средствам

Наркотические агенты

Одним из критериев оценки состояния ЦНС при воздействии каких-либо фармакологических веществ является изучение чувствительности животных к наркотическим средствам. С этой целью изучалось наркотическое действие гексенала по критерию продолжительности наркотического сна на фоне однократного введения Лакоцина. Опыты выполнены на 30 мышах (CBAxC57B16)F1 - самцах массой 20-22 г. Лакоцин вводили в желудок в крахмальном геле за 40 минут до гексенала (70 мг/кг внутрибрюшинно в объеме 0,1 мл на 10 г массы тела).

Установлено, что Лакоцин в использованных дозах не влияет на продолжительность гексеналовго сна.

Аналептические средства

Аналептики являются стимуляторами центральной нервной системы общего действия. Они либо усиливают процесс возбуждения, облегчая межнейронную передачу нервных импульсов, либо подавляют тормозные механизмы. Действуют аналептики практически на всех уровнях центральной нервной системы, однако каждый из препаратов характеризуется более выраженной тропностью в отношении определенных отделов центральной нервной системы. Так, коразол обладает преимущественным влиянием на центры продолговатого мозга, стрихнин - на спинной мозг.

Исходя из сказанного, коразол является адекватным анализатором для оценки общей возбудимости ЦНС при патологических состояниях и введении лекарственных средств.

Коразол непосредственно возбуждает различные отделы ЦНС и является аналептиком широкого спектра действия. Хотя механизм возбуждающего влияния на ЦНС остается во многом неясным, установлено, что эффекты коразола связаны с экстрасинаптическим действием на мембранные структуры нейронов, повышением их проводимости для ионов натрия и угнетением для ионов хлора.

Таким образом, действие коразола является генерализованным и неспецифическим в отношении различных нейромедиаторных систем мозга. С этой точки зрения коразол является адекватным анализатором для оценки общей возбудимости ЦНС при применении изучаемых препаратов.

Исследование судорожного действия коразола проведено на 30 мышах (СВАхС57 В16) F₁ - самцах массой 20-23 г. Коразол в дозе 50 мг/кг вводили подкожно (0,1 мл водного раствора на 10 г массы тела) через 40 мин после внутрижелудочного введения Лакоцина, регистрировалось появление судорог.

Контролем служили мыши, которым в желудок вводили крахмальный гель 0,1 мл/10 г. Установлено, что Лакоцин в однократной лечебной дозе не влияет, а в пятикратной лечебной дозе усиливал судорожный эффект коразола.

Влияние на холинэргическую систему

Центральная М-холинергическая система

Наряду с действием на постганглионарные парасимпатические нервы М-холиномиметик ареколин обладает и центральным действием, что проявляется, в частности, в треморе. На этом основано применение ареколина как анализатора состояния холинергической системы.

Опыты проведены на 54 мышах CBAxC₅₇Bl₆(F₁) массой 20-24 г. Лакоцин вводили в желудок за 40 мин до ареколина. Последний применялся в дозе 20 мг/кг в виде 2% водного раствора по 0,1/10 г подкожно. Регистрировали начало тремора и его окончание для каждой мыши индивидуально, затем высчитывалась продолжительность тремора. Сравнивалась продолжительность ареколинового тремора у контрольных и опытных животных. Полученные результаты свидетельствуют, что чувствительность центральной М-холинергической системы к действию ареколина под влиянием Лакоцина существенно не изменяется.

Центральная Н-холинергическая система

Для исследования влияния изучаемых препаратов на Н-холинергическую систему мозга использовали Н-холиномиметик центрального действия - никотин.

Эксперименты выполнены на 28 мышах - самцах (CBAxC₅₇Bl₆)F₁ массой 20-23 г. Лакоцин вводили в желудок в крахмальном геле за 40 минут до применения никотина (10 мг/кг подкожно). Н-холинергическое действие оценивали по влиянию на продолжительность судорог, вызываемых никотином.

Установлено, что Лакоцин в обеих испытанных дозах увеличивал продолжительность никотиновых судорог.

Влияние на ГАМК-ергическую систему

γ-Аминомасляная кислота (ГАМК) - биогенное вещество, содержится в центральной нервной системе и принимает участие в обменных процессах головного мозга. По современным данным ГАМК является медиатором центрального торможения. О состоянии ГАМК-ергической системы судили по выраженности действия тиосемикарбазида (вещество, задерживающее образование ГАМК).

Опыты проведены на 30 мышах (CBAxC₅₇Bl₆)F₁ - самцах массой 20-23 г. Тиосемикарбазид вводили в дозе 10 мг/кг, внутрибрюшинно, в виде 0,1% водного раствора по 0,1/10 г массы. Влияние тиосемикарбазида учитывалось индивидуально для каждой мыши по секундомеру. Регистрировалось время введения препарата, появление симптомов его действия (тремор, вздрагивание, судороги), время исчезновения симптомов. Для каждой мыши высчитывался период гипервозбудимости. Лакоцин вводили в желудок за 40 мин до ТСК. Введение Лакоцина в 1 и 5 кратной дозе значимо не влияет на эффекты тиосемикарбазида.

Влияние на серотонинэргическую систему

Влияние Лакоцина на серотонинергическую систему мышей изучали по тесту «Head twich» (кивание головой). Опыты проведены на 34 мышах (CBAxC₅₇Bl₆)F₁ - самцах массой 20-23 г. 5-Окситритофан (5-Hydroxy-DL-tryptophan, фирма Sigma) вводили внутрибрюшинно в дозе 150 мг/кг (15 мг/1 мл, по 0,1 мл/10 г веса). Лакоцин вводили в желудок за 40 минут до окситритофана в 1 и 5 лечебных дозах в объеме 0,1/10 г веса мыши. Регистрировали среднее количество киваний в контрольной и опытных группах в течение 2 минут. Проведенные исследования показали, что Лакоцин в обеих дозах усиливает действие 5-окситриптофана.

Влияние Лакоцина на функцию сердечно-сосудистой системы и дыхание

Действие Лакоцина при внутрижелудочном введении

Опыты выполнены на крысах - самцах Wistar массой 250-330 г. Лакоцин назначали в виде взвеси в 1% крахмальном геле однократно в желудок в 1,5 или 10 лечебных дозах.

Контрольным животным в качестве плацебо перорально вводили 1% раствор крахмального геля. Крыс наркотизировали тиопенталом натрия (60 мг/кг в/б) и регистрировали параметры частоты дыхательных движений (ЧДД), частоты сердечных сокращений (ЧСС), артериального давления в левой сонной артерии, систолического и диастолического (АДс и АДд), а также показатели электрокардиограммы в трех стандартных отведениях (ЭКГ) через 40, 60 и 90 минут после введения одной из доз Лакоцина.

Для мониторного контроля и обработки исследуемых физиологических параметров использовали прибор Polygraph RM-6000 (Nihon Kohden, Япония) и кардиограф (Nihon Kohden, Япония). Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием параметрических критериев: t - критерия Стьюдента (прикладной пакет Statistica 5.5).

Проведенные исследования показали, что однократное пероральное введение Лакоцина в однократной, пятикратной и десятикратной дозировках не вызывало у крыс видимых резких различий показателей сердечно - сосудистой деятельности и дыхания в сравнении с контрольными животными. Процедура введения смеси не вызывала негативных реакций в поведении животного.

Гемодинамика и дыхание.

Через 40 минут после введения однократной дозы Лакоцина показатели артериального давления (АДс и АДд) были ниже контрольных значений, а частота дыхания - выше. Эта тенденция усилилась к 60 и 90 минутам наблюдения: АДс опытных крыс значимо ниже контроля, АДд существенно ниже, а частота дыхания - выше, чем у контрольных животных. При этом частота пульса имела выраженную тенденцию к урежению.

Пятикратное увеличение дозировки исследуемой рецептуры не вызвало таких изменений: значение АДс на протяжении 90 минут после введения смеси практически не отличается от показателей контроля, значение АДд умеренно понижено, показатели частоты пульса и частоты дыхания практически не отличаются от контрольных. Все исследуемые показатели оставались стабильными на протяжении 90 минут наблюдения.

Десятикратное увеличение дозировки рецептуры также не вызвало резких изменений показателей. АДс на протяжении 90 минут исследований практически не менялось, оставаясь на уровне контроля, АДд, как и в предыдущей группе, умеренно понижено. Обращает на себя внимание четко прослеживаемая динамика повышения частоты сердечных сокращений и частоты дыхания у животных этой группы, усиливающаяся к 90 минутам наблюдений.

Биологическая и электромеханическая активность сердца.

Анализ функций автоматизма, проводимости и возбудимости миокарда, обеспечивающих нормальную координацию сокращений между различными участками сердечной мышцы и отделами сердца, показал, что исследуемая рецептура в испытанных дозах не оказывала на них выраженного негативного влияния: у всех животных кардиоцикл регулярный, сердечный ритм правильный, синусовый. Показатель RR у всех опытных животных не отличался существенно от контроля на протяжении всего периода исследований.

Проводимость предсердий под влиянием компонентов рецептуры несколько повышается: у всех опытных крыс прослеживается тенденция к укорочению интервала PQ. В группе, получившей 1 дозу рецептуры, это различие достоверно, в других группах - нет в связи с большим различием сигм.

Возбудимость предсердий у крыс, получивших одну из доз рецептуры, также несколько повышена: возрастает амплитуда Р у всех опытных крыс. Различия достоверны по t-критерию Стьюдента в группах, получивших 1 и 5 доз рецептуры. В группе "10 доз" дисперсии сравниваемого показателя значимо различаются.

Длительность Р в группе " 1 доза" Лакоцина незначительно укорочена, а в группе "5 доз" - несколько увеличена.

Деполяризация желудочков сердца практически не изменялась под влиянием компонентов рецептуры. Об этом свидетельствуют стабильные показатели амплитуды зубца R и длительности желудочкового комплекса QRS.

Процессы угасания возбуждения желудочков и периоды медленной деполяризации и быстрой реполяризации желудочков у животных в группе "5 доз" и особенно "10 доз" отличаются от контроля (повышение сегмента ST и увеличение амплитуды T). Видно, что усиливающееся кардиотоническое действие при повышении дозировки вызывает умеренную ишемию миокарда.

Описанные изменения подтверждаются поворотом электрической оси сердца: у большинства опытных животных она принимает горизонтальное положение.

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют, что пероральное назначение пятикратной дозировки Лакоцина в 1% растворе крахмального геля практически не вьвывает у животных изменений показателей гемодинамики и дыхания.

Однократная доза приводит к снижению артериального давления и повышению частоты дыхания (на уровне тенденции).

Десятикратное увеличение дозировки практически не влияет на показатели АД, однако наблюдается тенденция к повышению частоты пульса и частоты дыхания.

Лакоцин оказывает отчетливое кардиотоническое действие, что проявляется повышением возбудимости и проводимости предсердий, поворотом электрической оси сердца в горизонтальное положение.

Действие Лакоцина при внутрибрюшинном введении

Опыты выполнены на 14 крысах - самцах Wistar массой 230-300 г, получивших однократно внутрибрюшинно одну или пять доз Лакоцина в физиологическом растворе.

Крыс наркотизировали тиопенталом натрия (60 мг/кг в/б) и регистрировали исходные параметры частоты дыхательных движений (ЧДД), частоты сердечных сокращений (ЧСС), артериального давления в левой сонной артерии, систолического и диастолического (АДс и АДд), а также показатели электрокардиограммы в трех стандартных отведениях (ЭКГ). Затем внутрибрюшинно вводили Лакоцин (1 или 5 доз) и продолжали регистрацию указанных показателей в течение 40 минут.

Для мониторного контроля и обработки исследуемых физиологических параметров использовали прибор Polygraph RM-6000 (Ninon Kohden, Япония) и кардиограф (Ninon Kohden, Япония). Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием t-критерия Стьюдента и критерия Фишера, и непараметрического U-критерия Манна-Уитни (прикладной пакет Statistica 5.5).

Проведенные исследования показали, что однократное внутрибрюшинное введение рецептуры в однократной или пятикратной дозировках не вызывало у крыс видимых резких различий показателей сердечно-сосудистой деятельности и дыхания.

Гемодинамика и дыхание.

Введение однократной дозировки Лакоцина не изменяло показателей артериального давления на протяжении всего периода наблюдений. Введение пятикратной дозировки вызывало умеренное, но достоверное понижение АДс, при этом показатели АДд практически не отличались от исходных. Частота пульса у крыс обеих групп увеличивалась, причем в группе, получившей 5 доз, через 15 минут наблюдения эти различия существенны и достоверны. Частота дыхания, достаточно высокая исходно у данной выборки крыс, также увеличивалась в обеих группах, к 40 минутам достигая достоверных различий. Этот эффект, вероятно, обусловлен некоторым возбуждением дыхательного и сосудодвигательного центров и усилением сердечной деятельности кофеином, входящим в состав Лакоцина.

Биологическая и электромеханическая активность сердца.

Анализ функций автоматизма, проводимости и возбудимости миокарда, обеспечивающих нормальную координацию сокращений между различными участками сердечной мышцы и отделами сердца, показал, что Лакоцин в испытанных дозах не оказывал на них заметного влияния: у всех животных кардиоцикл регулярный, сердечный ритм правильный, синусовый. Показатель RR у всех опытных животных имел отчетливую тенденцию к укорочению, его значения в группе "5 доз" достоверно ниже исходных (табл.4.11, 4.12). Это объясняется кардиотоническим действием кофеина.

Проводимость предсердий под влиянием Лакоцина практически не меняется (интервал PQ).

Возбудимость предсердий у крыс, получивших одну или пять доз, также практически не изменена (амплитуда и длительность P).

Деполяризация желудочков сердца практически не изменялась. Об этом свидетельствуют стабильные показатели амплитуды зубца R и длительности желудочкового комплекса QRS.

Процессы угасания возбуждения желудочков и периоды медленной деполяризации и быстрой реполяризации желудочков у животных в группе "1 доза" практически не меняют показатели сегмента ST и амплитуды зубца T, а в группе "5 доз" прослеживается отчетливая тенденция к повышению этих показателей, что, вероятно, связано с усиливающимся кардиотоническим действием препарата.

Эти изменения не оказывали, по-видимому, выраженного негативного влияния на сердечно-сосудистую деятельность животных: у всех опытных крыс в ходе исследований электрическая ось сердца практически не меняла своего направления.

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют, что внутрибрюшинное назначение однократной или пятикратной дозировки комбинированного средства Лакоцина практически не вызывает у животных изменений показателей гемодинамики и дыхания.

Назначение исследуемой рецептуры в однократной дозе незначительно понижает систолическое артериальное давление, умеренно повышает частоту пульса и дыхания.

Пятикратное увеличение дозировки практически достоверно понижает систолическое АД, не влияет на диастолическое АД, достоверно повышает частоту пульса и существенно учащает дыхание.

Все описанные эффекты вызваны, очевидно, умеренным возбуждением дыхательного и сосудодвигательного центров, а также кардиотоническим действием компонентов Лакоцина.

Влияние Лакоцина на моторно-эвакуаторную функцию желудочно-кишечного тракта у мышей

Эксперименты выполнены на 30 мышах - самцах. За сутки до начала опыта животные лишались корма при свободном доступе к воде. Лакоцин вводили в желудок за 1 час до введения в желудок индикаторной взвеси 50% сульфата бария на 1% крахмальном геле (0,2 мл на мышь). Контрольные животные вместо препарата получали воду. Через 30 минут мышей забивали растяжением шейного отдела позвоночника, вскрывали и определяли дистанцию прохождения индикатора в тонком кишечнике в процентах по отношению к его общей длине. Результаты экспериментов на мышах показывают, что Лакоцин обладает антиперистальтическим действием.

Изучение иммунотропных, иммунотоксических и аллергизирующих свойств Лакоцина.

Свойства комбинированного фармакологического средства Лакоцина исследовали на мышах и крысах. При этом, как правило, использовали 1 и 5 терапевтических доз, пересчитанных по поверхности тела животных.

Оценка влияния Лакоцина на гуморальный иммунный ответ

Работа выполнена на 40 мышах-гибридах F₁ (CBAxC57BL6), самцах и самках, массой 20-25 г, содержавшихся в условиях вивария на стандартном пищевом рационе. Первичный гуморальный иммунный ответ оценивали по способности мышей формировать в селезенке антителообразующие клетки (АОК) на антигенный стимул. Для этого животным внутрибрюшинно вводили тимусзависимый антиген - эритроциты барана (ЭБ) в дозе 5×10⁷ клеток на мышь. Через 4 сут определяли массу и клеточность селезенки и массу тимуса, а в селезенке - содержание АОК методом Каннингема. Лакоцин растворяли в дистиллированной воде и вводили в желудок одну или пять доз в объеме 0,2 мл на 10 г массы тела за 1 сут до иммунизации животных. Контрольной группе мышей вместо препарата вводили соответствующий объем дистиллированной воды. Каждая экспериментальная группа состояла из 10 особей. Достоверность различий результатов экспериментов определяли с помощью t-критерия Стьюдента.

При введении одной дозы комбинированного средства мышам самцам - масса, клеточность селезенки и содержание в ней АОК, а также масса тимуса не изменялись.

Введение Лакоцина в пятикратной дозе - самкам вызывает стимуляцию гуморального иммунного ответа. При этом масса селезенки и масса тимуса оставались на контрольном уровне. Однако клеточность селезенки несколько снижалась.

Таким образом, Лакоцин на мышах-самках в высокой дозе оказывает стимулирующий эффект на первичный тимусзависимый гуморальный иммунный ответ, но при этом несколько уменьшает клеточность селезенки.

Оценка влияния Лакоцина на клеточный иммунный ответ

Влияния Лакоцина на реакцию гиперчувствительности замедленного типа

Клеточный иммунитет оценивали по реакции гиперчувствительности замедленного типа. Для этого мышей (30 особей) сенсибилизировали внутрибрюшинным введением ЭБ в дозе 5×10⁷ клеток на одну мышь в объеме 0,2 мл физиологического раствора. Через 5 сут под апоневротическую пластинку одной из задних лап (опыт) вводили ЭБ в дозе 1×10⁸ клеток в объеме 50 мкл, а в контрлатеральную лапу - 50 мкл физиологического раствора (контроль). Через 24 ч мышей забивали путем дислокации шейных позвонков, отсекали лапы на уровне голеностопных суставов, определяли их массу и вычисляли индекс реакции (ИР) по формуле:

где Мо - масса опытной лапы, г;

Мк - масса контрольной лапы, г.

Каждая экспериментальная группа состояла из 10 особей. Лакоцин растворяли в дистиллированной воде. Одну или пять мышиных доз препарата вводили per os в объеме 0,2 мл на 10 г массы тела за сутки до сенсибилизации животных ЭБ. Контрольные мыши получали равный объем дистиллированной воды. Как следует из полученных данных у мышей, подвергнутых воздействию Лакоцина, индекс реакции гиперчувствительности замедленного типа не изменялся. Таким образом, Лакоцин не оказывает влияния на реакцию гиперчувствительности замедленного типа.

Определение влияния Лакоцина на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов

В работе использованы мыши-самцы (СВАхС57Вl6) F1 массой тела 25-26 г. Животным вводили препарат перорально в однократной и пятикратной (мышиной) дозах объемом 0,1 мл/10 г массы тела. Контрольным животным вводили растворитель в том же объеме. Через сутки животных опытных и контрольной групп умерщвляли с помощью эфира и промывали брюшную полость 3-4 мл среды 199 с 10%-ной эмбриональной сывороткой. Полученные клетки перитонеального экссудата отмывали средой 199 и подсчитывали в камере Горяева количество клеток экссудата, доводя их концентрацию до 2 млн/мл. Фагоцитируемыми частицами были клетки стафилококка (Staph. aureus), убитые нагреванием и опсонизированные пуловой мышиной сывороткой. Опсонизацию проводили в течение 10 мин при 37°С с последующим отмыванием и доведением концентрации до 20 млн/мл. К суспензии клеток перитонеального экссудата в объеме 1 мл добавляли равный объем клеток стафилококка. Через 30 минут после инкубации при 37°С готовили мазки (по аналогии с мазками крови), на предметном стекле оценивали по фагоцитарному числу и индексу, с последующей фиксацией в абсолютном спирте и окраской по Романовскому-Гинза способность Лакоцина влиять на поглотительную стадию фагоцитоза.

Эксперименты показали, что в контрольных пробах количество способных фагоцитировать макрофагов колебалось от 88 до 98% и в среднем составляло 93,6±1,7%, а фагоцитарный индекс был равен 5,8±0,38 частиц на фагоцитирующий макрофаг. У мышей после введения Лакоцина в однократной дозе количество фагоцитирующих клеток колебалось от 64 до 94%, в среднем - 84,0±5,2%, а индекс фагоцитоза - 5,2±0,35. После введения Лакоцина в пятикратной дозе количество фагоцитирующих макрофагов колебалось от 84 до 90%, в среднем - 87,2±1,0%, а индекс фагоцитоза - 5,26±0,3.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что Лакоцин в однократной и пятикратной дозе не влияет на поглотительную способность перитонеальных макрофагов. Введение Лакоцина в пятикратной дозе лишь незначительно изменяет параметры колебания физиологического количества фагоцитирующих перитонеальных макрофагов.

Таким образом, в данных условиях эксперимента у Лакоцина не было выявлено выраженного влияния на показатели гуморального и клеточного иммунитета. За исключением того, что на мышах-самках в высокой дозе он оказывает стимулирующий эффект на первичный тимусзависимый гуморальный иммунный ответ.

Оценка аллергизирующих свойств Лакоцина

Изучение влияния препарата на реакцию общей анафилаксии (анафилактический шок)

Работа выполнена на крысах-самцах популяции "Вистар" массой тела 140-150 г, содержавшихся в условиях вивария на стандартном пищевом рационе.

Каждая экспериментальная группа животных состояла из 10 особей.

Для получения активного анафилактического шока крыс контрольной и опытных групп сенсибилизировали подкожно (п/к) нормальной лошадиной сывороткой в дозе 0,1 мл. Сразу после сенсибилизации животным опытных групп вводили перорально препараты в однократной и пятикратной (крысиной) дозах объемом 1 мл/100 г массы тела. Контрольным животным вводили растворитель (дистиллированная вода) в том же объеме.

Для получения анафилактического шока через 19 суток после сенсибилизации животным опытных и контрольных групп вводили внутривенно разрешающую дозу нормальной лошадиной сыворотки в объеме 1,5 мл. Оценку реакции проводили по общепринятой четырехплюсовой схеме:

+ - кратковременное почесывание носа, взъерошивание шерсти, падение температуры тела не менее чем на 1°С;

++ - четко выраженные частые почесывания, единичные чихания, падение температуры тела;

+++ - спастический кашель, боковое положение животного, отделение кала и мочи;

++++ - спазм дыхательных путей, конвульсивные прыжки, судороги, животное погибает.

Интенсивность анафилаксии оценивали индивидуально и вычисляли индекс реакции по формуле Вейгла:

где А, Б, В, Г, Д - число животных с соответствующей оценкой реакции: минимальная - А (1+);

- Б (2+); - В (3+); максимальная - Г (4+); реакция отсутствует - Д.

Проведенные исследования показали, что у сенсибилизированных крыс контрольной группы после введения разрешающей внутривенной инъекции нормальной лошадиной сыворотки в объеме 1,5 мл наблюдались: у 2 крыс - кратковременное почесывание носа (оценка реакции составляла - +), у 8-х крыс - четко выраженные почесывания и единичные чихания (реакция оценивается - ++). Соответственно индекс реакции по Вейглу равен - 1,8.

Разрешающая инъекция у крыс, которым после сенсибилизации вводили исследуемый препарат в однократной дозе, вызывала у 4 крыс кратковременное почесывание носа (оценка реакции - +). У 6 крыс - четко выраженные почесывания и единичные чихания - ++. Следовательно, индекс реакции по Вейглу был равен - 1,6.

У крыс, которым вводили препарат в пятикратной дозе, реакция на разрешающее воздействие отсутствовала у 8 особей, а у 2-х крыс составляла - +. Индекс реакции по Вейглу - 0,2.

Таким образом, проведенные испытания свидетельствуют о том, что Лакоцин в однократной и пятикратной дозах не влияет на интенсивность анафилактического шока, кроме того, Лакоцин, введенный крысам в пятикратной дозе, частично ингибирует сенсибилизацию чужеродным белком.

Оценка влияния Лакоцина на активную кожную анафилаксию

Работа выполнена на крысах-самцах популяции "Вистар" массой тела 190-200 г, содержавшихся в условиях вивария на стандартном пищевом рационе. Исследуемый препарат вводили в дозах 1,57 и 3,14 мг/кг (1/6 и 1/3 дозы для крыс) по 0,1 мл/100 г массы тела по следующей схеме. Сенсибилизирующие инъекции: первая - подкожно в складку на спине, две последующие внутримышечно через день в область бедра. Контрольной группе животных по той же схеме вводили растворитель - дистиллированную воду. Количество животных в группах: в контрольной группе 16 крыс, в опытных по 10 особей. Через 16 дней после сенсибилизации опытным группам крыс вводили разрешающую дозу Лакоцина, равную суммарной сенсибилизирующей дозе внутрикожно (в/к) в выстриженный участок на спине: одной группе трехкратную, другой шестикратную, каждая в объеме 0,1 мл/100 г. Контрольные животные были поделены на две группы. Одной группе особей в нижнюю часть выстриженного участка спины вводили в/к растворитель, а в верхнюю часть - препарат в трехкратной дозе, другой группе - растворитель и препарат в шестикратной дозе. Через 30 мин после разрешающей инъекции животным внутривенно вводили 0,5 мл 1% раствора синего Эванса. Через 30 минут после последнего введения животных умерщвляли эфиром и определяли размеры окрашенного пятна на внутренней стороне кожи в месте введения препарата.

Эксперименты показали, что у крыс, сенсибилизированных Лакоцином в однократной дозе по приведенной выше схеме, диаметр окрашенного пятна на месте введения разрешающей дозы препарата составлял от 8,0 до 12,5 мм и в среднем равнялся 10,35±0,44 мм. После сенсибилизирующих инъекций препарата в двукратной дозе диаметр окрашенного пятна составлял от 6,0 до 14 мм, в среднем - 9,6±0,95 мм.

У контрольных животных диаметр окрашенного пятна на месте введения однократной дозы Лакоцина составлял 11,0±0,68 мм, двухкратной - 11,5±0,62 мм. После введения растворителя диаметр пятна составлял 4,68±0,84 мм.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что Лакоцин при введении в однократной и двукратной дозах аллергизирующими свойствами не обладает. На основании проведенных исследований можно заключить, что Лакоцин в использованных дозах не обладает иммунотоксическими, аллергизирующими и анафилактогенными свойствами

Изучение специфической активности Лакоцина

Результаты экспериментов на собаках показали, что профилактическое (за 15 мин) пероральное введение комбинированного ЛС Лакоцин животным, облученным в дозе 30 Гр, приводит к снижению выраженности эметического синдрома первичной реакции на облучение. Как видно из данных, приведенных в таблице 5, применение препарата Лакоцин в дозе 1 таб. на животное приводит к достоверному уменьшению общего количества рвотных актов, продолжительности эметического периода и увеличению времени появления первого рвотного акта по сравнению с животными группы «Контроль облучения». Облучение собак в дозе 30 Гр вызывало у всех животных закономерное развитие эметической реакции: среднее время появления первого рвотного акта составило 27 мин после окончания воздействия, продолжительность периода эметической реакции колебалось от 134 мин до 177 мин, а среднее количество актов рвоты равнялось 14. Профилактическое введение Лакоцина привело к снижению выраженности эметической реакции у облученных собак. Профилактическое действие препарата Лакоцин проявлялось в достоверном уменьшении количества рвотных актов (среднее значение в группе - 5) и продолжительности периода эметической реакции (до 22,5 мин), время появления первого рвотного акта достоверно возросло и составило 115 мин (среднее значение в группе).

Для решения вопроса об оптимальной дозе ЛС была проведена серия экспериментов, в которой собаки получали Лакоцин в дозе 6 таблеток на животное. Выбор этой дозы препарата был обусловлен тем, что по данным, полученным М.Г.Шагояном (1998), оптимальная доза латрана для собак составляет 2,4 мг/кг. Такая доза противорвотного средства обеспечивается введением 6 таблеток на животное массой 20 кг. Как видно из данных, приведенных в таблице 5, увеличение дозы Лакоцин до 6 таб. на животное приводит к выраженному снижению проявлений эметической реакции на облучение. В то же время существенных отличий между группами животных, которые получали 1 таб. или 6 таб., выявить не удалось. В связи с этим, в последующих экспериментах на собаках животные получали препарат Лакоцин в дозе 1 таб. на животное.

Таблица 5
Влияние Лакоцина на саливацию и рвоту у собак (облучение в дозе 30 Гр, n=6 в каждой группе, М±m)
Экспериментальная группа	Доза препарата, таб./животное	Частота саливации, %	Рвота
Частота, %	Время появления, мин	Продолжительность, мин	Количество
Контроль облучения	-	100-8	100-8	27,5±14,4	155,7±21,7	14±2
Лакоцин	1	33±19*	83±5*	115,0±59,8*	22,5±20,7*	5±2*
6	25±16*	78±5*	130,0±65,0*	18,4±15,2*	3±1*
* - различия достоверны по сравнению с группой "Контроль облучения" (P≤0,05)

Препарат Лакоцин обладает и антидиарейной активностью. Как видно из данных, приведенных в таблице 6, у животных, которым вводили препарат, отсутствовали позывы на дефекацию, уменьшилось среднее значение актов дефекации и увеличилось время появления первого акта дефекации по сравнению с аналогичными показателями группы «Контроль облучения».

Таблица 6
Антидиарейная активность Лакоцина у собак (облучение в дозе 30 Гр, n=6 в каждой группе, М±m)
Экспериментальная группа	Количество позывов	Время появления диареи, мин	Частота дефекации, %	Количество актов дефекации
Контроль облучения	2,0±1,0	37,5±12,5	67±7	1,5±0,5
Лакоцин	0,0±0,0*	77,5±76,1*	40±5*	0,8±0,8
* - различия достоверны по сравнению с группой "Контроль облучения" (P≤0,05)

В экспериментах на втором виде животных - крысах изучалась пропульсивная активность кишки и ее всасывающая способность. Индекс пропульсивной активности (ИПА) отражает моторно-эвакуаторную функцию кишки и рассчитывается как отношение заполненного участка к общей длине кишки. Экспериментальные данные показывают, что облучение увеличивает скорость прохождения бариевой взвеси по кишке крыс в 1,2 раза. Введение Лакоцина способствует замедлению этого процесса. Так, введение препарата в дозах 0,5; 1 и 2 таб. на кг веса тела животного за 30 мин до облучения в дозе 100 Гр приводит к снижению величины ИПА до 61,42 и 32% соответственно. Различия в ИПА при введении 1 таб./кг и 2 таб./кг отличаются на 10%. Таким образом, оптимальной дозой ЛС Лакоцин для крыс является 1 таб./кг. Эта доза применялась в дальнейших экспериментах на крысах. Эффект снижения пропульсивной активности кишечника после введения Лакоцина проявляется через 5 мин после введения препарата и сохраняется в течение 1 ч.

Таблица 7
Влияние различных доз и сроков введения Лакоцина на пропульсивную активность кишки крыс (облучение в дозе 30 Гр, n=12 в каждой группе)
Экспериментальная группа	Доза препарата, таб./кг	Срок профилактического введения, мин	Индекс пропульсивной активности (М±m), %
Биоконтроль	-	-	71±3
Контроль облучения	-	30	88±3*
Лакоцин	0,5	30	61±5**
	1	5	42±4*, **
	1	30	42±4*, **
	1	60	53±3*, **
2	30	32±8*, **
* - различия достоверны (P≤0,05) по сравнению с группой "Биоконтроль";
** - различия достоверны (P≤0,05) по сравнению с группой "Облучение" (контроль)

Адсорбционную функцию кишечника оценивали на крысах по методу, основанному на измерении флюоресценции плазмы после внутрижелудочного введения флюоресцеина. Как видно из данных, представленных в таблице 7, облучение приводит к замедлению всасывания флюоресцеина в кровь в 1,4 раза. Профилактическое введение Лакоцина в дозе 1 таблетка на кг за 30 мин до облучения восстанавливает всасывающую функцию кишки.

Таблица 8
Влияние профилактического введения Лакоцина на адсорбционную функцию кишечника крыс (облучение в дозе 30 Гр, n=12 в каждой группе)
Экспериментальная группа	Коэффициент, %
Биоконтроль	22,9±2,1
Контроль облучения	17,0±1,8*
Лакоцин	24,6±2,2**
* - различия достоверны (P<0,05) по сравнению с группой «Биоконтроль»;
** - различия достоверны (P≤0,05) по сравнению с группой «Контроль облучения»

Как видно из данных, представленных в таблице 9, облучение в дозе 100 Гр вызывало диарею у 83% животных, которая начиналась уже во время экспозиции. Введение Лакоцина приводит к снижению частоты развития диареи в 4 раза по сравнению с группой «Контроль облучения».

Таблица 9
Влияние профилактического введения Лакоцина на частоту развития диареи у крыс (облучение в дозе 100 Гр, n=24 в каждой группе)
Экспериментальная группа	Абсолютное значение	Частота, %
Контроль облучения	30	83±6
Лакоцин	5	20±8*
* - различия достоверны (P≤0,05) по сравнению с группой «Контроль облучения»

Таким образом, Лакоцин в испытанной дозе является эффективным антидиарейным средством, способствующим нормализации пропульсивной и всасывающей активности кишечника крыс. Оптимальная доза комбинированного ЛС Лакоцин для человека составляет 1 таб.

Для выяснения вопроса о влиянии ЛС Лакоцин на вызванную облучением гиподинамию проведены эксперименты на крысах, облученных в дозе 100 Гр.

Как видно из данных, приведенных в таблице 10, у животных, которые получали ЛС Лакоцин, наблюдается умеренное (в 1,2 раза) усиление двигательной активности и снижение (в 1,4 раза) времени неподвижного сидения. Такие показатели как количество вертикальных стоек и норковых реакций практически не изменялись. Облучение приводит к снижению поведенческой активности, выражающемуся в снижении показателей двигательной активности (в 1,7 раз), вертикальных стоек (в 2 раза) и увеличению общего времени неподвижного сидения (в 2,4 раза) по сравнению с аналогичными показателями группы «Биоконтроль». Профилактическое введение препарата Лакоцин приводит к нормализации показателей поведенческой активности. Так, двигательная активность животных, которые получали перед облучением Лакоцин, в 1,7 раза превосходит аналогичный показатель группы «Контроль облучения». Время неподвижного сидения животных в группе Лакоцин превосходило показатель группы «Контроль облучения» в 3 раза.

Таблица 10
Влияние Лакоцина на поведенческую активность крыс через 30 мин после облучения (тест «открытое поле», облучение в дозе 100 Гр, n=10 в каждой группе, М±m)
Экспериментальная группа	Двигательная активность	Количество вертикальных стоек	Количество норковых реакций	Время неподвижного сидения, с
Биоконтроль	66,8±8,7	8,9±2,4	2,3±1,6	45,4±19,6
Лакоцин	82,0±17,9	10,5±3,7	2,7±0,4	32,6±15,5
Облучение	39,4±17,2*	4,5±1,7*	1,2±0,5	107,0±34,3*
Лакоцин + облучение	69,4±25,2**	6,7±3,8	3,3±0,4**	35,1±25,2**
* - различия достоверны по сравнению с группой «Биоконтроль» (P≤0,05)
** - различия достоверны по сравнению с группой «Облучение» (P≤0,05)

В таблице 11 представлены показатели поведенческой активности крыс через 60 мин после облучения. Как видно из представленных экспериментальных данных, оцениваемые показатели в разных экспериментальных группах находились практически на одном уровне. Следует обратить внимание, что в группе Лакоцин время неподвижного сидения было в 2 раза ниже, чем в группе «Биоконтроль». Данное обстоятельство может быть связано с «истощением» из-за стимулирующего эффекта кофеина.

Таблица 11
Влияние Лакоцина на поведенческую активность крыс через 60 мин после облучения (тест «открытое поле», облучение в дозе 100 Гр, n=10 в каждой группе, М±m)
Экспериментальная группа	Двигательная активность	Количество вертикальных стоек	HP, усл.ед.	Время неподвижного сидения, с
Биоконтроль	68,2±18,4	9,2±5,4	2,7±1,5	40,2±18,4
Лакоцин	65,6±20,6	9,5±3,7	3,3±1,6	21,6±5,4*
Облучение	56,5±30,1	6,0±1,4	2,3±1,4	37,6±17,0
Лакоцин + облучение	60,6±21,8	8,1±4,8	2,3±1,6	34,1±24,8
* - различия достоверны по сравнению с группой «Биоконтроль» (P≤0,05)

1. Лекарственное средство, обладающее профилактическим действием для купирования первичной реакции на облучение и ранней преходящей недееспособности, содержащее ондансетрон и метацин, отличающееся тем, что дополнительно введен фармакологически активный агент кофеин в массовом соотношении ондансетрон:метацин:кофеин 4:1:20-300.

2. Лекарственное средство по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой таблетированную лекарственную форму.

3. Лекарственное средство по любому из пп.1 и 2, отличающееся тем, что оно представляет собой таблетированную лекарственную форму, покрытую оболочкой.

4. Лекарственное средство по любому из пп.1 и 2, отличающееся тем, что 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1H-имидазол-1-ил)метил]-4H-карбазол-4-он используют в виде хлоргидрата дигидрата.

5. Лекарственное средство по любому из пп.1 и 2, отличающееся тем, что ондансетрон:метацин:кофеин используют в весовом соотношении 4:1:50-100.